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文檔簡介

1、.檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質 1.實驗原理. 斐林試劑斐林試劑蘇丹蘇丹橘黃色橘黃色紅色紅色磚紅色沉淀磚紅色沉淀紫色紫色蘇丹蘇丹 雙縮脲試劑雙縮脲試劑鑒定物質鑒定物質試劑試劑實驗現象實驗現象還原性糖還原性糖脂肪脂肪蛋白質蛋白質淀粉淀粉 碘碘 藍色藍色 生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定l實驗原理實驗原理.選材:含糖量較高的選材:含糖量較高的白色或近于白色的植物組織白色或近于白色的植物組織(排除色素對排除色素對顯色的干擾顯色的干擾),蘋果、梨最好,蘋果、梨最好 。 l實驗流程實驗流程(步驟步驟)1.可溶性還

2、原糖可溶性還原糖 制備組織樣液:制備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨,制漿:去皮、切塊、研磨,過濾:(用單層紗布)過濾:(用單層紗布)取液:取液:(mL)顯色反應顯色反應 mL組織樣液剛配制的斐林試劑mL現象:現象: (用前混勻用前混勻)5065.C水浴水浴加熱加熱2min.還原糖的檢測和觀察:還原糖的檢測和觀察:.還原糖的檢測結果還原糖的檢測結果.2.脂肪的鑒定脂肪的鑒定 取材:花生種子(浸泡取材:花生種子(浸泡h),去皮,將子葉削成薄片),去皮,將子葉削成薄片 制片:制片:選取最薄的薄片移至載玻片中央選取最薄的薄片移至載玻片中央在薄片上滴加在薄片上滴加蘇丹蘇丹(或蘇丹或蘇丹) 染液染液2

3、3滴,滴,染色染色min滴加體積分數為滴加體積分數為50%的酒精的酒精溶液溶液12滴,洗滴,洗去浮色去浮色(多余的蘇丹多余的蘇丹 )吸去余液,滴吸去余液,滴1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成臨時裝片臨時裝片顯微觀察:顯微觀察: 先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察現象:現象:有被染成有被染成橘黃色橘黃色(或紅色或紅色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒.脂肪的檢測結果脂肪的檢測結果.3.蛋白質的鑒定蛋白質的鑒定 選材與制備選材與制備組織樣液:組織樣液:黃豆組織樣液(或雞蛋蛋清稀釋液)黃豆組織樣液(或雞蛋蛋清稀釋液)黃

4、豆浸泡黃豆浸泡 去皮去皮切片切片研磨研磨過濾過濾濾液濾液 顯色反應顯色反應mL組織樣液雙縮脲試劑mL現象:現象:無色無色紫色或紫紅色紫色或紫紅色(創(chuàng)設堿性條件創(chuàng)設堿性條件)(提供提供Cu2+).蛋白質的檢測結果蛋白質的檢測結果.蛋白質的鑒定蛋白質的鑒定-雙縮脲試劑雙縮脲試劑雞蛋清溶液雞蛋清溶液 NaOH 溶液溶液滴加滴加CuSO2 溶液溶液, 每次滴加均需搖勻每次滴加均需搖勻結果顯示結果顯示: 紫色紫色.1.你的預測與實驗結果是否一致?2.小組間交流實驗結果。你有什么發(fā)現?3.全班共檢測了多少種生物材料?這些生物 材料中有機化合物的種類、含量一樣嗎? 這對我們選擇食物有什么啟發(fā)?討論討論.4.

5、淀粉的鑒定淀粉的鑒定取材:馬鈴薯勻漿取材:馬鈴薯勻漿檢測:檢測:mL組織樣液碘液碘液2滴滴現象:現象: 搖勻后變成藍色搖勻后變成藍色.問題探討問題探討:1、在做還原糖、蛋白質鑒定的實驗時,為什么要留出、在做還原糖、蛋白質鑒定的實驗時,為什么要留出一部分樣液?一部分樣液?作對照作對照2、使用雙縮脲試劑時為什么、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加液只能加34滴而不能滴而不能過量?過量? 過量的雙縮脲試劑過量的雙縮脲試劑B B會與試劑會與試劑A A反應,使溶液呈藍色,反應,使溶液呈藍色,而掩蓋生成的紫色。而掩蓋生成的紫色。3、為什么斐林試劑要現配現用,不能放置太久?為什么斐林試劑要現配現用,不能放置太

6、久? 時間太長,時間太長,Cu(OH)Cu(OH)2 2懸濁液就沉淀在試管底部而懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應。無法參與反應。l深化深化.比較項比較項目目試劑及成試劑及成分分原理原理溶液濃度溶液濃度方法方法加熱加熱與否與否結結果果可溶還可溶還原糖的原糖的鑒定鑒定斐林試劑斐林試劑NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4磚磚紅紅色色沉沉淀淀蛋白質蛋白質的鑒定的鑒定雙縮脲試雙縮脲試劑劑NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4溶溶液液呈呈紫紫色色4、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同?、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同?新配制新配制的的Cu(OH)2溶液溶液在堿性在堿性環(huán)境下環(huán)境下的的Cu2+

7、NaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0.05g/mLNaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0.01g/mL先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合,而后而后立即使用立即使用。先先加入加入Na0H1mL,然,然后后再加再加CuS044滴,搖勻。滴,搖勻。(不能過量不能過量)水浴水浴加熱加熱不不需需要要.5、實驗的材料的選擇和處理有什么要求?、實驗的材料的選擇和處理有什么要求?材料的選擇材料的選擇材料的處理材料的處理還原性糖的鑒定還原性糖的鑒定脂肪的鑒定脂肪的鑒定含糖高,顏色為含糖高,顏色為白色的植物組織,白色的植物組織,如蘋果和梨如蘋果和梨富含

8、脂肪的種子富含脂肪的種子,如花生,如花生浸泡浸泡34小時小時/蛋白質的鑒定蛋白質的鑒定富含蛋白質的富含蛋白質的黃豆或雞蛋清黃豆或雞蛋清黃豆需浸泡黃豆需浸泡1-2天,天,雞蛋清要先稀釋雞蛋清要先稀釋淀粉的鑒定淀粉的鑒定馬鈴薯馬鈴薯/. 各種可供實驗的材料各種可供實驗的材料梨梨 黃桃黃桃 胡蘿卜胡蘿卜 黃豆黃豆 花生種子花生種子 小麥種子小麥種子 其中適合于鑒定其中適合于鑒定可溶性還原糖可溶性還原糖的是的是 ,理由是,理由是梨的組織細胞梨的組織細胞 ,你打算用什么試劑鑒定你打算用什么試劑鑒定? 。 小麥種子不如花生種子更適合用來鑒定脂肪,這是小麥種子不如花生種子更適合用來鑒定脂肪,這是因為因為 ,

9、你打,你打算用什么試劑鑒定算用什么試劑鑒定? . 例例 做生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白做生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定實驗時,需要根據實驗需要選擇不同的實質的鑒定實驗時,需要根據實驗需要選擇不同的實驗材料。請根據下表所列各種材料回答問題:驗材料。請根據下表所列各種材料回答問題:梨梨 顏色為白色,并且糖含量較高顏色為白色,并且糖含量較高 斐林試劑斐林試劑脂肪含量不如花生高,也不容易做切片脂肪含量不如花生高,也不容易做切片 用蘇丹用蘇丹或蘇丹或蘇丹試劑試劑.小麥種子中糖類化合物小麥種子中糖類化合物 含量很高,卻不適合用含量很高,卻不適合用來鑒定來鑒定 _,這是因為,這是因為 _。

10、 適合于鑒定蛋白質的是適合于鑒定蛋白質的是 ,理由是,理由是 ,鑒定所用的試劑是,鑒定所用的試劑是 。 蛋白質含量高蛋白質含量高 黃豆和花生黃豆和花生 雙縮脲試劑雙縮脲試劑淀粉淀粉 可溶性還原糖可溶性還原糖 淀粉是非還原糖且不溶于水淀粉是非還原糖且不溶于水 .知識結構.1、青蘋果汁遇碘液顯藍色,熟蘋果汁能與斐林試劑青蘋果汁遇碘液顯藍色,熟蘋果汁能與斐林試劑作用產生磚紅色沉淀,下列結論中最合理的是作用產生磚紅色沉淀,下列結論中最合理的是 ( ) A青蘋果汁中有淀粉,不含還原糖青蘋果汁中有淀粉,不含還原糖 B熟蘋果汁中含還原糖,沒有淀粉熟蘋果汁中含還原糖,沒有淀粉 C蘋果轉熟時,大量淀粉水解成還原

11、糖蘋果轉熟時,大量淀粉水解成還原糖 D蘋果轉熟時單糖聚合成淀粉蘋果轉熟時單糖聚合成淀粉 Cl例題例題.、安徽阜陽劣質奶粉事件震驚全國,引起世、安徽阜陽劣質奶粉事件震驚全國,引起世人注目。鑒定脫脂淡奶粉是否為偽劣產品,肯人注目。鑒定脫脂淡奶粉是否為偽劣產品,肯定不需要用到的化學試劑是定不需要用到的化學試劑是( ) A.斐林試劑斐林試劑 B. 紅墨水紅墨水C.雙縮脲試劑雙縮脲試劑 D.蘇丹蘇丹染液染液 Bl例題例題.3(2005.廣東廣東)生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質三種有機生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質三種有機物的鑒定實驗中,以下操作錯誤的是物的鑒定實驗中,以下操作錯誤的是( )A、可溶性還原

12、糖的鑒定,可用酒精燈直接加熱產生磚紅、可溶性還原糖的鑒定,可用酒精燈直接加熱產生磚紅色沉淀色沉淀B、只有脂肪的鑒定需要使用顯微鏡、只有脂肪的鑒定需要使用顯微鏡C、用雙縮脲試劑檢測蛋白質不需要加熱、用雙縮脲試劑檢測蛋白質不需要加熱D、使用斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現配現用、使用斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現配現用A .第二章組成細胞的分子第二章組成細胞的分子網絡構建網絡構建.蛋白質的結構和功能蛋白質的結構和功能核酸的結構和功能核酸的結構和功能細胞的分子組成細胞的分子組成糖類的種類和作用糖類的種類和作用脂質的種類和作用脂質的種類和作用水和無機鹽的作用水和無機鹽的作用.8590%水水蛋白質蛋白質710

13、%脂質脂質12%無機鹽無機鹽11.5%糖類和核酸糖類和核酸11.5%C C、H H、O O、N N氨基酸氨基酸脫水縮合脫水縮合多肽多肽盤曲折疊盤曲折疊2020種種種類種類化學鍵名稱化學鍵名稱肽鍵肽鍵氨基酸種類、數目、排列順序、空間結構氨基酸種類、數目、排列順序、空間結構蛋白質結構的多樣性蛋白質結構的多樣性蛋白質功能的多樣性蛋白質功能的多樣性細胞的組成物質細胞的組成物質良好的溶劑良好的溶劑參與生化反應參與生化反應運送營養(yǎng)物質和代謝廢物運送營養(yǎng)物質和代謝廢物脂肪:脂肪:磷脂:磷脂:固醇固醇單糖單糖二糖二糖多糖多糖結構蛋白結構蛋白催化作用催化作用運輸載體作用運輸載體作用信息傳遞作用信息傳遞作用免疫作

14、用免疫作用膽固醇膽固醇: :性激素:性激素:維生素維生素D D:CHO 生物體內的儲能物質生物體內的儲能物質CHONP CHONP 細胞膜和細胞器膜的組成成分細胞膜和細胞器膜的組成成分細胞膜的重要成分,參與脂質的運輸細胞膜的重要成分,參與脂質的運輸促進生殖器官的發(fā)育和生殖細胞的形成促進生殖器官的發(fā)育和生殖細胞的形成促進對鈣、磷的吸收促進對鈣、磷的吸收離子離子某些有機物的組成成分某些有機物的組成成分維持細胞和生物體的生命活動維持細胞和生物體的生命活動維持細胞正常的滲透壓和酸堿平衡維持細胞正常的滲透壓和酸堿平衡:葡萄糖 核糖脫氧核糖核酸的組成成分細胞內的主要能源物質麥芽糖、蔗糖、乳糖能水解成單糖供能:淀粉:纖維素:糖原構成細胞壁的主要成分植物細胞中的儲能物質動物細胞中的儲能物質核糖核苷酸核糖核苷酸C C、H H、O O、N N、P P核糖核酸(核糖核

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