高中生物選修一知識(shí)點(diǎn)匯總

1、高中生物選修一學(xué)案1.1 果酒、醋的制作一、果酒制作的原理1酵母菌的生物學(xué)特征屬于 生物。新陳代謝類型： 。在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，反應(yīng)式為： 。在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行 ，反應(yīng)式為： 。繁殖方式：酵母菌多以 方式進(jìn)行無(wú)性生殖，也可以通過(guò)形成孢子進(jìn)行有性生殖。 2在葡萄酒的自然發(fā)酵過(guò)程中，起主要作用的是附著在葡萄皮上的 。3果酒制作時(shí)需控制溫度在 。4紅色葡萄果酒的顏色成因：在發(fā)酵過(guò)程中，隨著 的提高，紅葡萄皮的 進(jìn)入發(fā)酵液，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色。5在缺氧、 的發(fā)酵液中， 可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他 都因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受到 。二、果醋制作的原理1醋酸菌的生物學(xué)特性屬于 生物。新

2、陳代謝類型： 。與其呼吸作用有關(guān)的酶主要分布在細(xì)胞膜上。繁殖方式： 。2果醋制作的原理當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成 。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)?，再變?yōu)?。反應(yīng)式為 。3果醋制作時(shí)需控制的條（1）環(huán)境條件： 充足。（2）溫度：醋酸菌生長(zhǎng)的最適溫度為 。（3）菌種來(lái)源：到當(dāng)?shù)?購(gòu)買，或從 中分離醋菌。4在變酸的酒的表面觀察到的菌膜是 在液面大量繁殖而形成的。溶液內(nèi)部能形成菌膜嗎？為什么？ 三、流程圖 葡萄 四、實(shí)驗(yàn)步驟對(duì)發(fā)酵瓶、紗布、榨汁機(jī)等實(shí)驗(yàn)用具進(jìn)行清洗并消毒。先用溫水反復(fù)沖洗幾次，再用體積分?jǐn)?shù)為_ 擦拭消毒，晾干待用。取葡萄500g，用清水沖洗12遍除去污物（注意

3、_ _）。去除葡萄枝梗和腐爛的子粒。用榨汁機(jī)榨取葡萄汁后，將其裝入發(fā)酵瓶中。（如果沒(méi)有合適的發(fā)酵裝置，可用500mL的_替代。但注入的果汁量不要超過(guò)塑料瓶總體積的_。） 將發(fā)酵瓶置于適宜的溫度（_）下發(fā)酵。 由于發(fā)酵旺盛期CO2的產(chǎn)量非常多，因此需要及時(shí)_，以防止發(fā)酵瓶爆裂。（如果是簡(jiǎn)易發(fā)酵裝置，每天_瓶蓋24次。進(jìn)行排氣。） 10天后，取樣檢驗(yàn)。例如，可以檢驗(yàn)酒味、酒精的含量、進(jìn)行酵母菌的鏡檢等工作。 當(dāng)果酒制成以后，可在發(fā)酵液中加入醋酸菌（或醋曲），然后移至_條件下發(fā)酵，適時(shí)用氣泵向發(fā)酵液中_。（如果沒(méi)有充氣裝置，可以將瓶蓋打開，在瓶口上蓋上_，以減少空氣中塵土等的污染。） 五、操作提示（

4、一）材料的選擇與處理選擇_的葡萄，榨汁前先將葡萄進(jìn)行_，并除去_ _。（二）防止發(fā)酵液被污染1榨汁機(jī)要清洗_，并_。2發(fā)酵瓶要清洗_，用體積分?jǐn)?shù)_的酒精消毒。3裝入葡萄汁后，_充氣口。（三）控制好發(fā)酵條件1葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留出大約_的空間。2制作葡萄酒過(guò)程中，將溫度嚴(yán)格控制在_，時(shí)間控制在_左右，可通過(guò)出料口對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測(cè)。3制作葡萄醋的過(guò)程中，將溫度嚴(yán)格控制在_，時(shí)間控制在_左右，并注意適時(shí)通過(guò)充氣口_。六、課題延伸果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用_來(lái)檢驗(yàn)。在_條件下重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)_。檢測(cè)時(shí)，先在試管中加入發(fā)酵液2mL，再滴入物質(zhì)的量的濃度為3mol/L的_3滴，振

5、蕩混勻，最后滴加常溫下_3滴，振蕩試管，觀察顏色的變化。七、旁欄思考題1你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？為什么？答：應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時(shí) 。2你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？答：需要從發(fā)酵制作的過(guò)程進(jìn)行全面的考慮。例如， 。3制葡萄酒時(shí)，為什么要將溫度控制在1825 ？制葡萄醋時(shí)，為什么要將溫度控制在3035 ？答：溫度是 。20 左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長(zhǎng)溫度為3035 ，因此要將溫度控制在3035 。4制葡萄醋時(shí)，為什么要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣？答： 。5發(fā)酵裝置的設(shè)計(jì)討論請(qǐng)分析此裝置中的充氣口、排氣

6、口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接？結(jié)合果酒、果醋的制作原理，你認(rèn)為應(yīng)該如何使用這個(gè)發(fā)酵裝置？（1）充氣口是 ；（2）排氣口是 ；（3）出料口是 。（4）排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是 。（5）使用該裝置制酒時(shí)， ；制醋時(shí)， 。6為什么在酒精發(fā)酵過(guò)程中往往“先通氣后密封”？ “通氣”的目的是 ；“密封”的目的是 。7酒精發(fā)酵過(guò)程中發(fā)生“先來(lái)水后來(lái)酒”現(xiàn)象，其原因是什么？ 。8在實(shí)際生產(chǎn)中，還要對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行煮沸處理，其目的是什么？ 。9在醋酸發(fā)酵過(guò)程中需要向發(fā)酵液中補(bǔ)充氧氣，最經(jīng)濟(jì)實(shí)用的方法是？ 。1.2腐乳的制作一、腐乳制作的原理1參與

7、豆腐發(fā)酵的微生物有 、 、 、 等多種，其中起主要作用的是 。2毛霉是一種 ，分布廣泛，常見于 、 蔬菜、谷物上，具有發(fā)達(dá)的 。3.毛霉等微生物產(chǎn)生的 能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子 和 ,產(chǎn)生的 可將脂肪分解為 和 。在多種微生物的 作用下，普通的豆腐轉(zhuǎn)變成風(fēng)味獨(dú)特的腐乳。二、制作腐乳的實(shí)驗(yàn)流程(一)毛霉的生長(zhǎng)1.豆腐塊表面長(zhǎng)滿菌絲,溫度應(yīng)控制在 (此溫度不適于細(xì)菌、酵母菌和曲霉的生長(zhǎng)，而適于毛霉慢慢生長(zhǎng)),并保持一定的濕度,約 后,毛霉開始生長(zhǎng), 天后,菌絲生長(zhǎng)旺盛， 天后，豆腐塊表面布滿菌絲。2.豆腐塊上生長(zhǎng)的毛霉來(lái)自空氣中的 。現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在 的條件下， 將優(yōu)良 直接接種在豆腐上，

8、這樣可以避免其他菌種的污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。(二)加鹽腌制1.將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊分層整齊地?cái)[放在瓶中,同時(shí)逐層 ,隨著層數(shù)的加高而增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要 。2.加鹽可以 ，使豆腐塊變硬，后期制作時(shí)不會(huì)過(guò)早酥爛；能夠 ，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。3.注意控制鹽的用量。鹽的濃度過(guò)低， ；鹽的濃度過(guò)高， 。(三)配制鹵湯1.鹵湯直接關(guān)系到腐乳的 、 、 。鹵湯是由 和各種 配制而成。 2.鹵湯中酒的含量一般控制在 左右，酒精含量越高，對(duì) 的抑制作用也越大,使腐乳 ；酒精含量過(guò)低， 的活性高,加快 的水解,雜菌繁殖快,豆腐易腐敗,難以成塊。加酒可以 ，同時(shí)能使腐乳具有 。3.香辛料可以 ,也具有 的作

9、用。（四）防止雜菌污染1.用來(lái)腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用 （煮沸消毒法）。2.裝瓶時(shí)，操作要 。整齊地?cái)[放好豆腐、加入鹵湯后，要用膠條將瓶口 。封瓶時(shí)，最好將瓶口通過(guò) ，防止瓶口被污染。三、思考與討論1王致和為什么要撒許多鹽，將長(zhǎng)毛的豆腐腌起來(lái)？鹽在該過(guò)程中起什么作用？ 2豆腐坯用食鹽腌制，其作用是什么？（ ）滲透鹽分，析出水分 給腐乳以必要的咸味 防止毛霉繼續(xù)生長(zhǎng)和污染的雜菌繁殖 浸提毛霉菌絲上的蛋白酶A B C D3你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí)，解釋豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事？ 4我們平常吃的豆腐，哪種適合用來(lái)做腐乳？ 5吃腐乳時(shí)，你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢

10、？它對(duì)人體有害嗎？它的作用是什么？ 1.3制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量一、乳酸菌代謝類型為 ，在 情況下，將葡萄糖分解成乳酸，反應(yīng)式為： 常見的種類有 和 。常用于生產(chǎn)酸奶的是 。在 、土壤、 、人或動(dòng)物的 內(nèi)等均有分布。二、亞硝酸鹽 粉末、易溶于 。在食品生產(chǎn)中常用作食品 。膳食中的亞硝酸鹽一般不危害人體健康，當(dāng)人體攝入總量達(dá) 時(shí)，會(huì)引起中毒；當(dāng)攝入總量達(dá) 時(shí)，會(huì)引起死亡。絕大多數(shù)亞硝酸鹽隨 排出，但在特定條件下，即適宜的 、 和一定的 作用，會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)- 。三、泡菜腌制過(guò)程1.泡菜壇的選擇應(yīng)選用無(wú)砂眼、無(wú)裂紋等的合格的泡菜壇。不合格的泡菜壇容易引起 。檢查時(shí)，可將壇口 壓入水中，看壇內(nèi)

11、有無(wú) 現(xiàn)象。2.腌制（1）過(guò)程：將清水和鹽以 的質(zhì)量比例配制鹽水。將鹽水 后備用。將蔬菜裝至 時(shí)加入香辛料，裝至 時(shí)，加入鹽水，要使鹽水 ，蓋好壇蓋。將壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內(nèi)的 環(huán)境（2）條件：控制腌制的 、 和 。溫度 、食鹽用量 ，腌制時(shí)間 ，容易造成 ， 含量增加。一般在腌制10天后，亞硝酸鹽的含量 。四、亞硝酸鹽的測(cè)定1.原理：（1）在 條件下，亞硝酸鹽與 發(fā)生 反應(yīng)后，與 結(jié)合形成 色染料。（2）將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的 進(jìn)行目測(cè)比較，可以大致 出泡菜中亞硝酸鹽的含量。計(jì)算公式為： 中亞硝酸鹽含量（mg） （40mL濾液的質(zhì)量，kg）。2.測(cè)定步驟： （1）配制溶液

12、配置的溶液有 、 、 、 、 、 、 。其中需要避光保存的溶液是 ； 。（2）配制標(biāo)準(zhǔn)顯色液用 吸取體積0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5mL的 溶液分別置于比色管中，另取1支比色管作為 。向各管加入2.0mL ，混勻，靜置35分鐘。向各管加入1.0mL 溶液。最后用 定容到50mL。（3）制備樣品處理液榨汁得濾液。取濾液倒入容量瓶，添加 和 ，搖床振蕩1h，再加 ，用蒸餾水定容到后，立即過(guò)濾。將濾液移入容量瓶，加入 定容后過(guò)濾，獲得 的濾液。（4）比色將濾液移入比色管中，并編號(hào)。分別依次加入 和 ，并定容后混勻靜置觀察顏色變化，并與 比較，記錄亞硝酸鹽含量。計(jì)算五、思考與討論1為

13、什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶？2日常生活中不宜食用放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)和變質(zhì)蔬菜的原因是什么？3經(jīng)測(cè)定某樣品濾液中亞硝酸鹽含量為5.0µg，40mL濾液的質(zhì)量為41.3g，則泡菜中亞硝酸鹽含量為4為什么泡菜壇內(nèi)有時(shí)會(huì)長(zhǎng)一層白膜？這層白膜是怎樣形成的？2.1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一、培養(yǎng)基1概念：人們按照微生物對(duì) 的不同需求，配制出供其 的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)叫培養(yǎng)基。可分為 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基。 2營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有 、 、 和 ，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì) 、 以及 的要求。 3培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需在培養(yǎng)基中添加 、培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基PH調(diào)至 、培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將PH調(diào)至 、培養(yǎng)厭氧微生物則需提供

14、 條件。思考1：從細(xì)胞的化學(xué)元素組成來(lái)看，培養(yǎng)基中為什么都含有這些營(yíng)養(yǎng)成分？答： 二、無(wú)菌技術(shù)(一)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 ，具體操作如下：來(lái)源1對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的 、操作者的 和 進(jìn)行 。2將用于微生物培養(yǎng)的 、 和 等器具進(jìn)行 。3為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 附近進(jìn)行。4實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與 相接觸。(二)消毒和滅菌1消毒是指 。常用的方法有 、 、 消毒法。2滅菌是指 。常用的方法有： 、 、 滅菌。分別適用于那些用具？ 思考2：無(wú)菌技術(shù)除了防止培養(yǎng)物被污染外，還具有的目的是什么？答： 。思考3：利用干熱滅菌箱對(duì)玻璃器皿滅菌時(shí)物品不能擺得太擠，目的是什么？答

15、： 。思考4：物品裝入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后，要首先打開排氣閥，煮沸并排除鍋內(nèi)冷空氣，其目的是 ；隨后關(guān)閉排氣閥繼續(xù)加熱，氣壓升至 ，溫度為 ，并維持 min；最后切斷熱源，使溫度自然降溫，氣壓務(wù)必降至 時(shí)打開鍋蓋，其目的是防止 。三、實(shí)驗(yàn)操作-大腸桿菌的純化培養(yǎng)（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 1操作步驟是： 、 、 、 、 。思考5：在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的稱量操作中，動(dòng)作要迅速，原因是什么？溶化操作中需要不斷用玻璃棒攪拌的目的是什么？答： ； 。思考6：牛肉膏和蛋白胨主要為微生物提供什么等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)？答： 。2倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至 左右時(shí)在酒精燈火焰附近操作進(jìn)行。其過(guò)程是：在火焰旁右

16、手拿 ，左手 ；使錐形瓶的瓶口 ；左手將培養(yǎng)皿 ，右手 ，立刻蓋上皿蓋。待平板冷卻凝固后，將平板 。思考7：錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰的目的是什么？答： 思考8：倒平板的目的是什么？答： 思考9：若皿蓋和皿底之間粘有培養(yǎng)基，則該平板能否培養(yǎng)微生物？為什么？答： 思考10：配制斜面培養(yǎng)基作用是什么？，試管為什么要加塞棉塞？答： （二）純化大腸桿菌微生物接種最常用的是 法和 法。還有 和 等。1平板劃線法是 的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。其操作步驟是：將 在酒精燈火焰上灼燒直至 。在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開大腸桿菌的菌種試管的棉塞。將菌種試管口通過(guò)火焰達(dá)到 的目的。將冷卻的接種環(huán)

17、伸入 。將菌種試管口再次通過(guò)火焰后塞上棉塞。將皿蓋打開一條縫隙，把接種環(huán) ，蓋上皿蓋，不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基。灼燒接種環(huán)，冷卻后從 劃線。重復(fù)上述過(guò)程，完成三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將 相連。將平板 放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。思考11：取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是什么？為什么除第一次劃線外，其余劃線前都要灼燒接種環(huán)？取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進(jìn)行，其目的是？最后灼燒接種環(huán)的目的是？ 在第1次劃線后都從上次劃線末端開始的目的是？答： 2稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的 ，然后將 進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，即可獲得單個(gè)細(xì)菌形成的 。系列稀釋操作步驟為：取盛有 mL水的無(wú)菌試管6支試管 ，編號(hào)101、

18、102、103、104、105、106。用灼燒冷卻的移液管吸取 mL菌液注入編號(hào)為101試管中，并吹吸3次使之混勻。從101倍液中吸取 mL菌液注入到編號(hào)為102試管內(nèi)吹吸均勻，獲得102倍液。依此類推。思考12：系列稀釋操作的注意事項(xiàng)是什么？答： 四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)1.培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是什么？，若有菌落形成，說(shuō)明什么？ 2.在肉湯培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落顏色？形態(tài)？ 3.培養(yǎng)12h和24h后的菌落大小？；菌落分布位置？原因？ 思考13：在某培養(yǎng)基上出現(xiàn)了3種特征不同的菌落是什么原因？ 思考14：頻繁使用的菌種利用什么法保存？長(zhǎng)期保存菌種的方法是什么？ 22 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)

19、數(shù)一、課題背景1尿素CO(NH2)2是一種重要的氮肥，農(nóng)作物 （能，不能）直接吸收利用，而是首先通過(guò)土壤中的細(xì)菌將尿素分解為 ，這是因?yàn)榧?xì)菌能合成 。2以土壤中能分解尿素的細(xì)菌為研究對(duì)象，要達(dá)到的兩個(gè)主要目的是： ； 。二、研究思路 (一)篩選分解尿素的菌株1篩選思路：在尋找 時(shí)，要根據(jù)他對(duì) 的要求，到相應(yīng)的 中去尋找?！舅伎家弧吭鯓訉ふ夷透邷氐拿改?？從熱泉中把耐熱細(xì)菌篩選出來(lái)，這是因?yàn)闊崛母邷貤l件 了絕大多數(shù)微生物，而使 的Taq細(xì)菌脫穎而出。2篩選原理人為提供 菌株生長(zhǎng)的條件（包括 等），同時(shí) 其他微生物生長(zhǎng)。3 篩選方法：選擇培養(yǎng)4選擇培養(yǎng)基（1）概念：選擇培養(yǎng)基是指允許 微生物生長(zhǎng)，

20、同時(shí) 其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。目的菌株就是利用 對(duì)微生物進(jìn)行 ，從而獲得所需的 。（2）原理：根據(jù)不同微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性不同而制備培養(yǎng)基。（3）方法：在培養(yǎng)基中加入某種 （不作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，對(duì)分離的微生物無(wú)害）， 其他微生物而選擇所需微生物。如在基本培養(yǎng)基中加入 可以抑制細(xì)菌和放線菌的生長(zhǎng)，從而將酵母菌和霉菌分離出來(lái)。改變培養(yǎng)基中的 。如缺乏氮源的選擇培養(yǎng)基，可用來(lái)分離自主固氮微生物，因?yàn)榉枪痰⑸锊荒茉诖伺囵B(yǎng)基上生存；以 為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可用來(lái)分離分解尿素的微生物；改變微生物的 ，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。（4）實(shí)例：分解尿

21、素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的選擇培養(yǎng)基【思考二】在分離分解尿素的細(xì)菌所用的培養(yǎng)基即為 。其選擇機(jī)制是 的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng) ?！舅伎既吭谠撆囵B(yǎng)基配方中，為微生物的生長(zhǎng)提供碳源的是 ，提供氮源的的是 ，瓊脂的作用是 。只有能合成 （分解尿素的酶）的微生物才能分解尿素。(二)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目1方法：常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中 菌數(shù)目的方法是 。2理論依據(jù)：即當(dāng)樣品的 足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于 。通過(guò)統(tǒng)計(jì) ，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。另外， 也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。計(jì)算方法：從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)，計(jì)算方法是

22、 注意事項(xiàng)：一般來(lái)說(shuō)，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目 。這是因?yàn)楫?dāng) 時(shí)，平板上觀察到的只是 。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用 而不是活菌數(shù)來(lái)表示。為使結(jié)果更接近真實(shí)值，要設(shè) ，取其 ，可將 稀釋度的樣品加到 的平板上，經(jīng)涂布，培養(yǎng)計(jì)算出菌落的 。【思考四】比較教材中兩位同學(xué)的操作方法，第 位同學(xué)的結(jié)果接近真實(shí)值。你認(rèn)為這兩位同學(xué)的實(shí)驗(yàn)需要改進(jìn)操作的是 ，需設(shè)置 ；第二位同學(xué)統(tǒng)計(jì)的三個(gè)菌落數(shù)相差太大，說(shuō)明 ，如果某個(gè)平板的細(xì)菌數(shù)量與其他平板差別太大，應(yīng)舍棄并分析產(chǎn)生差異的原因， ?！舅伎嘉濉坷孟♂屚坎计桨宸ǔ晒y(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是 ，直接影響平板上生長(zhǎng)的 。(三)設(shè)置對(duì)照設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除 對(duì)實(shí)

23、驗(yàn)結(jié)果的影響，提高 可信度。【思考六】請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)本實(shí)驗(yàn)的對(duì)照實(shí)驗(yàn)組：方案一：其他同學(xué)用A同學(xué)的 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以證明同學(xué) 是否有誤或 的配制是否有問(wèn)題。方案二：A同學(xué)以不接種的 作為空白對(duì)照，以證明培養(yǎng)基是否受到 。三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容包括 、 、 和 等。2實(shí)驗(yàn)流程： 菌落計(jì)數(shù)配制土壤溶液系列稀釋涂布平板與培養(yǎng)3實(shí)驗(yàn)過(guò)程：土壤取樣：土壤微生物主要分布在距地表 cm富含 近 性的土壤中，約 為細(xì)菌。土壤取樣時(shí)，一般要鏟除 。土壤是微生物的 。樣品的稀釋：分離不同的微生物采用不同的 ，原因是不同微生物在土壤中含量 。 其目的是保證獲得菌落數(shù) 之間、 的平板。細(xì)菌稀釋度為 ，放線菌稀釋度為 ，真菌

24、稀釋度為 。第一次做實(shí)驗(yàn)時(shí)可以將稀釋的范圍 一點(diǎn)。涂布平板與培養(yǎng)：培養(yǎng)不同微生物往往需要不同培養(yǎng)溫度。細(xì)菌一般在 下培養(yǎng)12d，放線菌一般在 下培養(yǎng)57d，霉菌一般在2528的溫度下培養(yǎng) 。菌落計(jì)數(shù)：在菌落計(jì)數(shù)時(shí)，每隔 統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目。選取菌落數(shù)目 時(shí)的記錄作為結(jié)果，以防止因 而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目，使每個(gè)菌體都能形成肉眼可觀察到的菌落。菌落的特征包括 等方面?！舅伎计摺客寥牢⑸锓N類最多、數(shù)量最大的原因是什么？ 4操作提示：取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都要 。應(yīng)在 旁稱取土壤 。將稱好的土樣倒入盛有 無(wú)菌水的 中，塞好棉塞。在稀釋土壤溶液的過(guò)程中，每一步都要在 旁進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)時(shí)要對(duì)

25、作好標(biāo)記。注明 等。為了提高效率，在操作時(shí)更加有條不紊，應(yīng)當(dāng) 時(shí)間?！舅伎及恕吭谘芯课粗⑸飼r(shí)務(wù)必規(guī)范操作，以防被 感染，實(shí)驗(yàn)后一定要洗手。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)1對(duì)分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定，還需要借助 的方法。2在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成了氨。氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性 ，PH 。因此，我們可以通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基 變化來(lái)判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。3在以 為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入 指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果PH升高，指示劑將變 ，說(shuō)明該細(xì)菌能夠 。思考九、測(cè)定飲水中大腸桿菌數(shù)量的方法是將一定體積的水用細(xì)菌過(guò)濾器過(guò)濾后，將濾膜放到 培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌菌落呈現(xiàn) 色，通過(guò)記述得出水

26、樣中大腸桿菌的數(shù)量。你認(rèn)為在該實(shí)驗(yàn)中至少應(yīng)取 個(gè)水樣。2.3 分解纖維素的微生物的分離一、課題背景纖維素是一種由 首尾相連而成的高分子化合物，植物每年產(chǎn)生的纖維素能被土壤中的某些微生物分解利用，是因?yàn)樗鼈兡墚a(chǎn)生 。對(duì)這些微生物的研究與利用，使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn) ，用 處理服裝面料等。二、基礎(chǔ)知識(shí)（一）纖維素和纖維素酶1 纖維素為白色、無(wú)氣味的纖維狀結(jié)構(gòu)物質(zhì)，不溶于水，也不溶于一般 ；纖維素是地球上含量最豐富的 類物質(zhì)，植物根、莖、葉等器官都含大量的纖維素，其中 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。許多商品纖維素都是由天然纖維素制得的，如水溶性的 （ ）、不溶于水的 （Avicel）等

27、；由于膳食纖維具有刺激胃腸蠕動(dòng)，促進(jìn)消化液分泌，有助于食物的消化和排便的功能，被稱為“第七營(yíng)養(yǎng)”。2纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即 、 和 ，前兩種酶使纖維素分解成 ，第三種酶將纖維素分解成 ，為微生物提供了 。3.纖維素酶作用的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 在2支20mL的試管中，分別加入寬1cm，長(zhǎng)6cm的 ，在分別加入pH為4.8、濃度為0.1mol/L的 10mL、11mL。其中10mL的試管中加入1mL （7080U/mL），固定，搖床振蕩反應(yīng)1h，觀察結(jié)果。一段時(shí)間后， 的試管中濾紙條被分解。（二）纖維素分解菌的篩選纖維素分解菌的篩選方法是 ，這種方法能夠通過(guò)顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物

28、進(jìn)行篩選。其原理是：剛果紅（CR）是一種染料，它可以與 形成 ，但并不和水解后的 和 發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被 分解后， 的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以 為中心的 。這樣我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。三、實(shí)驗(yàn)操作分離分解纖維素的微生物實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣 梯度稀釋 ?！舅伎肌勘緦?shí)驗(yàn)的流程與課題2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同？提示：課題2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上，直接分離得到菌落。本課題通過(guò)選擇培養(yǎng)，使纖維素分解菌得到增殖后，再將菌液涂布在鑒別培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。(一) 土壤取樣采集土樣時(shí)，應(yīng)選擇 的環(huán)境。若找不到合適環(huán)境，可將 ，如濾

29、紙等，埋在 中一個(gè)月左右，再?gòu)?濾紙上篩選分解纖維素菌。【思考】為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌？由于生物與環(huán)境的互相依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對(duì)提高，因此從這種土壤中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境?！舅伎肌繉V紙埋在土壤中有什么作用？你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深？將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)聚集，實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右的腐殖土壤中。（二）選擇培養(yǎng)1.選擇培養(yǎng)的目的：增加 ，以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。2.制備選擇培養(yǎng)基：參照課本29頁(yè)旁欄中的比例配置，回答下列問(wèn)題：（1）旁欄中的配

30、方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基？為什么？答： 培養(yǎng)基，原因是配方中無(wú) 。（2）這個(gè)培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有選擇作用？如果具有，是如何進(jìn)行選擇的？答： 選擇作用，因本配方中的碳源主要是 ，所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖。（3）你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基的作用？答：用 培養(yǎng)基與之對(duì)照。3.選擇培養(yǎng)操作方法將土樣加入裝有30ml 的錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖床上，在一定 下震蕩培養(yǎng)12天，直至 。吸取一定的培養(yǎng)液（如5mL），轉(zhuǎn)移至另一瓶新鮮的 中，進(jìn)行重復(fù)選擇培養(yǎng)。稀釋涂布到 的培養(yǎng)基上?！舅伎肌繛槭裁催x擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物？在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條

31、件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮”的作用（三）梯度稀釋按照課題1的稀釋操作方法，將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋101 106倍。吸取適量的稀釋后培養(yǎng)液，涂布到 的培養(yǎng)基上。（四）將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上1.制備培養(yǎng)基:參照課本旁欄中的配方制備鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基。（1）按照每200mL培養(yǎng)基加入1mL質(zhì)量濃度為10mg/mL的CR溶液的比例配置培養(yǎng)基：將稀釋度為104106的菌懸液各取0.1mL涂布到平板培養(yǎng)基上，30倒置培養(yǎng)，待培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落后，產(chǎn)生 的菌落周圍將會(huì)出現(xiàn)明顯的 。（2）不加CR溶液的培養(yǎng)基：將稀釋

32、度為104106的菌懸液各取0.1mL涂布到平板培養(yǎng)基上，30倒置培養(yǎng)。長(zhǎng)出菌落后，在培養(yǎng)基上覆蓋質(zhì)量濃度為1mg/mL的 ，10至15min后倒去，再加入濃度為1mol/L的NaCI溶液，15分鐘后倒去，此時(shí)，產(chǎn)生 的菌落周圍將會(huì)出現(xiàn) 。（五）挑選產(chǎn)生透明圈的菌落【思考】?jī)煞N剛果紅染色法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足？方法一：缺點(diǎn)是操作煩瑣，加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜；優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。方法二：優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，不存在菌落混雜問(wèn)題。缺點(diǎn)一是：由于培養(yǎng)基中（纖維素粉、瓊脂、土豆汁）還含有淀粉類物質(zhì)，可以使能產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)，產(chǎn)生模糊的透明圈；缺點(diǎn)二是：有些微生物具有降解色素的能力，它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)降解剛果紅，形成明顯的透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)（一）培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落？設(shè)置對(duì)照，若對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中 長(zhǎng)則說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生 的菌落，則說(shuō)明可能獲得了分解纖維素的微生物。（二）分離的結(jié)果是否一致如果不同，分析產(chǎn)生不同結(jié)果的原因。五、課題延伸本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選，但是