選修一 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)習(xí)題案

1、大洼高中高三生物一輪復(fù)習(xí)習(xí)題案案選修一第二章課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)制作人 張洪芬 審核人 高三生物組 適用范圍 高三實(shí)驗(yàn)班 使用日期： 1、在分解尿素菌的分離和鑒定中，對先后用到的兩種培養(yǎng)基，敘述正確的是（ ）A加入酚紅指示劑作為選擇培養(yǎng)基，再加入唯一碳源作為鑒別培養(yǎng)基B加入唯一氮源作為鑒別培養(yǎng)基，再加入酚紅指示劑作為選擇培養(yǎng)基C加入唯一氮源作為選擇培養(yǎng)基，再加入酚紅指示劑作為鑒別培養(yǎng)基D加入酚紅指示劑作為選擇培養(yǎng)基，再加入唯一碳源作為鑒別培養(yǎng)基、某實(shí)驗(yàn)小組欲從被石油污染過的土壤中篩選出能分解石油的細(xì)菌，下列操作中錯(cuò)誤的是（ ）A利用平板劃線法可對細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)B以石油為唯一碳

2、源的培養(yǎng)基可用于篩選C目的菌不能利用無機(jī)碳源合成有機(jī)物D稀釋土壤時(shí)需在火焰旁的目的是防雜菌污染、現(xiàn)有兩種固體培養(yǎng)基，成分和含量如下表。有關(guān)敘述合理的是 成分KH2PO4MgSO47H2ONaClCaSO42H2OCaCO3葡萄糖純淀粉甲培養(yǎng)基0.02%0.02%0.02%0.01%0.50%0.50%2%乙培養(yǎng)基0.02%0.02%0.02%0.01%0.50%A甲培養(yǎng)基適于選擇培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物B甲培養(yǎng)基適于選擇培養(yǎng)毛霉C乙培養(yǎng)基適于選擇培養(yǎng)自養(yǎng)型自生固氮菌D乙培養(yǎng)基適于選擇培養(yǎng)酵母菌、下圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5五個(gè)區(qū)域依次進(jìn)行。下列敘述正確的是（ ）A在五個(gè)區(qū)

3、域中劃線前后都要對接種環(huán)和培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌B劃線操作時(shí)打開皿蓋，劃完立即蓋上C接種時(shí)不能劃破培養(yǎng)基，否則難以達(dá)到分離單菌落的目的D第1區(qū)和第5區(qū)的劃線最終要相連接起來，以便比較前后的菌落數(shù)、下列是對四種微生物的能源、碳源、氮源、新陳代謝類型的描述，正確的一組是（ ）、下列有關(guān)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)相關(guān)敘述，正確的是（ ）A對實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者衣著和手，進(jìn)行滅菌B培養(yǎng)基配制好應(yīng)先滅菌，然后立即倒平板C接種操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行D培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，需將pH調(diào)至酸性、對分解尿素細(xì)菌的初步篩選中，加入酚紅指示劑的目的是（ ）A指示劑變藍(lán)能認(rèn)定該菌能分解尿素B對菌種進(jìn)一步鑒定C篩選分解尿素的細(xì)菌D培養(yǎng)基中缺乏

4、酚紅作營養(yǎng)物質(zhì)、請分析回答下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐方面的問題：(1)微生物培養(yǎng)基一般都含有：水和無機(jī)鹽以及 (2)在微生物接種過程中，試管口需要通過酒精燈火焰12次，其目的是 。(3)分離分解尿素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程包括：土壤取樣、梯度稀釋、樣品涂布到 培養(yǎng)基上、挑選菌落。（4）在無氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵，其反應(yīng)方程式為：_ _；在果醋制作中，在缺少糖原，氧氣充足時(shí)，其反應(yīng)方程式為：_ _、根據(jù)有關(guān)微生物的知識，分析回答問題：(1)當(dāng)水體過于純凈時(shí)，硝化細(xì)菌會形成休眠體，這種休眠體被稱為_。(2)對于混有硝化細(xì)菌、藍(lán)細(xì)菌和大腸桿菌的懸浮液，可利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行微生物篩選。篩選硝化細(xì)菌的培養(yǎng)基成

5、分包括_(供選：葡萄糖、纖維素、牛肉膏、(NH4)2SO4、KNO3、無機(jī)鹽、瓊脂、伊紅美藍(lán)染料、H2O)，制備培養(yǎng)基時(shí)，滅菌與調(diào)pH的先后順序是_。(3)如利用上述培養(yǎng)基篩選大腸桿菌菌落，則應(yīng)另外添加的成分是_，菌落特征為_。(4)將采自養(yǎng)殖池中的水樣1 mL稀釋100倍，然后吸取稀釋后的水樣1 mL，接種于上述硝化細(xì)菌選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，接種所使用的工具是_。一段時(shí)間后觀察菌落并計(jì)數(shù)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次結(jié)果如圖所示。該養(yǎng)殖池每毫升水含有硝化細(xì)菌_個(gè)。、下面的甲圖表示酵母菌、硝化細(xì)菌和乳酸菌在半固體培養(yǎng)基中的生長情況，乙圖表示這三種菌的增殖速度與氧氣濃度之間的關(guān)系，請據(jù)圖回答：(1)乙圖中a、b、c

6、三條曲線依次表示甲圖_號試管中微生物在不同氧氣濃度中的增殖速度。(2)研究發(fā)現(xiàn)，青霉素能破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁并在細(xì)菌細(xì)胞的繁殖期起殺菌作用。如果培養(yǎng)基中混雜了這三類微生物，請?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，利用改變培養(yǎng)基成分等培養(yǎng)條件，將酵母菌和硝化細(xì)菌分離出來。主要步驟：a分別配制不含_的培養(yǎng)基(A)和加入_的培養(yǎng)基(B)，分別滅菌。b分別接種混合液放在適宜條件下培養(yǎng)。c觀察結(jié)果。結(jié)果：在A培養(yǎng)基上生存的是_，在B培養(yǎng)基上生存的是_。(3)微生物培養(yǎng)過程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是_。(4)若想對初步篩選得到的目的菌進(jìn)行純化并計(jì)數(shù)，可采用的接種方法是_。、下面是分離分解尿素的細(xì)菌所用的培養(yǎng)基配方：KH2PO4Na2HP

7、O4MgSO47H2O葡萄糖尿素瓊脂蒸餾水1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g15.0 g定容至1 000 mL請根據(jù)以上配方，回答下列問題：(1)該培養(yǎng)基含有微生物所需要的_類營養(yǎng)物質(zhì)。其中最主要的碳源是_，氮源是_。(2)該培養(yǎng)基按物理性質(zhì)劃分是_培養(yǎng)基；按培養(yǎng)基的作用劃分是_培養(yǎng)基。(3)該培養(yǎng)基具有選擇作用的原因是_。(4)在該培養(yǎng)基中，可通過檢測pH的變化來判斷尿素是否被分解，依據(jù)的原理是_。所用方法是在培養(yǎng)基中加入_指示劑，如果尿素被分解，則培養(yǎng)基變成_色。、臨床試用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以

8、確定某致病菌對不同抗生素的敏感性回答下列問題：（1）為了從樣本中獲取致病菌菌落，可用 法或 法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得（2）取該單菌落適當(dāng)稀釋，用 法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長，布滿平板（3）為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有A，B，C，D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A ；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B ；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明 ；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，

9、在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的 （4）根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選擇抗生素 、為了探究土壤中的微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如下圖所示。請分析回答問題。KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖1 g尿素10 g瓊脂15 g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000mL(1)簡述土壤中可分解尿素的細(xì)菌的鑒定方法及原理：_。(2)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選_，這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的_

10、和_，實(shí)驗(yàn)中需要振蕩培養(yǎng)，原因是_。(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時(shí)，常采用_接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。(5)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行_處理后，才能倒掉。、土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基”之稱，下圖表示對土壤中某種微生物進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)而進(jìn)行的對樣品的稀釋和稀釋液的取樣培養(yǎng)流程示意圖。請據(jù)圖回答有關(guān)問題。（1）圖示統(tǒng)計(jì)樣品活菌數(shù)目的方法叫做 法，主要包括 操作和 操作。（2）當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的 ，一般選擇菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。（3）圖中各試管間的“箭頭”表示的操作過程是 。（4）圖中選擇了104、105、106倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，最可能是

11、測定土壤中 的數(shù)量，這個(gè)平板需要在 溫度下培養(yǎng) d。（5）如果要想分離分解尿素的細(xì)菌，平板中培養(yǎng)基成分的特點(diǎn)應(yīng)該是 ；如果懷疑培養(yǎng)基被污染導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果有誤，則需要做對照實(shí)驗(yàn)，方法是。1、C、A、C、C、C、C、B、 (1)碳源和氮源(2)滅菌(3)選擇(4)略 （5） 乙 丙、(1)芽孢(2)(NH4)2SO4、無機(jī)鹽、瓊脂、H2O先調(diào)pH再滅菌(3)葡萄糖、伊紅美藍(lán)染料呈現(xiàn)黑色(4)涂布器800.(1)3、2、1(2)有機(jī)碳源青霉素硝化細(xì)菌酵母菌(3)防止雜菌污染(無菌技術(shù))(4)稀釋涂布平板法.(1)4葡萄糖尿素(2)固體選擇(3)該培養(yǎng)基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在該

12、培養(yǎng)基上生長和繁殖(4)在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高酚紅紅.【答案】（1）平板劃線法 稀釋涂布平板法（2）稀釋涂布平板法（3）敏感 不敏感 該致病菌對C的敏感性較A的弱 耐藥菌（4）A.(1)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，pH升高，使酚紅指示劑變?yōu)榧t色(2)目的菌選擇(3)尿素葡萄糖為目的菌提供氧氣(4)稀釋涂布平板分離法(或平板劃線分離法)(5)滅菌.（1）稀釋涂布平板計(jì)數(shù) 梯度稀釋 涂布平板（2）一個(gè)活菌 30300（3）用移液管吸取1 mL上一試管的菌液注入下一試管中，并用手指輕壓移

13、液管橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分混合（4）細(xì)菌 3037 12（5）尿素作為唯一氮源 將一個(gè)培養(yǎng)基在不加土壤液的情況下與加入土壤溶液的培養(yǎng)基同時(shí)培養(yǎng)1、C、A、C、C、C、C、B、 (1)碳源和氮源(2)滅菌(3)選擇(4)略 （5） 乙 丙、(1)芽孢(2)(NH4)2SO4、無機(jī)鹽、瓊脂、H2O先調(diào)pH再滅菌(3)葡萄糖、伊紅美藍(lán)染料呈現(xiàn)黑色(4)涂布器800.(1)3、2、1(2)有機(jī)碳源青霉素硝化細(xì)菌酵母菌(3)防止雜菌污染(無菌技術(shù))(4)稀釋涂布平板法.(1)4葡萄糖尿素(2)固體選擇(3)該培養(yǎng)基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長和繁殖(4)在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高酚紅紅.【答案】（1）平板劃線法 稀釋涂布平板法（2）稀釋涂布平板法（3）敏感 不敏感 該致病菌對C的敏感性較A的弱 耐藥菌（4）A.(1)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨