血細胞分析項目質(zhì)量要求及性能驗證（課堂PPT）

1、1 血細胞分析項目質(zhì)量要求及性能驗證血細胞分析項目質(zhì)量要求及性能驗證23前言前言本標準按照本標準按照GB/T 1.1-2009給出的規(guī)則起草。給出的規(guī)則起草。本標準由衛(wèi)生部臨床檢驗標準專業(yè)委員會提出。本標準由衛(wèi)生部臨床檢驗標準專業(yè)委員會提出。本標準起草單位：衛(wèi)生部臨床檢驗中心、四川本標準起草單位：衛(wèi)生部臨床檢驗中心、四川大學華西大學華西醫(yī)院醫(yī)院、北京協(xié)和醫(yī)院。、北京協(xié)和醫(yī)院。本標準起草人：彭明婷、周文賓、谷小林、李本標準起草人：彭明婷、周文賓、谷小林、李臣賓、吳際、陸紅、江虹、李建英。臣賓、吳際、陸紅、江虹、李建英。4范圍范圍o本標準規(guī)定了臨床血液學檢驗常規(guī)項目（全本標準規(guī)定了臨床血液學檢驗常

2、規(guī)項目（全血細胞血細胞計數(shù)和計數(shù)和凝血凝血血試驗）的分析質(zhì)量要求血試驗）的分析質(zhì)量要求及及驗證方法驗證方法。o本標準適用于使用本標準適用于使用血液分析儀血液分析儀和和血凝儀血凝儀的臨的臨床實驗室、室間質(zhì)量評價機構(gòu)或床實驗室、室間質(zhì)量評價機構(gòu)或體外診斷體外診斷企企業(yè)的內(nèi)部質(zhì)量業(yè)的內(nèi)部質(zhì)量控制控制、外部質(zhì)量評價及檢測、外部質(zhì)量評價及檢測系系統(tǒng)統(tǒng)的的性能性能驗證驗證5引用文件引用文件o下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其用于本文件。凡是不注日期的引

3、用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。件。oWS/T 407 醫(yī)療機構(gòu)內(nèi)定量檢驗結(jié)果的醫(yī)療機構(gòu)內(nèi)定量檢驗結(jié)果的可比性可比性驗證指南驗證指南oWS/T 408 臨床化學設(shè)備臨床化學設(shè)備線性線性評價指南評價指南6oCLSI EP9-A2 用患者用患者樣本樣本進行方法學比進行方法學比對及對及偏倚評估偏倚評估：批準指南第二版：批準指南第二版（Method comparison and bias estimation using patient samples: Approved guideline-Second edition7下列術(shù)語和定義適用于本

4、文件。下列術(shù)語和定義適用于本文件。 1、驗證驗證 verification 提供客觀證據(jù)以認定規(guī)定要求得到滿足。提供客觀證據(jù)以認定規(guī)定要求得到滿足。82、攜帶污染攜帶污染 carryover 由測量系統(tǒng)將一個檢測樣品由測量系統(tǒng)將一個檢測樣品反應(yīng)反應(yīng)攜帶到另一攜帶到另一個檢測樣品反應(yīng)的分析物不連續(xù)的量，由此個檢測樣品反應(yīng)的分析物不連續(xù)的量，由此錯誤地影響了另一個檢測樣品的表現(xiàn)量。錯誤地影響了另一個檢測樣品的表現(xiàn)量。93、精密度精密度 precision 在規(guī)定的條件下，在規(guī)定的條件下，獨立獨立檢測結(jié)果間的一致程檢測結(jié)果間的一致程度，精密度的度量通常以度，精密度的度量通常以不精密度不精密度表示。表

5、示。104、不精密度不精密度 imprecision 同一實驗室用同種方法在多次獨立檢測中分同一實驗室用同種方法在多次獨立檢測中分析同一樣品所得結(jié)果的離散程度。析同一樣品所得結(jié)果的離散程度。115、批內(nèi)精密度批內(nèi)精密度 within-run precision 在相同的檢測條件下，對同一被測物進行連在相同的檢測條件下，對同一被測物進行連 續(xù)測量所得結(jié)果間的一致程度。續(xù)測量所得結(jié)果間的一致程度。注：批內(nèi)精密度又稱為注：批內(nèi)精密度又稱為重短性重短性。126、日間精密度日間精密度 inter-day precision 在不同天內(nèi)對同一被測物進行重復測量所得在不同天內(nèi)對同一被測物進行重復測量所得結(jié)果

6、間的一致程度。結(jié)果間的一致程度。137、線性線性 linearity 檢測樣本時，在一定范圍內(nèi)可以直接按比例檢測樣本時，在一定范圍內(nèi)可以直接按比例關(guān)系得出分析物含量的關(guān)系得出分析物含量的能力能力。148、正確度正確度 trueness 一系列檢測結(jié)果的均值與靶值之間的一致程一系列檢測結(jié)果的均值與靶值之間的一致程度，以度，以偏倚偏倚表示。表示。159、偏倚偏倚 bias 同一實驗室用同種方法在多次獨立檢測中分析同同一實驗室用同種方法在多次獨立檢測中分析同一樣品所得結(jié)果的均值與靶值之間的差異。一樣品所得結(jié)果的均值與靶值之間的差異。 注注1：靶值可以是參考方法測定值、有證標準物質(zhì)定：靶值可以是參考方

7、法測定值、有證標準物質(zhì)定值或其他適當定值，如室間質(zhì)量評價計劃的統(tǒng)計值。值或其他適當定值，如室間質(zhì)量評價計劃的統(tǒng)計值。 注注2：偏倚一般通過分析有證標準物質(zhì)及其他適當參：偏倚一般通過分析有證標準物質(zhì)及其他適當參考物質(zhì)、與參考方法或已知考物質(zhì)、與參考方法或已知正確度正確度的其他方法（如的其他方法（如公認的指定比對方法）比對而獲得。公認的指定比對方法）比對而獲得。 注注3：偏倚可用絕對值或相對值表示。：偏倚可用絕對值或相對值表示。 注注4：偏倚有：偏倚有方向性方向性，即可能是正偏倚或負偏倚。，即可能是正偏倚或負偏倚。1610、準確度準確度 accuracy 單次檢測結(jié)果與參考值間的一致程度，以單次檢

8、測結(jié)果與參考值間的一致程度，以 誤差誤差表示。表示。1711、總誤差總誤差 total error 實驗室用某方法在多次獨立檢測中分析某實驗室用某方法在多次獨立檢測中分析某 樣品所得各個結(jié)果值與靶值之差在一定置樣品所得各個結(jié)果值與靶值之差在一定置 信區(qū)間內(nèi)的最大允許范圍。信區(qū)間內(nèi)的最大允許范圍。1812、可比性可比性 comparability 使用不同的檢測使用不同的檢測程序程序測定某種分析物獲得的測定某種分析物獲得的檢測結(jié)果間的一致性。結(jié)果間的差異不超過檢測結(jié)果間的一致性。結(jié)果間的差異不超過規(guī)定的可接受標準時，可認為結(jié)果具有可比規(guī)定的可接受標準時，可認為結(jié)果具有可比性。性。19全血全血細胞

9、細胞計數(shù)的分析質(zhì)量要求及驗證方法計數(shù)的分析質(zhì)量要求及驗證方法1 本底計數(shù)本底計數(shù)1.1 本底計數(shù)檢測要求本底計數(shù)檢測要求血液分析儀本底計數(shù)各參數(shù)的結(jié)果應(yīng)符合表血液分析儀本底計數(shù)各參數(shù)的結(jié)果應(yīng)符合表1的要求。的要求。20檢測項目WBCRBCHBPLT檢測要求0.5109/L 0.051012/L 2.0g/L 10109/L 表1 血液分析儀本底計數(shù)的檢測要求5.1.2 驗證方法驗證方法用稀釋液作為樣本在分析儀上連續(xù)檢測3次，3次檢測結(jié)果的最大值應(yīng)在允許范圍內(nèi)。212 攜帶污染攜帶污染2.1 攜帶污染檢測要求攜帶污染檢測要求血液分析儀的攜帶污染率應(yīng)符合表血液分析儀的攜帶污染率應(yīng)符合表2的要求。的

10、要求。22檢測項目WBCRBCHBPLT攜帶污染率3.0% 2.0%2.0% 4.0% 表2 血液分析儀攜帶污染檢測要求232.2 驗證方法驗證方法 分別針對不同檢測項目，取一份高濃度的臨分別針對不同檢測項目，取一份高濃度的臨床樣本（床樣本（EDTA-K2或或EDTA-K3抗凝抗凝靜脈靜脈血），混合均勻后連續(xù)測定血），混合均勻后連續(xù)測定3次，測定值分次，測定值分別為別為H1、H2、H3； 再取一份低濃度的臨床樣本，混合均勻后連再取一份低濃度的臨床樣本，混合均勻后連續(xù)測定續(xù)測定3次，測定值分別為次，測定值分別為L1、L2、L3。按式（按式（l）計算攜帶污染率。）計算攜帶污染率。24式中：CR -

11、攜帶污染率；L1 -低濃度臨床樣本的第1次測定值； L3低濃度臨麻樣本的第3次測定值； H3高濃度臨床樣本的第3次測定值。252.3 臨床樣本濃度要求臨床樣本濃度要求 不同檢測項目所選高、低濃度樣本的濃度水不同檢測項目所選高、低濃度樣本的濃度水平應(yīng)符合表平應(yīng)符合表3的要求。的要求。26檢測項目WBCRBCHBPLT高濃度值90109/L 6.201012/L 220g/L 900109/L 第濃度值03109/L 01.501012/L 050g/L 030109/L 表3 攜帶污染率驗證樣本的濃度要求273 批內(nèi)精密度批內(nèi)精密度3.1 批內(nèi)精密度檢測要求批內(nèi)精密度檢測要求 批內(nèi)精密度以連續(xù)檢

12、測結(jié)果的批內(nèi)精密度以連續(xù)檢測結(jié)果的變異系數(shù)變異系數(shù)為評為評價指標，批內(nèi)精密度應(yīng)達到廠家說明書的要價指標，批內(nèi)精密度應(yīng)達到廠家說明書的要求，檢測正常濃度水平新鮮血的批內(nèi)精密度求，檢測正常濃度水平新鮮血的批內(nèi)精密度至少應(yīng)符合表至少應(yīng)符合表4的要求。的要求。28檢測項目 檢測范圍 變異系數(shù) WBC4.0109/L10.0109/L 4.0% RBC3.51012/L5.51012/L 2.0% HB110g/L160g/L 1.5% HCT35%55% 3.0% PLT100109/L300109/L 5.0% MCV80fl100fl 2.0% MCH27pg34pg 2.0% MCHC320g/

13、L360g/L 2.5% 表4 批內(nèi)精密度檢測要求293.2 驗證方法驗證方法 取一份濃度水平在上述檢測范圍內(nèi)的臨床樣取一份濃度水平在上述檢測范圍內(nèi)的臨床樣本，按常規(guī)方法重復檢測本，按常規(guī)方法重復檢測11次，計算后次，計算后10次檢測結(jié)果的算術(shù)平均值和次檢測結(jié)果的算術(shù)平均值和標準差標準差，按照式，按照式（2）計算變異系數(shù)。）計算變異系數(shù)。30式中：CV-變異系數(shù)；s標準差；算數(shù)平均值。314 日間精密度日間精密度4.1 日間精密度檢測要求日間精密度檢測要求 日間精密度以室內(nèi)質(zhì)控在控結(jié)果的變異系數(shù)日間精密度以室內(nèi)質(zhì)控在控結(jié)果的變異系數(shù)為評價指標，日間精密度應(yīng)符合表為評價指標，日間精密度應(yīng)符合表5

14、的要求。的要求。32檢測項目WBCRBCHBHCTPLTMVCMCHMCHC相對差異6.0% 2.5% 2.0% 4.0% 8.0% 2.5% 2.5% 3.0% 表5 日間精密度檢測要求334.2 驗證方法驗證方法 至少使用兩個濃度水平（包含正常和異常水至少使用兩個濃度水平（包含正常和異常水平）的質(zhì)控品，在檢測當天至少進行一次室平）的質(zhì)控品，在檢測當天至少進行一次室內(nèi)質(zhì)控，剔除失控數(shù)據(jù)（失控結(jié)果已得到糾內(nèi)質(zhì)控，剔除失控數(shù)據(jù)（失控結(jié)果已得到糾正）后按正）后按批號批號或者月份計算在控數(shù)據(jù)的變異或者月份計算在控數(shù)據(jù)的變異系數(shù)。系數(shù)。345 線性線性5.1 線性驗證檢測要求線性驗證檢測要求 線性回歸

15、方程的斜率在線性回歸方程的斜率在10. 05范圍內(nèi)，范圍內(nèi)，相關(guān)系相關(guān)系數(shù)數(shù)r0.975或或r20.95。 WBC、RBC、Hb和和Plt項目滿足要求的線性范圍項目滿足要求的線性范圍在廠家說明書規(guī)定的范圍內(nèi)。在廠家說明書規(guī)定的范圍內(nèi)。5.2 驗證方法驗證方法 驗證方法參照驗證方法參照臨床化學設(shè)備線性評價指南臨床化學設(shè)備線性評價指南 （制定過程中）（制定過程中）356 正確度正確度6.1 偏倚偏倚 正確度驗證以偏倚為評價指標，偏倚應(yīng)符合正確度驗證以偏倚為評價指標，偏倚應(yīng)符合表表6的要求。的要求。36檢測項目WBCRBCHBHCTPLTMVCMCHMCHC偏倚5.0% 2.0% 2.5% 2.5%

16、 6.0% 3.0% 3.0% 3.0% 表6 正確度驗證的允許偏倚376.2 驗證方法驗證方法 至少使用至少使用10份檢測結(jié)果在參考區(qū)間內(nèi)的新鮮血樣份檢測結(jié)果在參考區(qū)間內(nèi)的新鮮血樣本，每份樣本檢測兩次，計算本，每份樣本檢測兩次，計算20次以上檢測結(jié)果次以上檢測結(jié)果的均值。的均值。 以校準實驗室的定值或臨床實驗室內(nèi)部規(guī)范操作檢以校準實驗室的定值或臨床實驗室內(nèi)部規(guī)范操作檢測系統(tǒng)（如使用配套試劑、用配套校準物定期進行測系統(tǒng)（如使用配套試劑、用配套校準物定期進行儀器校準、儀器性能良好、規(guī)范地開展室內(nèi)質(zhì)量控儀器校準、儀器性能良好、規(guī)范地開展室內(nèi)質(zhì)量控制、參加室間質(zhì)量評價成績優(yōu)良、檢測程序規(guī)范、制、參加

17、室間質(zhì)量評價成績優(yōu)良、檢測程序規(guī)范、人員經(jīng)過良好培訓的檢測系統(tǒng)）的測定均值為標準，人員經(jīng)過良好培訓的檢測系統(tǒng)）的測定均值為標準，計算偏倚。計算偏倚。387 不同吸樣模式的結(jié)果可比性不同吸樣模式的結(jié)果可比性7.1 適用條件適用條件使用不同吸樣模式檢測樣本并報告結(jié)果時。使用不同吸樣模式檢測樣本并報告結(jié)果時。397.2 可比性要求可比性要求 同一臺血液分析儀不同吸樣模式的結(jié)果可比同一臺血液分析儀不同吸樣模式的結(jié)果可比性應(yīng)符合表性應(yīng)符合表7的要求。的要求。40檢測項目WBCRBCHBPLTHCTMCV相對差異5.0% 2.0%2.0% 7.0% 3.0%3.0% 表7 血液分析儀不同吸樣模式的結(jié)果可比

18、性要求417.3 驗證方法驗證方法 每次校準后，取每次校準后，取5份臨床樣本分別使用不同份臨床樣本分別使用不同模式進行檢測，每份樣本各檢測兩次，分別模式進行檢測，每份樣本各檢測兩次，分別計算兩種模式下檢測結(jié)果均值間的相對差異，計算兩種模式下檢測結(jié)果均值間的相對差異，結(jié)果應(yīng)符合表結(jié)果應(yīng)符合表7的要求。的要求。428 實驗室內(nèi)的結(jié)果可比性實驗室內(nèi)的結(jié)果可比性8.1 偏差偏差 實驗室內(nèi)的結(jié)果可比性以相對偏差為評價指實驗室內(nèi)的結(jié)果可比性以相對偏差為評價指標，相對偏差應(yīng)符合表標，相對偏差應(yīng)符合表8的要求。的要求。43 檢測項目濃度范圍樣本數(shù)量所占比例相對偏差WBC109 /L 2.0 10% 10.0%

19、 2.05.0 10% 7.5% 5.111.0 45% 11.150.0 25% 50.1 10% 表8 檢測項目濃度范圍樣本數(shù)量 所占比例相對偏差44續(xù)表續(xù)表8檢測項目濃度范圍樣本數(shù)量所占比例相對偏差RBC1012 /L3.00 5% 3.0%3.004.00 15% 4.015.00 55% 5.016.00 20% 6.01 5% HCT無要求無要求3.5%MCV3.5%MCH3.5%MCHC3.5%45續(xù)表續(xù)表8檢測項目濃度范圍樣本數(shù)量所占比例相對偏差 HB g/L100 10% 3.5% 10012015% 121160 60% 161180 10% 181 5% 46檢測項目濃度

20、范圍樣本數(shù)量所占比例相對偏差PLT 109 /L4010%12.5%40 12520%12630040%30150020%5016005%6015%478.2 驗證方法驗證方法8.2.1 新儀器使用前，配套檢測系統(tǒng)新儀器使用前，配套檢測系統(tǒng)至少使用至少使用20份臨床樣本（濃度要求見表份臨床樣本（濃度要求見表8），每份樣），每份樣本分別使用臨床實驗室內(nèi)部規(guī)范操作檢測系本分別使用臨床實驗室內(nèi)部規(guī)范操作檢測系統(tǒng)和被比對儀器進行檢測，以內(nèi)部規(guī)范操作統(tǒng)和被比對儀器進行檢測，以內(nèi)部規(guī)范操作檢測系統(tǒng)的測定結(jié)果為標準，計算相對偏差，檢測系統(tǒng)的測定結(jié)果為標準，計算相對偏差，每個檢測項目的相對偏差符合表每個檢測項

21、目的相對偏差符合表8要求的比要求的比例應(yīng)例應(yīng)80%。48 8.2.2 新儀器使用前，非配套檢測系統(tǒng)按新儀器使用前，非配套檢測系統(tǒng)按CLSI頒布的頒布的EP9-A9文件文件與配套檢測系統(tǒng)與配套檢測系統(tǒng)進行比對，至少使用進行比對，至少使用40份臨床樣本（濃度份臨床樣本（濃度要求見表要求見表8），計算相對偏差，每個檢測項），計算相對偏差，每個檢測項目的相對偏差符合表目的相對偏差符合表8要求的比例應(yīng)要求的比例應(yīng)80%。然后再按。然后再按5.8.2.1的方法進行驗的方法進行驗證。證。49 8.2.3 常規(guī)檢測儀器使用過程中，至少使常規(guī)檢測儀器使用過程中，至少使用用20份臨床樣本份臨床樣本（血細胞計數(shù)項目

22、所選（血細胞計數(shù)項目所選標標本本的濃度水平應(yīng)符合表的濃度水平應(yīng)符合表8的要求，其他檢測的要求，其他檢測項目所選標本應(yīng)含正常、異常濃度水平各占項目所選標本應(yīng)含正常、異常濃度水平各占50%;比對可分次進行）定期（至少半年）比對可分次進行）定期（至少半年）進行一次結(jié)果比對，每個檢測項目的相對偏進行一次結(jié)果比對，每個檢測項目的相對偏差符合表差符合表8要求的比例應(yīng)要求的比例應(yīng)80%。508.2.4 以下情況，可按以下情況，可按WS/T 407的方法和要求進行比對：的方法和要求進行比對：a） 室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果有漂移趨勢時；室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果有漂移趨勢時；b） 室間質(zhì)評結(jié)果不合格，采取糾正措施后；室間質(zhì)評結(jié)果不合格，

23、采取糾正措施后；c） 更換試劑批號（必要時）；更換試劑批號（必要時）；d） 更換重要部件或重大維修后；更換重要部件或重大維修后；e） 軟件軟件程序變更后；程序變更后；f） 臨床醫(yī)生對結(jié)果的可比性有疑問時；臨床醫(yī)生對結(jié)果的可比性有疑問時；g） 患者投訴對結(jié)果可比性有疑問（患者投訴對結(jié)果可比性有疑問（需要需要確認時）；確認時）；h） 需要提高需要提高周期周期性比性比對對頻率頻率時（如每季度或每月一次）。時（如每季度或每月一次）。51 比對樣本比對樣本樣本類型樣本類型 臨床標本：首選比對物質(zhì)臨床標本：首選比對物質(zhì) 其他物質(zhì)：室間質(zhì)評或其他參考物質(zhì)其他物質(zhì)：室間質(zhì)評或其他參考物質(zhì)樣本濃度水平樣本濃度水平 需已知比對物質(zhì)不同濃度水平對應(yīng)的結(jié)果需已知比對物質(zhì)不同濃度水平對應(yīng)的結(jié)果 不精密度不精密度 至少檢測兩個濃度水平（正常和異常水平）至少