小兒支原體肺炎中醫(yī)證候與TH細(xì)胞相關(guān)性研究

1、小兒支原體肺炎中醫(yī)證候與TH細(xì)胞相關(guān)性研究         11-04-28 11:46:00     編輯：studa20               作者：姜永紅,姜之炎,馬晶,胡鵬,張婧延,石李,徐彬彬【摘要】  目的 探討TH1、TH2、TH17的效應(yīng)因子干擾素-(IFN-)、白細(xì)胞介素(IL)-4、IL-17與小兒肺炎

2、支原體肺炎(MPP)中醫(yī)證型的關(guān)系。方法 選取55例MPP住院患兒,根據(jù)癥狀體征進(jìn)行中醫(yī)辨證分型,檢測血清IFN-、IL-4、IL-17含量,與33例正常組兒童進(jìn)行比較。結(jié)果 55例MPP中,風(fēng)熱閉肺證25例,痰熱閉肺證3例,痰瘀互阻證11例,脾虛痰蘊(yùn)證16例。MPP患兒血清IFN-、IL-4、IL-17較正常組兒童均升高,IL-4、IL-17顯著升高(均P<0.01), IFN-升高無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。痰熱閉肺證的血清IFN-、IL-4含量均高于其余3組(P<0.01);脾虛痰蘊(yùn)證IL-4低于其余3組(P<0.01);IL-17含量各證型之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 MPP患兒中醫(yī)

3、證候與TH細(xì)胞具有相關(guān)性,可為不同證型分期論治提供較客觀的免疫學(xué)指標(biāo)。 【關(guān)鍵詞】  小兒;支原體肺炎;中醫(yī)證候;TH細(xì)胞;相關(guān)性Abstract：Objective To study TCM syndromes characteristic of mycoplasma pneumoniae pneumonia (MPP) and explore its relationship with TH1, TH2, TH17 cells effect factors IFN-, IL-4, IL-17. Method Fifty-five cases of MPP hospitalized

4、 children, detemined TCM syndrome differentiation according to symptoms and signs, were detected serum levels of IFN-, IL-4, IL-17, with 33 normal children as normal control group. Results In 55 cases, there were 25 cases of the wind-heat blocking the lung syndrome, 3 cases of the phlegm-heat blocki

5、ng the lung syndrome, 11 cases of the binding of phlegm and blood stasis syndrome, 16 cases of the phlegm accumulate due to spleen deficiency syndrome. Serum IFN-, IL-4, IL-17 level increased in MPP patients compared with control group, with significant difference in IL-4 and IL-17 (P<0.01), whil

6、e no difference in IFN- level. Serum levels of IFN- and IL-4 in syndrome of phlegm-heat blocking the lung were higher than the other three syndromes significantly (P<0.01). Serum level of IL-4 in syndrome of phlegm accumulate due to spleen deficiency was lower than the other three syndromes signi

7、ficantly (P<0.01). There was no difference in IL-17 levels among the various syndromes. Conclusion The TCM syndrome and TH cells of MPP children have relativity, which provides more objective immunology index sign for the MPP clinical treatment based on syndrome differentiation.Key words：children

8、;mycoplasma pneumoniae pneumonia;TCM syndrome;TH cells;correlation肺炎支原體(mycoplasma pneumoniae,MP)是引起小兒社區(qū)獲得性肺炎的常見病原,其發(fā)病機(jī)制與免疫高度相關(guān)。目前對肺炎支原體肺炎(Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia,MPP)與TH細(xì)胞的關(guān)系正處于探索階段,尤其是新發(fā)現(xiàn)的TH17細(xì)胞,對其在發(fā)病中作用的研究,將為治療提供新的思路。為此,我們對MPP不同中醫(yī)證型的TH1、TH2、TH17細(xì)胞的效應(yīng)因子,血清干擾素-(IFN-)、白細(xì)胞介素(IL)-4、IL-17進(jìn)行了檢測,

9、探討TH細(xì)胞與MP中醫(yī)證型的關(guān)系。1 資料與方法1.1 病例選擇1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn)(1)符合MPP診斷標(biāo)準(zhǔn),參照諸福堂實(shí)用兒科學(xué)1：發(fā)熱,熱型不定,熱程13周;刺激性咳嗽濕啰音;胸部X線攝片肺門陰影增濃,支氣管肺炎改變,間質(zhì)性肺炎改變,均一的實(shí)變影;血清特異性MP-IgM陽性(180)。(2)年齡412歲。(3)監(jiān)護(hù)人知情同意,并能夠配合治療者。1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn)(1)有哮喘病史,或過敏性疾病者;(2)近期使用過糖皮質(zhì)激素及免疫調(diào)節(jié)劑者;(3)血清學(xué)檢查合并病毒感染者;(4)痰或深部咽拭子細(xì)菌培養(yǎng)為陽性者;(5)合并有嚴(yán)重的心血管、肝、腎、內(nèi)分泌、血液系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)疾病者。1.2 一般資料

10、55例MPP病例均來自2009年9月-2010年5月本院兒科住院患兒,其中男29例,女26例,平均年齡(6.0±1.7)歲。正常對照組33例,來自健康體檢兒童,其中男18例,女15例,平均年齡(5.5±1.6)歲。1.3 研究方法1.3.1 辨證分型參照1994年國家中醫(yī)藥管理局制定的中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)2和上海市中醫(yī)兒科小兒肺炎臨床優(yōu)勢專病診療方案。風(fēng)熱閉肺：初起發(fā)熱,惡風(fēng),有汗熱不解,口渴引飲,咳嗽痰黏或黃,咽部紅赤,舌紅,苔薄黃或薄白而干,脈浮數(shù)。痰熱閉肺：發(fā)病較急,壯熱煩躁,咳嗽喘促,呼吸困難,氣急鼻煽,喉間痰鳴,聲如拽鋸;重證顏面口唇青紫發(fā)紺,兩脅煽動(dòng),搖身擷肚,

11、舌紅絳或紫黯,苔黃膩而厚,脈滑數(shù)。痰瘀互阻：咳嗽遷延不愈或反復(fù)發(fā)作,晝輕夜重,痰黏難咯,可伴發(fā)熱或無發(fā)熱,或訴胸痛,痛有定處,口渴不欲飲,舌黯紅,苔白膩或黃膩而干,脈細(xì)澀或弦滑。脾虛痰蘊(yùn)：咳嗽遷延不愈,痰聲漉漉,氣短多汗,神疲乏力,面色少華,納少便溏,舌淡,苔薄白,脈細(xì)無力。     11-04-28 11:46:00     編輯：studa201.3.2 指標(biāo)檢測與方法用顆粒凝集法檢測MP-IgG、IgM抗體,各組患兒晨起空腹采集EDTA抗凝靜脈血3 mL,低溫離心(3 000 r/min, 5 min),留取

12、1.5 mL血漿,-70 凍存待測,酶免法檢測血清IFN-、IL-4、IL-17。MP病原學(xué)檢測試劑盒由日本富士株式會(huì)社提供。人IFN-、IL-4、IL-17檢測試劑盒由美國R&D公司提供,用美國THERMO MULTISKAN MS酶標(biāo)儀檢測。1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理,結(jié)果采用±s表示,采用ONE-WAY ANOVA進(jìn)行分析。2 結(jié)果2.1 支原體肺炎中醫(yī)證候分布本研究55例患兒,風(fēng)熱閉肺證25例(45.5%),痰熱閉肺證3例(5.5%),痰瘀互阻證11例(20.0%),脾虛痰蘊(yùn)證16例(29.1%)。2.2 支原體肺炎患兒血清干擾素-及白細(xì)

13、胞介素-4、白細(xì)胞介素-17分析結(jié)果顯示,MPP患兒血清IFN-、IL-4、IL-17較正常對照組均升高,IFN-升高無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,IL-4、IL-17升高差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,均P<0.01。與正常對照組比較,IL-4/IFN-和IL-4/IL-17差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.01;IL-17/IFN-差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。2.3 中醫(yī)證型與血清干擾素-及白細(xì)胞介素-4、白細(xì)胞介素-17的關(guān)系結(jié)果顯示,血清IFN-含量痰熱閉肺證高于其余3組(P<0.01),其余3組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IL-4含量,痰熱閉肺證高于其余3組(P<0.01),脾虛痰蘊(yùn)證低于其余3組(P<

14、;0.01)。IL-17含量各證型之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IL-4/IFN-各證型之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IL-17/IFN-痰熱閉肺證低于其余3組,與脾虛痰蘊(yùn)證比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);脾虛痰蘊(yùn)證高于其余3組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IL-4/IL-17痰熱閉肺證高于其余3組(P<0.01);脾虛痰蘊(yùn)證低于其余3組,與風(fēng)熱閉肺證和痰熱閉肺證比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表2。表1 MPP患兒血清IFN-、IL-4、IL-17含量與正常對照組比較表2 不同證型MPP患兒血清IFN-、IL-4、IL-17含量比較3 討論國內(nèi)外研究顯示,MPP發(fā)病中存在TH1/TH

15、2失衡3,但對于哪種免疫細(xì)胞占優(yōu)勢眾說紛紜。近年來新發(fā)現(xiàn)的TH17細(xì)胞,也參與了MPP的發(fā)病,但其在發(fā)病中的作用研究尚不足。本研究顯示,MPP患兒TH1、TH2、TH17的效應(yīng)因子IFN-、IL-4、IL-17均升高,以TH2的效應(yīng)因子IL-4占主要優(yōu)勢,其次是TH17的效應(yīng)因子IL-17,兩者均顯著升高,TH1的效應(yīng)因子IFN-雖升高,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MPP的IL-4/IFN-和IL-4/IL-17均顯著升高,說明MPP的TH2/TH1和TH2/TH17均發(fā)生失衡。MPP患兒IL-4含量濃度增高,可通過B淋巴細(xì)胞分泌IgE,而IFN-為IgE合成的潛在抑制物,所以,當(dāng)IL-4及IL-4/ I

16、FN-比值增高時(shí)可導(dǎo)致機(jī)體IgE增高,引起氣道高反應(yīng)性。Koh等4 發(fā)現(xiàn),14例MPP患兒支氣管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4和IL-4/IFN-顯著增高,而12例肺炎鏈球菌肺炎和8例正常對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,3組中IFN-含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Romero-Rojas等5對感染MP大鼠的脾細(xì)胞進(jìn)行研究顯示,與非感染組比較,MP感染大鼠的脾細(xì)胞產(chǎn)生更多的IL-4和較少的IFN-。這些都與本研究結(jié)果一致。TH17細(xì)胞是新發(fā)現(xiàn)的一種IL-23相關(guān)且能夠分泌IL-17的新的TH細(xì)胞亞群,它的分化過程和生物學(xué)功能等方面與THl和TH2細(xì)胞亞群均有不同之處,其可介導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)、宿主防御和自身免疫。Qu

17、n Wu等6研究顯示,MP感染時(shí)BALF中IL-17蛋白的水平顯著增加,肺內(nèi)IL-17、IL-17C和IL-17F的基因表達(dá)顯著上調(diào)。上述研究也和本研究的結(jié)果相符。細(xì)胞因子IL-17、IL-6、IL-4、TNF、IFN-等在免疫調(diào)節(jié)方面相互誘導(dǎo)、相互制約形成了免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)。 (下轉(zhuǎn)第99頁)當(dāng)MP感染時(shí),這些細(xì)胞因子出現(xiàn)紊亂,導(dǎo)致肺內(nèi)炎癥加重并出現(xiàn)肺外各系統(tǒng)的并發(fā)癥7。本研究發(fā)現(xiàn),中醫(yī)證型與TH細(xì)胞具有相關(guān)性。痰熱閉肺證TH1、TH2、TH17的效應(yīng)因子IFN-、IL-4、IL-17均高于風(fēng)熱閉肺證,說明TH細(xì)胞隨病情的嚴(yán)重而升高。痰瘀互阻證各細(xì)胞因子的值低于MPP重癥痰熱閉肺證,而略高于輕癥

18、風(fēng)熱閉肺證,且我們發(fā)現(xiàn),這種趨勢在TH17細(xì)胞尤為明顯。其機(jī)制考慮兩方面,一方面各細(xì)胞因子在疾病的發(fā)展過程中存在逐漸上升的趨勢,另一方面可能與痰瘀有關(guān)。脾虛痰蘊(yùn)證各細(xì)胞因子的值均低于其余3個(gè)證型,說明疾病在向愈的過程中,TH細(xì)胞因子也逐漸向正?；芈洹Ｌ禑衢]肺證TH2/TH1比值低于風(fēng)熱閉肺證,考慮其標(biāo)準(zhǔn)差過大所致,痰瘀互阻證和脾虛痰蘊(yùn)證均低于風(fēng)熱閉肺證,說明疾病恢復(fù)過程中,該比值逐漸回落。痰熱閉肺證TH17/TH1比值低于風(fēng)熱閉肺證,且疾病恢復(fù)過程中逐漸升高,說明病情越輕,該比值越大。TH2/TH17比值與TH2/TH1基本一致,病情越重比值越高,疾病恢復(fù)期逐漸回落。本研究結(jié)果顯示,MPP存在

19、TH1、TH2、TH17細(xì)胞的紊亂,其效應(yīng)因子IFN-、IL-4、IL-17均升高,且不同中醫(yī)證型的TH細(xì)胞具有不同的特點(diǎn),為中醫(yī)辨證施治及機(jī)制研究提供了免疫學(xué)的思路?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1 胡亞美,江載芳.諸福棠實(shí)用兒科學(xué)M.7版.北京：人民衛(wèi)生出版社, 2002：1205.2 國家中醫(yī)藥管理局.中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)S.南京：南京大學(xué)出版社,1994：94.3 Abi Berger. Th1 and Th2 responses：what are they?J. BMJ,2000, 321(7258)：424.4 Koh YY, Park Y, Lee HJ, et al. Levels of interleukin-2, interferon-, and interleukin-4 in broncho