高效薄層掃描法測定雷公藤搽劑中雷公藤內(nèi)酯醇含量(精)

1、高效薄層掃描法測定雷公藤搽劑中雷公藤內(nèi)酯醇含量更新日期：2009-12-21點擊： 寧曉閩王寶奎劉錫鈞提要運用高效薄層掃描法測定雷公藤搽劑中雷公藤內(nèi)酯醇的含量，具有簡便、快速、靈敏度高、重現(xiàn)性好等優(yōu)點。關(guān)鍵詞雷公藤搽劑；雷公藤內(nèi)酯醇；薄層掃描法；含量測定 HPTLCDensitometric Determination of Triptolide (TL in Triptolide Liniment Ning Xiaomin,Wang Baokui, Liu Xijun Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command of PLA,Fuz

2、hou350001AbstractHPTLC densitometric determination of Triptolide (TLin Triptolide Liniment is simple, rapid, sensitive and reproductive.Key wordsTriptolide liniment;Triptolide (TL;HPTLC-Densitometric;Determination.雷公藤搽劑是由雷公藤醋酸乙酯提取物配制成的透皮制劑，用于抗炎、鎮(zhèn)痛、免疫抑制等。雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤內(nèi)酯醇是主要的有效成分，但也是主要的有毒成分 1。為了保證用藥安

3、全有效，探討本品的內(nèi)在質(zhì)量，制定質(zhì)控標準，本文采用高效薄層掃描法對雷公藤搽劑中的雷公藤內(nèi)酯醇進行含量測定。1實驗部分 1.1 儀器與試劑： CS-9000型薄層掃描儀 (日本島津公司，高效硅膠 G 板(青島海洋化工廠，定量毛細管 (美國產(chǎn)；所用試劑均為分析純；雷公藤內(nèi)酯醇對照品 (福建省醫(yī)科所提供，雷公藤醋酸乙酯提取物，雷公藤搽劑 (均自制。 1.2 薄層層析及掃描條件：高效硅膠 G 板為吸附劑，氯仿乙醚 (21 為展開劑 2，上行展開約 9 cm，取出晾干測定，用島津 CS-9000 型薄層掃描儀定位，雷公藤內(nèi)酯醇 Rf 值為 0.74，掃描條件為 S225 nm，反射鋸齒掃描，擺幅 12

4、mm， Y 0.02，資料累積數(shù)為 1，尋峰參數(shù)為 2。 1.3 標準曲線的制備：精密稱取減壓干燥至恒重的雷公藤內(nèi)酯醇對照品 1.022 mg 置 10 ml 容量瓶中，加無水乙醇溶解稀釋至刻度，即得0.1022 g/ 的l對照品液。在高效硅膠 G 板上，用定量毛細管點樣， 1、2、7、10 l的對照品液 (0.1022 g/，l以氯仿乙醚 (21 室溫上行展開 9 cm，取出晾干按選定的掃描條件測定，結(jié)果見表 1。以點樣量為橫坐標，斑點積分值為縱坐標，在0.11.0g范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，求得回歸方程Y=0.0776+3.8928 10×-4 X. =0.9999。 表 1雷公藤內(nèi)酯醇

5、掃描積分值點樣量 ( 積l分面積1 2457 2 4754 512796 7 17738 10 25449 1.4穩(wěn)定性實驗：取對照品溶液5 l，按制備標準曲線的方法點樣，層析，取出晾干后掃描，0.5、12、24、48h 掃描，測定結(jié)果見表2。實驗表明穩(wěn)定性好。表 2穩(wěn)定性實驗結(jié)果測定項 0.5h 12h 24h 48h積分面積12831.574 12789.324 12789.283 13024.471 =12844.250； CV=0.97%1.5雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤內(nèi)酯醇含量測定：精密稱取減壓干燥恒重的雷公藤醋酸乙酯提取物5.005 mg 置 10 ml 容量瓶中，無水乙醇溶解并

6、稀釋至刻度，作為供試液。吸取供試液5 l和對照品液 2、 5 l點樣，按選定的層析條件及掃描條件測定，外標2 點法計算。結(jié)果見表3。 表 3雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤內(nèi)酯醇含量測定點樣量 ( 掃l描面積 樣品中內(nèi)酯醇 測定量 ( g/ 醋l酸乙酯提取物中 內(nèi)酯醇含量(% 5 7310 0.05790.11575 7290 0.05800.11595 74270.05940.1187=0.1168%；CV=1.44% 1.6雷公藤醋酸乙酯提取物加樣回收率測定：在供試液點樣點上，加點雷公藤內(nèi)酯醇對照品液(0.1022g/ l 2或5ll，測定。結(jié)果見表4。 表4雷公藤醋酸乙酯提取物加樣回收率測定

7、樣品中內(nèi)酯醇含量 ( g加入內(nèi)酯 醇量 ( g測定量 ( g回收量 ( g回收率 (% 0.3127 0.2044 0.51010.1974 96.58 0.3084 0.5110 0.8139 0.5055 98.92 0.3244 0.5110 0.8114 0.4870 95.30=96.93%； CV=1.89% 1.7 雷公藤搽劑含量測定：用定量毛細管吸取搽劑10 l，對照品液 (0.1022g/ 、l52 l點樣，按選定的層析及掃描條件測定，外標2 點法計算含量。結(jié)果見表5。 表 5 搽劑中雷公藤內(nèi)酯醇含量測定 點樣量 ( 掃l描面積 樣品中內(nèi)酯醇含量 ( g/ 搽l劑中內(nèi)酯醇含量

8、 ( ×10-3% 10 5934 0.0243 2.4310 60120.0246 2.46 10 6084 0.0249 2.49 =2.4610-3%；×CV=1.22% 1.8 雷公藤搽劑加樣回收率測定：在搽劑點上加點對照品液 (0.1022 g/ 、l25 l。結(jié)果見表6。表6搽劑中加樣回收率測定樣品中含內(nèi)酯醇( g加入酯醇量 ( g測定量 ( g回收量 ( g回收率 (% 0.3777 0.2044 0.5741 0.1964 96.09 0.3716 0.5110 0.8586 0.4870 95.300.3504 0.5110 0.8498 0.4994 97.74 =96.38%；CV=1.29% 2小結(jié)與討論2.1在高效硅膠G 板上，用氯仿乙醚(21 為展開劑上行展開約9 cm，雷公藤內(nèi)酯醇被分離得較好， Rf 值為 0.74。 2.2經(jīng)用島津 CS-9000 型薄層掃描儀進行光譜測定，雷公藤內(nèi)酯醇在 225 nm 處有最大吸收，故選用樣品測定波長為225 nm，因干擾小，采用單波長掃描。 2.3 雷公藤內(nèi)酯醇斑點不經(jīng)顯色，用 CS-9000 型薄層掃描定位斑點在 48 h 內(nèi)定時測定，結(jié)果穩(wěn)定。 2.4 本法靈敏、簡便、快速、穩(wěn)定性好，結(jié)果滿意。 作者單位：寧曉閩，女， 1950 年生，主管藥師 作者單