實驗性鎘中毒對三穗鴨免疫器官及免疫效果的影響.docx

1、文章編號1001-3601(2013)11-0671-0136-03實驗性鎘中毒對三穗鴨免疫器官及免疫效果的影響陳佳琪械，嵇辛勤帶*,文明口，傅心亮“2（1.貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，貴州貴陽550025；2,貴州省動物疫病研究室，貴州貴陽550025）摘要為探明鎘對三穗鴨機(jī)體的危害及預(yù)防重金屬污染提供科學(xué)依據(jù)，選取健康三穗雛鴨80只，通過添加一定劑量的鎘飼喂雛鴨，同時設(shè)立對照組，分別于26日齡、52日齡、78日齡和104日齡時采集血液、法氏囊、胸腺和脾器官組織，測定禽流感H5的效價、疫器官指數(shù)和觀察病理變化。結(jié)果表明：隨著日齡增長鎘中毒免疫組鴨的禽流感H5免疫效價顯著下降，52日蜂后效價不合格（

2、HI<41og2）；免疫器官法氏囊、胸腺和脾臟存在明顯的萎縮、壞死、出血等現(xiàn)象；中毒組和中毒免疫組免疫器官指數(shù)明顯低于對照組，除脾臟指數(shù)在26日齡時與對照組間差異不顯著外，其他日齡均顯著或極顯著低于對照組。說明，鎘殘留對三穗鴨的免疫器官有實質(zhì)性損傷，同時影響鴨禽流感的免疫應(yīng)答。關(guān)鍵詞鎘中毒；三穗鴨；免疫器官指數(shù)；禽流感H5抗體效價；貴州中圖分類號S834文獻(xiàn)標(biāo)識碼AImmuneEffectofExperimentalCadmiumPoisoningonSansuiDuckCHENJiaqi'2,JIXinqinU2*,WENMingu2,FUXinliang1-2(1.Colle

3、geofAnimalScience,GuizhouUniversity>Guiyang,Guizhou550025；2.LaboratoryforAnimalEpidemicDiseaseofGuizhou,GuiyangGuizhou550025,China)Abstract:InordertoexploreCadmium(Cd)onbodydamageofSansuiduckandtoprovidescientificbasisforheavymetalpollutioncontrol,80healthyducklingswereselectedandfedbycertaindose

4、ofCd.Blood,bursaofFabricius,thymus,andspleenorganandtissuesampleswerecollectedin26d,52d,78d,and104d,respectively,andtiterofbird-flueAIVH5,immuneorganindexweredeterminedandpathologicalchangeswereobserved.Theresultsshowedthatasthedaysofagegrowth,titerofbird-flueAIVH5significantlydecreasedinCdpoisoning

5、-immunegroup,titerunqualifiedin52days(HI<41og2)TheimmuneorgansasbursaofFabricius,thymus,andspleenperformedobviouslyatrophy,necrosis,hemorrhageandetc.Immuneorganindexinpoisoninggroupandpoisoning-immunegroupwereobviouslysignificantlyorhighlysignificantlylowerthancontrolgroup»exceptthedifferenc

6、eofspleenindexwasnotsignificantin26days.ItcouldbeconcludedthatCaresidueshadsubstantialdamageonimmuneorgansofSansuiduck,meanwhileitinfluencedtheimmuneresponseonbird-fluefortheducks.Keywords:Cadmium(Cd)poisoning；Sansuiduck；immuneorganindex；avianinfluenzaH5antibodytiter；Guizhou動物及人機(jī)體內(nèi)重金屬殘留是通過食物鏈富集，即通過飲

7、水、呼吸、采食含重金屬的物質(zhì)，經(jīng)新陳代謝在機(jī)體相應(yīng)組織或器官內(nèi)富集，超出相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),從而引起相應(yīng)的不良反應(yīng)，達(dá)到一定量時則引起慢性中毒，進(jìn)一步損傷機(jī)體組織，危害人畜的健康。從20世紀(jì)60年代發(fā)現(xiàn)鎘污染與日本“痛痛病”的因果關(guān)系后，環(huán)境中鎘與健康關(guān)系的研究引起了全世界的關(guān)注，同時世貿(mào)組織（WTO）將鎘規(guī)定為食品中必檢項目之一；1984年聯(lián)合國環(huán)境規(guī)劃署（UNEP）提出具有全球意義的12種危險化學(xué)物中鎘被列為首位。目前，鎘已被美國毒物管理委員會列為第6位危及動物身體健康的有毒物質(zhì)，因為鎘中毒可引起機(jī)體的急、慢性中毒，導(dǎo)致機(jī)體肝、腎等多種器官損傷，甚至對生殖細(xì)胞和免疫都存在一定的危害作用口句。此外，隨

8、著研究的深入，鎘已被證實為一種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，除了對內(nèi)分泌系統(tǒng)的存在影響外，還對動物的免疫器官有極大影響。邵明東等研究發(fā)現(xiàn)，鎘中毒對雞各器官鎘含量及其健康存在一定的影響。張春紅等8】對雛雞鎘污染的免疫器官檢測發(fā)現(xiàn)，脾、胸腺、法氏囊中淋巴細(xì)胞數(shù)目減少，造成雞免疫功能被抑制。張陸等研究表明，鎘對雛雞紅細(xì)胞免疫功能存在影響。YucesoyB等研究表明，鎘對機(jī)體免疫系統(tǒng)有很大的抑制作用。三穗縣是貴州省養(yǎng)鴨業(yè)基地，近年來養(yǎng)鴨業(yè)快速發(fā)展，三穗鴨也越來越受到養(yǎng)殖者和消費者的青睞。為探究重金屬鎘對三穗鴨機(jī)體免疫效果的影響，筆者等對其進(jìn)行了研究，以期為鎘對動物機(jī)體的危害研究及預(yù)防重金屬污染提供科學(xué)依據(jù)，以促進(jìn)

9、貴州三穗鴨養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。1材料與方法材料1.1.1 動物為1日齡健康三穗麻鴨，共80只。1.1-2試劑禽流感H5-HI抗原（批號：收稿日期2013-07-30；2013-09-23修回基金項目貴州省自然科學(xué)基金項目“環(huán)境鎘污染影響動物機(jī)體生理及免疫功能的實驗研究4科合J字（2011）2221作者簡介陳佳琪（1988），女，碩士，研究方向：獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)。E-maiL3712136O5射通訊作者：嵇辛勤（1957），女，教授，碩士生導(dǎo)師，從事獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)研究。E-mail：jxq972陳佳琪等實驗性鎘中學(xué)對三穗鴨免疫器官及免疫效果的影響CHENJiaqietalImmuneEffectof

10、ExperimentalCadmiumPoisoningonSansuiduck組別樣本數(shù)26日齡52日齡78H齡104日齡GroupSamplesize26days52days78days104days中毒免疫組Poisoning-immunegroup5(6±2)log2(4±l)log2A(3±l)log2A(2±l)log2A免疫組Immunegroup5(7±l)log2(8±l)log2(6±1)log2(5±l)log2不同組鎘中毒鴨對禽流感病毒（AIV）H5的效價Table1EffectofCd-p

11、oisoningontiterofbird-flueAIVH5indifferentgroups注：A表示與免疫組間差異顯著(PV0.05)。Note：Aindicatedsignificantdifferencewithimmunegroupin5%level.20110630）、禽流感H5-HI血清（批號：20100710）,均購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所;CdC購自上海生物工程公司。1.2 方法1.2.1試驗鴨分組將80只鴨隨機(jī)分為4組，即鎘中毒組、鎘中毒免疫組、免疫組和空白對照組，各組20只，試驗期104d。免疫是指鴨15日齡和鴨換羽后（40日齡）進(jìn)行禽流感油苗頸部皮下注射，鎘中

12、毒組與鎘中毒免疫組每天飼喂基礎(chǔ)日糧+CdCl260mg/只，免疫組與空白對照組只飼喂基礎(chǔ)日糧。1.2.2 H5抗體效價檢測和病理觀察分別于26日齡、52日齡、78日齡、104日齡各組隨機(jī)抽取5只稱重，頸靜脈采血，置于試管內(nèi)，斜面放置析出血清，檢測禽流感H5抗體效價，參照高致病性禽流感診斷技術(shù)GB/T189362003中微量法進(jìn)行。根據(jù)血清效價（HI）的判斷標(biāo)準(zhǔn)，禽流感滅活苗的HI>41og2為陽性，判定為免疫合格；HI<41og2為陰性，表12.2病理變化經(jīng)解剖觀察，中毒組和中毒免疫組鴨的免疫器官法氏囊、胸腺和脾臟存在明顯萎縮、壞死、出血等現(xiàn)象，隨著日齡的增長，病變越明顯，這可能與

13、鎘在機(jī)體內(nèi)隨著日齡的增長而富集導(dǎo)致。同時肝臟、脾和腺胃輕度充血，腺胃黏膜易脫落，肝臟明顯增大,膽汁呈墨綠色，濃于對照組；肌胃內(nèi)膜出現(xiàn)脫落，有結(jié)節(jié)樣壞死灶，壞死灶有石化現(xiàn)象；免疫組和空白對照組免疫器官均無明顯的病理變化。表明，鎘殘留對免疫器官和內(nèi)臟存在實質(zhì)性損傷。2.3臟器指數(shù)變化從表2看出，飼喂混有重金屬銅的中毒組和中毒免疫組在26日齡、52H齡、78日齡和104日齡階判定為不合格。同時宰殺解剖觀察病理變化。1-2.3免疫器官臟器系數(shù)測定取胸腺、法氏囊及脾臟稱里計算臟器指數(shù)。胸腺指數(shù)=胸腺重（g）/體重（kg）,脾臟指數(shù)=脾臟重（g）/體重（kg）,法氏囊指數(shù)=法氏囊重（g）/體重（kg）。2

14、結(jié)果與分析2.1禽流感H5抗體變化從表1看出，免疫組在26日齡、52日齡、78日齡、104日齡時抗體平均效價均高于中毒免疫組。在免疫組中禽流感抗體效價均合格（HI41og2）；中毒免疫組隨著喂鎘時間的增加導(dǎo)致禽流感抗體效價降低，52日齡后禽流感抗體效價均不合格（HI<41og2）,表明鎘對禽流感免疫應(yīng)答有著嚴(yán)重影響，起到一定的抑制作用。中毒組與對照組未注射禽流感油苗未產(chǎn)生免疫，故不作比較。段，免疫器官指數(shù)均低于免疫組和對照組，且中毒組和中毒免疫組間無顯著性差異。胸腺指數(shù)：鴨中毒組中毒免疫組均極顯著低于對照組和免疫組，可能是鎘在機(jī)體內(nèi)富集，從而抑制胸腺器官的生長發(fā)育。脾臟指數(shù)：26日齡時，

15、各組間差異不顯著；52日齡時，中毒組、中毒免疫組與對照組間均存在極顯著差異，免疫組與對照組間差異顯著，78日齡和104日齡時中毒組、中毒免疫組與對照組間均存在顯著差異，這可能是重金屬鎘隨日齡的增加在鴨機(jī)體內(nèi)富集和脾臟內(nèi)富集，從而抑制脾臟的生長發(fā)育。法氏囊指數(shù)：從26日齡到78日齡，中毒組、中毒免疫組與對照組間均存在極顯著差異；104日齡時，由于法氏囊消失，臟器指數(shù)無法計算。表明，鎘對免疫器官表2不同日齡各免疫器官的臟器指數(shù)Table2Visceraindexofimmuneorganindifferentdaysofages器官組別26H齡52日齡78日齡104日齡OrganGroup26da

16、ys52days78days104days胸腺中毒組Poisoninggroup2.450+0.179B3.890土0.224B2.592±O.206B2.168+0.189BThymus中毒免疫組Poisoning-immunegroup2.405±0.192B3.825+0.235B2.53110.198B2.007+0.142B免疫組Immunegroup3.529±0.2035.242±0.2144.668±0.1893.225+0.281對照組Controlgroup3.507±0.2565.119+0.3094.617&#

17、177;0.2133.237±0.224脾臟中毒組Poisoninggroup0.536士0.0440.522±0.035B0.253±0.025A0.187+0.044ASpleen中毒免疫組Poisoning-immunegroupO.52O±O.0280.403+0.033B0.362±0.056A0.186±0.053A免疫組Immunegroup0.559±0.0220.708士0.042A0.403±0.0500.225+0.036對照組Controlgroup0.543±0.0230.759

18、+0.0270.423±0.0420.257±0.038法氏囊中毒組Poisoninggroup0.459±0.039B0.324士0.035B0.224±0.020BBursaofFabricius中毒免疫組Poisoning-immunegroup0.371+0.031B0.365+0.042B0.215±0.019B免疫組Immunegroup1.216+0.1741.033±0.1460.401+0.022對照組Controlgroupl.299±0.0381.010±0.Ill0.411±0.0

19、19注：A表示同種器官不同組間差異顯著（P<0.05）,B表示差異極顯著（PV0.01）,表示法氏囊萎縮消失。Note：Aindicatedsignificantdifferencewithimmunegroupin5%level,Bindicatedhighlysignificantdifferencein1%level.indicatedthatthebursaofFabriciusatrophiedanddisappeared.生長發(fā)育有極大的抑制作用。3結(jié)論重金屬中毒是一個積累的過程，所需時間長，而本試驗設(shè)置的試驗時間較長，與環(huán)境中重金屬殘留富集相似,具有可行性。研究結(jié)果表明，隨

20、著重金屬在三穗鴨體內(nèi)的富集，禽流感H5抗體效價明顯下降，到52日齡后中毒免疫組鴨的抗體水平不合格，說明重金屬鎘對禽流感免疫應(yīng)答存在影響。經(jīng)解剖觀察，鎘殘留對免疫器官和內(nèi)臟存在實質(zhì)性損傷；中毒組和中毒免疫組免疫器官指數(shù)明顯低于對照組，除脾臟指數(shù)在26日齡時與對照組間差異不顯著外，其他日齡均顯著或極顯著低于對照組，與YucesoyB等的研究結(jié)果一致，表明重金屬鎘會影響免疫器官的生長發(fā)育。因此，在三穗鴨養(yǎng)殖地，要避免重金屬鎘對當(dāng)?shù)丨h(huán)境的污染，從而避免鎘對三穗鴨養(yǎng)殖的影響。參考文獻(xiàn)1LourdesSchnaas,StephenJRothenberg,EstelaPerro-ni,etal.Tempor

21、alpatternintheeffectofpostnatalbloodleadlevelonintellectualdevelopmentofyoungchildrenLJ.NeurotoxicologyandTeratology,2000,22(6):805-810.2董秋洪，聶根新，涂田華，等.食品中重金屬污染對人體健康的影響及其對策J.江西農(nóng)業(yè)科技，2003(3)：37-38.3BuchkoGW,HessNJ,KennedyMA.CadmiummutagenicityandhumannuchleotideexcisionrepairproteinXPA:CD,EXAFSand1H/15N-NMRspectroscopicstud