色譜技術(shù)及相關(guān)設(shè)備知識培訓(xùn)課件(共131頁).ppt

1、第四講第四講 色譜技術(shù)及相關(guān)設(shè)備色譜技術(shù)及相關(guān)設(shè)備生物儀器分析生物儀器分析色譜法色譜法chromatographychromatography又稱又稱“色譜分析、色譜分析、“色譜分析法、色譜分析法、“層析法，是一種別離和層析法，是一種別離和分析方法，在分析化學(xué)、有機化學(xué)、生物化學(xué)分析方法，在分析化學(xué)、有機化學(xué)、生物化學(xué)等領(lǐng)域有著非常廣泛的應(yīng)用。等領(lǐng)域有著非常廣泛的應(yīng)用。是利用混合物不同組分在固定相和流動相中分是利用混合物不同組分在固定相和流動相中分配系數(shù)配系數(shù)( (或吸附系數(shù)、滲透性等或吸附系數(shù)、滲透性等) )的差異，使不的差異，使不同組分在作相對運動的兩相中進(jìn)行反復(fù)分配，同組分在作相對運動的

2、兩相中進(jìn)行反復(fù)分配，實現(xiàn)別離的分析方法。實現(xiàn)別離的分析方法。色譜法色譜法1 1 色譜法的開展色譜法的開展2 2 色譜法的分類色譜法的分類3 3 色譜法流出曲線及相關(guān)術(shù)語色譜法流出曲線及相關(guān)術(shù)語4 4 色譜法的原理色譜法的原理內(nèi)容提要內(nèi)容提要色譜法始于二十世紀(jì)初，經(jīng)歷了整整一個世紀(jì)色譜法始于二十世紀(jì)初，經(jīng)歷了整整一個世紀(jì)的開展到今天已經(jīng)成為最重要的別離分析科學(xué)，的開展到今天已經(jīng)成為最重要的別離分析科學(xué)，廣泛地應(yīng)用于許多領(lǐng)域，如石油化工、有機合廣泛地應(yīng)用于許多領(lǐng)域，如石油化工、有機合成、生理生化、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境保護(hù)，乃至空成、生理生化、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境保護(hù)，乃至空間探索等。間探索等。 將一滴含有混合

3、色素的溶液滴在將一滴含有混合色素的溶液滴在一塊布或一片紙上，隨著溶液的展開可以觀察一塊布或一片紙上，隨著溶液的展開可以觀察到一個個同心圓環(huán)出現(xiàn)，這種層析現(xiàn)象雖然古到一個個同心圓環(huán)出現(xiàn)，這種層析現(xiàn)象雖然古人就已有初步認(rèn)識并有一些簡單的應(yīng)用。人就已有初步認(rèn)識并有一些簡單的應(yīng)用。 TswettTswett俄國植物學(xué)家關(guān)于色譜別離方法的研究始于俄國植物學(xué)家關(guān)于色譜別離方法的研究始于19011901年，兩年后他發(fā)表了他的研究成果年，兩年后他發(fā)表了他的研究成果 一種新型一種新型吸附現(xiàn)象及其在生化分析上的應(yīng)用，提出了應(yīng)用吸吸附現(xiàn)象及其在生化分析上的應(yīng)用，提出了應(yīng)用吸附原理別離植物色素的新方法。三年后，他將這

4、種附原理別離植物色素的新方法。三年后，他將這種方法命名為色譜法方法命名為色譜法ChromatographyChromatography，很顯然色，很顯然色譜法譜法 ChromatographyChromatography這個詞是由希臘語中這個詞是由希臘語中色色“的寫法的寫法chromachroma和書寫和書寫“(graphein)“(graphein)這兩這兩個詞根組成的，派生詞有個詞根組成的，派生詞有chromatographchromatograph色譜色譜儀，儀，chromatogramchromatogram色譜圖，色譜圖，chromatographerchromatographer色

5、譜工作者等。由色譜工作者等。由TswettTswett的的開創(chuàng)性工作，因此人們尊稱他為開創(chuàng)性工作，因此人們尊稱他為 色譜學(xué)之父色譜學(xué)之父 ，而，而以他的名字命名的以他的名字命名的TswettTswett獎也成為了色譜界的最高獎也成為了色譜界的最高榮譽獎。榮譽獎。色譜法創(chuàng)造后的最初二三十年開展非常緩慢。液色譜法創(chuàng)造后的最初二三十年開展非常緩慢。液- -固色譜的進(jìn)一步開展有賴于瑞典科學(xué)家固色譜的進(jìn)一步開展有賴于瑞典科學(xué)家TiseliusTiselius19481948年年Nobel Chemistry PrizeNobel Chemistry Prize獲得者和獲得者和ClaessonClaess

6、on的努力，他們創(chuàng)立了液相色譜的迎頭法和的努力，他們創(chuàng)立了液相色譜的迎頭法和頂替法。分配色譜是由著名的英國科學(xué)家頂替法。分配色譜是由著名的英國科學(xué)家MartinMartin和和 SyngeSynge創(chuàng)立的，他們因此而獲得創(chuàng)立的，他們因此而獲得19521952年的諾貝爾化年的諾貝爾化學(xué)獎。學(xué)獎。1941年，Martin和Synge采用水分飽和的硅膠為固定相，以含有乙醇的氯仿為流動相別離乙酰基氨基酸，他們在這一工作的論文中預(yù)言了用氣體代替液體作為流動相來別離各類化合物的可能性。 1951年，Martin和James報道了用自動滴定儀作檢測器分析脂肪酸，創(chuàng)立了氣-液色譜法。 1958年，Golay首

7、先提出了別離效能極高的毛細(xì)管柱氣相色譜法，創(chuàng)造了玻璃毛細(xì)管拉制機，從此氣相色譜法超過最先創(chuàng)造的液相色譜法而迅速開展起來，今天常用的氣相色譜檢測器也幾乎是在五十年代開展起來的。七十年代創(chuàng)造了石英毛細(xì)管柱和固定液的交聯(lián)技術(shù)。隨著電子技術(shù)和計算機技術(shù)的開展氣相色譜儀器也在不斷開展完善中，到現(xiàn)在最先進(jìn)的氣相色譜儀已實現(xiàn)了全自動化和計算機控制，并可通過網(wǎng)絡(luò)實現(xiàn)遠(yuǎn)程診斷和控制。 “色譜法色譜法” 名稱的由來名稱的由來石油醚石油醚(流動相流動相)碳酸鈣碳酸鈣( (固定相固定相) )色色譜譜帶帶色譜法起源于20世紀(jì)初，1906年俄國植物學(xué)家米哈伊爾茨維特用碳酸鈣填充豎立的玻璃管，以石油醚洗脫植物色素的提取液，

8、經(jīng)過一段時間洗脫之后，植物色素在碳酸鈣柱中實現(xiàn)別離，由一條色帶分散為數(shù)條平行的色帶。氣相色譜和色譜理論的出現(xiàn)氣相色譜和色譜理論的出現(xiàn) 19521952年馬丁和詹姆斯提出用氣體作為流動相年馬丁和詹姆斯提出用氣體作為流動相進(jìn)行色譜別離的想法，他們用硅藻土吸附的進(jìn)行色譜別離的想法，他們用硅藻土吸附的硅酮油作為固定相，用氮氣作為流動相別離硅酮油作為固定相，用氮氣作為流動相別離了假設(shè)干種小分子量揮發(fā)性有機酸。了假設(shè)干種小分子量揮發(fā)性有機酸。 氣相色譜的出現(xiàn)使色譜技術(shù)從最初的定氣相色譜的出現(xiàn)使色譜技術(shù)從最初的定性別離手段進(jìn)一步演化為具有別離功能的定性別離手段進(jìn)一步演化為具有別離功能的定量測定手段，并且極大

9、的刺激了色譜技術(shù)和量測定手段，并且極大的刺激了色譜技術(shù)和理論的開展。相比于早期的液相色譜，以氣理論的開展。相比于早期的液相色譜，以氣體為流動相的色譜對設(shè)備的要求更高，這促體為流動相的色譜對設(shè)備的要求更高，這促進(jìn)了色譜技術(shù)的機械化、標(biāo)準(zhǔn)化和自動化；進(jìn)了色譜技術(shù)的機械化、標(biāo)準(zhǔn)化和自動化；氣相色譜需要特殊和更靈敏的檢測裝置，這氣相色譜需要特殊和更靈敏的檢測裝置，這促進(jìn)了檢測器的開發(fā)；而氣相色譜的標(biāo)準(zhǔn)化促進(jìn)了檢測器的開發(fā)；而氣相色譜的標(biāo)準(zhǔn)化又使得色譜學(xué)理論得以形成色譜學(xué)理論中有又使得色譜學(xué)理論得以形成色譜學(xué)理論中有著重要地位的塔板理論和著重要地位的塔板理論和Van DeemterVan Deemter

10、方程，方程，以及保存時間、保存指數(shù)、峰寬等概念都是以及保存時間、保存指數(shù)、峰寬等概念都是在研究氣相色譜行為的過程中形成的。在研究氣相色譜行為的過程中形成的。 高效液相色譜高效液相色譜1960年代，為了別離蛋白質(zhì)、核酸等不易汽年代，為了別離蛋白質(zhì)、核酸等不易汽化的大分子物質(zhì)，氣相色譜的理論和方法被化的大分子物質(zhì)，氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜。重新引入經(jīng)典液相色譜。1960年代末科克蘭、年代末科克蘭、哈伯、荷瓦斯、莆黑斯、里普斯克等人開發(fā)哈伯、荷瓦斯、莆黑斯、里普斯克等人開發(fā)了世界上第一臺高效液相色譜儀，開啟了高了世界上第一臺高效液相色譜儀，開啟了高效液相色譜的時代。高效液相色譜使用

11、粒徑效液相色譜的時代。高效液相色譜使用粒徑更細(xì)的固定相填充色譜柱，提高色譜柱的塔更細(xì)的固定相填充色譜柱，提高色譜柱的塔板數(shù)，以高壓驅(qū)動流動相，使得經(jīng)典液相色板數(shù)，以高壓驅(qū)動流動相，使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的別離工作得以在譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的別離工作得以在幾個小時甚至幾十分鐘內(nèi)完成。幾個小時甚至幾十分鐘內(nèi)完成。1971年科克蘭等人出版了年科克蘭等人出版了?液相色譜的液相色譜的現(xiàn)代實踐現(xiàn)代實踐?一書，標(biāo)志著高效液相色譜法一書，標(biāo)志著高效液相色譜法HPLC正式建立。正式建立。1 1 色譜法的開展色譜法的開展2 2 色譜法的分類色譜法的分類3 3 色譜法流出曲線及相關(guān)術(shù)語色譜法流出曲線

12、及相關(guān)術(shù)語4 4 色譜法的原理色譜法的原理內(nèi)容提要內(nèi)容提要 色譜法的分類色譜法的分類1 1 根據(jù)流動相的根據(jù)流動相的物態(tài)可分為物態(tài)可分為氣相色譜氣相色譜(GC)(GC)液相色譜液相色譜(LC)(LC)超臨界流體色譜超臨界流體色譜(SFC)(SFC)2 2 根據(jù)固定相的外形分根據(jù)固定相的外形分柱色譜柱色譜平板色譜平板色譜平平 板板 色色 譜譜吸附色譜：利用吸附劑對不同組分的吸附吸附色譜：利用吸附劑對不同組分的吸附性能的差異而進(jìn)行別離，常用的吸附劑有性能的差異而進(jìn)行別離，常用的吸附劑有氧化鋁、硅膠、聚酰胺等有吸附活性的物氧化鋁、硅膠、聚酰胺等有吸附活性的物質(zhì)。包括氣質(zhì)。包括氣-固吸附色譜和液固吸附

13、色譜和液-固吸附固吸附色譜。色譜。分配色譜：利用不同的組分在兩相間的分分配色譜：利用不同的組分在兩相間的分配系數(shù)的差異而進(jìn)行別離，常用的載體有配系數(shù)的差異而進(jìn)行別離，常用的載體有硅膠、硅藻土、硅鎂型吸附劑與纖維素粉硅膠、硅藻土、硅鎂型吸附劑與纖維素粉等包括氣等包括氣液分配色譜和液液分配色譜和液-液分配色譜。液分配色譜。3 3 根據(jù)別離機理可分為根據(jù)別離機理可分為: :離子交換色譜離子交換色譜離子交換色譜中的固定相固定相是一些帶電荷的基團(tuán)，這些帶電基團(tuán)通過靜電相互作用與帶相反電荷的離子結(jié)合。如果流動相中存在其他帶相反電荷的離子，按照質(zhì)量作用定律，這些離子將與結(jié)合在固定相上的反離子進(jìn)行交換。固定相

14、基團(tuán)帶正電荷的時候，其可交換離子為陰離子，這種離子交換劑為陰離子交換劑；固定相的帶電基團(tuán)帶負(fù)電荷，可用來與流動相交換的離子就是陽離子，這種離子交換劑叫做陽離子交換劑。排阻色譜：用化學(xué)惰性的多孔性凝膠作固定相，按固定相對樣品中各組分分子體積阻滯作用的差異來實現(xiàn)別離。當(dāng)分子進(jìn)入色譜柱后，它們中的不同組分按其大小進(jìn)入相應(yīng)的孔徑內(nèi)，大小大于所有孔徑的分子不能進(jìn)入填充劑顆粒內(nèi)部，在色譜過程中不被保存，最早被流動相洗脫至柱外，表現(xiàn)為保存時間較短；大小小于所有孔徑的分子能自由進(jìn)入填充劑外表的所有孔徑，在柱子中滯留時間較長，表現(xiàn)為保存時間較長；其余分子那么按分子大小依次被洗脫。 1 1 色譜法的開展色譜法的開

15、展2 2 色譜法的分類色譜法的分類3 3 色譜法流出曲線及相關(guān)術(shù)語色譜法流出曲線及相關(guān)術(shù)語4 4 色譜法的原理色譜法的原理內(nèi)容提要內(nèi)容提要色譜流出曲線及有關(guān)術(shù)語色譜流出曲線及有關(guān)術(shù)語圖4-1基線基線鋒高鋒高h(yuǎn) ht 0 如果進(jìn)樣量很小，濃度很低，在吸附等溫線的線性范圍內(nèi)，色譜峰如果對稱，可用Gauss正態(tài)分布函數(shù)表示： 式中：C不同時間t時某物質(zhì)的濃度，C0進(jìn)樣濃度，tr保存時間，標(biāo)準(zhǔn)偏差。)(21exp220rttCC1、基線 是柱中僅有流動相通過時，檢測器響應(yīng)訊號的記錄值，即圖41中Ot線穩(wěn)定的基線應(yīng)該是一條水平直線 2、峰高 色譜峰頂點與基線之間的垂直距離，以h表示，如圖41中BA 3

16、區(qū)域?qū)挾?色譜峰的區(qū)域?qū)挾仁墙M份在色譜柱中譜帶擴張的函數(shù)，它反映了色譜操作條件的動力學(xué)因素度量色譜峰區(qū)域?qū)挾韧ǔＳ腥N方法： 1.標(biāo)準(zhǔn)偏差標(biāo)準(zhǔn)偏差即即0.607倍峰高處色譜峰寬的一半，如倍峰高處色譜峰寬的一半，如圖圖41中中EF距離的一半。距離的一半。2.半峰寬半峰寬W1/2即峰高一半處對應(yīng)的峰寬，如圖即峰高一半處對應(yīng)的峰寬，如圖41中中GH間的距離它與標(biāo)準(zhǔn)偏差間的距離它與標(biāo)準(zhǔn)偏差的關(guān)系是：的關(guān)系是：W1/2=2.354 3 3. . 基線寬度基線寬度W W 即色譜峰兩側(cè)拐點上的切線在基線上的截即色譜峰兩側(cè)拐點上的切線在基線上的截距，如圖距，如圖4 41 1中中IJIJ的距離它與標(biāo)準(zhǔn)偏差的距離

17、它與標(biāo)準(zhǔn)偏差的的關(guān)系是：關(guān)系是： W = 4 W = 4 2/17.1WW 保存值定性保存值定性1 1 死時間死時間t0t0死時間死時間(dead time)-(dead time)-不保存組分的保存時不保存組分的保存時間間 不被固定相吸附或溶解的物質(zhì)進(jìn)入色譜柱時，從進(jìn)樣到出現(xiàn)峰極大值所需的時間稱為死時間，如圖41中 OA。因為這種物質(zhì)不被固定相吸附或溶解，故其流動速度將與流動相的流動速度相近測定流動相平均線速時，可用往長L與t t0 0的比值計算。流動相流動相平均線速度平均線速度0tLu 柱長柱長2 2 保存時間保存時間trtr試樣從進(jìn)樣開始到柱后試樣從進(jìn)樣開始到柱后出現(xiàn)峰極大點時所經(jīng)歷的時

18、間，稱為出現(xiàn)峰極大點時所經(jīng)歷的時間，稱為保存時間，如圖保存時間，如圖4 41 OB1 OB它相應(yīng)它相應(yīng)于樣品到達(dá)柱末端的檢測器所需的時于樣品到達(dá)柱末端的檢測器所需的時間間 3 3 校正校正( (調(diào)整調(diào)整) )保存時間保存時間 某組份的保存時間扣除死時間后某組份的保存時間扣除死時間后稱為該組份的調(diào)整保存時間，即稱為該組份的調(diào)整保存時間，即保存時間是色譜法定性的根本依據(jù)，但同一組份的保存時間常受到流動相流速的影響，因此色譜工作者有時用保存體積等參數(shù)進(jìn)行定性檢定 4 4死體積死體積 V0 V0 指色譜柱在填充后，柱管內(nèi)固定相顆粒指色譜柱在填充后，柱管內(nèi)固定相顆粒間所剩留的空間、色譜儀中管路和連接頭間

19、間所剩留的空間、色譜儀中管路和連接頭間的空間以及檢測器的空間的總和當(dāng)后兩項的空間以及檢測器的空間的總和當(dāng)后兩項很小而可忽略不計時，死體積可由死時間與很小而可忽略不計時，死體積可由死時間與流動相體積流速流動相體積流速F0F0L Lminmin計算：計算： V0= t0F0 V0= t0F0 5 5保存體積保存體積 VR VR 指從進(jìn)樣開始到被測組份在柱后出指從進(jìn)樣開始到被測組份在柱后出現(xiàn)濃度極大點時所通過的流動相體積?，F(xiàn)濃度極大點時所通過的流動相體積。保存體積與保存時間保存體積與保存時間t t的關(guān)系如下：的關(guān)系如下： VR = tRF0 VR = tRF0 6 6調(diào)整保存體積調(diào)整保存體積VRVR

20、 某組份的保存體積扣除死體積后，某組份的保存體積扣除死體積后，稱該組份的調(diào)整保存體積，即稱該組份的調(diào)整保存體積，即 VR= VR-V0 VR= VR-V0 7 7相對保存值相對保存值2.1 2.1 某組份某組份2 2的調(diào)整保存值與組份的調(diào)整保存值與組份1 1的調(diào)整的調(diào)整保存值之比，稱為相對保存值：保存值之比，稱為相對保存值：12121.2RRRRVVtt 由于相對保存值只與柱溫及固定相的性質(zhì)有關(guān)，而與柱徑、柱長、填充情況及流動相流速無關(guān)，因此，它是色譜法中，特別是氣相色譜法中，廣泛使用的定性數(shù)據(jù) 必須注意，相對保存值絕對不是兩個組份保存時間或保存體積之比 。8 別離因子 在定性分析中，通常固定

21、一個色譜峰作為標(biāo)準(zhǔn)s，然后再求其它峰i對這個峰的相對保存值此時，ri/s可能大于1，也可能小于1在多元混合物分析中，通常選擇一對最難別離的物質(zhì)對，將它們的相對保存值作為重要參數(shù)在這種特殊情況下，可用符號表示： 式中tR2為后出峰的調(diào)整保存時間，所以這時總是大于1的 。12RRtt色譜流出曲線上的信息1 根據(jù)色譜峰的個數(shù)，可判斷樣品所含的最少組份數(shù)。2 根據(jù)色譜峰的保存值，可以進(jìn)行定性分析。3 根據(jù)色譜峰的面積或峰高, 可以進(jìn)行定量分析4 色譜峰的保存值及其區(qū)域?qū)挾仁窃u價色譜柱別離效能的依據(jù)5 色譜峰兩峰間的距離，是評價固定相(或流動相)選擇是否適宜的依據(jù)。1 1 色譜法的開展色譜法的開展2 2

22、 色譜法的分類色譜法的分類3 3 色譜法流出曲線及相關(guān)術(shù)語色譜法流出曲線及相關(guān)術(shù)語4 4 色譜法的原理色譜法的原理內(nèi)容提要內(nèi)容提要色譜分析的根本原理組分保存時間為何不同？色譜峰為何變寬？ 色譜法分析的根本原理 色譜分析的目的是將樣品中各組分彼此別離，組分要到達(dá)完全別離，兩峰間的距離必須足夠遠(yuǎn)，兩峰間的距離是由組分在兩相間的分配系數(shù)決定的，即與色譜過程的熱力學(xué)性質(zhì)有關(guān)。但是兩峰間雖有一定距離，如果每個峰都很寬，以致彼此重疊，還是不能分開。這些峰的寬或窄是由組分在色譜柱中傳質(zhì)和擴散行為決定的，即與色譜過程的動力學(xué)性質(zhì)有關(guān)。因此，要從熱力學(xué)和動力學(xué)兩方面來研究色譜行為。 (一分配系數(shù)K和分配比kms

23、ccK 組分在固定相中的濃度組分在流動相中的濃度1 分配系數(shù)k 如前所述，分配色譜的別離是基于樣品組分在固定相和流動相之間反復(fù)屢次地分配過程，而吸附色譜的別離是基于反復(fù)屢次地吸附一脫附過程。這種別離過程經(jīng)常用樣品分子在兩相間的分配來描述，而描述這種分配的參數(shù)稱為分配系數(shù)見它是指在一定溫度和壓力下，組分在固定相和流動相之間分配達(dá)平衡時的濃度之比值，即 組分一定時，K 主要取決于固定相性質(zhì)組分及固定相一定時,溫度增加,K 減小試樣中的各組分具有不同的K 值是別離的根底選擇適宜的固定相可改善別離效果影響影響K K 的因素的因素固定相、溫度2 分配比(容量因子)k 分配比又稱容量因子，它是指在一定溫度

24、和壓力下，組分在兩相間分配達(dá)平衡時，分配在固定相和流動相中的質(zhì)量比。即 msmmk 組分在固定相中的質(zhì)量 組分在流動相中的質(zhì)量K與k都是與組分及固定相的熱力學(xué)性質(zhì)有關(guān)的常數(shù)。K與k都是衡量色譜柱對組分保存能力的參數(shù)，數(shù)值越大，該組分的保存時間越長。k可直接從色譜圖上獲得。 k值越大，說明組分在固定相中的量越多，相當(dāng)于柱的容量大，因此又稱分配容量或容量因子。它是衡量色譜柱對被別離組分保存能力的重要參數(shù)。k值也決定于組分及固定相熱力學(xué)性質(zhì)。它不僅隨柱溫、柱壓變化而變化，而且還與流動相及固定相的體積有關(guān)。 mmssmsVCVCnnkmm3 滯留因子 Rs 設(shè)流動相在柱內(nèi)的線速度為u，組分在柱內(nèi)線速度

25、為us，由于固定相對組分有保存作用，所以usu此兩速度之比稱為滯留因子Rs。 rmssttuuR0Rs假設(shè)用質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示，即 對組分和流動相通過長度為L的色譜柱，其所需時間分別為sruLtknnnnnRmssmms1111mmmmmuLtm0可得： )1 (kttmr0mrmrmmrVVtttttk00004. 分配系數(shù)K與分配比k的關(guān)系 其中稱為相比率，它是反映各種色譜柱型特點的又一個參數(shù)。例如，對填充柱，其值一般為6-35；對毛細(xì)管柱，其值為60-600。 5分配系數(shù)K及分配比k與別離因子的關(guān)系 根據(jù)上述式子，對A、B兩組分的選擇因子，用下式表示 )()()()()()(AKBKAkBkA

26、tBtrr 上式說明：通過選擇因子把實驗測量值k與熱力學(xué)性質(zhì)的分配系數(shù)K直接聯(lián)系起來，對固定相的選擇具有實際意義。如果兩組分的K或k值相等，那么=1，兩個組分的色譜峰必將重合，說明分不開。兩組分的K或k值相差越大，那么別離得越好。因此兩組分具有不同的分配系數(shù)是色譜別離的先決條件。6 6 別離度別離度)WW()tt (2)WW(21ttR211r2r211r2r 定義：相鄰兩組分的色譜峰保存值之差與兩組分色譜峰底寬均值的比值tr2, tr1: 組分組分2和組分和組分1的保存時間的保存時間W2, W1: 組分組分2和組分和組分1的峰底寬度的峰底寬度R=1.5完全別離完全別離 (二色譜理論-塔板理論

27、 最早由Martin等人提出塔板理論，把色譜柱比作一個精餾塔，沿用精餾塔中塔板的概念來描述組分在兩相間的分配行為，同時引入理論塔板數(shù)作為衡量柱效率的指標(biāo)。 該理論假定： i在柱內(nèi)一小段長度H內(nèi)，組分可以在兩相間迅速到達(dá)平衡。這一小段柱長稱為理論塔板高度H。 ii以氣相色譜為例，載氣進(jìn)入色譜柱不是連續(xù)進(jìn)行的，而是脈動式，每次進(jìn)氣為一個塔板體積Vm。 iii所有組分開始時存在于第0號塔板上，而且試樣沿軸縱向擴散可忽略。 iv分配系數(shù)在所有塔板上是常數(shù)，與組分在某一塔板上的量無關(guān)。 為簡單起見，設(shè)色譜往由5塊塔板n5，n為柱子的塔板數(shù)組成，并以r表示塔板編號，r=1，2，nl；某組分的分配比k=1.

28、 根據(jù)上述假定，在色譜別離過程中，該組分的分布可計算如下： 開始時，假設(shè)有單位質(zhì)量，即m=1例1mg或1g的該組分加到第0號塔板上，分配平衡后，由于k=1，即ms=mm故mm=ms=0.5。當(dāng)一個板體積lV的載氣以脈動形式進(jìn)入0號板時，就將氣相中含有nm局部組分的載氣頂?shù)?號板上，此時0號板液相或固相中ms局部組分及1號板氣相中的mm局部組分，將各自在兩相間重新分配。故0號板上所含組分總量為05，其中氣液或氣固兩相各為025而1號板上所含總量同樣為05氣液或氣固相亦各為025。以后每當(dāng)一個新的板體積載氣以脈動式進(jìn)入色譜柱時，上述過程就重復(fù)一次(見下表)。1 塔板理論柱別離效能指標(biāo)塔板理論柱別離

29、效能指標(biāo)* k=1 塔板號塔板號載氣塔板體積數(shù)載氣塔板體積數(shù)01234柱出口柱出口01234567891011121314151610.50.250.1250.0630.0320.0160.0080.0040.0020.00100000000.50.50.3750.250.1570.0950.0560.0320.0180.0100.0050.0020.001000000.250.3750.3750.3130.2350.1650.1110.0720.0450.0280.0160.0100.0050.0020.0010.000.1250.250.3130.3130.2740.220.1660.09

30、40.0700.0490.0330.0220.0140.00800000.0630.1570.2350.2740.2740.2470.2070.1510.1100.080.0570.0400.027000000.0320.0790.1180.1380.1380.1240.1040.0760.0560.0400.0280.020 按上述分配過程，對于n=5，k=1，m=1的體系，隨著脈動進(jìn)入柱中板體積載氣的增加，組分分布在柱內(nèi)任一板上的總量氣液兩相中的總質(zhì)量見表：4-2由塔板理論可建流出曲線方程： m為組分質(zhì)量，Vr為保存體積，n為理論塔板數(shù)。當(dāng)V=Vr 時，C值最大，即)1 (2exp22rr

31、VVnVmnCrVmnC2max222/11654. 5 WtWtnrrnLH 理論塔板數(shù)理論塔板數(shù)理理論論塔塔板板高高度度色譜柱長度色譜柱長度當(dāng)色譜柱長度一定時，塔板數(shù)當(dāng)色譜柱長度一定時，塔板數(shù) n 越大越大( (塔板高度塔板高度 H 越小越小) )，被測組分在柱內(nèi)，被測組分在柱內(nèi)被分配的次數(shù)越多，柱效能越高，所被分配的次數(shù)越多，柱效能越高，所得色譜峰越窄。得色譜峰越窄。由流出曲線方程可推出： 從上兩式可以看出，色譜峰W越小，n就越大，而H就越小，柱效能越高。因此，n和H是描述柱效能的指標(biāo)。 通常填充色譜柱的n103，H1mm。而毛細(xì)管柱 n=105-106，H0.5mm 由于死時t0包括在

32、tr中,而實際的t0不參與柱內(nèi)分配,所計算的n值盡大,H很小,但與實際柱效能相差甚遠(yuǎn).所以,提出把t0扣除,采用有效理論塔板數(shù)neff和有效塔板高Heff評價柱效能。 222/11654. 5 WtWtnrreffeffeffnLH 不同物質(zhì)在同一色譜柱上的分配系數(shù)不同，用有效塔板數(shù)和有效塔板高度作為衡量柱效能的指標(biāo)時，應(yīng)指明測定物質(zhì)。有效塔板數(shù)有效板高由別離度和塔板理論推出根本色譜別離方程式)(212112WWttRrr 對于難別離相鄰兩組分：W1W2WWttWttRrrrr1212 22162 Wtnreff反反映映柱柱效效，則則有有若若以以組組分分222122211616 RtttRnr

33、rreffRttWrr12 22220222221 kktttttnnrrrreff 11422kknR 14 effnR別離度與別離度與k、n及及 的關(guān)系的關(guān)系 k從從1增加到增加到3，R增加到原來的增加到原來的1.5倍倍 (k: 2-7) n增加到原來的增加到原來的3倍倍，R增加到原來的增加到原來的1.7倍倍 從從1.01增加到增加到1.1，增加約增加約9，R增增 加到原來的加到原來的9倍倍 結(jié)論結(jié)論選擇合適的固定相選擇合適的固定相(流動相流動相)以增加以增加 是改善分離度最有效的方法是改善分離度最有效的方法 1) 各組分的分配系數(shù)必須不同。這一條件通過選擇適宜的固定相來實現(xiàn)。2) 區(qū)域擴

34、寬的速度應(yīng)小于區(qū)域別離的速度，即色譜柱的柱效要高。3) 在保證快速別離的前提條件下，色譜柱應(yīng)足夠長。使試樣中的不同組分別離需要滿足的條件雙K與“五保，塔板n/H。 1，沒有戲！R1.5, 全別離。 塔板理論用熱力學(xué)觀點形象地描述了溶質(zhì)在色譜柱中的分配平衡和別離過程，導(dǎo)出流出曲線的數(shù)學(xué)模型，并成功地解釋了流出曲線的形狀及濃度極大值的位置，還提出了計算和評價柱效的參數(shù)。但由于它的某些根本假設(shè)并不完全符合柱內(nèi)實際發(fā)生的別離過程，例如，縱向擴能解釋造成譜帶擴張的原因和影響板高的各種因素，也不能說明為什么在不同流速下可以測得不同的理論塔板數(shù)，這就限制了它的應(yīng)用。 2 速率理論影響柱效的因素CuuBAH

35、流動相流動相線速度線速度范弟姆特方程1) 渦流擴散項渦流擴散項ApdA 2 固定相顆粒越小，填充的越均勻固定相顆粒越小，填充的越均勻A越小，越小，H越小，柱效越高，色譜峰越窄。越小，柱效越高，色譜峰越窄。2) 分子擴散項分子擴散項B/u(縱向擴散項縱向擴散項)gDB 2 流動相流動相柱內(nèi)譜帶構(gòu)型柱內(nèi)譜帶構(gòu)型相應(yīng)的響應(yīng)信號相應(yīng)的響應(yīng)信號產(chǎn)生原因：產(chǎn)生原因：濃度梯度濃度梯度影響因素：影響因素：流動相流速；流動相流速；氣體擴散系數(shù)氣體擴散系數(shù))1(載載氣氣MDg 3) 傳質(zhì)阻力項傳質(zhì)阻力項CuuCuCCulg gpgDdkkC222)1(01. 0 氣相傳質(zhì)阻力氣相傳質(zhì)阻力固定相顆粒越小，載氣分子量

36、越小固定相顆粒越小，載氣分子量越小氣相傳質(zhì)阻力越小氣相傳質(zhì)阻力越小lflDdkkC22)1(32 液相傳質(zhì)阻力液相傳質(zhì)阻力固定液粘度及液膜厚度越小固定液粘度及液膜厚度越小液相傳質(zhì)阻力越小液相傳質(zhì)阻力越小4) 流動相線速度對板高的影響流動相線速度對板高的影響CuuBAH 例1：一色譜柱在某溫度下的速率方程的A=0.08cm; B=0.65cm2/s; C=0.003s, 求最正確線速度u和最小塔板高H. 解: H=A+B/u+Cu欲求 u最正確和H最小,要對速率方程微分,即 dH/dud(A+B/u+Cu)/du-B/u2+C0最正確線速: u最正確(B/C)1/2 (0.65/0.003)1/

37、214.7cm/s最小板高: H最小A+2(BC)1/2 0.08+2(0.650.003)1/20.17cm例2：有一根 l m長的柱子，別離組分1和2得到如下色譜圖。圖中橫坐標(biāo)l為記錄筆走紙距離。假設(shè)欲得到 R=1.2的別離度，有效塔板數(shù)應(yīng)為多少？色譜柱要加到多長？22116 Rneff需需要要解法解法1 11 . 154554912 rrtt R=1.2,)(278811 . 11 . 12 . 11622塊塊需要需要 effn1) 14 effnR2)需要需要原來原來需要需要原來原來LLnneffeff effeffHnL 原來原來需要需要原來原來需要需要effeffnnLL )(12

38、39545491616222塊塊原原來來 Wtneff)(25. 2123927881mL 需需要要8 . 054549 原原R解法解法2)(25. 28 . 02 . 112mL需要需要 需要需要原來原來需要需要原來原來需要需要原來原來LLRRnneffeff2 1) 同解法同解法12)22116 Rneff氣相色譜實驗技術(shù)氣相色譜實驗技術(shù)一一 氣相色譜儀氣相色譜儀GC工作過程工作過程載氣系統(tǒng)載氣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)別離系統(tǒng)別離系統(tǒng)檢測和檢測和記錄系統(tǒng)記錄系統(tǒng)溫控系統(tǒng)溫控系統(tǒng)一載氣系統(tǒng)一載氣系統(tǒng)常用載氣：常用載氣：氮氣、氦氣、氫氣及氬氣氮氣、氦氣、氫氣及氬氣氣源氣源凈化枯燥管凈化枯燥管載氣流

39、速控制裝置載氣流速控制裝置 載氣系統(tǒng)載氣系統(tǒng)載氣選擇依據(jù)載氣選擇依據(jù)檢測器檢測器柱效柱效 二進(jìn)樣系統(tǒng)二進(jìn)樣系統(tǒng)注射器注射器氣化室氣化室進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng) 進(jìn)樣器進(jìn)樣器氣化室氣化室溫度比柱溫高溫度比柱溫高出出1050取樣位置取樣位置 試樣導(dǎo)入色譜柱試樣導(dǎo)入色譜柱六通閥進(jìn)樣器六通閥進(jìn)樣器三別離系統(tǒng)三別離系統(tǒng)(色譜柱色譜柱)色譜柱色譜柱填充柱填充柱毛細(xì)管柱毛細(xì)管柱柱內(nèi)徑柱內(nèi)徑1-10 mm0.05-0.5 mm柱長度柱長度 0.5-10 m10-150 m總塔板數(shù)總塔板數(shù)103 106樣品容量樣品容量 10-1000 0.1-50g g 1 氣液色譜固定相氣液色譜固定相 組成組成擔(dān)體擔(dān)體(載體載體)固

40、定液固定液硅藻土硅藻土紅色紅色白色白色非硅藻土非硅藻土 1) 擔(dān)體擔(dān)體(載體載體)對載體的要求對載體的要求 具有多孔性，即比外表積大。具有多孔性，即比外表積大。 化學(xué)惰性，外表沒有活性，有較好的化學(xué)惰性，外表沒有活性，有較好的浸潤性。浸潤性。 熱穩(wěn)定性好。熱穩(wěn)定性好。 有一定的機械強度，使固定相在制備有一定的機械強度，使固定相在制備和填充過程中不易粉碎。和填充過程中不易粉碎。SiOHO SiOHSiCH3CH3ClCl+Si O SiSiCH3CH3OO+ HCl 擔(dān)體的外表處理擔(dān)體的外表處理a. 酸洗濃鹽酸浸泡，除去堿性作用基團(tuán)酸洗濃鹽酸浸泡，除去堿性作用基團(tuán)b. 堿洗氫氧化鉀甲醇溶液浸泡，

41、除去酸堿洗氫氧化鉀甲醇溶液浸泡，除去酸 性作用基團(tuán)性作用基團(tuán)c. 硅烷化除去擔(dān)體外表的氫鍵作用力硅烷化除去擔(dān)體外表的氫鍵作用力二甲基二甲基二氯硅二氯硅烷烷2) 固定液固定液高沸點的有機化合物高沸點的有機化合物 對固定液的要求對固定液的要求 熱穩(wěn)定性好，在操作溫度下不發(fā)生聚合、分熱穩(wěn)定性好，在操作溫度下不發(fā)生聚合、分解等反應(yīng)；具有較低的蒸氣壓，以免流失。解等反應(yīng)；具有較低的蒸氣壓，以免流失。 化學(xué)穩(wěn)定性好，不與樣品或載氣發(fā)生不可逆化學(xué)穩(wěn)定性好，不與樣品或載氣發(fā)生不可逆的化學(xué)反應(yīng)。的化學(xué)反應(yīng)。 粘度和凝固點低，以便在載體表面能均勻分粘度和凝固點低，以便在載體表面能均勻分布。布。 對樣品中的各組分有

42、適當(dāng)?shù)娜芙舛取悠分械母鹘M分有適當(dāng)?shù)娜芙舛取?填充填充柱柱 ，毛細(xì)管柱，毛細(xì)管柱 )15. 1 08. 1 組分與固定液分子間的相互作用組分與固定液分子間的相互作用 靜電力極性分子之間的作用力靜電力極性分子之間的作用力 誘導(dǎo)力極性與非極性分子之間的作用力誘導(dǎo)力極性與非極性分子之間的作用力 色散力非極性分子之間的作用力色散力非極性分子之間的作用力 氫鍵力氫原子與電負(fù)性很大的原子氫鍵力氫原子與電負(fù)性很大的原子(如如F、O、N等等) 之間的作用力之間的作用力 固定液的相對極性固定液的相對極性P)()(lg)()(lg正丁烷正丁烷丁二烯丁二烯或或環(huán)己烷環(huán)己烷苯苯rrrrttqttq 角角鯊鯊?fù)橥檠跹?/p>

43、二二丙丙腈腈:2;, :1 )()(100100211qqqqPxx 固定液的選擇原那么固定液的選擇原那么“相似相溶相似相溶a. 非極性物質(zhì)非極性物質(zhì)非極性固定液非極性固定液。 沸點沸點越低的組分越早出峰。越低的組分越早出峰。b. 極極性物質(zhì)性物質(zhì)極性固定液極性固定液。 極性極性越小的組分出越早出峰。越小的組分出越早出峰。c. 極極性與非極性混合物性與非極性混合物極性固定液極性固定液。 極性越小的組分出越早出峰。極性越小的組分出越早出峰。d. 易易形成氫鍵物質(zhì)形成氫鍵物質(zhì)極性或氫鍵型固定液。極性或氫鍵型固定液。 不易形成氫鍵的組分先出峰，易形成氫鍵不易形成氫鍵的組分先出峰，易形成氫鍵的組分后出

44、峰。的組分后出峰。e. 復(fù)雜難別離樣品復(fù)雜難別離樣品多種固定液混合多種固定液混合固定液固定液極性極性適用范圍適用范圍100二甲基聚硅二甲基聚硅氧烷氧烷非極性非極性脂肪烴化合物，脂肪烴化合物，石化產(chǎn)品石化產(chǎn)品(50三氟丙基三氟丙基)甲甲基聚硅氧烷基聚硅氧烷中等極性中等極性極性化合物，如極性化合物，如高級脂肪酸高級脂肪酸聚乙二醇聚乙二醇中強極性中強極性極性化合物，如極性化合物，如醇、羧酸酯等醇、羧酸酯等常用毛細(xì)管色譜柱固定液常用毛細(xì)管色譜柱固定液2 氣固色譜固定相氣固色譜固定相永久性氣體永久性氣體惰性氣體惰性氣體低沸點有機化合物低沸點有機化合物分離對象分離對象別離測定有機物中的痕量水別離測定有機物

45、中的痕量水高分子多孔微球高分子多孔微球硅膠強極性硅膠強極性氧化鋁弱極性氧化鋁弱極性活性炭非極性活性炭非極性分子篩分子篩強極性強極性高分子多孔微球高分子多孔微球(GDX)固體吸附劑固體吸附劑(四四) 檢測系統(tǒng)檢測系統(tǒng)1 熱導(dǎo)池檢測器熱導(dǎo)池檢測器 (TCD)參比參比測量測量R1R2ABR1*R參比參比=R2*R測量測量只有載氣通過時只有載氣通過時載氣載氣+組分組分R1*R參比參比R2*R測量測量利用載氣與組分熱導(dǎo)系數(shù)的差異進(jìn)行測量利用載氣與組分熱導(dǎo)系數(shù)的差異進(jìn)行測量載氣對載氣對熱導(dǎo)檢測器靈敏度的影響熱導(dǎo)檢測器靈敏度的影響某些氣體與蒸氣的熱導(dǎo)系數(shù)某些氣體與蒸氣的熱導(dǎo)系數(shù)/10-4J(cms)-1氣體

46、氣體熱導(dǎo)系數(shù)熱導(dǎo)系數(shù)氣體氣體熱導(dǎo)系數(shù)熱導(dǎo)系數(shù)氫氣氫氣22.4甲烷甲烷4.56氦氣氦氣17.41乙烷乙烷3.06氮氣氮氣3.14丙烷丙烷2.64氧氣氧氣3.18甲醇甲醇2.30空氣空氣3.14乙醇乙醇2.22氬氣氬氣2.18丙酮丙酮1.76影響熱導(dǎo)檢測器靈敏度的因素影響熱導(dǎo)檢測器靈敏度的因素載氣種類；載氣種類；熱絲工作電流；熱絲工作電流；熱絲與池體溫度差。熱絲與池體溫度差。適用范圍適用范圍 測量對象：通用測量對象：通用 色譜柱：填充柱色譜柱：填充柱 2 氫氫火焰離子化檢測器火焰離子化檢測器 (FID) CH6HC66裂解裂解 CHO6e6O3CH62 OH6CO6OH6CHO632火焰離子化機理

47、火焰離子化機理 適用范圍適用范圍 含碳有機化合物含碳有機化合物 影響檢測靈敏度的因素影響檢測靈敏度的因素氫氮比；空氣流量；極化電壓。氫氮比；空氣流量；極化電壓。3 電子捕獲檢測器電子捕獲檢測器 (ECD) eNN22 ABeABABNNAB22 電子電子捕獲機理捕獲機理 適用范圍適用范圍 鹵素及親電子物質(zhì)鹵素及親電子物質(zhì)飲用水中三鹵甲烷色譜圖飲用水中三鹵甲烷色譜圖水水氯氯氯仿氯仿二氯溴甲烷二氯溴甲烷二溴氯甲烷二溴氯甲烷溴仿溴仿4 火焰光度檢測器火焰光度檢測器 (FPD) 222SOCOO2RS S2OH4H4SO222 *2C390SSS )nm394(hSSmax*2 )nm526(hHPO

48、HPOmax* 響應(yīng)機理響應(yīng)機理 適用范圍適用范圍 含硫、磷化合物含硫、磷化合物含磷化合物含磷化合物含硫化合物含硫化合物三三九九一一一一乙乙拌拌磷磷地地亞亞農(nóng)農(nóng)倍倍硫硫磷磷對對硫硫磷磷丙丙硫硫磷磷乙乙硫硫磷磷乙乙丙丙硫硫磷磷谷谷硫硫磷磷壤壤蟲蟲磷磷豐豐索索磷磷蠅蠅毒毒磷磷馬馬拉拉硫硫磷磷一一0五九五九5 質(zhì)譜檢測器質(zhì)譜檢測器毛毛細(xì)細(xì)管管柱柱接口接口離子源離子源離子檢測器離子檢測器加加熱熱器器溫溫度度傳傳感感器器6 原子發(fā)射光譜檢測器原子發(fā)射光譜檢測器二二 色譜別離操作條件的選擇色譜別離操作條件的選擇1. 色譜色譜柱柱固定相；固定相；固定液液膜厚度；固定液液膜厚度；柱長等柱長等檢測器檢測器載氣載

49、氣柱柱效效u 較小時，選擇分子量較較小時，選擇分子量較大的載氣大的載氣N2，Ar；u 較大時，選擇分子量較較大時，選擇分子量較小的載氣小的載氣(H2，He) u的選的選擇擇3. 的選擇的選擇改變柱溫產(chǎn)改變柱溫產(chǎn)生的影響生的影響柱柱效效增加柱溫可加快氣增加柱溫可加快氣相、液相的傳質(zhì)速相、液相的傳質(zhì)速率，有利于降低塔率，有利于降低塔板高度，改善柱效；板高度，改善柱效；但同時又會加劇縱但同時又會加劇縱向擴散，從而導(dǎo)致向擴散，從而導(dǎo)致柱效下降。柱效下降。 別離度別離度柱溫升高，柱溫升高， K 減小，別離度減小，別離度下降。下降。分析時間分析時間降低柱溫，分析降低柱溫，分析時間增加時間增加 柱溫應(yīng)控制在

50、固定液的最高使用溫度和柱溫應(yīng)控制在固定液的最高使用溫度和最低使用溫度范圍之內(nèi)。最低使用溫度范圍之內(nèi)。 使最難別離的組分有盡可能好的別離前使最難別離的組分有盡可能好的別離前提下，采取適當(dāng)?shù)偷闹鶞兀员４鏁r提下，采取適當(dāng)?shù)偷闹鶞兀员４鏁r間適宜，峰形不拖尾為度。間適宜，峰形不拖尾為度。 柱溫一般選擇在組分平均沸點左右。柱溫一般選擇在組分平均沸點左右。 組分復(fù)雜，沸程寬的試樣，采用程序升組分復(fù)雜，沸程寬的試樣，采用程序升溫。溫。選擇原那選擇原那么么程序升溫程序升溫50250，8/min恒溫恒溫150 正構(gòu)烷烴恒溫和程序升溫色譜圖比較正構(gòu)烷烴恒溫和程序升溫色譜圖比較程序升溫不僅可以改善別離，而且可

51、程序升溫不僅可以改善別離，而且可以縮短分析時間。以縮短分析時間。 4. 進(jìn)樣量的選擇進(jìn)樣量的選擇 進(jìn)樣量進(jìn)樣量柱柱效效進(jìn)樣量過大，使色進(jìn)樣量過大，使色譜柱超載，柱效急譜柱超載，柱效急劇下降，峰形變寬劇下降，峰形變寬檢測器檢測器 進(jìn)樣量過大，峰高進(jìn)樣量過大，峰高或峰面積與進(jìn)樣量或峰面積與進(jìn)樣量的線性關(guān)系被破壞的線性關(guān)系被破壞 進(jìn)樣量應(yīng)控制在柱容量允許范圍進(jìn)樣量應(yīng)控制在柱容量允許范圍及檢測器線性檢測范圍之內(nèi)及檢測器線性檢測范圍之內(nèi)氣相色譜分析方法及應(yīng)用氣相色譜分析方法及應(yīng)用一一 定性分析定性分析1 用純物質(zhì)用純物質(zhì) 對照定性對照定性保存值定性保存值定性峰高增加法定性峰高增加法定性 (1) 經(jīng)驗規(guī)律

52、經(jīng)驗規(guī)律碳數(shù)規(guī)碳數(shù)規(guī)律律在一定溫度下，同系物的調(diào)整保存時間的在一定溫度下，同系物的調(diào)整保存時間的對數(shù)與分子中碳數(shù)成線性關(guān)系對數(shù)與分子中碳數(shù)成線性關(guān)系)3(lg nCAntr如果知道兩種或更多同系物的調(diào)整保存時間，那么如果知道兩種或更多同系物的調(diào)整保存時間，那么可求出常數(shù)可求出常數(shù)A和和C。從色譜圖查出未知物的。從色譜圖查出未知物的 后，后，根據(jù)上式即可求出未知物的碳數(shù)。根據(jù)上式即可求出未知物的碳數(shù)。rt(2) 相對保存值相對保存值(3) 保存指數(shù)保存指數(shù)lglglglg100)()1()()(ZrZrZrxrxttttZI Z, Z+1:正構(gòu)烷烴的碳原子數(shù)正構(gòu)烷烴的碳原子數(shù)進(jìn)樣)(xrt)(Z

53、rt)1( Zrt例：乙酸正丁酯在阿皮松例：乙酸正丁酯在阿皮松L柱上的流出曲線如以柱上的流出曲線如以下圖所示。由圖中測得調(diào)整保存距離為：乙酸下圖所示。由圖中測得調(diào)整保存距離為：乙酸正丁酯正丁酯310.0 mm，正庚烷，正庚烷174.0 mm，正辛烷，正辛烷373.4 mm。求乙酸正定酯的保存指數(shù)。求乙酸正定酯的保存指數(shù)。6 .7750 .174lg4 .373lg0 .174lg0 .310lg7100 xI在與文獻(xiàn)值對照時，一在與文獻(xiàn)值對照時，一定要重視文獻(xiàn)值的實驗定要重視文獻(xiàn)值的實驗條件，如固定液、柱溫條件，如固定液、柱溫等。而且要用幾個組分等。而且要用幾個組分進(jìn)行驗證。進(jìn)行驗證。 聯(lián)機定

54、性聯(lián)機定性GC/MS(氣相色譜氣相色譜- -質(zhì)譜質(zhì)譜) )例：川桂皮揮發(fā)油的化學(xué)成分分析例：川桂皮揮發(fā)油的化學(xué)成分分析色譜柱：色譜柱：SE54(30m0.25mm0.25m) 色譜操作條件色譜操作條件載氣：氦氣，流速載氣：氦氣，流速1mL/min柱溫：初溫柱溫：初溫60保持保持1min，8 /min升溫至升溫至150 ，6 /min升溫至升溫至190 ，8 /min升升溫至溫至250 ，保持，保持1min總離子流色譜圖總離子流色譜圖6號峰的質(zhì)譜圖號峰的質(zhì)譜圖GC/AES(氣相色譜原子發(fā)射光譜氣相色譜原子發(fā)射光譜)二甲基硒二甲基硒烯丙基甲基硒烯丙基甲基硒甲基亞磺基硒酸甲酯甲基亞磺基硒酸甲酯二甲基二硒二甲基二硒2丙稀硫硒酸甲酯丙稀硫硒酸甲酯 1丙稀硫硒酸甲酯丙稀硫硒酸甲酯 雙雙(甲硫甲硫)硒硒烯丙基甲基烯丙基甲基硫硫二甲基二硫二甲基二硫二烯丙基硫二烯丙基硫烯丙基甲基二硫烯丙基甲基二硫二甲基三硫二甲基三硫二烯丙基二硫二烯丙基二硫烯丙基甲基三硫烯丙基甲基三硫二烯丙基三硫二烯丙基三硫GC-AES同時檢測大蒜中碳、硫、硒化合物同時檢測大蒜中碳、硫、硒