金花茶組植物化學(xué)成分的定量分析

1、金花茶組植物化學(xué)成分的定量分析                  作者：唐前 羅燕英 黃連冬 陸敏珠 唐玲 史麗穎 馮寶民 王永奇    【摘要】  目的測定金花茶、毛瓣金花茶、凹脈金花茶、四季金花茶、薄葉金花茶不同植物部位中總皂苷、總多酚（鞣質(zhì)）、總黃酮的含量。方法采用紫外分光光度法。結(jié)果其總皂苷、總多酚（鞣質(zhì)）、總黃酮的含量依次為：金花茶花蕾醇提物：21.30%、

2、6.56%（0.34%）、21.76%；葉子醇提物：43.24%、3.95%（1.57%）、0.93%；葉子水提物：9.91%、6.69%（1.34%）、5.19%；種子醇提物：13.53%、5.88%（0.83%）、6.85%。毛瓣金花茶葉子醇提物：43.49%、6.79%（1.65%）、1.54%。 凹脈金花茶葉子醇提物：36.29%、13.19%（5.33%）、1.12%；種子醇提物：20.58%、5.29%（0.14%）、0.33%。四季金花茶葉子醇提物：35.90%、7.01%（0.47%）、0.78%。薄葉金花茶葉子醇提物：30.08%、7.57%（0.19%），0.82%。結(jié)論紫

3、外分光光度法測定以上3種物質(zhì)簡便易行，準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性和回收率都較理想。 【關(guān)鍵詞】  金花茶組植物 總皂苷 總多酚（鞣質(zhì)） 總黃酮    Abstract:ObjectiveTo determine the chemical constituents of total saponin, total polyphenol (tannin) and total flavonoids in Section Chrysantha Chang. MethodsTheir contents were determined by spectrophotometry.

4、ResultsThe contents of total saponin,total polyphenol ( tannin) and total flavonoids were：21.30%,6.56%（0.34%）,21.76%； 43.24%,3.95%（1.57%）,0.93%； 9.91%,6.69%（1.34%）,5.19%； 13.53%,5.88%（0.83%）,6.85%；43.49%,6.79%（1.65%）,1.54%；36.29%,13.19%（5.33%）,1.12%； 20.58%,5.29%（0.14%）,0.33%；35.90%,7.01%（0.47%）,0.7

5、8%；30.08%,7.57%（0.19%）,0.82% respectively.ConclusionThe method is convenient and reliable to determine the three substances, and the reproducibility and the recovery are fairly good.    Key words:Section Chrysantha Chang;  Total saponin;  Total polyphenol（tannin）;  Tota

6、l flavonoids    20世紀(jì)60年代初，在我國廣西首次發(fā)現(xiàn)黃色山茶屬植物金花茶Camellia chrysantha (Hu)Tuyama,震驚世界。到目前為止，已發(fā)現(xiàn)并命名的黃花山茶屬植物已達(dá)32種5變種，1998年張宏光教授將其歸類為金花茶組。其中除越南與廣西接壤的北部有3種，云南、貴州、四川各有1種外，其余26種、5變種均產(chǎn)于我國廣西南部和西南部的亞熱帶南緣和熱帶北緣地區(qū)。90%分布于，80%分布于廣西，說明中國是金花茶組植物的特產(chǎn)國，而廣西是金花茶組的特產(chǎn)區(qū)。    但因?yàn)榻鸹ú杞M植物發(fā)現(xiàn)較晚，加之分類上爭議時(shí)間較

7、長，所以盡管在園林、花卉界轟動較大，亦被國家列為珍稀保護(hù)植物，但對它的研究甚少。本文以皂苷、多酚、黃酮類成分為指標(biāo)，對其中產(chǎn)量大、資源較豐富的5種金花茶組植物化學(xué)成分進(jìn)行了分析測定。現(xiàn)報(bào)道如下。    1  儀器與試藥    1.1  儀器Unico7200可見分光光度計(jì)(尤尼柯上海儀器有限公司); Laborata 4000 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀( Heidolph 公司) ;BP210S 十萬分之一天平(Sartorius 公司) ; Jasco v2560紫外可見分光光度計(jì)(JASCO 日本分光株式會社) 。

8、0;   2  方法與結(jié)果    2.1  總皂苷的含量測定1    2.2  多元酚及鞣質(zhì)的含量測定2,31             2.3  總黃酮的含量測定4,5    對照品溶液的制備：精確稱取干燥至恒重的對照品20 mg，置100 ml容量瓶中，加入甲醇溶解并稀釋到刻度，搖勻，得濃度為0.2 mg/ml的對照品溶液，備用。

9、60;   供試品溶液的制備：精確稱取金花茶組植物提取物的干浸膏 G(g), 置100 ml容量瓶中加入甲醇溶解并稀釋至刻度, 搖勻, 得 H(mg·ml- 1)的溶液, 備用。表3  金花茶總酚和鞣質(zhì)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表4  總酚和鞣質(zhì)含量測定結(jié)果測定波長的選擇：對照品溶液和供試品溶液NaNO2- AlCl3 顯色后, 在紫外可見分光光度上, 波長200600 nm 區(qū)間掃描。均在400 nm 處有最大吸收, 因此選擇400 nm 為測定波長。測得的結(jié)果以對照品為基準(zhǔn)計(jì)算總黃酮的含量。    線性關(guān)系考察：精密吸取對照品

10、溶液 0.00，0.30，0.60，0.90，1.20，1.50 ml，各加甲醇至4.0 ml，再分別加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的NaNO2溶液0.3 ml,搖勻，室溫放置6 min，再加10% AlCl3溶液0.3 ml,搖勻，室溫放置10 min，在400 nm波長下測定吸光度A，同時(shí)以試劑空白做參比。以吸光度A為縱坐標(biāo)，濃度C（mg/ml）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到回歸方程A=15.065C+0.002 6,R2=0.999 9 線性范圍：0.0130.065 2 mg/ml。    重復(fù)性實(shí)驗(yàn)：精確吸取 I（ml） 的供試品溶液, 置于試管中, 加入甲醇至4.0

11、 ml , 按照標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下的方法操作, 測定吸光度, 平行做5次實(shí)驗(yàn), 代入回歸方程, 計(jì)算總黃酮的含量。G 、H 、I的數(shù)據(jù)見表5。結(jié)果見表6。表5  金花茶總黃酮的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表6  總黃酮含量測定結(jié)果    對照品溶液的制備：精確稱取干燥至恒重的蘆丁對照品20 mg, 置100 ml 容量瓶中, 加入甲醇溶解并稀釋至刻度, 搖勻, 得濃度為0.2 mg·ml- 1 的對照品溶液, 備用。    供試品溶液的制備：精確稱取金花茶組植物提取物的干浸膏J(g), 置100 ml容量瓶中加入甲醇溶解并稀釋至刻

12、度, 搖勻, 得K(mg·ml- 1)的溶液, 備用。    測定波長的選擇：蘆丁對照品溶液和供試品溶液NaNO2-Al(NO3)3-NaOH 顯色后, 在紫外可見分光光度上, 波長200600 nm 區(qū)間掃描。均在500 nm 處有最大吸收, 因此選擇500 nm 為測定波長。測得的結(jié)果以蘆丁為基準(zhǔn)計(jì)算總黃酮的含量。    重復(fù)性實(shí)驗(yàn)：精確吸取1.0 ml 的供試品溶液, 置于試管中, 加入甲醇至2.0 ml , 按照標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下的方法操作,測定吸光度, 平行做5次實(shí)驗(yàn), 代入回歸方程, 計(jì)算總黃酮的含量。J，K，L的數(shù)據(jù)

13、見表7。結(jié)果見表8。表7  金花茶總黃酮的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表8  總黃酮含量測定結(jié)果%    3  討論    3.1  總黃酮含量測定方法的選擇經(jīng)大量的調(diào)研表明，采用可見分光光度法測定總黃酮的含量是比較成熟的方法，此方法穩(wěn)定性好，準(zhǔn)確度高，且簡便快捷，易于操作，結(jié)果可靠，故選擇了采用分光光度法測定金花茶提取物中總黃酮的含量。    3.2  皂苷含量測定方法的選擇皂苷的分析測定有多種方法，如沉淀法、溶血指數(shù)法、層析法等，沉淀法測定往往易帶進(jìn)雜質(zhì)或?qū)е略碥兆冑|(zhì)；層

14、析法一般可以分離出總皂苷，但對總含量測定不適，誤差大，成本高，而分光光度法操作簡便、靈敏，屬于經(jīng)典、成熟的方法，我們選擇了與金花茶皂苷類成分基本母核結(jié)構(gòu)接近的齊墩果酸為對照品，采用分光光度法測定其總皂苷的含量。    3.3  鞣質(zhì)測定方法的選擇鞣質(zhì)的經(jīng)典含量測定方法有很多種，如重量法、容量法、比色法等。以前最常用的有皮粉法、高錳酸鉀法、絡(luò)合定量法。2005年版以前的藥典部2鞣質(zhì)含量測定法一直沿用皮粉法。但是其缺點(diǎn)是耗用樣品多，測定時(shí)間長，且沒有選擇性，測定結(jié)果偏高，而且皮粉用量很大，而2005年版中國藥典部鞣質(zhì)測定法，以沒食子酸為對照品穩(wěn)定性好，干酪素的吸附作用具有專屬性，其方法操作簡便，用時(shí)短，且重復(fù)性和回收率都較理想。 【文獻(xiàn)】  1 高聲傳，郭 濤，夏維杰，等比色法測定酸棗仁提取物中總