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文檔簡介
1、附錄二: 常用固定液和染色液的配制常用固定液的配制1. 福爾馬林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml +冰醋酸5ml +福爾馬林(37%40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般組織,但不適用于單細(xì)胞及絲狀藻類,也不適宜 作細(xì)胞學(xué)研究。幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收 縮。若材料堅(jiān)硬,可略減冰醋酸,略增福爾馬林。若材料易收縮,可 稍增加冰醋酸。久置時(shí)另加入5ml甘油以防蒸發(fā)和材料變硬。此液又 可作保存液。固定時(shí)間最多10h。如果用在植物胚胎的材料上,改用 下面的配方,效果較好:50%酒精89ml +冰醋酸6ml +福爾馬林5ml2. 福爾馬林炳酸-酒精固定液(FP
2、A)福爾馬林5ml +丙酸5ml + 50%酒精90ml固定一般的植物組織,通常固定 24h,可長久保存。3酒精-醋酸-氯仿固定液(卡諾固定液,Carnoy fixative)配方I:純酒精3份+冰醋酸1份配方純酒精6份+冰醋酸1份+氯仿3份適用于植物組織和細(xì)胞學(xué)材料,為研究細(xì)胞分裂和染色體的優(yōu)良固定 液。固定時(shí)間不宜過久。4酒精-福爾馬林固定液福爾馬林 26 (610) ml + 70%酒精 100ml固定植物一般組織,尤其適用于萌發(fā)的花粉管的固定。通常固定24h, 亦可長久保存 5酒精-福爾馬林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福爾馬林100ml +甘油50ml此液也可長期儲(chǔ)存材料
3、。6. 鉻酸-醋酸固定液根據(jù)固定對象的不同,可分為強(qiáng)、中、弱3種配方:(1)弱液配方:10%鉻酸2.5ml + 10%醋酸5ml +蒸餾水92.5ml(2)中液配方:10%鉻酸7ml + 10%醋酸10ml +蒸餾水83ml(3)強(qiáng)液配方:10%鉻酸10ml + 10%醋酸30ml +蒸餾水60ml 弱液配方用在固定較柔軟的材料,如藻類、苔蘚和蕨類的原葉體等。固定時(shí)間較短,一般為數(shù)小時(shí),最長可固定 1224h,但藻類和蕨類 的原葉體可縮短到幾分鐘至1h。中液配方用于固定根尖、莖尖、未成熟子房和胚珠等。為了易于滲透, 可在此液中加入2%的麥芽糖或尿素。固定時(shí)間1224h。強(qiáng)液配方用于固定木質(zhì)根、
4、莖、成熟子房等。為了易于滲透,可在此液中加入2%的麥芽糖或尿素。固定時(shí)間1224h或更長。7. 鉻酸-醋酸-福爾馬林混合液這3種藥品混合在一起所配成的各種固定液,通常稱納瓦興固定液(Nawashin fixative),簡稱 Craf。配方見下表:常備液納瓦興原液(ml)納瓦興固定液(ml)桑弗利斯液(ml)InmIVV1%鉻酸404040甲10%鉻酸1581013鉻酸1520206070液冰醋酸108蒸餾水75454040322079乙福爾馬林40101010203064液蒸餾水60909080807036甲、乙兩液均為貯備液,使用之前才將二者混合。適用于組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)的研究材料。柔嫩而含水
5、多的材料,可選用I或H固定,堅(jiān)韌而 成熟的材料,可用高濃度的W或V, 般材料多用皿。制作染色體和 有絲分裂的紡錘體標(biāo)本時(shí),常用桑弗利斯固定液。I、H、皿、W、 V固定液的固定時(shí)間為1248h,桑弗利斯液固定時(shí)間為46h。8. 鉻酸-鋨酸-醋酸固定液(Flemming fixative)強(qiáng)液:10%鉻酸水溶液3.1ml + 2%鋨酸的鉻酸(2%)水溶液12ml + 10%醋酸水溶液30ml +蒸餾水11.9ml中液:10%鉻酸水溶液0.33ml + 2%鋨酸的鉻酸(2%)水溶液0.62ml+ 10%醋酸水溶液3ml +蒸餾水6.27ml弱液:10%鉻酸水溶液1.5ml + 2%鋨酸的鉻酸(2%)水溶液5ml + 10% 醋酸水溶液1ml +蒸餾水96.5ml此固定液需現(xiàn)用現(xiàn)配。固定2348h。 可用于各
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