動(dòng)物細(xì)胞工程試題及詳解

1、動(dòng)物細(xì)胞工程試題1用動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是（C）A都須用液體培養(yǎng)基B都需用培養(yǎng)箱C都要在無菌條件下進(jìn)行D都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性解析： 動(dòng)物細(xì)胞離體培養(yǎng)主要是獲得細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，植物體細(xì)胞離體培養(yǎng)體現(xiàn)的是全能性。植物體細(xì)胞是固體培養(yǎng)基。動(dòng)物體細(xì)胞培養(yǎng)需要二氧化碳培養(yǎng)箱。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：1、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和繁殖。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的特點(diǎn)：液體培養(yǎng)基含動(dòng)物血清。4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件(1)充

2、足的營養(yǎng)供給微量元素、無機(jī)鹽、糖類、氨基酸、促生長因子、血清等。(2)適宜的溫度：36.5±0.5；適宜的pH：7.27.4。 (3)無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。 (4)氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。 5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）剪碎用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)貼滿瓶壁的細(xì)

3、胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。2下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是（D）A. 電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動(dòng)物細(xì)胞融合B. 去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理C. 小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞融合可制備單克隆抗體D. 某種植物甲乙兩品種的體細(xì)胞雜交與甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目相同解析：A正確誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法（離心 振動(dòng) 電刺激）化學(xué)法（聚乙二醇PEG）生物方法（滅活的病毒）. B正確去除植物細(xì)胞壁需要纖維素酶和果膠酶，將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞需要胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理一段時(shí)間。C正確小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫

4、小鼠的B淋巴細(xì)胞融合既可以無限增殖，又可產(chǎn)生特異性抗體。D錯(cuò)誤，假設(shè)甲植物體細(xì)胞是2N,乙植物體細(xì)胞是2M，甲乙體細(xì)胞雜交染色體數(shù)目為2N+2M；而甲乙品種雜交染色體數(shù)目是N+M。3制備單克隆抗體所采用的細(xì)胞工程技術(shù)包括（A）細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞融合 胚胎移植 細(xì)胞核移植A B C D解析：單克隆抗體的制備過程是 人工誘導(dǎo)經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)過培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞獲得單克隆抗體。4利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是（D）A. 用純化的核衣蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體B

5、. 體外培養(yǎng)單個(gè)漿細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體C. 將等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D. 利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者解析：A錯(cuò)誤 一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差； B錯(cuò)誤 單克隆抗體是雜交瘤細(xì)胞合成并分泌的，雜交瘤細(xì)胞是由漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的；C錯(cuò)誤制備單克隆抗體過程中的篩選：篩選是將未融合的B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞以及BB融合、瘤瘤融合的細(xì)胞通過選擇培養(yǎng)基淘汰，篩選出B瘤融合的細(xì)胞。篩選是將產(chǎn)生特定抗體的B瘤細(xì)胞通過細(xì)胞培養(yǎng)用相應(yīng)抗原檢測(cè)

6、的辦法篩選出來。因?yàn)閺捏w內(nèi)取免疫過的B淋巴細(xì)胞時(shí)取出很多種，形成的雜交瘤細(xì)胞有很多種，所以需篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。5用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是()A. 將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B. 用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C. 用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D. 篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體解析：動(dòng)物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁，所以不需要纖維素酶去除細(xì)胞壁6某研究小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí)，以動(dòng)物肝細(xì)胞為材料，測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種，甲細(xì)胞為肝

7、腫瘤細(xì)胞，乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：(1)將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一段時(shí)間后，觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量_多_。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是 血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)_。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是_維持培養(yǎng)液pH _。(3)在兩種細(xì)胞生長過程中，當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí)，其生長_停止_。藥物試驗(yàn)需要大量細(xì)胞，兩種細(xì)胞頻繁傳代，甲細(xì)胞比乙細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更_多_。若用動(dòng)物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液，需用_胰蛋白酶_消化處理。(4)為了防止細(xì)

8、胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的_抗生素_。(5)已知癌細(xì)胞X過量表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，要試驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對(duì)甲細(xì)胞生長的影響，可將甲細(xì)胞分為A、B兩組，A組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入_Y_，B組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入無菌生理鹽水，經(jīng)培養(yǎng)后，從A、B兩組收集等量細(xì)胞，通過分別檢測(cè)X基因在A、B兩組細(xì)胞中的_mRNA_或_蛋白質(zhì)_合成水平的差異，確定Y的藥效。7回答下列有關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)的問題(1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面_相互接觸_時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的_接觸抑制_。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是_單層_。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理

9、，可用的酶是_胰蛋白酶_。(2)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)_衰老甚至死亡_現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成_不死性_細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性_降低_，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量_減少_。(3)現(xiàn)用某種大分子染料，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí)，觀察到死細(xì)胞被染色，而活細(xì)胞不染色，原因是_由于死細(xì)胞膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色_。(4)檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用細(xì)胞分裂到_中_期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。(5)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常在_超低溫_條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中_酶_的活性降低

10、，細(xì)胞_新陳代謝_的速率降低。(6)給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作_抗原_進(jìn)行攻擊。8如圖所示為單克隆抗體制備過程示意圖。（1)淋巴細(xì)胞能與骨髓瘤細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，兩種細(xì)胞膜也能“融合”在一起，說明細(xì)胞膜_具有一定的流動(dòng)性_。此過程，常用_聚乙二醇_作為誘導(dǎo)劑，雜交瘤細(xì)胞繁殖進(jìn)行的是有絲分裂。該細(xì)胞的特點(diǎn)（遺傳性狀）是_既能大量增殖又能產(chǎn)生特異性抗體_。(2)篩選出雜交瘤細(xì)胞的方法是_培養(yǎng)液中加入氨基蝶呤，收集增殖的細(xì)胞_。(3)雜交瘤細(xì)胞的體外培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基相比有何主要不同？_液體培養(yǎng)基含有葡萄糖和動(dòng)物血清_。(4)單克隆

11、抗體注入體內(nèi)后可以自動(dòng)追蹤抗原(病原體或癌變細(xì)胞等)并與之結(jié)合，而絕不攻擊任何正常細(xì)胞，故稱為“生物導(dǎo)彈”，這是利用了_抗原與抗體之間結(jié)合的高度特異性_。(5)在單克隆抗體制備過程中，還應(yīng)用了細(xì)胞工程中的_動(dòng)物細(xì)胞融合_和_動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)_兩大技術(shù)。9現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學(xué)物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)室研究人員欲通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法來鑒定它們是否有毒性并比較二者毒性的強(qiáng)弱。請(qǐng)你以一個(gè)研究人員的身份參與此項(xiàng)研究，完成下列有關(guān)問題：(1)實(shí)驗(yàn)原理：_有毒物質(zhì)能誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生染色體變異_。根據(jù)這種變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(以下稱Q值)，可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性。(2)材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液

12、、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、動(dòng)物細(xì)胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)甲溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)乙溶液、蒸餾水、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、小白鼠正常有絲分裂各時(shí)期的高倍顯微照片。(3)實(shí)驗(yàn)步驟：制備細(xì)胞懸浮液。把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個(gè)細(xì)胞，再加入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸浮液。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。取A、B、C3個(gè)潔凈的培養(yǎng)瓶，_消毒 滅菌 加入等量的細(xì)胞懸浮液_；向A、B兩個(gè)培養(yǎng)瓶中分別加入等量的甲、乙溶液，C瓶中加入等量的蒸餾水，搖勻；把3個(gè)培養(yǎng)瓶放在37的恒溫箱中培養(yǎng)。制作臨時(shí)裝片。當(dāng)細(xì)胞增殖到

13、大約8代左右時(shí)，同時(shí)從恒溫箱中取出3個(gè)培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，加入動(dòng)物細(xì)胞固定液，迅速殺死細(xì)胞并固定細(xì)胞分裂相；靜置一段時(shí)間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號(hào)的載玻片的中央，_用適宜濃度龍膽紫進(jìn)行染色_，35min后，蓋上蓋玻片。鏡檢和統(tǒng)計(jì)。把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于_有絲分裂中_期的細(xì)胞，并與_C_進(jìn)行對(duì)比，統(tǒng)計(jì)并計(jì)算變異的細(xì)胞占該期細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)(Q值)。(4)結(jié)果分析與結(jié)論：經(jīng)研究人員實(shí)驗(yàn)得知，A、B、C三個(gè)培養(yǎng)瓶的Q值依次為：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，由此可知該實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是_甲乙都是有毒性的且乙的毒

14、性大于甲_。在實(shí)驗(yàn)中，C培養(yǎng)瓶起_對(duì)照_作用，C瓶的Q值說明_動(dòng)物細(xì)胞在正常培養(yǎng)狀態(tài)下染色體變異頻率非常低_。10下面兩幅圖分別是單克隆抗體制備過程和克隆羊培育過程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：(1)圖甲和圖乙所示的過程中，都必須用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段是_動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)_。(2)圖甲中注射病原入小鼠體內(nèi)后，要經(jīng)過_吞噬細(xì)胞_細(xì)胞處理后，才能被免疫細(xì)胞識(shí)別。過程常在_滅火的病毒_誘導(dǎo)下完成，過程與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點(diǎn)是_不需特定的培養(yǎng)基，不需嚴(yán)格的外界環(huán)境條件_。(3)單克隆抗體能定向攻擊癌細(xì)胞，主要是利用其_特異性_。(4)圖乙過程常選擇_M中_期的卵母細(xì)胞做受體細(xì)胞，原因是_M期卵母細(xì)胞體積大，易操作，含有促使細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)和營養(yǎng)添加_。若不考慮環(huán)境因素影響，克隆羊的性狀全部像白面綿羊嗎？_不是_。原因是_卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)也能控制某些性