體內(nèi)藥物分析考試

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上浙江大學(xué)繼續(xù)教育學(xué)院體內(nèi)藥物分析習(xí)題集一、 名詞解釋1. 反相HPLC答：即流動相極性大于固定相極性的HPLC。2. ODS答：即十八烷基硅烷鍵合硅膠，為常用反相HPLC的固定相。3. 熒光光譜答：以發(fā)射波長為橫坐標(biāo)，熒光強度為縱坐標(biāo)所作的圖。4. 激發(fā)光譜答：以激發(fā)波長為橫坐標(biāo)，熒光強度為縱坐標(biāo)所作的圖。5. RSD答：相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，即精密度的一種表示方法。6. 一相代謝答：指藥物在體內(nèi)發(fā)生的氧化反應(yīng)、還原反應(yīng)、水解反應(yīng)。7. 二相代謝答：指藥物在體內(nèi)的結(jié)合反應(yīng)，包括：葡萄糖醛酸結(jié)合、硫酸酯化、甲基化、乙?；?、氨基酸綴合、谷胱甘肽綴合等。8. 檢測限答：表示藥物的

2、最低可測度，不必定量，通常以S/N=23倍時被測藥物的絕對量表示。9. 定量限答：表示藥物可定量測定的最低量，須符合一定精密度和準(zhǔn)確度要求，常以標(biāo)準(zhǔn)曲線最低濃度點來確定，或以 S/N=510確定。10. 血清 答：全血經(jīng)離心后的上清液。11. 血漿答：全血加抗凝劑（肝素等），經(jīng)離心后的上清液。12. 酶免疫分析答：酶免疫分析是在放射免疫分析基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種免疫分析方法，以酶代替同位素來標(biāo) 記藥物，酶與底物、輔酶等反應(yīng)后引起吸收光譜變化而被檢測。13. 手性藥物答：分子結(jié)構(gòu)中含有不對稱碳原子（即手性中心）的藥物稱為手性藥物。14. TDM答：治療藥物監(jiān)測，為英文“therapeutic dr

3、ug monitoring”的縮寫。15. 冷凍答：指20及以下溫度。16. 人工抗原答：全稱為人工完全抗原，將藥物等小分子半抗原與蛋白質(zhì)、多肽等大分子物質(zhì)經(jīng)人工合成而得，具有免疫原性。17. 生物轉(zhuǎn)化答：主要指體內(nèi)代謝反應(yīng)。18. 提取回收率答：指藥物加入到生物樣本中經(jīng)前處理后測得的量與理論加入量的比值。19. CYP1A2答：細(xì)胞色素P450 1族A亞族第2個酶基因。20. 毛細(xì)管電泳答：即高效毛細(xì)管電泳(HPCE),是以高壓電場為驅(qū)動力，以毛細(xì)管為分離通道，依據(jù)各組分之間的遷移速度和分配行為上的差異而實現(xiàn)分離的一類液相分離技術(shù)。二、 填空1. 氣相色譜法中常用的檢測器有 氫焰離子化檢測器

4、、氮磷檢測器、電子捕獲檢測器、MS 等。2. 分析方法認(rèn)證的主要指標(biāo) 線性范圍、 準(zhǔn)確度、精密度、專屬性、靈敏度、 穩(wěn)定性 等。3. 在毛細(xì)管電泳中，驅(qū)動荷電物質(zhì)前進(jìn)的兩個重要作用力是 電泳流 和 電滲流 。4. 手性HPLC法常用測定方法有 手性試劑衍生化法、手性流動相添加劑法、手性固定相法。5. 體內(nèi)藥物分析的特點 干擾雜質(zhì)多，樣品量少濃度低，不能再度獲得完全相同的樣品，要有一定的儀器設(shè)備、工作量大 等。6精密度的表示方法有 標(biāo)準(zhǔn)差（SD）、變異系數(shù)（CV）、相對標(biāo)準(zhǔn)差（RSD） 等。7. 紫外光譜法消除干擾的方法有 差示光譜法、導(dǎo)數(shù)光譜法、雙波長法 等。8. 液相色譜中常用檢測器有 紫外

5、檢測器（可變波長、二極管陣列）、熒光檢測器、電化學(xué)檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器、MS 等。9. 毛細(xì)管電泳分離模式有 毛細(xì)管區(qū)帶電泳，膠束電動色譜，毛細(xì)管凝膠色譜，毛細(xì)管等電聚焦，毛細(xì)管等速電泳，移動界面毛細(xì)管電色譜 。10. 常用生物樣品有 血樣（血漿、血清、全血），尿樣，唾液 等。11. 常用去蛋白的方法有 蛋白質(zhì)沉淀法（加蛋白質(zhì)沉淀劑，如：三氯乙酸，高氯酸，Zn2+，Cu2+ ，硫酸銨，氯化鈉，甲醇，乙腈，丙酮等）和組織酶消化法（加蛋白水解酶如：胃蛋白酶，胰蛋白酶，枯草菌溶素等） 。12.抗血清的鑒定指標(biāo)有 特異性，活度和滴度 。13.反相HPLC法常用流動相有 甲醇-水，乙腈-水，四氫呋喃

6、-水 等。14. 生物樣品中藥物與代謝物的提取方法有 液-液提取和液-固提取 等。15. 影響血藥濃度的因素有 機體因素（生理因素、遺傳因素、病理因素）、藥物因素（劑型、手性藥物相互作用）、環(huán)境因素（藥酶誘導(dǎo)劑、抑制劑、大氣污染、飲食） 等。16. 影響液-液提取的因素有 水相pH 值、提取溶劑和離子強度 等。17. 在放射免疫分析中，結(jié)合物與游離標(biāo)記物的分離方法有 沉淀法、吸附法、固相法、差速遷移法、雙抗體法 。18.常用聯(lián)用技術(shù)有 LC-MS，GC-MS，GC-GC，HPLC-HPLC，GC-HPLC，免疫分析-HPLC 等。19.GC-MS中常用離子源包括 電子轟擊、化學(xué)電離、負(fù)離子化學(xué)

7、離子化 等。20.體內(nèi)藥物分析方法包括 光譜法（比色、紫外、熒光），色譜法（HPLC、GC、GC-MS、LC-MS），免疫分析法（放射免疫、酶免疫、熒光免疫） 等。三、單選題1. 高效液相中流動相極性大于固定相的稱為（ A ）.A. RP-HPLC B. HPTLC C. NP-HPLC D. LLPC E. HPCE2. 尿中異煙肼及乙酰異煙肼的比色測定是利用（ B ）專屬反應(yīng)（KCN氯胺T反應(yīng)）A異煙肼 B乙酰異煙肼C異煙肼及乙酰異煙肼D異煙腙 E 異煙酸3. 放射免疫法與熒光免疫法的區(qū)別在于（D）A抗體不同 B親和力不同 C標(biāo)準(zhǔn)抗原不同D標(biāo)記物不同 E 原理不同4. 引起藥物氧化代謝的主

8、要酶是（ D ）A氧化酶 B 硫酸酯酶 C脫氫酶D細(xì)胞色素P450 E葡醛酸轉(zhuǎn)移酶5. 藥理作用強度與下列哪一項最相關(guān)（ C ） A 血液濃度 B 攝入量 C 血液中游離藥物的濃度 D 與蛋白結(jié)合藥物的濃度 E血藥總濃度6. 一般鍵合相色譜的使用pH范圍為（ E ）A 39 B 29 C 27 D 38 E 287. 表示生物樣品測定方法準(zhǔn)確度的是（ E ）A 檢測限 B 定量限 C精密度D 線性范圍 E回收率 8. 屬于藥物二相代謝酶的是（ E ）A氧化酶 B 酯酶 C脫氫酶D細(xì)胞色素P450 E葡醛酸轉(zhuǎn)移酶9. 在色譜定量分析中，采用內(nèi)標(biāo)法的目的是（ C ）A提高靈敏度 B改善分離度 C改

9、善精密度D增加穩(wěn)定性 E增加選擇性10. 高效液相中流動相極性小于固定相的稱為（ C ）.A. RP-HPLC B. HPTLC C. NP-HPLC D. LLPC E. HPCE11.表示生物介質(zhì)中藥物最低可測度的是（ A ）A檢測限 B定量限 C線性范圍 D最低檢測濃度 E可信限12.以發(fā)射波長對熒光強度所作的圖稱為（ E ） A激發(fā)光譜 B照射光譜 C紫外發(fā)射光譜 D吸收光譜 E熒光光譜（發(fā)射光譜）13. 氣相色譜進(jìn)樣室溫度一般要求（ D ）A 低于柱溫 B 低于沸點10°C C不得低于250°C D 高于被測物沸點 E 等于柱溫14. 欲提取尿中某一堿性藥物，其p

10、Ka為7.8，要使99.9%的藥物能被有機溶劑提取，尿樣pH應(yīng)調(diào)節(jié)到（ D ）A. 5.8 B.9.8 C. 4.8以下 D.10.8或10.8以上 E. 7.8-9.815.蒸發(fā)光散射檢測器主要用于（ C ）的檢測A揮發(fā)性物質(zhì) B有紫外吸收的物質(zhì) C無紫外吸收的物質(zhì)D極性物質(zhì) E非極性物質(zhì)16.HPLC離子抑制色譜主要用于（ B ）的分析A弱酸性物質(zhì) B弱酸弱堿物質(zhì) C中性物質(zhì)D強極性物質(zhì) E非極性物質(zhì)17.體內(nèi)藥物分析方法學(xué)研究要求考察穩(wěn)定性，以下內(nèi)容中哪一項不屬于穩(wěn)定性試驗內(nèi)容( E )A長期貯存穩(wěn)定性 B短期室溫穩(wěn)定性 C冷凍-解凍穩(wěn)定性D貯備液穩(wěn)定性 E流動相穩(wěn)定性18. 測定藥物的

11、血漿蛋白結(jié)合率時應(yīng)注意什么問題（ A ）A測定治療量時的結(jié)合率 B采用超濾法測定 C體內(nèi)外測定相結(jié)合D測定高中低濃度的結(jié)合率 E采用平衡透析法19.表示樣品中含有其他共存物質(zhì)時該法能定量測定被測物的能力的是（ D ）A方法的精密度 B方法的準(zhǔn)確性 C方法的相關(guān)性D方法的選擇性 E方法的線性范圍20.方法的專屬性也稱選擇性，在體內(nèi)藥物分析中主要考察（ E ）A相關(guān)物質(zhì) B內(nèi)標(biāo)物 C共存雜質(zhì)D降解物 E內(nèi)源性物質(zhì)四、多選題1. RIA中分離結(jié)合與游離標(biāo)記物的方法有（ACDE）A 雙抗體法 B LC/MS法 C 吸附法D 固相法 E 沉淀法2. 體內(nèi)藥物分析的任務(wù)包括（ABCD）.A分析方法的研究

12、B血藥濃度監(jiān)測 C藥動學(xué)研究D體內(nèi)內(nèi)源性物質(zhì)測定 E新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究3. 紫外分光光度法中消除干擾的方法有（ABE）A 差示分光光度法 B導(dǎo)數(shù)光譜法 C 二極管陣列法 D 化學(xué)發(fā)光法 E 雙波長法4. 氣-質(zhì)聯(lián)用儀中接口的作用是（ BC ） A連接作用 B使壓力匹配 C組分濃縮D檢測器作用 E電離作用5. 藥物二相代謝物綴合物（結(jié)合物）的水解方法有（ ACD ）A酸水解 B堿水解 C溶劑解D酶水解 E離子對法6. 質(zhì)譜儀的基本部件有（ BCE ） A 接口 B離子源 C質(zhì)量分析器D 色譜柱 E檢測器7. 體內(nèi)藥物分析方法的專屬性主要考察（ BDE ） A輔料 B共服藥 C有關(guān)物質(zhì) D內(nèi)源性雜質(zhì)

13、 E代謝物8. 測定血漿蛋白結(jié)合率的常用方法（ AB ）A、平衡透析法 B、超濾法 C、酶法D、衍生化法 E、反相色譜法9. 設(shè)計生物樣品預(yù)處理方法時，應(yīng)考慮( ABCDE )A藥物的理化性質(zhì) B藥物的濃度范圍 C測定目的D生物樣本類型 E擬采取的測定方法10. 氣相色譜中常用流動相為（ CDE ）A 甲醇-水 B乙腈-水 C 氦氣 D 氮氣 E 氫氣11. 抗血清的鑒定指標(biāo)（BCD）A 吸光強度 B 特異性 C 活度D 滴度 E 放射性強度12. 免疫分析中基本試劑包括（ ADE ）A特異性抗體 B分離試劑 C免疫原 D標(biāo)準(zhǔn)抗原 E標(biāo)記抗原13. 在HPLC法中常用來調(diào)節(jié)流動相pH的酸堿是（

14、 ABDE ）A枸櫞酸 B 稀醋酸 C 稀硫酸 D 三乙胺 E 磷酸鹽14. 利用吸光度差值（DA）來消除干擾的方法是（AC）A 差示分光光度法 B導(dǎo)數(shù)光譜法 C雙波長法 D 化學(xué)發(fā)光法 E 二極管陣列法15. 質(zhì)譜儀常用離子源（ ADE ）A電子轟擊 B熱導(dǎo) C電子捕獲D場致離子化 E化學(xué)電離16.藥物在體內(nèi)的一相代謝包括（ AC ）A氧化反應(yīng) B甲基化反應(yīng) C水解反應(yīng) D綴合反應(yīng) E與大分子結(jié)合反應(yīng)17.影響液-液提取的因素有( ABC ) A水相pH B提取溶劑 C離子強度 D流速 E裝樣量18.影響液-固提取的主要因素有( CDE ) A水相pH B提取溶劑 C固定相 D洗脫液流速 E

15、樣品裝載量19.在反相HPLC中，增加流動相中甲醇含量（ BCE ）A被測物保留時間延長 B被測物保留時間變短 C被測物容量因子k值變小 D流動相極性增加 E洗脫能力增加20. 離子對反相色譜中，烷基磺酸鹽主要用作（ AE ）藥物的反離子。A有機強堿 B有機強酸 C羧酸D有機弱酸 E季銨鹽五、問答題1. 生物樣本分析前為什么要除去蛋白質(zhì)？常用去蛋白質(zhì)的方法有哪些？答：除蛋白質(zhì)的意義：j使結(jié)合型藥物釋放出來，以測定總濃度。k得到較“干凈”的提取液，減少乳化。l消除對測定的干擾。常用去蛋白質(zhì)方法：j蛋白質(zhì)沉淀法生成不溶性鹽或鹽析和脫水作用。包括：加酸類、重金屬鹽、中性鹽和能與水混溶的有機溶劑等，如

16、：三氯乙酸、高氯酸、Cu2+、硫酸銨、甲醇、乙腈等。k組織酶消化法蛋白水解酶，如胰蛋白酶、胃蛋白酶等。2. 影響血藥濃度的因素有哪些？ 答：包括j機體因素：生理（年齡、性別、妊娠）、病理、遺傳；k藥物因素：劑型因素、手性藥物對映體相互作用；l環(huán)境因素：化學(xué)物質(zhì)、合并用藥；m人體晝夜節(jié)律、營養(yǎng)和精神狀態(tài)。3. 簡述體內(nèi)藥物分析方法建立的一般步驟。答：首先進(jìn)行文獻(xiàn)查閱，設(shè)計方案，然后通過實驗加以驗證。一般實驗步驟如下：j以純品進(jìn)行測定選擇最佳測定條件（線性，靈敏度、pH、檢測波長等）。k空白樣品測定按設(shè)定的方法進(jìn)行前處理和測定，考察空白值的大小和干擾程度。l以水代替空白樣品，添加標(biāo)準(zhǔn)品后測定，以獲

17、得提取回收率的大致情況，從而對前處理中各步操作條件進(jìn)行選擇。m空白樣品中添加標(biāo)準(zhǔn)后測定求樣品回收率，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線等。n體內(nèi)實樣測定根據(jù)實樣測定結(jié)果來判斷設(shè)定的方法是否合理、可行。以上步驟需要反復(fù)試驗以獲得最佳實驗條件。4. 說明RP-HPLC法的常用固定相、流動相、適用范圍，及流動相中甲醇等有機溶劑濃度變化對被測組分保留時間的影響。答：常用固定相ODS（C18）柱；流動相甲醇-水、乙腈-水、四氫呋喃-水；適用范圍非極性至中等極性的各類分子型化合物；流動相中甲醇等有機溶劑濃度增大，被測組分保留時間縮短。5. 藥物進(jìn)入體內(nèi)后一般需經(jīng)歷哪些物理、化學(xué)變化？這些變化與藥理作用的關(guān)系？答：物理變化系指藥

18、物與生物大分子如血漿蛋白的結(jié)合反應(yīng)?；瘜W(xué)變化系指藥物的代謝反應(yīng)，包括一相代謝（氧化、還原、水解反應(yīng)）和二相代謝反應(yīng)（各種結(jié)合反應(yīng)）由于藥物的作用強度與血液中游離藥物的濃度密切相關(guān)，同時藥物經(jīng)代謝后活性發(fā)生了變化，故藥物的物理、化學(xué)變化與藥理作用密切有關(guān)。6. 為什么要進(jìn)行體內(nèi)藥物分析？體內(nèi)藥物分析的主要任務(wù)是什么？答：為開展臨床藥學(xué)和臨床藥理學(xué)研究服務(wù)，以指導(dǎo)臨床安全、合理、有效用藥和正確評價新藥。體內(nèi)藥分的主要任務(wù)：分析方法學(xué)的研究、治療藥物監(jiān)測、藥代動力學(xué)研究、人群代謝分型研究、體內(nèi)內(nèi)源性物質(zhì)的測定及其它方面（藥物濫用、吸毒、興奮劑檢測、法醫(yī)毒物分析等）的應(yīng)用。7. 藥物在體內(nèi)的代謝包括哪

19、些反應(yīng)？答：一相代謝（氧化反應(yīng)、還原反應(yīng)、水解反應(yīng)）和二相代謝（葡萄糖醛酸結(jié)合、硫酸酯化、甲基化、乙?；?、氨基酸綴合、谷胱甘肽綴合等反應(yīng)）。8. 為什么要研究手性藥物？常用手性HPLC法有哪些？答：因手性藥物兩對映體在體內(nèi)的生物活性有差異，包括藥效學(xué)差異（競爭拮抗等）和藥動學(xué)差異（吸收、分布、代謝、排泄）。為正確評價兩對映體的作用和進(jìn)行對映體藥物的質(zhì)量控制，所以要研究手性藥物。常用手性HPLC法有：手性衍生化法、手性流動相添加劑法、手性固定相法。9. 免疫分析的基本原理與基本條件是什么？答：基本原理：即抗原-抗體結(jié)合反應(yīng)。在反應(yīng)體系中，當(dāng)抗體（Ab）量一定時，抗原（Ag）與標(biāo)記抗原（Ag*）

20、就與抗體發(fā)生競爭性結(jié)合反應(yīng)，生成的Ag*-Ab與Ag的量呈負(fù)相關(guān)，這種特異的競爭性抑制的數(shù)量關(guān)系是免疫分析的定量基礎(chǔ)?；緱l件是：特異性抗體、標(biāo)記抗原、未標(biāo)記抗原（即標(biāo)準(zhǔn)品）。10.什么是體內(nèi)藥物分析？與常規(guī)藥物分析相比，體內(nèi)藥物分析有哪些特點？答：體內(nèi)藥物分析旨在通過各種分析手段，了解藥物在體內(nèi)的數(shù)量與質(zhì)量變化。獲得藥物代謝動力學(xué)的各種參數(shù)和信息，從藥品生產(chǎn)、臨床醫(yī)療、實驗研究等方面對所研究藥物作出估計和評價。與常規(guī)藥物分析相比，體內(nèi)藥物分析具有干擾雜質(zhì)多、樣品量少且濃度變化大，不能再度獲得完全相同的樣品、有時要求較快提供結(jié)果、要有一定的儀器設(shè)備、工作量大等特點。11. 什么叫檢測限？什么叫

21、定量限？兩者的區(qū)別是什么？ 答：檢測限（LOD）表示藥物的最低可測度，不必定量，通常以信噪比（S/N）=23時被測藥物的絕對量表示；定量限即定量下限（LLOQ），表示藥物可定量測定的最低量，須符合一定精密度和準(zhǔn)確度要求，常以標(biāo)準(zhǔn)曲線最低濃度點來確定，或以 S/N=510確定。兩者的區(qū)別主要在于是否有定量要求：LOD沒有定量要求，而LLOQ則有定量要求。12.為什么一些藥物欲獲得相近血藥濃度，個體之間劑量相差可達(dá)數(shù)十倍？答：因為藥物進(jìn)入體內(nèi)到產(chǎn)生一定血藥濃度，要經(jīng)過一系列的過程，而在這一過程中會受到多種因素影響：包括機體因素中的生理因素（性別、年齡、妊娠），病理因素（胃、肝、腎疾病影響藥物的吸收

22、、代謝和排泄），遺傳因素（快代謝、慢代謝）；藥物因素中的劑型因素（影響藥物溶解速度的藥物粒子大小、晶型，輔料，工藝），手性藥物對映體相互作用（藥效學(xué)、藥動學(xué)相互作用）；環(huán)境因素中的化學(xué)物質(zhì)和合并用藥（藥酶誘導(dǎo)劑、抑制劑、藥物相互作用），大氣污染，飲食；以及人體晝夜節(jié)律、營養(yǎng)狀態(tài)、精神狀態(tài)等。13.常用生物樣本有哪些？如何采集、儲存？答：常用生物樣本有：血樣（血漿、血清和全血）、尿樣、唾液。采集與儲存：血漿全血加抗凝劑，離心，取上清液；血清全血離心，取上清液。采血后必須盡快離心分離出血漿或血清，置20以下冷凍保存。尿樣收集服藥后一定時間內(nèi)尿樣，記錄體積，混合均勻后取一定量,測定尿中藥物濃度，計算

23、一定時間內(nèi)尿中藥物的累積量。唾液漱口15分鐘后收集口內(nèi)自然流出或經(jīng)舌在口內(nèi)攪動后流出的混合唾液，離心后取上清液。樣本采集后不能及時測定，可置4冷藏，若放置時間較長，則需-20-80冷凍保存。14.體內(nèi)藥物分析方法有哪些？各有何優(yōu)缺點？答：體內(nèi)藥物分析方法可分為三大類：光譜法包括比色法、紫外法和熒光法。方法優(yōu)點是操作簡便、快速，所需設(shè)備簡單。其缺點是不具備分離功能，選擇性較差，對前處理要求高；比色法和紫外法靈敏度較低。免疫法包括放射免疫、酶免疫、熒光免疫等。方法優(yōu)點是靈敏、專屬，操作簡便、快速，對樣品預(yù)處理要求不高。其缺點是精密度較差，需要試劑盒和專屬儀器。色譜分析法包括HPLC, GC, LC/MS, GC/MS等。方法優(yōu)點是具有分離分析功能，是評價其它方法的參比方法。15.簡述紫外差示光譜法消除干擾的原理。答：被測物在兩種不同的溶液系統(tǒng)中具有大的紫外光譜差別，而干擾物質(zhì)在同樣的兩種溶液系統(tǒng)中的紫外光譜無差別，則可利用被測物在兩種溶液系統(tǒng)中的吸收光譜差值（DA）進(jìn)行定量。由于干擾物質(zhì)的DA值=0，所以消除了干擾，樣品溶液的DA值只與被測物濃度呈