梅毒螺旋體的血清學(xué)檢測(cè)方案2

1、梅毒螺旋體的血清學(xué)檢測(cè)方案梅毒螺旋體的血清學(xué)檢測(cè)方案問題Q1：實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒的兩類血清學(xué)檢測(cè)方法：實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒的兩類血清學(xué)檢測(cè)方法是什么？是什么？Q2：為什么需要這兩類血清學(xué)檢測(cè)方法？：為什么需要這兩類血清學(xué)檢測(cè)方法？梅毒血清學(xué)檢測(cè)分類梅毒血清學(xué)檢測(cè)分類o 非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn) （非特異性梅毒抗體） 包括：RPR、TRUST等o 梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn) （特異性梅毒抗體） 包括：TPPA、TP-RT、ELISA、CLIA等非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)(RPR、TRUST)o原理原理（抗心磷脂抗體）：n 人體感染了梅毒螺旋體后，組織受到破壞，釋放出來的一種類脂成分，與梅毒螺旋體結(jié)合形成完

2、全抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生類脂質(zhì)抗體（反應(yīng)素）。n 主要是IgM和IgG混合抗體。 非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)o抗體產(chǎn)生時(shí)間 n感染3周-4周，硬下疳出現(xiàn)1周-2周n一般在感染后57周（或硬下疳出現(xiàn)后23周）產(chǎn)生。（郭紅亮 ，中外健康文摘2010年第20期） o抗體作用n無保護(hù)作用，治療監(jiān)測(cè)。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長(zhǎng)期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應(yīng)素可以逐漸減少至轉(zhuǎn)為陰性。Q3：臨床上非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)為什么有定性和定量?jī)桑号R床上非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)為什么有定性和定量?jī)煞N檢測(cè)方法種檢測(cè)方法原理和方法o 反應(yīng)原理反應(yīng)原理n抗原抗體結(jié)合形成復(fù)合物，凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒被肉眼所見o 抗原

3、基本成分抗原基本成分n心磷脂、卵磷脂和膽固醇o(jì) 方法包括：方法包括：n快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)n不加熱血清反應(yīng)素(USR) n甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）n性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)等。檢測(cè)流程o 操作步驟：n將檢測(cè)試劑盒從冰箱中取出，室溫放置30分鐘。n測(cè)RPR自動(dòng)旋轉(zhuǎn)儀轉(zhuǎn)速。 在RPR紙卡上編上相應(yīng)的待檢樣本的編號(hào)。檢測(cè)流程（定性）o 加樣：加樣：n吸取50l血清（漿）放在卡片圈中，并均勻地涂布在整個(gè)圈內(nèi)。o 加抗原加抗原：n將抗原輕輕搖勻，用試劑盒提供的針頭加1滴抗原。o 反應(yīng)反應(yīng)：n將卡片置梅毒自動(dòng)旋轉(zhuǎn)儀8分鐘立即在亮光下觀察結(jié)果。檢測(cè)流程（定量）o 稀釋液準(zhǔn)備

4、：稀釋液準(zhǔn)備：n在圈內(nèi)加入50l生理鹽水（根據(jù)需要確定稀釋度），勿將鹽水涂開。o 加樣加樣：n吸取50l血清(漿)與各圈中鹽水作系列稀釋，并涂布滿整個(gè)圈內(nèi)。o 重復(fù)定性試驗(yàn)后兩步。重復(fù)定性試驗(yàn)后兩步。2021/5/711o9、 人的價(jià)值，在招收誘惑的一瞬間被決定。2022-2-262022-2-26Saturday, February 26, 2022o10、低頭要有勇氣，抬頭要有低氣。2022-2-262022-2-262022-2-262/26/2022 1:58:36 AMo11、人總是珍惜為得到。2022-2-262022-2-262022-2-26Feb-2226-Feb-22o12

5、、人亂于心，不寬余請(qǐng)。2022-2-262022-2-262022-2-26Saturday, February 26, 2022o13、生氣是拿別人做錯(cuò)的事來懲罰自己。2022-2-262022-2-262022-2-262022-2-262/26/2022o14、抱最大的希望，作最大的努力。2022年2月26日星期六2022-2-262022-2-262022-2-26o15、一個(gè)人炫耀什么，說明他內(nèi)心缺少什么。2022年2月2022-2-262022-2-262022-2-262/26/2022o16、業(yè)余生活要有意義，不要越軌。2022-2-262022-2-26February 26

6、, 2022o17、一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息。2022-2-262022-2-262022-2-262022-2-26臨床意義o 早期梅毒硬下疳出現(xiàn)1周-2周后，血清可呈陽(yáng)性。 【感染57周（或硬下疳出現(xiàn)后23周）】o 經(jīng)治療后血清滴度可下降并陰性，故可作為療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征。假陽(yáng)性問題o 假陽(yáng)性：非梅毒患者的血清反應(yīng)呈陽(yáng)性技術(shù)性假陽(yáng)性技術(shù)性假陽(yáng)性n 由于標(biāo)本的保存不當(dāng)（如細(xì)胞污染或溶血）、試劑質(zhì)量差或過期、或?qū)嶒?yàn)室操作錯(cuò)誤所造成。生物學(xué)假陽(yáng)性生物學(xué)假陽(yáng)性n 是由于患者有其他疾病或生理狀態(tài)發(fā)生變化，使梅毒血清試驗(yàn)出現(xiàn)陽(yáng)性急性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)的疾病 風(fēng)疹風(fēng)疹 水痘水痘

7、 傳染性單核細(xì)胞增多癥傳染性單核細(xì)胞增多癥 傳染性肝炎傳染性肝炎 上呼吸道感染上呼吸道感染 肺炎球菌性肺炎肺炎球菌性肺炎 病毒性肺炎病毒性肺炎 牛痘疹牛痘疹慢性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)的疾病o 系統(tǒng)性紅斑狼瘡系統(tǒng)性紅斑狼瘡 o 自身免疫性溶血性貧自身免疫性溶血性貧血血o 盤狀紅斑狼瘡盤狀紅斑狼瘡 o 結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎 o 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎 o 橋本氏甲狀腺炎橋本氏甲狀腺炎 o 風(fēng)濕性心臟病風(fēng)濕性心臟病o 干燥綜合征干燥綜合征o 毒品癮者毒品癮者 o 慢性腎炎慢性腎炎o(hù) 肝硬化肝硬化o 老年老年 o 麻風(fēng)麻風(fēng) (是唯一產(chǎn)生是唯一產(chǎn)生慢性生物學(xué)假陽(yáng)性的慢性生物學(xué)假陽(yáng)性的感染性感染性

8、 疾病疾病)妊娠的假陽(yáng)性反應(yīng)妊娠的假陽(yáng)性反應(yīng) 這是一種生理情況下的生物學(xué)假陽(yáng)性這是一種生理情況下的生物學(xué)假陽(yáng)性 假陽(yáng)性發(fā)生率較低有報(bào)告為假陽(yáng)性發(fā)生率較低有報(bào)告為0.4%，滴度低。，滴度低。 假陽(yáng)性問題o 梅梅毒毒假假陽(yáng)陽(yáng)性性反反應(yīng)應(yīng)的的處處理理1. 技術(shù)性假陽(yáng)性反應(yīng)一般是由于操作錯(cuò)誤引起的假陽(yáng)性反應(yīng)，經(jīng)過重復(fù)試驗(yàn)即可除外。2. 對(duì)急、慢性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)，應(yīng)做TPPA等梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（特異性梅毒抗體）試驗(yàn)進(jìn)行排除。前帶現(xiàn)象o 原理原理n 指二期梅毒患者非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中，有時(shí)血清中存在高濃度的抗體時(shí)出現(xiàn)的弱陽(yáng)性、不典型或陰性反應(yīng)的結(jié)果。o 處理處理n 將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)。

9、血清固定o 耐血清性（血清固定）n 指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)在一定時(shí)期內(nèi)不陰轉(zhuǎn)。早期的耐血清性常與治療量不足或不規(guī)則治療、復(fù)發(fā)、再感染或有神經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關(guān)。 梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn) （特異性梅毒抗體） 包括：TPPA、TP-RT、ELISA、CLIA等試驗(yàn)原理試驗(yàn)原理o 檢測(cè)血中特異性抗梅毒螺旋體特異蛋白為抗原的抗體（ IgG 和IgM ）。o 特異性IgM型抗梅毒螺旋體抗體，感染2周后即可測(cè)出。 o Q3：梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)的定量試：梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)的定量試驗(yàn)在梅毒診療中有意義嗎？驗(yàn)在梅毒診療中有意義嗎？TPPA/TPHAo TPPA試驗(yàn)原理與TPHA

10、試驗(yàn)基本相同n TPPA試驗(yàn)用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒n TPHA試驗(yàn)中梅毒螺旋體致敏羊紅細(xì)胞o 特點(diǎn)n 梅毒螺旋體全抗原TP-ELISA/CLIAo 原理原理n ELISA:用重組梅毒螺旋體抗原包被固相板條，加上梅毒血清和單克隆抗體酶標(biāo)記物，形成抗原抗體復(fù)合物與酶標(biāo)記物結(jié)合，用酶聯(lián)檢測(cè)儀判定試驗(yàn)陽(yáng)性反應(yīng)。n CLIA:采用雙抗夾心法的原理，使用化學(xué)發(fā)光底物取代傳統(tǒng)的顯色底物，增加了檢測(cè)的靈敏度。o 特點(diǎn)n 本法可用于大規(guī)模血清檢測(cè)。臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用o 梅毒螺旋體試驗(yàn)的作用是作為證實(shí)試驗(yàn)o 它們可以幫助確定非梅毒螺旋體試驗(yàn)陽(yáng)性反應(yīng)是真陽(yáng)性還是假陽(yáng)性。o 一旦這些試驗(yàn)呈陽(yáng)性，則患者終身陽(yáng)性。o 不

11、能作為療效觀察的指標(biāo)。o 陽(yáng)性不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應(yīng)結(jié)合RPR/TRUST結(jié)果進(jìn)行診斷。小結(jié)o 根據(jù)目的選擇檢測(cè)方法及檢測(cè)策略?？刹捎萌魏我活惷范狙鍖W(xué)檢測(cè)方法作為篩查試驗(yàn)。o 策略一n采用任何一種非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)對(duì)樣品進(jìn)行初篩;再用任何一種梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)對(duì)樣品進(jìn)行確證。o 策略二n采用任何一種梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)對(duì)樣品進(jìn)行初篩；再用任何一種非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)對(duì)樣品進(jìn)行診斷是否現(xiàn)正感染。目前我們醫(yī)院的梅毒血清學(xué)檢測(cè)采用的是策略1，其存在以下不足：1.早期和晚期梅毒的篩查漏檢率高。2.判斷結(jié)果主觀性強(qiáng)，不易保存和查閱結(jié)果。3.手工操作不適合大批量篩查。隨著梅毒篩查的標(biāo)本量不斷增加，為進(jìn)一步提高工作效率，同時(shí)也為降低我們的梅毒篩查漏診率。從現(xiàn)在起我們將啟用策略2作為我們醫(yī)院的梅毒血清學(xué)檢測(cè)方案。先用化學(xué)發(fā)光法篩查梅毒特異性抗體，陽(yáng)性