血常規(guī)SOP文件

1、 全自動(dòng)血細(xì)胞分析SOP一，檢驗(yàn)?zāi)康募霸?1，目的：用BC-3000 Plus 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，在臨床和實(shí)驗(yàn)室定量分析血液細(xì)胞，對(duì)人體的血液中三種有形成分（紅細(xì)胞，白細(xì)胞，血小板）的19項(xiàng)參數(shù)和3個(gè)直方圖進(jìn)行分析。是人體血液的基本生理病理指標(biāo)之一。白細(xì)胞計(jì)數(shù)WBC淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)Lymph#中間細(xì)胞計(jì)數(shù)Mid#中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)Gran#淋巴細(xì)胞百分比Lymph%中間細(xì)胞百分比Mid%中性粒細(xì)胞百分比Gran%紅細(xì)胞計(jì)數(shù)RBC血紅蛋白HGB平均紅細(xì)胞體積MCV平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量MCH平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度MCHC紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)RDW-CV紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差RDW-SD紅細(xì)胞壓積HC

2、T血小板計(jì)數(shù)PLT平均血小板體積MPV血小板分布寬度PDW血小板壓積PCT白細(xì)胞分布直方圖WBC Histogram紅細(xì)胞分布直方圖RBC Histogram血小板分布直方圖PLT Histogram對(duì)患者和健康人群來(lái)講，觀察有無(wú)各種原因引起的貧血，出血和失血，目前機(jī)體有無(wú)細(xì)菌及病毒感染，可篩查出各種血液病，如白血病，血小板減少性紫癜等。 2，原理：電阻法測(cè)量的血樣先用稀釋液進(jìn)行指定比例的稀釋?zhuān)靡詼y(cè)量WBC、RBC、PLT 和HGB等參數(shù)。WBC、RBC 計(jì)數(shù)池的稀釋標(biāo)本在負(fù)壓作用下，分別通過(guò)各自的計(jì)數(shù)微孔，流入管道，通過(guò)兩個(gè)光電傳感器，在這兩個(gè)光電傳感器之間的液量就是儀器分析計(jì)數(shù)的標(biāo)本量。

3、 用阻抗法測(cè)量WBC、RBC 和PLT 的體積分布和數(shù)目。電極插在液體中計(jì)數(shù)微孔的兩邊，在計(jì)數(shù)微孔的兩邊周?chē)⒘艘粋€(gè)電場(chǎng)環(huán)境，根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)性的性質(zhì)，當(dāng)有細(xì)胞通過(guò)計(jì)數(shù)微孔時(shí)，將引起阻抗的變化，阻抗變化的大小與細(xì)胞體積成正比。WBC根據(jù)體積的大小，它有多種形態(tài)，由于稀釋液、溶血?jiǎng)┖腿苎獣r(shí)間的不同，WBC的體積大小會(huì)發(fā)生變化。在一定的程序控制下，顯示出WBC 的三分類(lèi)淋巴細(xì)胞、中間細(xì)胞（嗜酸嗜堿單核）和中性粒細(xì)胞。被稀釋的血樣加入溶血?jiǎng)┖?，紅細(xì)胞溶解，釋放出血紅蛋白，血紅蛋白與溶血?jiǎng)┙Y(jié)合形成復(fù)合物，用波長(zhǎng)525nm 的單色光在WBC計(jì)數(shù)池內(nèi)測(cè)定此化合物的透過(guò)光強(qiáng)，用這個(gè)透過(guò)光強(qiáng)與空白狀態(tài)的透過(guò)

4、光強(qiáng)相比較，得到血紅蛋白濃度（空白狀態(tài)是指WBC計(jì)數(shù)池中只有稀釋液的狀態(tài)）。二，標(biāo)本1，標(biāo)本種類(lèi)：末梢血為200-300微升，靜脈血2毫升。2，采集標(biāo)本容器及添加劑：容器：末梢血為一次性朔料試管，靜脈血為真空采血管。添加劑：不同實(shí)驗(yàn)使用不同的抗凝劑，不能互相代替。血常規(guī)用EDTA-k2抗凝。3，采集方法：毛細(xì)血管采集或靜脈穿刺采集。采集時(shí)間：患者隨到隨時(shí)采集。4，標(biāo)本運(yùn)送：標(biāo)本采集后，應(yīng)及時(shí)送檢。5，標(biāo)本接受：標(biāo)本的編號(hào)與化驗(yàn)單上的編號(hào)要一致，清楚，正確及完整。6，準(zhǔn)備與保存：室溫靜置10-15分鐘，充分混勻后上機(jī)檢測(cè)。血液常規(guī)標(biāo)本一般保存在室溫24小時(shí)。三，設(shè)備與試劑1，設(shè)備：BC-3000

5、 Plus 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀。深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)。產(chǎn)品注冊(cè)號(hào)：粵食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2005第2400522號(hào)。2，專(zhuān)用試劑： 稀釋液：M-30PD，等滲溶液，具有特定的電導(dǎo)值，為細(xì)胞計(jì)數(shù)提供穩(wěn)定的環(huán)境。作為人體血細(xì)胞計(jì)數(shù)，體積測(cè)量以及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)時(shí)的稀釋液使用。本品應(yīng)為透明液體，不得有沉淀，懸浮物和絮狀物。主要成份，NaCl，Na2SO4，緩沖劑，抗菌劑。本品2-30保存期2年。開(kāi)瓶后，使用溫度15-30，有效期60天。 產(chǎn)品注冊(cè)號(hào)：粵食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2005第2400276號(hào)。 沖洗液：M-30PR， 不含蛋白酶和次氯酸鈉（NaCIO)等強(qiáng)蛋白清除劑的電解質(zhì)溶液，用于儀器

6、的進(jìn)樣孔，閥和管路系統(tǒng)的清潔和沖洗。本品應(yīng)為透明液體，不得有沉淀，懸浮物和絮狀物。主要成份，NaCl，KCl，Na2SO4，緩沖劑，抗菌劑和表面活性劑。本品2-30保存期2年。開(kāi)瓶后，使用溫度15-30，有效期60天。產(chǎn)品注冊(cè)號(hào)：粵食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2005第2400303號(hào)。 無(wú)氰溶血?jiǎng)篗-30PCFL，能溶解紅細(xì)胞，與血紅蛋白形成復(fù)合物。用于白細(xì)胞計(jì)數(shù)，白細(xì)胞分群和血紅蛋白測(cè)定。本品應(yīng)為透明液體，不得有沉淀，懸浮物和絮狀物。主要成份，NaCl，KCl，Na2SO4，緩沖劑，抗菌劑和表面活性劑。本品2-30保存期2年。開(kāi)瓶后，使用溫度15-30，有效期60天。產(chǎn)品注冊(cè)號(hào)：粵食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2

7、005第2400274號(hào)。 E-Z清洗液（酶清洗液）：M-30PE，含有蛋白水解酶的電解質(zhì)溶液，能有效地清除蛋白污漬，用于儀器的進(jìn)樣器，閥和管路系統(tǒng)的清潔和沖洗。本品應(yīng)為透明液體，不得有沉淀，懸浮物和絮狀物。主要成份，NaCl，緩沖劑，抗菌劑，表面活性劑，蛋白水解酶。本品2-30保存期2年。開(kāi)瓶后，使用溫度15-30，有效期60天。產(chǎn)品注冊(cè)號(hào)：粵食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2005第2400303號(hào)。 探頭清潔液：M-30PP，本品為含有次氯酸鈉的電解質(zhì)溶液，用于儀器的進(jìn)樣器，的清潔和沖洗。主要成份，NaOH，次氯酸鈉（NaCIO)，表面活性劑。本品2-30保存期2年。開(kāi)瓶后，使用溫度15-30，有效期6

8、0天。產(chǎn)品注冊(cè)號(hào)：粵食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2005第2400303號(hào)。四，操作步驟 1, 開(kāi)機(jī)前的準(zhǔn)備： 檢查試劑（稀釋液，沖洗液，溶血?jiǎng)┦欠褡懔?，有無(wú)渾濁變質(zhì)。 試劑管路連接正常否，管道有無(wú)扭結(jié)。 并倒空廢液瓶。 電源連接是否正常。 2，開(kāi)機(jī)啟動(dòng)： 打開(kāi)儀器主機(jī)后面的電源開(kāi)關(guān)。 電源指示燈燃亮，儀器內(nèi)部進(jìn)行初始化，進(jìn)行自檢。 自動(dòng)沖洗內(nèi)部管路，自動(dòng)測(cè)量本底。 80秒鐘后進(jìn)入計(jì)數(shù)界面。 3，本底檢查： 出現(xiàn)計(jì)數(shù)界面后，儀器自動(dòng)測(cè)量本底數(shù)值顯示在屏幕上，本底結(jié)果要求： WBC0.3 RBC0.03 HGB1 PLT10 如果本底沒(méi)有達(dá)到儀器的要求，儀器將會(huì)提示“本底異?！保?qǐng)執(zhí)行清洗或維護(hù)程序。 4

9、，室內(nèi)質(zhì)控操作： 5，全血測(cè)量： 在計(jì)數(shù)界面下，按模式鍵，將模式設(shè)置為“全血”。 用K2EDTA抗凝劑作抗凝血標(biāo)本。 混勻抗凝血后，送到采樣針下，讓采樣針插入抗凝血。 按開(kāi)始鍵，開(kāi)始對(duì)樣本計(jì)數(shù)。 58秒后測(cè)試結(jié)果顯示在屏幕上。 按“打印”鍵，結(jié)果打印出來(lái)。 6，末梢血測(cè)量： 在計(jì)數(shù)界面下，按模式鍵，將模式設(shè)置為“預(yù)稀釋”。 按“稀釋液”，按開(kāi)始鍵，用試管從采樣針下取0.7ml稀釋液。 將毛細(xì)血管采取的20l末梢血標(biāo)本，迅速注入盛有0.7ml的稀釋液的試管中，制成稀釋血樣（注意針刺得要深，用不起毛的紙巾拭去第一滴血） 制好的稀釋血樣要搖勻（注意不要?jiǎng)×艺鹗?，否則有可能會(huì)因產(chǎn)生微小氣泡導(dǎo)致計(jì)數(shù)值不

10、準(zhǔn)） 將預(yù)稀釋血樣放置3分鐘后，再次搖勻，放于采樣針下，按開(kāi)始鍵計(jì)數(shù)。 58秒后測(cè)試結(jié)果顯示在屏幕上。 按“打印”鍵，結(jié)果打印出來(lái)。 7，關(guān)機(jī)： 每天測(cè)試完畢一定要用E-Z清洗液執(zhí)行“關(guān)機(jī)”程序，等待屏幕提示“關(guān)閉電源”后關(guān)掉主機(jī)電源。WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、Lymph#、Lymph%、Gran#、Gran%六，結(jié)果分析與報(bào)告1，復(fù)查標(biāo)準(zhǔn)：HGB凡低于80g/L，高于170g/L者應(yīng)進(jìn)行復(fù)查。WBC凡低于3*109/L或高于20*109/L者應(yīng)復(fù)查。凡直方圖有明顯異常者，必須推片染色油鏡分類(lèi)。PLT低于5109/L或高于35109/L應(yīng)復(fù)查 2，按照儀

11、器模式出血細(xì)胞分析檢驗(yàn)報(bào)告。七，參考值與臨床意義： 1. 血紅蛋白測(cè)定（HGB）：120-160g/L降低：貧血、白血病、大量失血及鉤蟲(chóng)病等。增高：慢性缺氧（肺氣腫和先天性心臟病等）、嚴(yán)重脫水、大面積燒傷、慢性一氧化碳中毒及真性紅細(xì)胞增多癥等時(shí)。2. 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）：4.0-5.51012/L臨床意義同血紅蛋白，巨幼紅細(xì)胞貧血時(shí)減少更為明顯。3. 紅細(xì)胞壓積（HCT）：0.42-0.49增高：失水和大面積燒傷等所致的血液濃縮以及真性紅細(xì)胞增多癥時(shí)。降低：貧血及血液稀釋時(shí)。4. 紅細(xì)胞平均容積（MCV）： 82-92fl用于貧血分類(lèi)：增大為巨紅細(xì)胞性貧血，減小為小細(xì)胞性貧血（如嚴(yán)重缺鐵性貧

12、血）和遺傳性球型紅細(xì)胞增多癥；正常紅細(xì)胞性貧血時(shí)正常。5. 紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量（MCH）：27-31pg用于貧血分類(lèi)：增加見(jiàn)于大細(xì)胞性貧血，減少見(jiàn)于單純小細(xì)胞性貧血和小細(xì)胞低色素貧血。6. 紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHG）：320-360g/L大細(xì)胞性貧血正常，單純小細(xì)胞性貧血時(shí)正常，小細(xì)胞低色素性貧血時(shí)減小。貧血形態(tài)分類(lèi)MCVMCHMCHC病因大細(xì)胞性貧血巨紅細(xì)胞性貧血，惡性貧血正細(xì)胞性貧血急性失血，急性溶血，再障，白血病單純小細(xì)胞性貧血慢性感染，炎癥，肝病，惡性腫瘤，風(fēng)濕疾病小細(xì)胞低色素性血缺鐵性，地中海性，鐵粒幼細(xì)胞性貧血7. 紅細(xì)胞分布寬度（RDW）： 11.5-14.5%是反映

13、血液中紅細(xì)胞體積變異的參數(shù)，以測(cè)得紅細(xì)胞體積大小的變異系數(shù)表示。RDW與MCV結(jié)合可將貧血分為小細(xì)胞均一性貧血（MCVRDW正常，如地中海貧血），小細(xì)胞不均一性貧血（MCVRDW，如缺鐵性貧血），正細(xì)胞均一性貧血（MCV，RDW均正常，常見(jiàn)急性失血和再生障礙性貧血），正細(xì)胞不均一性貧血（MCV正常RDW，如早期缺鐵性貧血和急性溶血性貧血），大細(xì)胞均一性貧血（MCV RDW正常，如慢性再障）。大細(xì)胞不均一性貧血（MCV 和RDW均，如巨幼細(xì)胞性貧血和惡性貧血）。8. 白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）： 4.0-10.0109/L增多：細(xì)菌性感染、尿毒癥、嚴(yán)重?zé)齻?、傳染性單核?xì)胞增多癥、白血病和應(yīng)激狀態(tài)（急性

14、出血和大手術(shù)）等增多（妊娠后期、月經(jīng)期、飯后、劇烈運(yùn)動(dòng)后可有生理性增加）。 減少：病毒感染、傷害及副傷寒、瘧疾、再生障礙性貧血、極嚴(yán)重感染、放射性輻照、腫瘤化療后和非白血性白血病等。9. 白細(xì)胞分類(lèi)（DC）：正常參考值見(jiàn)下表檢測(cè)項(xiàng)目英文縮寫(xiě)參考值中性粒細(xì)胞百分比NEUT %0.5-0.7淋巴細(xì)胞百分比LYMPH %0.2-0.4單核細(xì)胞百分比MONO %0.03-0.08嗜酸性粒細(xì)胞百分比EO %0.005-0.05嗜堿性粒細(xì)胞百分比BASO %0.000-0.005中性粒細(xì)胞絕對(duì)值2， NEUT #3.0-5.0109/L淋巴細(xì)胞絕對(duì)值LYMPH #1.0-3.0109/L單核細(xì)胞絕對(duì)值MO

15、NO #0.067-0.325109/L嗜酸性粒細(xì)胞絕對(duì)值EO #0.02-0.05109/L嗜堿性粒細(xì)胞絕對(duì)值BASO #0.005-0.05109/L中性粒細(xì)胞：增多見(jiàn)于急性化膿性細(xì)菌感染、粒細(xì)胞白血病、急性出血、溶血、手術(shù)后和尿毒癥等；其減少見(jiàn)于傷寒和副傷寒、瘧疾、粒細(xì)胞缺乏癥、放射性輻照和腫瘤化療。 嗜酸性粒細(xì)胞增多見(jiàn)于過(guò)敏性疾病、寄生蟲(chóng)病等；其減少見(jiàn)于傷寒和副傷寒等。嗜堿性粒細(xì)胞增多見(jiàn)于慢性粒細(xì)胞白血病、何杰金氏病和鉛中毒等。淋巴細(xì)胞增多見(jiàn)于病毒感染，其減少見(jiàn)于免疫缺陷病。單核細(xì)胞增多見(jiàn)于某些細(xì)菌感染及單核細(xì)胞白血病等。10. 血小板計(jì)數(shù)（PLT）：100-350109/L減少：造血

16、功能障礙（如急生白血病和再生障礙性貧血等）、血小板破壞過(guò)多（如原發(fā)性血小板減少性紫癜、脾功能亢進(jìn)和系統(tǒng)性紅斑狼瘡等）及消耗增加（如DIC、血栓性血小板減少性紫癜等）時(shí)。增多：急性大出血、急性溶血、真性紅細(xì)胞增多癥、原發(fā)性血小板增多癥和慢性粒細(xì)胞性白血病等時(shí)11. 血小板平均容積（MPV）：9-17fl (1）血小板數(shù)低而 MPV增高：骨髓自身正常，但外周血血小板破壞增多造成血小板降低的刺激后反應(yīng)性增生時(shí)，巨核細(xì)胞 DNA倍體數(shù)及細(xì)胞大小都增加， MPV也增高。由于骨髓受抑制而造成血小板減少的病人在恢復(fù)初期 MPV也升高，這主要因外周血血小板數(shù)減低應(yīng)激性地致使巨核細(xì)胞倍體數(shù)增加所致。(2)血小板

17、數(shù)高、MPV正常：骨髓增生性疾病如血小板增多，紅細(xì)胞增多但MPV正常。(3）血小板數(shù)與MPV均下降：AIDS （艾滋?。┎《局苯佑绊懢藓思?xì)胞并導(dǎo)致血小板減少。大約2/3的病人血小板數(shù)降低，92%的病人MPV值下降，與骨髓受抑時(shí)的血小板狀態(tài)相似?；及l(fā)育不良性貧血的病人積壓小板數(shù)通常都降低，其 MPV值也低，但 PDW升高。當(dāng)骨髓纖維化或被脈沖瘤細(xì)胞浸潤(rùn)危及正常造血時(shí)，血小板數(shù)減少，隨即 MPV值也降低。再生障礙性貧血，骨髓瘤或白血病化療后，敗血癥所致血小板沽少等骨髓受抑性疾病中，雖然仍可能有一些大血小板，但血小板的平均體積減小。(4）MPV值與血小板數(shù)都升高：反應(yīng)性血小板增多癥病人中，其 MPV值升高，因血液的流失和本內(nèi)損傷造成的急性大失血都可使血小板值上升。(5）MPV值升高而血小板正常：慢性髓細(xì)胞性白血病、骨髓纖維化、脾切除均可周到MPV升高，慢性髓細(xì)胞性白血病和骨髓纖維化主要使骨髓增生異常，兩種疾病中，血小板體積經(jīng)常增大并大小不均。外周血涂片中可出現(xiàn)大血小板。半數(shù) -型和-型珠蛋白生成障礙性貧血的患者有4種明顯的血液學(xué)改變；血小板大小改變、紅細(xì)胞大小改變、肝珠蛋白改變和對(duì)瘧原蟲(chóng)抵抗力改變。其MPV值增高而血小板數(shù)正常。 1