丙型肝炎患者血清IL

1、丙型肝炎患者血清IL 作者：黃偉英，歐超偉，王小梅【關(guān)鍵詞】 丙型肝炎；,白細(xì)胞介素-6；,白細(xì)胞介素-12；,轉(zhuǎn)氨酶摘要：目的：探討丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12水平的變化以及在丙型肝炎發(fā)病機(jī)制中的作用。方法：分別應(yīng)用ELISA法檢測(cè)52例丙型肝炎患者(其中輕度18例，中度19例，重度15例)血清的IL-6、IL-12濃度，熒光定量PCR檢測(cè)HCV RNA含量，同時(shí)測(cè)定ALT水平，然后分析它們之間的關(guān)系，并與15名正常健康人作對(duì)照。結(jié)果：丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12、ALT和HCV RNA水平均非常顯著地高于正常對(duì)照組（P0.01），相關(guān)性分析表明，丙型肝炎患者血清中的ALT、

2、HCV病毒含量均與IL-6、IL-12濃度呈正相關(guān)。結(jié)論：丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12水平高低與HCV病毒含量有關(guān)，并且與肝臟的損傷程度密切相關(guān)。關(guān)鍵詞： 丙型肝炎； 白細(xì)胞介素-6； 白細(xì)胞介素-12； 轉(zhuǎn)氨酶The Research of Relationship between Serum IL-6, IL-12 Levels and HCV Content in Patients with HCV InfectionAbstract:Objective: To explore the changes of serum IL-6, IL-12 levels in patients

3、 with hepatitis C and the role of IL-6, IL-12 in pathogenesy of hepatitis C. Method： Levels of serum IL-6 and IL-12 were detected by ELISA, contents of HCV RNA by fluorescent quantitation PCR in 52 cases hepatitis C and 15normal controls. Levels of ALT were measured in the same time. Result： Serum l

4、evels of IL-6, IL-12, ALT and HCV virus were higher than those in normal controls(P0.01). there were positive correlation between serum levels of IL-6, IL-12 and contents of ALT and HCV. Conclusion： The serum levels of Il-6, Il-12 in patients with hepatitis C were related to HCV content. Their level

5、s were also related to immune function inj ,丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12與HCV含量變化及相關(guān)性研究 ury degree of liver.Key words: Hepatitis C; Interleukin-6; Interleukin-12; Aminopherase本研究擬通過(guò)對(duì)52例丙型肝炎患者血清中細(xì)胞因子IL-6、IL-12、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和HCV病毒RNA含量的檢測(cè)，并對(duì)它們進(jìn)行相關(guān)性分析，探討細(xì)胞因子在HC發(fā)病過(guò)程中的作用。1 材料和方法1.1 研究對(duì)象：丙型肝炎組選擇廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院傳染科HC患者52例(其中輕度

6、18例，中度19例，重度15例)，其診斷標(biāo)準(zhǔn)符合1995年第五次全國(guó)傳染病與寄生蟲(chóng)病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中男27例，女25例，平均年齡42.6歲。所有患者HCV IgG陽(yáng)性，血清HCV RNA陽(yáng)性，并排除其它病毒性肝炎、自身免疫性疾病及代謝性疾病，未經(jīng)干擾素及免疫抑制劑治療。正常對(duì)照組為15例（男8例，女7例），平均年齡39.5歲，均為我院保健科體檢合格的健康人，均無(wú)心、肝、肺、腎等重要臟器疾患，肝、腎功能正常，乙型肝炎病毒標(biāo)志物和丙型肝炎標(biāo)志物檢測(cè)均為陰性。1.2 試劑和儀器：IL-6、IL-10 ELISA試劑盒分別由北京華美公司和武漢伯士德生物工程公司提供；定量PCR試劑

7、盒由深圳晶美生物工程公司提供，用于HCV病毒含量測(cè)定；RT-200C型全自動(dòng)生化分析儀為美國(guó)杜雷公司產(chǎn)品；Opticon實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀為MJ Research公司產(chǎn)品。1.3 方法：分別采集各實(shí)驗(yàn)對(duì)象靜脈血5ml，靜置1H后2500rpm離心10min，取上層血清，用于測(cè)定血清的細(xì)胞因子IL-6、IL-12、ALT和HCV病毒RNA含量的檢測(cè)。1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：所測(cè)數(shù)據(jù)以S表示。用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，組間比較運(yùn)用t檢驗(yàn)；IL-6、IL-12水平與HCV病毒含量及ALT的相關(guān)分析用直線相關(guān)性分析，用相關(guān)系數(shù)(r)表示。2 結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明（見(jiàn)表1），和正常對(duì)照組比較，52例

8、HC患者血清IL-6、IL-12、ALT和HCV RNA含量均顯著上升（P0.01），并且隨著病情的加重其含量逐漸遞增。相關(guān)性分析顯示（見(jiàn)表2）， 52例HC患者ALT含量與HCV病毒含量、IL-6及IL-12水平均呈正相關(guān)（P0.01）。而HC患者的HCV病毒含量也與IL-6和IL-12水平呈正相關(guān)（P0.01）。表1 正常人和丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12和ALT、HCV RNA含量（略）與正常組比較，* P0.01表2 丙型肝炎患者血清和ALT、HCV 病毒的相關(guān)系數(shù)（略）3 討論丙型肝炎的發(fā)病機(jī)制目前雖尚不十分清楚，但近年來(lái)眾多的研究表明，免疫因素尤其是細(xì)胞免疫異?？赡苁潜透窝?/p>

9、發(fā)病的重要機(jī)制，而且細(xì)胞因子在其中起著重要的作用。研究表明丙型肝炎的發(fā)病過(guò)程中肝炎病毒感染使機(jī)體免疫系統(tǒng)活化，產(chǎn)生或釋放過(guò)量的細(xì)胞因子如TNF-、IL-6和IL-12等1。另外，病毒復(fù)制，內(nèi)毒素血癥又使單核巨噬細(xì)胞處于激活狀態(tài)，促進(jìn)IL-6和TNF-分泌大量增加，IL-6和TNF-反過(guò)來(lái)又激活T、B細(xì)胞，NK細(xì)胞和單核細(xì)胞，這些活化的細(xì)胞可與因肝炎病毒感染而改變肝細(xì)胞膜成分發(fā)生免疫應(yīng)答，因而造成肝功的改變和肝細(xì)胞的壞死。過(guò)量表達(dá)的IL-6由活化的淋巴細(xì)胞、患者的內(nèi)毒素血癥激發(fā)單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，其可促進(jìn)B細(xì)胞分化，增強(qiáng)穿孔素基因、IL-2、IL-2R的表達(dá)，加速肝臟急性期蛋白的合成和釋放，介導(dǎo)肝

10、細(xì)胞大量死亡2。另外IL-6還能誘導(dǎo)CTL產(chǎn)生更多的絲氨酸脂酶和穿孔素，導(dǎo)致大量離子和水份進(jìn)入引起肝細(xì)胞腫脹、破裂死亡。IL-6還可以介導(dǎo)自身免疫反應(yīng)，參與針對(duì)肝細(xì)胞的自身免疫，從而加重了肝細(xì)胞的破壞3。而IL-12主要由活化的巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞和中性粒細(xì)胞產(chǎn)生，能增加NK細(xì)胞活性，增加NK細(xì)胞與靶細(xì)胞的結(jié)合力，增強(qiáng)清除HCV活性，但同時(shí)也導(dǎo)致免疫損傷4，表現(xiàn)為介導(dǎo)肝細(xì)胞大量壞死，反映在機(jī)體血清ALT水平的升高。有文獻(xiàn)報(bào)道：重組人白細(xì)胞介素-12（rhIL-12）可在體外顯著增加慢性HCV感染者淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)，亦能顯著增強(qiáng)HCV感染者對(duì)HCV抗原的增殖反應(yīng)5。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示丙型肝炎患者組

11、血清IL-6和IL-12水平均顯著高于正常對(duì)照組（P0.01），實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)還顯示IL-6 和IL-12與血清ALT水平明顯相關(guān)，表明丙型肝炎患者體內(nèi)產(chǎn)生過(guò)量的IL-6和IL-12，導(dǎo)致免疫損傷，使肝細(xì)胞受損，致使ALT水平的升高。提示IL-6 和IL-12對(duì)丙型肝炎的病情輕重與預(yù)后判斷有一定的指導(dǎo)意義。HCV屬黃病毒屬，為單股正鏈RNA病毒，HCV感染可引起肝臟病變慢性化及肝硬化，同時(shí)與原發(fā)性肝癌的發(fā)生也有密切的關(guān)系6。丙型肝炎的病理改變主要是肝細(xì)胞壞死和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，病理改變提示，HCV的致病機(jī)制并非病毒的直接致細(xì)胞病變作用，而免疫介導(dǎo)的損傷可能是肝臟病變的主要原因。研究表明在病理情況下由于肝

12、炎病毒的侵襲，致使機(jī)體的細(xì)胞因子調(diào)節(jié)功能失衡，從而使細(xì)胞因子含量發(fā)生改變，并隨其含量的增高可引起局部炎癥反應(yīng)而造成多器官、多系統(tǒng)的損傷7。另有文獻(xiàn)報(bào)道HCV非結(jié)構(gòu)蛋白雖然不是病毒的結(jié)構(gòu)成分，但具有一定的免疫原性，可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞的增殖，可能免疫導(dǎo)致IL-12分泌增加，導(dǎo)致肝炎的發(fā)生。我們研究發(fā)現(xiàn)丙型肝炎患者血清HCV病毒含量與IL-6 、IL-12、ALT水平均呈正相關(guān)，表明HCV病毒感染誘導(dǎo)IL-6 、IL-12的大量增加，導(dǎo)致肝細(xì)胞損害。綜上所述，細(xì)胞因子IL-6、IL-12與肝細(xì)胞的炎癥反應(yīng)關(guān)系密切。HCV感染人體可以誘導(dǎo)機(jī)體IL-6、IL-12水平的顯著升高，進(jìn)而介導(dǎo)肝細(xì)胞的損傷。HCV

13、基因產(chǎn)物的高水平表達(dá)可能提高了細(xì)胞對(duì)細(xì)胞因子或其他肝細(xì)胞破壞介質(zhì)的敏感性。而在慢性丙型肝炎的發(fā)病機(jī)制中，免疫損傷可能是其重要原因之一。參考文獻(xiàn)：1 Gonzaler AR, Garcir ME, Garcia BL, et al. Induction of tumor necrosis factor production by human hepatocytes in chronic viral hepatialJ Exp Med,1994，179:8412 Allander T, Forns X, Emerson SU,et al. Hepatitis C Virus envelope pr

14、otein E2 to CD81 of tamarins.Virology ,2000，277(2):258-2673 駱抗先乙型肝炎的基礎(chǔ)與臨床第1版北京:人民衛(wèi)生出版社19971154 Sakaguchi E, Kayano K,Segaawa M, et al. Th1/Th2 imbalance in HCV-related liver cirrhosis Nippon Rinsho,2001，59(7)：1259-1263.5 an XG, Tang FQ, Yi h, et al. Effect of IL-12 on T-cell immune responses in patients with chronic HCV infection. APMIS,2000,108(7):531-538.6 Chromzynski P,Sac