動物細胞融合與單克隆抗體教師

1、動物細胞融合與單克隆抗體【考點要求：】1、比較動物細胞融合與植物體細胞雜交的異同2、理解和掌握動物細胞融合的原理、過程和意義。3、理解和掌握單克隆抗體制備的過程的步驟和應(yīng)用【考點解析】1、動物細胞融合與植物體細胞雜交的異同項目細胞融合的原理細胞融合的方法誘導(dǎo)手段用途植物體細胞雜交細胞膜的流動性植物細胞的全能性用纖維素酶、果膠酶去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電刺激、振動、聚乙二醇（PEG）誘導(dǎo)克服遠源雜交不親和，獲得雜種植株動物細胞融合細胞膜的流動性用胰蛋白酶使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合除應(yīng)用植物細胞雜交手段外，還有用滅活病毒誘導(dǎo)制備單克隆抗體【例1】動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的

2、是誘導(dǎo)融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成雜種細胞A.B.C.D.2、單克隆抗體的制備（1）單克隆抗體：一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B淋巴細胞，形成細胞群，其產(chǎn)生的抗體就是單克隆抗體。【例2】下列哪項屬于克隆A將雞的某個DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B將抗藥菌的某基因引入草履蟲的細胞內(nèi)C將鼠骨髓瘤細胞與經(jīng)過免疫的脾細胞融合成雜交瘤細胞 D將某腫瘤細胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個細胞群體制備過程：第一步：將 注射到小鼠體內(nèi)進行免疫；第二步：從該小鼠脾臟中獲得能夠產(chǎn)生抗體的細胞，與小鼠的細胞在，或聚乙二醇的誘導(dǎo)下融合；

3、第三步：在特定的培養(yǎng)基中，篩選出細胞；第四步：克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞，進行抗體檢測，從中挑選出的細胞群，繼續(xù)培養(yǎng)；第五步：將該雜交瘤細胞在 條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠 內(nèi)增殖，然后再從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取，分離純化單克隆抗體；（2）產(chǎn)生抗體的細胞是：漿細胞產(chǎn)生單克隆抗體的細胞是：雜交瘤細胞（3）雜交瘤細胞的特點：既能無限增殖，又能分泌特異性抗體（4）第一次篩選是為了獲得：雜交瘤細胞 第二次篩選時為了獲得：既能無限增殖，又能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞（5）單克隆抗體的優(yōu)點是：特異性強、靈敏度高、可大量制備（6）單克隆抗體可以作為診斷試劑，準確識別各種抗原物質(zhì)，與抗原的特異性結(jié)合具有準確、高效、

4、簡易、快速的特點。單克隆抗體還可以用于治療疾病和運載藥物：主要用于治療癌癥。單克隆抗體作為載體，運載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈”，準確殺傷癌變細胞。【例3】利用細胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是 A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體 B.體外培養(yǎng)單個B淋巴細胞可以獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體 C.將等量B淋巴細胞和骨髓瘤細胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細胞均為雜交瘤細胞 D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者【高考回顧】1、（01天津、山西卷）科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細胞與某種

5、細胞融合，得到雜交細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是 A經(jīng)過免疫的B淋巴細胞B不經(jīng)過免疫的T淋巴細胞 C經(jīng)過免疫的T淋巴細胞D不經(jīng)過免疫的B淋巴細胞2、（04全國一）用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是A將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞B用纖維素酶處理B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞C用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合D篩選雜交積累細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體3、（05高考）關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是A可以制成診斷盒用于疾病的珍斷 B可以與藥物結(jié)合，用于病變細胞的定向治療C

6、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)4、（06廣東卷）單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯誤的是 A特異性強、靈敏度高 B與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈” C體外培養(yǎng)B淋巴細胞可大量分泌單克隆抗體 D由效應(yīng)B細胞與骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞分泌5、（08全國卷一）5下列關(guān)于細胞工程的敘述，錯誤的是A電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動物細胞融合B去除植物細胞的細胞壁和將動物組織分散成單個細胞均需酶處理C小鼠骨髓瘤細胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細胞融合可制務(wù)單克隆抗體D某種植物甲乙兩品種的體細胞雜種與甲乙兩品種雜交后代

7、的染色體數(shù)目相同6、（11江蘇）關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯誤的是 A蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì) B體細胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體 C植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒 D動物細胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動物的培育【反饋練習】1在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是（ ）A結(jié)果是相同的B雜種細胞的形成過程基本相同C操作過程中酶的作用相同D誘導(dǎo)融合的手段相同2、單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是（ ） 淋巴細胞 小鼠骨髓瘤細胞 B淋巴細胞自身融合細胞 小鼠骨髓瘤細胞自身融合細

8、胞 雜交瘤細胞A BC D 3、試管嬰兒、試管苗、克隆羊三者均屬于生物工程技術(shù)的杰出成果,下面對其生物學(xué)原理及技術(shù)的敘述正確的是 ( ) A都屬于無性生殖,能保持母本性狀 B都是細胞工程的技術(shù)范圍C都充分體現(xiàn)了體細胞的全能性 D都不會發(fā)生基因重組和變異4、如圖表示用于預(yù)防和治療禽流感的單克隆抗體生產(chǎn)過程,請回答下列問題： (1)若A細胞是小鼠的骨髓瘤細胞,則B細胞取自 體內(nèi)的B淋巴細胞,促進d過程的 誘導(dǎo)劑是 。 (2)假設(shè)僅考慮兩個細胞的融合,則可形成 種類型的C細胞,因此需用 _篩選出具有 特點的D細胞用于 培養(yǎng)。D細胞的名稱是 。 (3)在細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基中除需要加入糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽和微量元素外,通常還需加入 等一些天然成分。 (4)目前注射禽流感疫苗是預(yù)防禽流感的一種措施。決定禽流感病毒在人體細胞中增殖變化的物質(zhì)是 參考答案：(1)感染禽流感病毒的動物或人 聚乙二醇或滅活的病毒 (2)3 選擇培養(yǎng)基 既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體 雜交瘤細胞 (3)血清、血漿 (4)禽流感病毒的RNA 【創(chuàng)新應(yīng)用】右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計的生產(chǎn)破傷風桿菌抗體的實驗方案。據(jù)圖回答：（1）該方案能達到預(yù)期效果嗎？。原因是_。（2）圖中為_過程，常