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文檔簡介
1、生物·選修一·生物技術(shù)實(shí)踐·知識(shí)點(diǎn)專題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題一 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)·1.培養(yǎng)基:人們按照微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì),是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。·培養(yǎng)基按照_可分為_、_和_。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_(是從紅藻中提取的一種多糖,在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑)后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長,可以形成肉眼可見的菌落。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。_應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn),_應(yīng)用于微生物的分離和鑒定,半固體培養(yǎng)基則常用于觀察微生物的運(yùn)動(dòng)及菌種保藏等。·按照成分培養(yǎng)基可分為
2、_和_。合成培養(yǎng)基是用成分已知的化學(xué)物質(zhì)配制而成,其中成分的種類比例明確,常用于微生物的分離鑒定。天然培養(yǎng)基是用化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)配制而成,常用于實(shí)際工業(yè)生產(chǎn)。·按照培養(yǎng)基的用途,可將培養(yǎng)基分為_和_。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物生長,促進(jìn)所需要的微生物的生長。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點(diǎn),在培養(yǎng)基中加入_或_配制而成的,用以鑒別不同類別的微生物。·各種培養(yǎng)基的配方不同,但一般都含有_ 、 _ 、_ 、 _。·碳源:能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如CO2、NaHCO3等無機(jī)碳源;糖類、石油、花生粉餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只
3、能利用有機(jī)碳源。·氮源:能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如N2、NH3、NO3-、NH4+(無機(jī)氮源)、蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有機(jī)氮源)等。只有固氮微生物才能利用N2。牛肉膏提供的主要營養(yǎng)是:_、_、_和_。蛋白胨提供的是:_、_和_。·培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對(duì)_、_以及_的要求。例如,培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加_,培養(yǎng)霉菌時(shí)須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至_,培養(yǎng)細(xì)菌是需要將pH調(diào)至_,培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供_的條件·2.無菌技術(shù)·獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,要注意以下幾個(gè)方面: 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手,進(jìn)
4、行清潔和_。 將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行_。 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在_附近進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還有什么目的?答:無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。·消毒與滅菌的區(qū)別消毒指使用較為_僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物(不包括_和_)。消毒方法常用_,_(對(duì)于一些不耐高溫的液體)還有化學(xué)藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用_殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括_和_。滅菌方法有_、_、_。3.滅菌方法:
5、接種環(huán)、接種針、試管口等使用_滅菌法; 玻璃器皿、金屬用具等使用_滅菌法,所用器械是_ ; 培養(yǎng)基、無菌水等使用_滅菌法,所用器械是_ 。表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈 。比較項(xiàng)理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物_滅菌強(qiáng)烈全部微生物_4、制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(1)方法步驟:_、_、_、_、_。(2)倒平板操作的步驟:將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞。右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過火焰。用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約1020mL
6、)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。 等待平板冷卻凝固,大約需510min。然后,將平板_,使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。·倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到_左右時(shí),才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后,為什么要將平板倒置?答:平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,
7、造成污染。4.在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。5、純化大腸桿菌(1)微生物接種的方法最常用的是_和_。(2)平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng),可以分離到由_繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體,這就是_。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的_,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。(4)用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是:使聚集在
8、一起的微生物分散成_,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的_,以便于純化菌種。(5)平板劃線法操作步驟:將接種環(huán)放在_上灼燒,直到接種環(huán)燒紅。在火焰旁冷卻接種環(huán),并打開棉塞。將試管口通過_。將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。將試管通過火焰,并塞上棉塞。左手將皿蓋打開一條縫隙,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃_平行線,蓋上皿蓋。注意_。灼燒接種環(huán),待其冷卻后,從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作,在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將_的劃線與_相連。將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。·平板劃線操作的討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)
9、束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?答:_。3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?答:劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌
10、的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。(6)涂布平板操作的步驟:將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。取少量菌液(不超過0.1mL),滴加到培養(yǎng)基表面。 將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃盡后,冷卻810s。 用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作?提示:應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。6、菌種的保存(1)對(duì)于頻繁使用的菌種,可以采用_的方法。
11、臨時(shí)保藏方法將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,在合適的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后,將試管放入_的冰箱中保藏。以后每_個(gè)月,都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。缺點(diǎn):這種方法保存的時(shí)間不長,菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。(2)對(duì)于需要長期保存的菌種,可以采用_的方法。在3mL的甘油瓶中,裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與_充分混勻后,放在_的冷凍箱中保存。疑難解答(1)確定培養(yǎng)基制作是否合格的方法_。課題二 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥,尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成_之后,才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所
12、以能分解尿素,是因?yàn)樗麄兡芎铣蒧。尿素最初是從_中發(fā)現(xiàn)的篩選菌株(1)實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長。(2)選擇性培養(yǎng)基在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長,同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基,稱作_。(3)配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。例如,培養(yǎng)基中不加入_可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物;培養(yǎng)基中不加入_元素,可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物;加入_可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目(1)測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法有_和_。(2)稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中
13、活菌的數(shù)目的原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落,來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活細(xì)菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般設(shè)置35個(gè)平板,選擇菌落數(shù)在_的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),并取_。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目_,因此,統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。采用此方法的注意事項(xiàng):1.一般選取菌落數(shù)在30300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)設(shè)置對(duì)照設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。對(duì)照實(shí)驗(yàn)是指除了被測(cè)試的條件以外,其他條件都相同的實(shí)驗(yàn),其作用是比照試驗(yàn)組,排除任何其他可能原因的干擾,證明確實(shí)是所測(cè)試的條件
14、引起相應(yīng)的結(jié)果。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括實(shí)驗(yàn)方案,所需儀器、材料、用具和藥品,具體的實(shí)施步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。(1)土壤取樣:同其他生物環(huán)境相比,土壤中的微生物,數(shù)量最大,種類最多。在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層,有更多的微生物生長。從富含有機(jī)物、潮濕、pH7的土壤中取樣。鏟去表層土,在距地表約38cm的土壤層取樣。(2)樣品的稀釋:樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。在實(shí)際操作中,通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng),以保證獲得菌落數(shù)_之間、適于計(jì)數(shù)的平板。測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量,一般選用_測(cè)定放線菌的數(shù)量,一般選用103 104 105 測(cè)定真菌的數(shù)量,一般選用_(3)微生物的培
15、養(yǎng)與觀察不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間。1、細(xì)菌3037 12天2、放線菌2528 57天 3、霉菌2528 34天每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取_時(shí)的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、唯獨(dú)及培養(yǎng)時(shí)間),同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。這些特征包括:_、_、隆起程度、_。課題延伸:本課題只是分離純化菌種的第一步,對(duì)分離的菌種做進(jìn)一步的鑒定,還需要借助生物化學(xué)方法。細(xì)菌合成的尿酶將_分解成了_。是培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),PH升高??梢栽谂囵B(yǎng)基中加入指示劑觀察現(xiàn)象。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_,如果PH
16、升高,指示劑將變_??梢猿醪借b定該菌種能夠分解尿素。疑難解答(1)如何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)?統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計(jì)_個(gè)平板,計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值每克樣品中的菌落數(shù)=_其中,C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù),V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(ml),M代表稀釋倍數(shù)課題三 分解纖維素的微生物的分離纖維素,一種由_首尾相連而成的高分子化合物,是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。纖維素與纖維素酶(1)棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物,木材、作物秸稈等也富含纖維素。(2)纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即_、_和_,前兩種酶使纖維
17、素分解成_,第三種酶將纖維二糖分解成_。纖維素最終被水解成葡萄糖,為微生物的生長提供營養(yǎng)。纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基應(yīng)以_為唯一碳源。能否設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn),說明選擇培養(yǎng)的作用?思路:_纖維素分解菌的篩選(1)篩選方法:_。能夠通過顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選。(2)剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理剛果紅是一種染料,它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成_,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們?cè)诤欣w維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí),剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以_為中心的_。這樣,我們就可以通過是否產(chǎn)生透明
18、圈來篩選纖維素分解菌。分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣選擇培養(yǎng)(此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定)_將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落(1)土壤采集 _。(2)剛果紅染色法分離纖維素分解菌的步驟 倒平板操作、制備菌懸液、涂布平板(3)剛果紅染色法種類一種是先_,另一種是_。課題延伸對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選后,只是分離純化的第一步,為確定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn),纖維素酶的發(fā)酵方法有_和_兩種。纖維素酶的測(cè)定方法,一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定。疑難解答(1)為什么要在富含纖
19、維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌?由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對(duì)提高,因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。(2)將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深?將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)聚集,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約_左右腐殖土壤中。(3)兩種剛果紅染色法的比較方法一是傳統(tǒng)的方法,缺點(diǎn)是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜;其優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便,不存在菌落混雜問題,缺點(diǎn)是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì),可以
20、使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊,因?yàn)榕囵B(yǎng)基中纖維素占主要地位,因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點(diǎn)是:有些微生物具有降解色素的能力,它們?cè)陂L時(shí)間培養(yǎng)過程中會(huì)降解剛果紅形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分。(4)為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用。課題延伸:本課題是初步的篩選。但這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行_的實(shí)驗(yàn)。纖維素酶的發(fā)酵方法有_
21、和_。纖維素酶的測(cè)定方法,一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定。歷年高考題:1(2011新課標(biāo))39【生物 選修1:生物技術(shù)實(shí)踐】(15分)有些細(xì)菌可分解原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株。回答問題:“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群公益作品(漢水丑生2012-7-13標(biāo)記)(1)在篩選過程中,應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,從功能上講,該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基?!皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群公益作品(漢水丑生2012-7-13標(biāo)記)(2)純化菌種時(shí),為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即 和
22、 。(3)為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小,分解圈大說明該菌株的降解能力 ?!皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群公益作品(漢水丑生2012-7-13標(biāo)記)(4)通常情況下,在微生物培養(yǎng)過程中實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、 和 。無菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈 附近進(jìn)行,以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。2(全國卷)34(12分)某種細(xì)菌體內(nèi)某氨基酸(X)的生物合成途徑如圖:這種細(xì)菌的野生型能在基本培養(yǎng)基(滿足野生型細(xì)菌生長的簡單培養(yǎng)基)上生長,而由該種細(xì)菌野生型得到的兩種突變型(甲、乙)都不能在基本培養(yǎng)基上生長;在基本培養(yǎng)基上若添加中間產(chǎn)物2,則甲、乙都能生長;若添加中間產(chǎn)物1,則乙能生
23、長而甲不能生長。在基本培養(yǎng)基上添加少量的,甲能積累中間產(chǎn)物1,而乙不能積累。請(qǐng)回答:“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群公益作品(漢水丑生2012-7-13標(biāo)記)(1)根據(jù)上述資料可推論:甲中酶 的功能喪失;乙中酶 的功能喪失,甲和乙中酶的功能都正常。由野生型產(chǎn)生甲、乙這兩種突變型的原因是野生型的 (同一、不同)菌體中的不同 發(fā)生了突變,從而導(dǎo)致不同酶的功能喪失。如果想在基本培養(yǎng)基上添加少量的X來生產(chǎn)中間產(chǎn)物1,則應(yīng)選用 (野生型、甲、乙)?!皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群公益作品(漢水丑生2012-7-13標(biāo)記)(2)將甲、乙混合接種于基本培養(yǎng)基上能長出少量菌落,再將這些菌落單個(gè)挑出分別接種在基本培養(yǎng)基
24、上都不能生長。上述混合培養(yǎng)時(shí)乙首先形成菌落,其原因是 (3)在發(fā)酵過程中,菌體中X含量過高時(shí),其合成速率下降。若要保持其合成速率,可采取的措施是改變菌體細(xì)胞膜的 ,使X排出菌體外。“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群公益作品(漢水丑生2012-7-13標(biāo)記)3(全國II卷)33. (10分)利用微生物分解玉米淀粉生產(chǎn)糖漿,具有廣闊的應(yīng)用前景。但現(xiàn)在野生菌株對(duì)淀粉的轉(zhuǎn) 化效率低,某同學(xué)嘗試對(duì)其進(jìn)行改造,以活得高效菌株?!皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群公益作品(漢水丑生2012-7-13標(biāo)記)(1)實(shí)驗(yàn)步驟:配置 (固體、半固體、液體)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基的碳源應(yīng)為 。將 接入已滅菌的培養(yǎng)基平板上。立即用適當(dāng)劑量
25、的紫外線照射,其目的是 。菌落形成后,加入碘液,觀察菌落周圍培養(yǎng)基的顏色變化和變化范圍的大小。周圍出現(xiàn) 現(xiàn)象的菌落即為初選菌落。經(jīng)分離、純化后即可達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。?)若已得到二株變異菌株和,其淀粉轉(zhuǎn)化率較高。經(jīng)測(cè)定菌株淀粉酶的催化活性高,菌株的淀粉酶蛋白含量高。經(jīng)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),突變發(fā)生在淀粉酶基因的編碼區(qū)或非編碼區(qū),可推測(cè)出菌株的突變發(fā)生在 區(qū),菌株的突變發(fā)生在 區(qū)。4(廣東)38(生物技術(shù)實(shí)踐,10分) “漢水丑生的生物同行”超級(jí)群公益作品(漢水丑生2012-7-13標(biāo)記)苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì),自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚,為了降解廢水中的苯酚,研
26、究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株,篩選的主要步驟如圖所示,為土壤樣品。請(qǐng)回答下列問題:漢水丑生的生物同行”超級(jí)群整理校對(duì)2012-7-5(1)中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入 作為碳源,中不同濃度碳源的培養(yǎng)基 (A影響;B不影響)細(xì)菌的數(shù)量,如果要測(cè)定中活細(xì)菌數(shù)量,常采用_法。(2)為對(duì)照,微生物在中不生長,在中生長,與培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于 ;使用 法可以在上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)?(3)如何比較不同菌株降解苯酚能力的大小? “漢水丑生的生物同行”超級(jí)群公益作品(漢水丑生2012-7-13標(biāo)記)(4)實(shí)驗(yàn)過程中如何防止其它微生物的污染?5 (寧
27、夏)32生物選考題(15分) 生物選修I生物技術(shù)實(shí)踐 “漢水丑生的生物同行”超級(jí)群公益作品(漢水丑生2012-7-13標(biāo)記)某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題。(1)培養(yǎng)基中含有蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了_和_。除此之外,培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是_和_?!皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群公益作品(漢水丑生2012-7-13標(biāo)記)(2)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,應(yīng)該采用的方法是_。(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于_中培養(yǎng),培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠,還應(yīng)
28、該同時(shí)在另一平板上接種_作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(4)培養(yǎng)20小時(shí)后,觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落,這說明湖水樣品中有_種細(xì)菌。一般說來,菌落總數(shù)越多,湖水遭受細(xì)菌污染的程度越_。(5)如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度,可以用于篩選耐_細(xì)菌,這種培養(yǎng)基被稱為_。6(全國卷一)34(12分)下列是與微生物培養(yǎng)有關(guān)的問題,請(qǐng)回答:(1)某細(xì)菌固體培養(yǎng)基的組成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水,其中凝固劑是_,碳源是_,氮源是_。已知只有能合成脲酶的細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長,故該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。按照化學(xué)成分分類,該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。從同化作用類型看,用該培
29、養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于_。(2)將少量細(xì)菌接種到一定體積的液體培養(yǎng)基中,適宜條件下培養(yǎng),定時(shí)取樣測(cè)定菌體數(shù)目,以時(shí)間為橫坐標(biāo),以菌體數(shù)目的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo),可以得到細(xì)菌的_曲線。該曲線中以菌體數(shù)目的對(duì)數(shù)作為縱坐標(biāo)的原因是_。實(shí)驗(yàn)室中,為了獲得形態(tài)和生理特征一致的菌體,一般應(yīng)在_期取材;在生產(chǎn)中,常收集培養(yǎng)至_期的細(xì)菌用于次生代謝產(chǎn)物的提取。7 新課標(biāo)卷39.生物選修1:生物技術(shù)實(shí)踐(15分)有些細(xì)菌可分解原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?;卮饐栴}:(1)在篩選過程中,應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,從功能上講,該培養(yǎng)基屬于_
30、培養(yǎng)基。(2)純化菌種時(shí),為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即_和_。(3)為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小,分解圈大說明該菌株的降解能力_。(4)通常情況下,在微生物培養(yǎng)過程中,實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈_附近進(jìn)行,以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。8 .39(上海)(9分)氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料,因其不易降解,會(huì)污染環(huán)境。某研究小組依照下圖所示實(shí)驗(yàn)方案篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如表1。(1)配制號(hào)固體培養(yǎng)基時(shí),除添加號(hào)液體培養(yǎng)基成分外,還應(yīng)添加1的_。(2)培養(yǎng)基配制時(shí),滅菌與調(diào)pH的先后順序是_。(3)從用途上來說,號(hào)培養(yǎng)基和號(hào)培養(yǎng)基分別屬于_培養(yǎng)基和_培養(yǎng)基。在號(hào)培養(yǎng)基中,為SP1菌提供氮源的成分是_。(4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時(shí),SP1的菌體會(huì)變成一個(gè)圓形的休眠體,這種休眠體被稱為_。(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的號(hào)培養(yǎng)液中培養(yǎng),得到生長曲線如下圖所示。從圖中可知,SP1菌在_培養(yǎng)條件下最早停止生長,其原因是_。試題答案:1【答案】(1)原油 選擇 (2)平板劃線法 稀釋涂布平板法 (3)強(qiáng) (4)干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 火焰2【
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