藥動學實驗講義

1、生物藥劑學與藥物動力學實 驗 講 義湖南中醫(yī)藥大學藥學技能教學實驗中心二O一O年五月目 錄1前言-2頁2. 實驗一 固體制劑體外溶出度測定-34頁3. 實驗二 血藥濃度法測定對乙酰氨基酚片的生物利用度等藥動學參數-57頁前 言 生物藥劑學與藥代動力學是藥學專業(yè)的一門專業(yè)課程，主要研究藥物制劑的評價方法及藥物的體內過程。生物藥劑學與藥代動力學實驗是本課程的重要組成部分，實驗中不僅將應用到本課程的理論知識，而且將貫通藥動學、藥劑學、分析化學、體內藥物分析等課程，并使用UV、HPLC等現代分析儀器。 為了達到本實驗教學目的，要求學生上實驗課前，必須認真預習，明確實驗目的，了解實驗內容和方法，并結合課

2、堂教學明白實驗的基本原理。實驗中要有嚴謹的科學態(tài)度和實事求是的作風，嚴格操作，正確使用儀器，詳細做好實驗記錄。實驗數據不得任意涂改，實驗報告要求書寫正確整潔。實驗中嚴格遵守實驗室規(guī)章制度，注意安全，保持實驗臺面整潔及室內衛(wèi)生。本實驗講義主要參考華西醫(yī)科大學臨床藥代動力學實驗講義、中南大學湘雅醫(yī)學院藥學系生物藥劑學與藥物動力學實驗講義及北京醫(yī)科大學生物藥劑與藥物動力學實驗講義編寫，在此對兩所學校的老師們表示感謝。由于時間倉促，錯誤及遺漏之處在所難免敬請批評指正。實驗一 固體制劑體外溶出度測定一目的要求1掌握固體制劑（片劑 丸劑 膠囊劑等）溶出度的測定原理、方法與數據處理。2熟悉溶出度測定的意義，

3、溶出度測定儀的使用方法。3了解溶出儀的基本構造與性能。二實驗提要1 溶出度系指在規(guī)定介質中藥物從片劑或膠囊等固體制劑中溶出的速度和程度。崩解（或溶散）度無法反映崩散后微細顆粒的再分散和溶解過程。當溶解過程為影響吸收的主要限速過程時，崩解（或溶散）時限往往不能作為判斷藥物制劑的吸收的指標。固體制劑的溶出度測定法是一種較簡便的體外試驗法，對主藥成分不易從制劑中釋放，久貯后變?yōu)殡y溶物，在消化液中溶解緩慢，與其他成分共存易發(fā)生化學變化的藥物，以及治療劑量與中毒劑量接近的藥物，均應作溶出度檢查。凡檢查溶出度的制劑，不再進行崩解（或容散）時限檢查。2 溶出度的測定原理為Noyes-Whitney方程：dc

4、/dt=ks(Cs-Ct) 式中：dc/dt為溶出速度；k為溶出速度常數；s為固體藥物表面積；Cs為藥物的飽和溶液濃度；Ct為t時的藥物濃度。試驗中，溶出介質的量必須遠遠超過使藥物飽和的介質所需要的量。一般至少為使藥物飽和時介質用量的510倍?，F行中國藥典溶出度測定方法有轉藍法和槳法，并對裝置的結構和要求作了具體的規(guī)定。通常以固體制劑中主藥溶出一定量所需時間或規(guī)定時間內主藥溶出百分數作為制劑質量評價指標。中國藥典規(guī)定，除有特殊規(guī)定外，固體制劑在45分鐘時的溶出度必須達到70%。3. 本實驗以阿斯匹林片為實驗對象，采用槳法測定阿司匹林的溶出度。三實驗內容1 比較E值的測定 取阿司匹林10片，精密

5、稱定，計算出平均片重（）。將稱定的片劑研細，再精密取相當于的量，置1000ml容量瓶中，加入人工胃液（0.1mol/L鹽酸）至刻度，混勻，于水浴上37放置1小時，每隔10分鐘振搖1次。冷至室溫，濾過。精密吸取濾液4ml置10ml容量瓶中加0.5mol/L氫氧化鈉液0.7ml，加蒸餾水3ml置沸水浴中煮沸5分鐘，取出冷卻，加0.25mol/L鹽酸6滴，搖勻，加三氯化鐵試液（人工胃液配制）0.3ml，加蒸餾水至刻度，搖勻，于UV-9200分光光度計上540nm波長處測吸收度E值。 (已經測得藥片平均片重= 0.365g E=0.262 )2 樣品Ei值的測定 取人工胃液（0.1mol/L鹽酸）10

6、00ml，經15分鐘超聲脫氣后，倒入貯液杯中，調節(jié)溫度在370.5，調節(jié)轉速每分鐘100轉，將精密稱定的藥片一片（W）放入貯液杯內，從人工胃液接觸藥片開始計時，在45分鐘時取樣5ml置于10ml小量筒中，再將所取樣液用移液管精密量取4ml置于10ml容量瓶中，余按比較值測定項下，自“加0.5mol/L氫氧化鈉液0.7ml”起依法測定，得藥片溶出的Ei值。四實驗數據處理1 計算：E=W/×E 溶出百分率=Ei/E×100%2 結論：根據結果判斷該藥片的溶出是否符合規(guī)定？五思考題1固體制劑進行溶出度測定有和意義？哪些藥物應進行溶出度測定？2影響溶出度測定結果的因素有哪些？實驗二

7、 血藥濃度法測定對乙酰氨基酚片的生物利用度等藥動學參數實驗目的 學習并掌握血藥濃度法測定片劑生物利用度等藥動學參數的方法。實驗材料 1儀器： 2十萬分之一分析天平，紫外分光光度計，離心機。 容量瓶1000ml 1個；具塞離心管10ml10支；20ml 24支：刻度吸管0.5ml 1支；lml 12支；5ml 3支；玻璃漏斗(直徑34cm)10個。 其他：濾紙、試管架、刀片、塑料夾、酒精棉球、脫脂棉、注射器、注射針頭、兔盒等。 2試劑： 對乙酰氨基酚對照品。 0.06mol/L氫氧化鋇溶液：取分析純或化學純氫氧化鋇19克，加新鮮煮沸放冷的蒸餾水溶解成1000ml。靜置過夜，過濾即得。 2硫酸鋅溶

8、液：取分析純硫酸鋅20克，加蒸餾水溶解成1000ml即得。 3藥品： 對乙酰氨基酚片實驗內容 1家兔空白血的采集 取體重3kg左右家兔一只，耳緣動脈取血或心臟取血2080ml，于20 ml具塞離心管中，室溫靜置四小時以上或37水浴中保溫12小時。離心(2500轉/分)15分，取血清供標準曲線制備用。 2標準曲線的制備精密稱取對乙酰氨基酚對照品50mg，置100ml容量瓶中，以蒸餾水溶解，并添加至刻度，搖勻，精密吸取10ml于50m1溶量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即成100ug/ml的標準溶液，分別吸取下表所列體積置于20ml具塞試管中，分別加適量蒸餾水使成10ml，然后各加上述血清1ml

9、混勻，再各加0.06mol/L氫氧化鋇4.5ml混勻，放置2分鐘，再分別加2硫酸鋅溶液4.5ml，即出現明顯乳狀渾濁，用雙層濾紙過濾。去初濾液，收集續(xù)濾液于20 ml干燥具塞試管中，以試藥加空白血清作空白對照，在紫外分光光度計上于245nm處測定吸收度(A)，以吸收度(A)對血清藥物濃度(C)進行線性回歸，結果記錄于表1。表1 標準曲線測定結果管 號空白123456標準液取量（ml）00.51.01.52.02.53.0含藥量（g）050100150200250300H2O（ml）109.59.08.58.07.57.0血清（ml）1.01.01.01.01.01.01.00.06mol/LB

10、a（OH）2（ml）4.54.54.54.54.54.54.52%ZnSO4（ml）4.54.54.54.54.54.54.5A值0.0000.1690.3330.4950.6400.8061.006線性回歸方程A=0.003285C-0.000035713家兔體內血藥濃度的測定血樣品的采集：取體重3kg左右的健康家兔一只，實驗先天下午禁食，實驗當日晨耳靜脈取血4ml，作為空白，然后即喂食對乙酰氨基酚片，劑量為500mg/3kg，在給藥后0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、10小時耳靜脈采血4ml，供測定血藥濃度用，喂藥四小時后可以給食，采血時間見表2。血藥濃度測定：將采用的血樣按前空白

11、血處理方法處理后，小心吸取血清1ml，加蒸餾水10ml，余下按標準曲線制備中“再各加0.06mol/L氫氧化鋇溶液4.5ml”起進行操作，將吸收值A代入標準曲線方程計算出血藥濃度。結果記于表2。表2 血藥濃度測定結果兔重： kg 給藥量： mg 給藥時間：8:00編號空白123456789時間（hr）00.250.511.523457采血時間測定結果A值00.1010.3960.6490.6360.5160.4630.3380.2100.092血藥濃度（g/ml）LgC實驗結果及數據處理1藥時曲線的繪制：用表2的濃度C對時間t作圖，即得藥時曲線圖。2消除速率常數K的求算：文獻報道對乙酰氨基酚的體內過程系一室模型，血管外給藥一室模型動力學方程為：C=A（e-kt-e-kat）這里A=通常Ka>K，當t充分大的式中e-Kat<<e-kt而可忽略，故式可改寫為：式兩端取對數：C=Ae-kt lgC=lgA-0.4343kt 用藥時曲線中尾部近似于直線上的3點，即尾數數據，代入式作直線回歸，求出系數：a、b，則： K=-2.303b