手性雙核釕_配合物與DNA的相互作用研究

1、收稿日期:2008-05-21。收修改稿日期:2008-06-14。國(guó)家自然科學(xué)基金(No.20571089,20771105、973計(jì)劃(No.2007CB815306、教育部新世紀(jì)優(yōu)秀人才支持計(jì)劃(No.NCET-06-0718、教育部科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(No.108103和教育部留學(xué)回國(guó)人員科研啟動(dòng)基金項(xiàng)目資助。*通訊聯(lián)系人。E-mail :ceschh ;cesjln 第一作者:袁益嫻,女,26歲,博士研究生;研究方向:生物無(wú)機(jī)化學(xué)。手性雙核釕!配合物與DNA 的相互作用研究袁益嫻陳禹王貽燦梁思敏巢暉*計(jì)亮年*(中山大學(xué)化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院,生物無(wú)機(jī)與合成化學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州51

2、0275摘要:本文合成了1對(duì)手性雙核釕!配合物-和-(bpy2Ru(mbpibH 2Ru(bpy2(ClO 44(bpy=2,2-聯(lián)吡啶,mbpibH 2=1,3-二(咪唑并4,5-f1,10-鄰菲咯啉苯。通過(guò)元素分析、質(zhì)譜、核磁共振、CD 光譜對(duì)這兩個(gè)化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征。采用循環(huán)伏安法對(duì)配合物的電化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了分析。利用紫外-可見(jiàn)吸收光譜滴定、熒光光譜滴定、穩(wěn)態(tài)熒光淬滅和粘度實(shí)驗(yàn)研究了配合物與DNA 的相互作用,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明這2個(gè)配合物都能以插入的方式與DNA 鍵合,而且配合物的DNA 結(jié)合強(qiáng)度稍強(qiáng)于配合物。關(guān)鍵詞:釕!配合物;手性配合物;DNA 鍵合中圖分類號(hào):O614.82+1;Q52

3、3+.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1001-4861(200808-1265-07Interaction between DNA and Chiral Dinuclear Ru !ComplexesYUAN Yi-Xian CHEN Yu WANG Yi-Can LIANG Si-Min CHAO Hui *JI Liang-Nian *(School of Chemistry and Chemical Engineering,MOE Laboratory of Bioinorganic andSynthetic Chemistry,Sun Yat-Sen University,Guangzho

4、u 510275Abstract:The enantiomerically-pure chiral dinuclear Ru !complexes -and -(bpy2Ru(mbpibH 2Ru(bpy2(ClO 44(bpy=2,2-bipyridine,mbpibH 2=1,3-bis(1,10phenanthroline-5,6-dimidazol-2-ylbenzenewere synthesized and characterizated by elemental analysis,MS,1H NMR and CD spectra.The electrochemical behav

5、iors of the complexes have been studied by cyclic voltammetry.Binding of the complexes with CT-DNA has been investigated by absorption titration,luminescence titration,steady-state emission quenching and viscosity experiments.The results indicate that both the enantiomers can intercalate into CT-DNA

6、 while the binding ability of is stronger than that of .Key words:Ru !complexes;chiral complexes;DNA binding引言核酸是生物體的重要組成物質(zhì),它在生物的生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖等正常生命活動(dòng)起著重要作用,并與致癌等生命的異常情況密切相關(guān)。研究核酸,尤其是DNA 的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系,受到了人們極大的關(guān)注。自從20世紀(jì)80年代初期美國(guó)化學(xué)家Barton 等發(fā)現(xiàn)Zn 2+、Co 3+、Ru 2+等配位飽和的八面體手性配合物具有識(shí)別DNA 二級(jí)結(jié)構(gòu)的能力以來(lái),金屬配合物與DNA 的識(shí)別與結(jié)合已成為近年來(lái)生

7、物無(wú)機(jī)化學(xué)十分活躍的研究領(lǐng)域13。值得注意的是,以上這些研究工作主要是圍繞單核金屬多吡啶配合物展開(kāi)的。而對(duì)以磷酸酯為底物的天然金屬酶的研究證實(shí):DNA 聚合酶I 、P1核酸酶、磷酯酶C 、堿性磷酸酯酶、核酶(ribozyme等多種天然金屬酶均含有2個(gè)或更多個(gè)金屬離子。在有機(jī)體系與DNA第24卷第8期2008年8月Vol.24No.812651271無(wú)機(jī)化學(xué)學(xué)報(bào)CHINESE JOURNAL OF INORGANIC CHEMISTRY第24卷無(wú)機(jī)化學(xué)學(xué)報(bào)的相互作用研究中,人們大多是選擇一些雙功能有機(jī)化合物來(lái)作為結(jié)構(gòu)探針,以期增強(qiáng)序列專一性和親和力。受此啟發(fā),生物無(wú)機(jī)化學(xué)家開(kāi)始將目光投向含有雙核

8、或多核的超分子金屬配合物。和單核金屬配合物相比,雙核金屬配合物具有更大的電荷數(shù),構(gòu)型和大小也更具可變性。設(shè)計(jì)、合成手性雙核配合物,可以進(jìn)一步增強(qiáng)配合物對(duì)DNA的親和力和識(shí)別序列專一性49。本文合成了1對(duì)手性雙核釕!配合物-(bpy2Ru(mbpibH2Ru(bpy2(ClO44 (1和-(bpy2Ru(mbpibH2Ru(bpy2(ClO44(2(bpy= 2,2-聯(lián)吡啶,mbpibH2=1,3-二(咪唑并4,5-f1,10-鄰菲咯啉苯,配合物的結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。通過(guò)元素分析、質(zhì)譜、核磁共振和CD光譜對(duì)這2個(gè)化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征。利用紫外可見(jiàn)光譜滴定實(shí)驗(yàn)、穩(wěn)態(tài)熒光光譜滴定、穩(wěn)態(tài)熒光猝滅和粘度實(shí)驗(yàn),具

9、體研究了配合物與DNA的相互作用。1實(shí)驗(yàn)部分配體1,3-二(咪唑并4,5-f1,10-鄰菲咯啉苯(mbpibH210、-Ru(bpy2(py2O,O-dibenzoyl-D-tartr-ate12H2O11和-Ru(bpy2(py2O,O-dibenzoyl-D-tartrate12H2O11參照文獻(xiàn)制備,2,2-聯(lián)吡啶(bpy購(gòu)自美國(guó)Aldrich公司,瓊脂糖凝膠、溴酚藍(lán)、三羥甲基氨基甲烷(Tris購(gòu)自美國(guó)Sigma公司,小牛胸腺DNA(CT-DNA、pBR322DNA購(gòu)自上海生工生物工程公司,其余均為市售分析純?cè)噭?用前未做進(jìn)一步處理。配制緩沖溶液均用雙蒸水,所有實(shí)驗(yàn)用的緩沖溶液均為含有5

10、mmolL-1Tris和50mmolL-1NaCl(pH=7.0的Tris-HCl緩沖液。適量小牛胸腺DNA溶于上述Tris-HCl緩沖溶液中,其濃度用260 nm處的吸光度確定(OD260/OD280>1.86,260nm=6600 Lmol-1cm-112。元素分析(C、H、N用Elementar Vario EL元素分析儀測(cè)定。電子吸收光譜用Perkin Elmer Lambda850紫外分光光度計(jì)記錄。熒光光譜用Perkin Elmer Ls55熒光光譜儀記錄。圓二色(CD譜用JASCO-J810圓二色譜儀記錄。核磁共振波譜用Varian500MHz核磁共振波譜儀記錄。電極電位用

11、循環(huán)伏安法測(cè)定,使用上海辰華CHI660電化學(xué)工作站。三電極系統(tǒng),工作電極和輔助電極均為鉑電極,參比電極為飽和甘汞電極(SCE。掃描速度為200mVs-1。溶劑為無(wú)水乙腈,支持電解質(zhì)為高氯酸四丁基銨(TBAP(A.R.,Fluka,濃度為0.1molL-1。測(cè)定前通氮除氧20min,測(cè)定時(shí)液面保持氮?dú)鈿夥?。?shí)驗(yàn)在室溫下進(jìn)行。1.2.1-(bpy2Ru(mbpibH2Ru(bpy2(ClO44(1的合成稱取-Ru(bpy2(py2O,O-dibenzoyl-D-tartrate12H2O(0.60g,0.6mmol和mbpibH2(0.15g,0.3mmol溶于20mL的乙二醇。氬氣保護(hù)下于12

12、0反應(yīng)10h,冷卻至室溫后加水稀釋。向?yàn)V液中加入飽和NaClO4溶液即產(chǎn)生大量紅色沉淀。抽濾,沉淀分別用水、乙醚洗滌數(shù)次后干燥。然后將干燥好的粗產(chǎn)品用少量乙腈溶解,過(guò)中性氧化鋁(74m(200目柱分離,V乙腈V乙醇=21的混合溶劑淋洗下主要紅色組分。最后得暗紅色微晶,產(chǎn)率56%。元素分析:實(shí)驗(yàn)值(%:C47.93,H3.15,N12.30;按C72H56N16O19Cl4Ru2的計(jì)算值(%:C48.21,H3.12,N 12.49。1H NMR(500MHz,d6-DMSO:9.43(s,1H, 9.17(br,4H,8.91(d,4H,J=8.5,8.87(d,4H,J=8.5, 8.49(

13、br,2H,8.21(t,4H,J1=J2=8.5,8.10(t,4H,J1=J2= 8.5,7.867.89(m,4H,7.787.83(br,4H,7.587.63 (m,8H,7.38(t,4H,J1=J2=7。ES-MS:CH3CN;m/z=770 (M-2ClO42+,479(M-3ClO43+,447(M-4ClO4-H3+, 336(M-4ClO44+。CD(/nm(/(Lmol-1cm-1 (CH3CN:475(-6.1,424(5.9,295(-92.7,280(39.1。1.2.2-(bpy2Ru(mbpibH2Ru(bpy2(ClO44(2的合成合成和提純方法與配合物1相

14、同,只是用0.60 g(0.6mmol的-Ru(bpy2(py2O,O-dibenzoyl-L-圖1釕!配合物的結(jié)構(gòu)圖Fig.1Molecular structure of Ru!complexes 1266第8期袁益嫻等:手性雙核釕!配合物與DNA 的相互作用研究tartrate12H 2O 代替-Ru(bpy2(py2O ,O -dibenz-oyl-D-tartrate12H 2O 。產(chǎn)率58%。元素分析:實(shí)驗(yàn)值(%:C 47.97,H 3.16,N 12.31;按C 72H 56N 16O 19Cl 4Ru 2的計(jì)算值(%:C 48.21,H 3.12N 12.49。1H NMR(50

15、0MHz ,d 6-DMSO:9.44(s ,1H,9.19(br ,4H,8.90(d ,4H ,J=8.5,8.88(d ,4H ,J=8.5,8.52(br ,2H,8.23(t ,4H ,J 1=J 2=8.5,8.09(t ,4H ,J 1=J 2=8.5,7.867.90(m ,4H,7.797.86(br,4H,7.597.63(m,8H,7.38(t ,4H ,J 1=J 2=6.5。ES-MS :CH 3CN ,m/z=770(M-2ClO 42+,479(M-3ClO 43+,447(M-4ClO 4-H3+,336(M-4ClO 44+。CD (/nm (/(L mol

16、-1cm -1(CH 3CN:475(5.8,423(-6.0,294(93.8,280(-38.7.1.3配合物和DNA 作用的電子吸收光譜在紫外可見(jiàn)光譜儀中,參比池中加入3mL 的緩沖液,在樣品池中加入同樣體積的10mol L -1的配合物溶液,用微量加樣器每次往參比池和樣品池中分別加入相同體積的DNA 溶液,使DNA 與配合物濃度比值(C D N A /C C om plex 按一定的比例遞增直至飽和,即MLCT 吸收峰不再減色為止。每次混合均勻約5min 后,在200800nm 范圍監(jiān)測(cè)配合物的電子吸收光譜變化。1.4配合物和DNA 作用的熒光光譜配制配合物溶液(10mol L -1,

17、用微量加樣器每次往樣品池中加入相同體積的DNA 溶液,使DNA 與配合物濃度比值(C D N A /C C om plex 按一定的比例遞增,直至飽和。每次混合均勻約5min 后,在500800nm 范圍監(jiān)測(cè)配合物的熒光光譜變化。用450nm 光源激發(fā),記錄發(fā)射光波峰和發(fā)光強(qiáng)度。1.5配合物與DNA 混合液的熒光淬滅實(shí)驗(yàn)配制配合物和DNA 的混合溶液。C C om plex =5mol L -1,C D N A /C C om plex =401。配制高濃度Fe(CN64-溶液,往配合物和DNA 混合溶液中每次加入同體積的Fe(CN64-溶液,Fe(CN64-濃度在01mmol L -1之間變

18、化。每次混合均勻約5min 后,分別測(cè)量熒光光譜,記錄熒光強(qiáng)度。I 0為C C om plex /C D N A =0時(shí)的熒光強(qiáng)度,以熒光強(qiáng)度比I 0/I 對(duì)淬滅劑濃度作圖。1.6DNA 粘度測(cè)試實(shí)驗(yàn)粘度用烏氏粘度計(jì)測(cè)量,溫度恒定在(29±0.1。測(cè)試液按固定DNA 的濃度,逐漸增加Ru !配合物濃度的方法配制。相對(duì)粘度按下式計(jì)算13:=(t-t 0/t 0。式中,t 0為緩沖液流經(jīng)毛細(xì)管所需的時(shí)間,t 為DNA 溶液(含濃度不等的釕配合物流經(jīng)毛細(xì)管所需的時(shí)間。以(/01/3對(duì)比r(r=C C om plex /C D N A 作圖。0為未加釕配合物時(shí)DNA 溶液的相對(duì)粘度。2結(jié)果與

19、討論配合物的合成與拆分配合物的合成通過(guò)手性前體Ru(bpy2(py22+與配體反應(yīng)而制得。在反應(yīng)過(guò)程中能保持配合物的絕對(duì)構(gòu)型不發(fā)生改變。該法已被廣泛用于制備對(duì)映體純的單核及多核釕配合物1416。配合物的對(duì)映體純度經(jīng)CD 光譜檢測(cè)(圖2,配合物1和2在295nm 處均展現(xiàn)了典型的-*瞬態(tài)激發(fā)子相互作用(excitonic interaction17,在可見(jiàn)區(qū)展現(xiàn)了金屬到配體的d *荷移躍遷(metal-ligand charge transfer ,MLCT帶的2個(gè)Cotton 效應(yīng)18。數(shù)據(jù)表明和異構(gòu)體的摩爾橢圓度數(shù)值上基本相等,而符號(hào)相反。釕多吡啶類配合物的氧化一般都是Ru !的d軌道失去1

20、個(gè)電子,變成Ru %。金屬中心氧化還原電勢(shì)的高低取決于配體的電子結(jié)構(gòu)性質(zhì),一般當(dāng)配體吸電子能力較強(qiáng)或共軛程度增大時(shí),低氧化態(tài)金屬中心更容易穩(wěn)定存在,電極電位有增大的趨勢(shì)。當(dāng)有幾個(gè)不同配體時(shí),負(fù)電位區(qū)將出現(xiàn)多個(gè)還原波。具有最低未占軌道(LUMO的配體將優(yōu)先得到電子被還原,隨后其余配體以LUMO 能量的高低依次得到電子19。表1為2個(gè)釕配合物的用循環(huán)伏安法測(cè)定的氧化-還原電位數(shù)據(jù)。從數(shù)據(jù)看,2個(gè)手性異構(gòu)體的氧化還原電位幾乎一致。在+2.0-2.0V 的掃描范圍內(nèi),循環(huán)伏安圖中都呈現(xiàn)了1個(gè)氧化峰和3個(gè)還原峰。第1個(gè)還原電位可歸屬于橋連配體mbpibH 2,因?yàn)镽u(bpy32+的第1個(gè)還原電位是在-

21、1.35V 處20,第2、第3可逆還原電位分別是-1.35和-1.59V ,是圖2手性配合物1和2的CD 譜圖Fig.2CD spectra of complexes 1and 21267第24卷表1釕!配合物的氧化還原電勢(shì)數(shù)據(jù)Table 1Redox potentials of Ru !complexesAll complexes were measured in 0.1mol L -1NBu 4ClO 4-MeCN,error in potentials is 0.02V,scan rate is 100mV S -1.C C om plex =20mol L -1,CD N A =012

22、0mol L -1;Arrow shows the ab-sorbance changes upon the increase of DNA concentration圖3配合物1(a和2(b的紫外CT-DNA 滴定光譜圖Fig.3Absorption spectra of complexes 1(aand 2(bupon addition of CT-DNA由隨后2個(gè)bpy 配體先后得電子引起的。對(duì)于雙核配合物而言,其氧化性質(zhì)可以用來(lái)衡量配合物中金屬之間相互作用的大小21。如果不存在金屬金屬相互作用,那么在對(duì)稱同雙核配合物中,2個(gè)金屬中心將在相同的電位處展示氧化峰;如果金屬之間可以通過(guò)橋連配

23、體相互作用,由于金屬中心的氧化過(guò)程互有影響,2個(gè)金屬中心將在不同的電位處展示氧化峰。對(duì)于我們合成的這兩個(gè)配合物,配合物的金屬中心之間氧化電位值基本沒(méi)有差別,表明金屬金屬之間相互作用很小,甚至到了忽略不計(jì)的程度。2.3配合物與DNA 相互作用的電子吸收光譜電子吸收光譜是研究小分子化合物與DNA 相互作用的常用方法。由于八面體釕%配合物具有豐富的與金屬-配體荷移躍遷(MLCT有關(guān)的電子吸收性質(zhì),通常配合物與DNA 結(jié)合后會(huì)導(dǎo)致其配體所處環(huán)境發(fā)生改變,結(jié)合強(qiáng)弱可通過(guò)光譜擾動(dòng)的變化反映出來(lái)。一般說(shuō)來(lái),當(dāng)小分子以插入方式進(jìn)入DNA 雙螺旋堿基對(duì)時(shí),其吸收光譜表現(xiàn)出峰位的紅移及減色效應(yīng)。配合物與DNA 作

24、用的滴定吸收光譜如圖3所示。與DNA 作用后,配合物1和2的MLCT 峰紅移都為2nm ,減色率分別為15.5%和15.0%;而286nm 處的-*躍遷峰的減色更明顯,配合物1和2分別為28.3%和27.2%。這些光譜變化表明配合物與DNA 之間存在較強(qiáng)的相互作用。為了定量比較配合物與DNA 的結(jié)合強(qiáng)弱,通過(guò)吸收光譜滴定實(shí)驗(yàn),以配合物1和2分別在MLCT 峰461和460nm 的吸光度的變化,按下列方程式22分別算出配合物與DNA 作用的結(jié)合常數(shù)K 。(a -f /(b -f =b-(b 2-2K 2C t C D N A /s1/2/2KC t b=1+KC t +KC D N A /2s式

25、中C D N A 代表DNA 的濃度,f 、a 和b 分別代表配合物在游離時(shí)、與各濃度DNA 結(jié)合時(shí)和與DNA 結(jié)合飽和時(shí)的摩爾吸光系數(shù),C t 代表配合物總濃度,s 為鍵合位點(diǎn)的大小,K 為擬合的結(jié)合常數(shù)。配合物1和2與DNA 作用的結(jié)合常數(shù)分別為1.02×106和7.6×105L mol -1。與以插入方式與DNA 結(jié)合的釕%配合物Ru(phen2(dppz2+(其和型異構(gòu)體與CT-DNA 的結(jié)合常數(shù)分別為1.7×106和3.2×106L mol -123、雙核配合物(bpy2Ru(ebipcH 2Ru (bpy24+(K=1.31×106

26、L mol -19的結(jié)合常數(shù)都很接近,由于手性構(gòu)型的差異,配合物1與DNA 的作用要強(qiáng)于配合物2。2.4配合物與DNA 相互作用的熒光光譜研究熒光法是一種比較靈敏的測(cè)試方法,廣泛用于研究配合物與DNA 的相互作用。釕%多吡啶配合物與DNA 相互作用后,由于DNA 保護(hù)配合物免受溶劑分子的淬滅,導(dǎo)致熒光增強(qiáng)。熒光增強(qiáng)幅度的1268第8期圖5隨著Fe(CN64-濃度增加,在無(wú)DNA 和有DNA(C D N A /C C om plex =40存在時(shí)配合物1和2的熒光淬滅曲線Emission-quenching curves of the complexes with increasing conc

27、entration of quencher Fe(CN64-for free(or DNA-bound (complex 1and free(or DNA bound (complex 2C C om plex =20mol L -1;Arrow shows the intensity change upon the increase of DNA concentration圖4在無(wú)DNA 和有DNA 存在下配合物1(a和2(b的熒光強(qiáng)度變化圖Fig.4Emission spectra of complexes 1(aand 2(bin the absence and presence of

28、CT-DNA袁益嫻等:手性雙核釕"配合物與DNA 的相互作用研究大小,一般反映配合物與DNA 作用的強(qiáng)弱,但不能作為配合物是否以插入方式與DNA 結(jié)合的判據(jù)。配合物1和2的熒光滴定曲線見(jiàn)圖4。在加入DNA 后,配合物1和2熒光增強(qiáng)幅度分別為1.9和1.77倍。該結(jié)果證明配合物結(jié)合DNA 后,水分子與配合物的接觸和碰撞機(jī)會(huì)減小,同時(shí)還表明配合物1與DNA 的作用強(qiáng)于配合物2。2.5配合物與DNA 相互作用的穩(wěn)態(tài)熒光淬滅研究熒光淬滅實(shí)驗(yàn)可用來(lái)檢測(cè)配合物與DNA 相互作用,這一方法可作為配合物與DNA 作用強(qiáng)弱的一種判據(jù)。在緩沖溶液中釕"多吡啶配合物以陽(yáng)離子形式存在,其熒光易被高

29、負(fù)電荷的Fe(CN64-淬滅,在一定濃度范圍內(nèi)的Stern-Volmer 型淬滅曲線幾乎是直線。當(dāng)配合物與DNA 發(fā)生有效結(jié)合后,配合物受到DNA 的保護(hù),受保護(hù)程度越大,熒光越難被淬滅。例如Ru(bpy32+與DNA 僅靠靜電作用,未加DNA 和加入DNA 的配合物Ru(bpy32+熒光均能被Fe(CN64-有效淬滅,且兩者的Stern-Volmer 曲線都為直線,兩直線斜率相近24,說(shuō)明配合物Ru(bpy32+未受DNA 有效保護(hù)。而配合物Ru(phen2dppz2+與DNA 以插入方式結(jié)合,在DNA 存在時(shí),其熒光不能被Fe(CN64-淬滅,Stern-Volmer 曲線近似為一條斜率為

30、0的直線23。對(duì)配合物1和2,在C D N A /C C om plex =0和40兩種條件下的溶液分別用Fe(CN64-作淬滅劑進(jìn)行對(duì)比研究,以加入和未加入淬滅劑的發(fā)光強(qiáng)度的比值I 0/I 為縱坐標(biāo),淬滅劑濃度為橫坐標(biāo),作出Stern-Volmer 曲線。如圖5所示,自由配合物的淬滅曲線基本滿足Stern-Volmer 方程式25:I 0/I=1+K sv C Fe(CN64-K sv 為淬滅常數(shù),是淬滅劑對(duì)發(fā)光淬滅有效程度的量度。在未加入DNA 時(shí),配合物發(fā)光減弱與Fe(CN64-的濃度增加成線性關(guān)系,即符合Stern-Volmer 方程。配合物1和2的淬滅常數(shù)K sv 分別為12580和

31、12070L mol -1,配合物1的淬滅常數(shù)大于配合物2的淬滅常數(shù)。當(dāng)2個(gè)配合物結(jié)合DNA 后,它們的Stern-Volmer 曲線的斜率都明顯減小,表明配合物都受到DNA 的保護(hù)而免于熒光的淬滅。此時(shí)配合物1和2的淬滅常數(shù)K sv 分別為210和2301269 無(wú) 機(jī) 化 學(xué) 學(xué) 報(bào) 第 卷 ， 配合物 的淬滅常數(shù)小于配合物 的淬滅 常數(shù)。一般來(lái)說(shuō)， 當(dāng)加入 后， 由于受到 的 保護(hù)， 淬滅曲線斜率減少， 減少的程度 反 映 了 配 合 物與 的結(jié)合能力， 即曲線的斜率越大， 結(jié)合力 越小。由以上數(shù)據(jù)可看出， 配合物 結(jié)合 的能 力要大于配合物 ， 這個(gè)結(jié)果與紫外 可見(jiàn)滴定光譜 的結(jié)果相符。 濃度的增加呈線性增長(zhǎng)。 對(duì)照與 結(jié)合的 溶 液粘度變化， 雖然配合物對(duì) 粘度的影響不如 明顯， 從圖可看出隨著配合物濃度的增加， 溶液粘度也隨之增大。其變化的趨勢(shì)也可以說(shuō)明配 合物 和 都是以插入的形式和 結(jié)合。同時(shí) 配合物 的增幅稍大于配合物 ， 說(shuō)明配合物 與 的作用比配合物 更強(qiáng)一些， 這與前面光譜滴 定實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)論一致。 配合物與 作用的粘度法研究 光譜學(xué)方法對(duì)于確定配合物與 的作用模 式只能提供必要的證據(jù)。在缺少高精度晶體結(jié)構(gòu)數(shù) 據(jù)的情況下， 粘度這種對(duì) 長(zhǎng)度變化比較敏感的 流體力學(xué)方法是檢測(cè)溶液狀