鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵

1、鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解分光光度法測定物質(zhì)含量的一般條件及其選定方法 。2掌握 鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵的方法3了解 722型分光光度計(jì)的構(gòu)造和使用方法2 實(shí)驗(yàn)原理1光度法測定條件:分光光度法測定物質(zhì)含量時(shí)應(yīng)注意的條件主要是顯色反應(yīng)的條件和測量吸光度的條 件。2鄰二氮雜菲 -亞鐵配合物:鄰 二氮雜菲是測定鉄的一種很好的試劑在 ph=2-9條件下,鉄與 鄰二氮雜菲 生成極穩(wěn)定的橘紅色配合物,此配合物的 lgK 穩(wěn) =21.3,摩爾吸光系數(shù)為 11000。在顯色前首先用鹽酸羥胺把三價(jià)鐵離子還原為二價(jià)鐵離子,其反應(yīng)式為2Fe3+2NH2OH.HCl=2Fe2+N2+2H2O+4

2、H+2Cl-3儀器與試劑儀器:分光光度計(jì),容量瓶,移液管,洗瓶。試劑:(1 100 ug/mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(2 20 ug/mL的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液4實(shí)驗(yàn)步驟1條件實(shí)驗(yàn)(1 吸收曲線的測繪 用吸量管移取 20 ug/mL 鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液 5.00 mL 于 50 mL 容量瓶中, 用吸量管依次加入 5% 的鹽酸羥胺溶液 1 mL,搖勻,加 1 mol/L NaAc 溶液 5 mL和 0.1% 鄰二氮菲溶 液 3 mL,以水稀釋至刻度,搖勻。在分光光度計(jì)上用 l cm 比色皿,以水為參比溶液,在 570-430 nm 之 間,每隔 10 nm 測定一次吸光度,以波長為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制吸收曲線,找

3、出最大吸收波 長 max 。(2 鄰二氮雜菲 -亞鐵配合物的穩(wěn)定性在最大吸收波長處每隔一定時(shí)間測定其吸光度然后以時(shí)間為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)繪制曲線(3 顯色劑濃度實(shí)驗(yàn)取 7 只 50 mL 容量瓶,并且對(duì)其編號(hào)用吸量管依次加入 20 ug/mL的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液 5mL 與容量瓶中 和 5% 鹽酸羥胺溶液 1 mL, 搖勻, 經(jīng)二分鐘后, 加入 1 mol/L NaAc 溶液 5 mL, 然后分別加入 0.1% 的 鄰二氮菲溶液 0.3 mL, 0.6 mL, 1.0 mL, 2.0 mL, 3.0 mL ,4.0 mL,以水稀釋至刻度,搖勻。在分光光 度計(jì)上,用 l cm 比色皿,在適宜波長下,

4、以水為參比溶液,測定以上七個(gè)溶液的吸光度。以鄰二氮菲的 體積 (mL 為橫座標(biāo),相應(yīng)的吸光度為縱座標(biāo),繪制吸光度 -顯色劑用量曲線,找出在測定中應(yīng)加人的顯色 劑的體積 (mL。(7 鐵含量的測定標(biāo)準(zhǔn)曲線的測繪:去 50 mL容量瓶 6只,分別移取(務(wù)必準(zhǔn)確移取 20 ug/mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液 2.0 mL, 4.0 mL, 6. 0mL , 8.0 mL , 10.0 mL于五只容量瓶中不加鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液醅空白液作參比, 然后各加 1MOL5%鹽酸羥胺溶液,搖勻經(jīng)二分鐘后,再各加 5ML1MOL.L-1NaAc 溶液及 3ML0.1%鄰二氮雜菲溶液,用水稀 釋至刻度搖勻在分光光度計(jì)上,一同 1cm 比

5、色皿在最大吸收波長 510nm 處測定各溶液吸光度, 以鐵含量 為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。未知液中鐵含量的測定 ,吸取 5ML 未知液代替標(biāo)準(zhǔn)溶液,其他步驟均同上,測定吸光度,由未知液吸 光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出 5ML 未知液中鐵含量然后以每毫升未知液中含鐵多少微克表示結(jié)果。五:(1 吸收曲線的測繪吸收曲線 0.10.20.3 0.40.5450 500550 600波長吸光度從吸收曲線可以看出 鄰二氮雜菲 -亞鐵配合物在波長 510nm 處吸光度最大, 因此測定鐵時(shí)宜用波長 為 510nm 。 。(4標(biāo)準(zhǔn)曲線的測繪與鐵含量的測定圖中標(biāo)準(zhǔn)曲線是一條直線,從該曲線可以測定未知液中鐵的含量。六