飼料成分測定

1、飼料營養(yǎng)成分的測定1、飼料中水分的測定飼料中的水分存在形式有兩種，一是游離水（又叫初水），二是吸附水。因此水分的測定一般包括初水和吸附水的測定，總水的計(jì)算。有些飼料如子實(shí)、糠麩類飼料和秸桿、干草等都處于風(fēng)干狀態(tài)，因此只測吸附水（也就是總水），不測初水和計(jì)算總水分的含量。1.1 初水分的測定1.1.1 儀器設(shè)備工業(yè)天秤，電熱式恒溫烘箱，剪刀，粉碎機(jī)，樣本瓶，藥匙，培養(yǎng)皿，篩子。1.1.2 測定原理含水分高的新鮮飼料在60-65烘箱中烘干至恒重，逸失的重量即為初水。1.1.3 測定步驟取平均樣品200-300g，置于已知重量的培養(yǎng)皿中，先在80條件下，烘15min，然后放在60-65的烘箱中，進(jìn)行

2、干燥，干燥到樣品容易磨碎（5-6h）。將烘干的樣品放在室內(nèi)自然的條件下冷卻4-6h（不少于2h），便成為風(fēng)干狀態(tài)。稱重：重復(fù)上述操作，直到兩次稱重之差不超過0.5g為止。1.1.4計(jì)算：初水分=烘干前后重量之差/鮮樣品重*100%1.2 吸附水分測定（干物質(zhì)測定）1.2.1 測定原理在105±2烘箱內(nèi)，在大氣壓下烘干，直至恒重，逸失的重量為試樣吸附水分。在該溫度下干燥，不僅飼料中的吸附水被蒸發(fā)，同時(shí)一部分膠體水分也被蒸發(fā)，另外還有少量揮發(fā)油揮發(fā)。1.2.2 儀器設(shè)備稱量瓶 ，烘箱，藥匙，干燥器（用氯化鈣或變色硅膠作干燥劑），分析天平，坩堝鉗，小毛刷。1.2.3 測定步驟潔凈的稱量瓶，

3、在105烘箱中烘1h，取出，在干燥器中冷卻30min ，稱重，準(zhǔn)確至0.0002g。重復(fù)以上動(dòng)作，直至兩次重量之差小于0.0005g為恒重。在已知重量的稱量瓶中稱取兩份平行試樣，每份2-5g（含水重0.1g以上，樣厚4mm以下），準(zhǔn)確至0.0002g，稱量瓶不蓋蓋，在105烘箱中烘3h（溫度到達(dá)105開始計(jì)時(shí)），取出，蓋好稱量瓶蓋，在干燥器中冷卻30min，稱重，再同樣烘干1h，冷卻，稱重，直到兩次重量差小于0.0002g。1.2.4 測定結(jié)果的計(jì)算1.2.4.1 計(jì)算公式見下式：水分=（W1-W2）/（W1-W0）*100%式中：W1為烘干前試樣及稱量瓶重（g）；W2為105烘干后試樣及稱量

4、瓶重（g）；W0為已恒重的稱量瓶重（g）。1.2.4.2 重復(fù)性：每個(gè)試樣應(yīng)取兩個(gè)平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。兩個(gè)平行樣測定值相差不得超過0.2%，否則重做。精密度：含水量在10%以上，允許相對(duì)偏差為1%；含水量在5-10%時(shí)，允許相對(duì)偏差為3%,含水量在5%以下時(shí)，允許相對(duì)偏差為5%。相對(duì)偏差=每個(gè)平行測定結(jié)果與兩次平行測定結(jié)果平均值之差/兩次平行測定結(jié)果平均值。1.2.5 注意事項(xiàng)1.2.5.1 加熱時(shí)樣本中有揮發(fā)物質(zhì)可能與樣本中水分一起損失，例如青貯料中的VFA。1.2.5.2 某些含脂肪高的樣品，烘干時(shí)間長反而增重，為脂肪氧化所致，應(yīng)以增重前那次重量為準(zhǔn)。1.2.5.3 含糖

5、分高的易分解或易焦化試樣，應(yīng)使用減壓干燥法(70，600mm汞柱以下，烘干5h 測定水分)。1.3 SC69-02C型水分快速測定儀1.3.1 原理:使試樣受紅外線輻射波的熱 能后，游離水分迅速蒸發(fā)后，即能通過儀器上的光學(xué)投影裝置直接讀出試樣物質(zhì)含水率的百分比。1.3.2 操作步驟1.3.2.1 干燥預(yù)熱：預(yù)熱5分鐘，關(guān)燈冷卻至常溫。1.3.2.2 開燈20分鐘后，用10g砝碼校正零點(diǎn)。在加碼盤中放置5克砝碼，并在天平或儀器上稱取試樣5g。1.3.2.3 加熱測試：開啟紅外燈，對(duì)試樣進(jìn)行加熱，在一定的時(shí)間后刻度移動(dòng)靜止，表示水分蒸干，記錄讀數(shù)即為水分?jǐn)?shù)。1.3.2.4 取下被測物和砝碼。1.4

6、 飼料總水分的計(jì)算飼料分析結(jié)果，通常都用風(fēng)干狀態(tài)樣本的百分含量表示。為了將這些數(shù)字換算成原始飼料或絕干飼料的百分含量，必須計(jì)算總水分。計(jì)算公式：OB=Y+(100-Y)*X/100式中：OB為飼料中總水分的百分?jǐn)?shù)；Y為初水分的百分?jǐn)?shù)；X為吸附水百分?jǐn)?shù)。2 飼料中粗蛋白質(zhì)的測定2.1 國標(biāo)法2.1.1 測定原理凱氏法測定試樣含氮量，即在催化劑存在下，用硫酸破壞有機(jī)物，使含氮物轉(zhuǎn)化成硫酸銨。加入強(qiáng)堿并蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定測得含氮量，乘以氮與蛋白質(zhì)的換算系數(shù)6.25，計(jì)算粗蛋白質(zhì)含量。2.1.2 儀器設(shè)備樣品粉碎機(jī)，常量直接蒸餾裝置或半微量水蒸汽蒸留裝置，凱氏燒瓶（100或15

7、0ml），三角瓶（150或250ml），洗瓶（500ml），酸式滴定管（25ml），移液管（10ml），消化電爐。2.1.3 試劑及配制2.1.3.1 濃硫酸：比重1.84。2.1.3.2 硫酸銅、硫酸鉀或硫酸鈉。2.1.3.3 40%NaOH溶液：40gNaOH溶于100ml蒸餾水中。2.1.3.4 標(biāo)準(zhǔn)硫酸胺：優(yōu)級(jí)純于105烘1-2h，干燥器內(nèi)冷卻備用。2.1.3.5 2%硼酸溶液：2g硼酸溶于100ml蒸餾水中。2.1.3.6 0.1mol/L鹽酸：8.3mlHCL，加蒸餾水定容于1000ml 容量瓶中，混合均勻標(biāo)定。2.1.3.7 甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑：0.1%甲基紅酒精溶液與0

8、.5%溴甲酚綠酒精溶液，兩溶液等體積混合，陰涼處保存3個(gè)月以內(nèi)。2.1.3.8 鹽酸溶液的標(biāo)定：基準(zhǔn)物無水碳酸鈉于270-300灼燒1h至恒重，稱0.2g(準(zhǔn)至0.0002g)，溶于50ml蒸餾水中，加2滴指示劑，用HCL溶液滴定至灰紅色。C(HCL)=W(Na2CO3)/0.053V(HCL)2.1.4 測定步驟2.1.4.1 試樣的消化取0.5-1g試樣（含氮量5-80mg），準(zhǔn)確至0.0002g，無損地放入凱氏燒瓶中，加入0.4g硫酸銅、6g硫酸鉀，與試樣混合均勻，再加濃硫酸10ml和2粒玻璃球。把凱氏燒瓶放在通風(fēng)柜里的電爐上小心加熱，待樣品焦化，泡沫消失，再加大火力（360-410），

9、直至全部內(nèi)容物呈透明的淺藍(lán)色或白色為止。試劑空白測定：另取凱氏燒瓶一個(gè)，加入0.4g硫酸銅、6g硫酸鉀，再加濃硫酸10ml和2粒玻璃球。加熱消化至瓶內(nèi)溶液澄清。另稱量標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨0.2g，同時(shí)按上述方法處理。結(jié)果應(yīng)為21.19±0.2%。2.1.4.2 氨的蒸餾2.1.4.2.1 常量直接蒸餾法待試樣消化液冷卻，加蒸餾水60-100ml，搖勻，冷卻。沿瓶壁小心加入50mlNaOH 溶液，立即與蒸餾裝置相連，蒸餾裝置冷凝管的末端應(yīng)浸入25ml硼酸吸收液1cm。加混合指示劑2滴，輕搖凱氏燒瓶，使溶液混勻，加熱蒸餾。直至餾水液體積約150ml。先將吸收液取下，再停止加熱。2.1.4.2.2

10、半微量水蒸汽蒸餾法待試樣的消化液冷卻，加蒸餾水20ml，移入100ml容量瓶，冷卻后用水稀釋至刻度，搖勻，為試樣分解液。取20ml硼酸溶液，加混合指示劑2滴，使半微量裝置的冷凝管末端浸入此溶液。準(zhǔn)確移取試樣分解液10-20ml，注入蒸餾裝置的反應(yīng)室中，用少量蒸餾水沖洗進(jìn)樣入口，塞好入口玻璃塞，再加10mlNaOH溶液，小心拉起玻璃塞使之進(jìn)入反應(yīng)室，將玻璃塞塞好，且在入口處加水封好，防止漏氣，蒸餾4min，使冷凝管末端離開吸收液面，再蒸餾1min，用蒸餾水洗冷凝管末端，洗液均流入吸收液。注： 上述兩種蒸餾法測定結(jié)果相近，可任選一種。2.1.4.3 滴定吸收氨后的吸收液立即用0.1mol/L鹽酸標(biāo)

11、準(zhǔn)液滴定，溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛壹t色即為終點(diǎn)。將試劑空白測定之消化液和測回收率的硫酸銨的消化液同樣處理。2.1.5 測定結(jié)果計(jì)算2.1.5.1 計(jì)算公式粗蛋白質(zhì)= C(V1-V2)*0.014*6.25/(WV3/V)*100%式中：C為HCL標(biāo)準(zhǔn)液的濃度(mol/L)；W為樣本重（g）；V1為滴定樣品時(shí)所用HCL標(biāo)準(zhǔn)液體積數(shù)（ml）；V2為空白滴定所用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液體積數(shù)（ml）；V為試樣分解液總體（ml）；V3為試樣分解液蒸餾用體積（ml）；0.014為氮的毫克當(dāng)量；6.25為氮換算成蛋白質(zhì)的平均系數(shù)。2.1.5.2 重復(fù)性每個(gè)試樣取兩平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。當(dāng)CP含量在25%以上，

12、允許相對(duì)偏差為1%；當(dāng)CP含量在10-25%，允許相對(duì)偏差為2%；當(dāng)CP含量在10%以下，允許相對(duì)偏差為3%。2.2凱氏定氮儀法2.2.1 儀器及試劑準(zhǔn)備同仲裁法2.2.2 操作步驟2.2.2.1 消化前準(zhǔn)備2.2.2.1.1將抽氣泵的螺口同水咀的內(nèi)螺紋聯(lián)接牢，然后將毒氣罩上的膠管一頭接在抽氣泵的橫出口處，抽氣泵下端用膠管能止下水道（注：出水膠管長度不得超出30cm并不準(zhǔn)彎曲），開足水咀，使抽氣泵有足夠的吸力。2.2.2.1.2 接通消化爐上的電源插座，開電源開關(guān)。2.2.2.2 消化操作2.2.2.2.1稱取0.3-1g試樣、液體2-5ml（含氮量5-80mg）準(zhǔn)確到0.0002，干凈無損失

13、地轉(zhuǎn)入清洗干凈的消化、加入催化劑6.4g再加入濃硫酸8-25ml。2.2.2.2.2 將裝有試樣的消化管放在消化爐支架上，蓋上毒氣罩，向下壓緊毒氣罩鎖牢兩面鎖鉤。2.2.2.2.3 手提毒氣罩中間連同裝有試樣的消化管一起移到電熱爐上保持消化管在電爐中心，開始樣品消化，保持消化管中液體連續(xù)沸騰，沸酸在瓶頸部下冷凝回流。待溶液消煮至無微小碳粒、呈蘭綠色時(shí)繼續(xù)消煮30-40min。2.2.3 蒸餾2.2.3.1 蒸餾前準(zhǔn)備2.2.3.1.1儀器保持目測水平2.2.3.1.2 接通進(jìn)水口、排水口，注意排水膠管出水口，不得高于儀器底平面，同時(shí)關(guān)閉排水閥門。2.2.3.1.3 接通電源，電源線必須有良好的

14、接地線，時(shí)時(shí)必須保持同儀器相同，禁止接地借用零線，再檢查電源是否牢靠。2.2.3.2 蒸餾操作2.2.3.2.1 先于電源總開關(guān)后開自來水龍頭，使自來水經(jīng)過給水口分別進(jìn)入冷凝管和穩(wěn)壓泵，由穩(wěn)壓泵對(duì)蒸汽發(fā)生爐供水并進(jìn)行汽的穩(wěn)壓。注意水流量以保證冷凝管起到冷卻作用并預(yù)熱15分鐘。2.2.3.2.2 開蒸餾開關(guān)，待蒸汽導(dǎo)出管放出蒸汽時(shí)，關(guān)閉蒸汽開關(guān)，從觀察窗觀察待蒸發(fā)爐水位穩(wěn)定（水位保持在電極底部）。2.2.3.2.3 在接收瓶托架上，放上已經(jīng)加入適量（15ml）接收液（硼酸和混合批示劑）的錐形瓶，使蒸餾導(dǎo)出管未端浸入接收液中。2.2.3.2.4 按下消化管托架將消化好并冷卻后的消化管，單個(gè)套在防濺

15、管的密封圈上稍加旋轉(zhuǎn)，其保持接口密封，抬上托架，關(guān)上防護(hù)罩。2.2.3.2.5 開蒸餾水開關(guān)，加蒸餾水約10ml左右，再加堿液開關(guān)，加適量NaOH溶液至蒸餾液堿性顏色變黑為止。2.2.3.2.6開抽吸開關(guān)，抽出消化管內(nèi)殘存廢液，然后關(guān)抽吸開關(guān)，開蒸餾開關(guān)至蒸汽清洗約1min后關(guān)蒸餾開關(guān)，取下消化管，按上步驟可連續(xù)蒸餾。2.2.4 滴定吸收氨后的吸收液，用標(biāo)定后的鹽酸溶液進(jìn)行滴定，溶液由蘭綠色變?yōu)榛易仙珵榻K點(diǎn)。2.2.5 空白測定用0.1g糖代替樣品或不加樣品作空白測定。2.2.6 測定結(jié)果計(jì)算2.2.6.1計(jì)算公式粗蛋白質(zhì)%=(V2-V1)*C*0.014*6.25/W*100式中：V2-滴定

16、試樣時(shí)消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（ml）V2-滴定空白時(shí)消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（ml）C-酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的mol/L濃度W-度樣質(zhì)量2.2.6.2平等測定的結(jié)果用算術(shù)平均值表示，保留小數(shù)后二位。2.3 飼料中真蛋白質(zhì)的測定2.3.1 原理蛋白質(zhì)在一定堿性條件下，能與重金屬鹽類發(fā)生鹽析作用而析出沉淀，此沉淀物不溶于熱水，而非蛋白氮?jiǎng)t易溶于水中。用熱水洗沉淀，將水溶性含氮物洗去，剩下的沉淀再測蛋白，得出真蛋白質(zhì)的含量，用真蛋質(zhì)與粗蛋白質(zhì)含量之比(蛋白質(zhì)比率)，可判斷出魚粉中是否摻入水溶性非蛋白含氮物質(zhì)。魚粉真蛋白質(zhì)比率與指標(biāo)：進(jìn)口魚粉中真蛋白質(zhì)比率不得小于80%，國產(chǎn)魚粉中真蛋白質(zhì)比率不得小于75%。2.3.

17、2 儀器設(shè)備樣品粉碎機(jī)，常量直接蒸餾裝置或半微量水蒸汽蒸留裝置，凱氏燒瓶（100或150ml），三角瓶（150或250ml），洗瓶（500ml），酸式滴定管（25ml），移液管（10ml），消化電爐，中速定性濾紙，表面皿，玻璃棒，漏斗。2.3.3 試劑與溶液2.3.3.1 濃硫酸：比重1.84。2.3.3.2 硫酸銅、硫酸鉀或硫酸鈉。2.3.3.3 40%NaOH溶液：40gNaOH溶于100ml蒸餾水中。2.3.3.4 標(biāo)準(zhǔn)硫酸胺：優(yōu)級(jí)純于105烘1-2h，干燥器內(nèi)冷卻備用。2.3.3.5 2%硼酸溶液：2g硼酸溶于100ml蒸餾水中。2.3.3.6 0.1mol/L鹽酸：8.3mlHCL，

18、加蒸餾水定容于1000ml 容量瓶。2.3.3.7 硫酸銅水溶液：100g/L。2.3.3.8 25g/L NaOH溶液：25gNaOH溶于1000ml蒸餾水中。2.3.3.9 氯化鋇試液：50g/L氯化鋇水溶液。2.3.4 樣品選取與制備同仲裁法2.3.5 測定步驟2.3.5.1 試樣的處理：稱取試樣1-2克(精確至0.0001g)于200ml燒杯中，加水50ml煮沸，加入10%的硫酸銅溶液20ml和2.5%的氫氧化鈉溶液20ml，邊加邊攪拌，加完后繼續(xù)攪拌1min，放置1小時(shí)以上或靜置過夜，沉淀物以中速定性濾紙過濾，用70以上熱水反復(fù)洗殘?jiān)?，直至濾液無硫酸根離子為止(取5%氯化鋇試液5滴于

19、表面皿中，加2mol/L鹽酸1滴，滴入濾液，在黑色背景處觀察應(yīng)無白色沉淀)。將濾紙與殘?jiān)茫湃牒嫦?，?5-75干燥2h.2.3.5.2試樣的消化：將烘干的試樣連同濾紙一起放入消化管中，以下操作同仲裁法或凱氏定氮儀法。2.3.6 結(jié)果計(jì)算2.3.6.1 計(jì)算公式粗蛋白質(zhì)與真蛋白質(zhì)含量計(jì)算方法同仲裁法或凱氏定氮儀法。真蛋白質(zhì)比率(%)=真蛋白質(zhì)含量/粗蛋白質(zhì)含量*1002.3.6.2 重復(fù)性蛋白質(zhì)含量在40%以上時(shí)允許相對(duì)平均偏差2%；蛋白質(zhì)含量在40%以下時(shí)允許相對(duì)平均偏差2.5%。3 飼料中粗脂肪的測定飼料脂肪的測定，通常是將試樣放在特制的儀器中，用脂溶性溶劑（乙醚、石油醚、氯仿等）反復(fù)

20、抽提，可把脂肪抽提出來，浸出的物質(zhì)除脂肪外，還有一部分類脂物質(zhì)也被浸出，如游離脂肪酸、磷脂、蠟、色素以及脂溶性維生素等，所以稱為粗脂肪。測定粗脂肪的方法常用的有油重法、殘余法、浸泡法等。3.1粗脂肪測定儀法3.1.1 儀器和用具3.1.1.1 分析天平：感量0.0001g3.1.1.2 實(shí)驗(yàn)室用粉碎機(jī)或研缽3.1.1.3干燥箱3.1.1.4備有變色硅膠的干燥器3.1.1.5脫脂棉、廣口瓶、脫脂細(xì)紗、脫脂線3.1.1.6脂肪測定儀及用具3.1.1.7濾紙筒：用直徑125mm圓形濾紙摺成外徑24mm左右，長度50mm左右的濾紙筒3.1.2 試劑無水乙醚，AR級(jí)3.1.3 操作步驟3.1.3.1 檢

21、查電源上否完好，水源是否接牢，開電源開關(guān)，設(shè)定溫控儀和調(diào)溫旋扭溫度，預(yù)熱15分鐘。3.1.3.2 將抽提筒用開水洗凈，洗至筒內(nèi)無任何雜質(zhì)，置于干燥箱內(nèi)烘1小時(shí)左右（105）取出編號(hào)，稱重后移入干燥器內(nèi)冷卻備用，編號(hào)并稱重。3.1.3.3 試樣準(zhǔn)備3.1.3.3.1 糧食、飼料等低油樣品，可直接稱取粉碎樣品2克左右，精確至0.0002克，先在濾紙筒內(nèi)底部塞一層脫脂棉，然后將樣品轉(zhuǎn)入筒內(nèi)，再用脫脂棉蓋在試樣上。3.1.3.3.2 油料等高油樣品在備用試樣中稱取2克左右試樣，倒入烘盒中，放入干燥箱中在105溫度下烘30分鐘趁熱加入研缽中進(jìn)行研磨，磨粹后，加入適量的脫脂細(xì)砂（約2克左右）與試樣同磨，將

22、試樣研至出油狀后，干凈地轉(zhuǎn)入在底部塞脫脂棉濾紙筒內(nèi)，用脫脂棉醮少許乙醚，揩凈研缽上試樣和脂肪，并入濾紙筒內(nèi)，再用脫脂棉蓋在試樣上。3.1.3.4 試樣轉(zhuǎn)入儀器，手握提把，使速節(jié)通近軟軸提至適當(dāng)位置，將濾紙筒上口對(duì)準(zhǔn)速節(jié)吸合即可，然后拉下提把，將濾紙筒移至適當(dāng)高度（使抽提筒放入時(shí)不碰），并觀察濾紙筒時(shí)否在冷凝管中心。3.1.3.5 將抽提筒從干燥器中取出，置于托架上，在抽提內(nèi)加入適量的無水乙醚約50ml，然后手握托架手柄將抽提筒移入加熱板上，然后用托架將抽提筒抬上，使抽提筒上口對(duì)準(zhǔn)下保護(hù)套的園柱孔，保證二平面接觸良好，拉下壓桿使鎖緊勾子同座子鎖牢，然后再將抽提筒稍加旋轉(zhuǎn)，以保證二平面接觸良好。3

23、.1.3.6 接通水源給水管、排水管，開啟冷凝管旋塞至手柄方向垂直于水平面。3.1.3.7 手握提把上移，將試樣降入抽提筒底浸泡，此時(shí)，將溫控儀和調(diào)溫旋扭溫度設(shè)置為60-70，具體按溶劑沸點(diǎn)及室溫度。3.1.3.8 從溶劑揮發(fā)開始浸泡適當(dāng)時(shí)間，將濾紙筒年長約5cm，進(jìn)行抽提，再將濾紙筒提升1cm，同時(shí)將冷凝管旋塞塞至手柄方向平行于水平面進(jìn)行溶劑回收，時(shí)間約為15分鐘。3.1.3.9 關(guān)閉電源，左手握住壓桿，拉開鎖緊勾子，使冷凝管復(fù)位，同時(shí)右手握住托架手柄將托架上抬，等冷凝管復(fù)位后，用托架皎抽提筒在加熱板上取出，待溶劑完全揮發(fā)后轉(zhuǎn)入干燥箱中烘去水分，一般為45分鐘（105）后移入干燥器內(nèi)冷卻稱量

24、，計(jì)算含油量，最好使所得油脂達(dá)到恒重（即多次烘干、冷卻、稱量，使最后二次稱重，前后重差在0.002g以內(nèi)）。3.1.3.10 將濾紙筒移至適當(dāng)位置，摘下濾紙筒后，取出回收溶劑，回收時(shí)將溶器放在冷凝管下部，容器口對(duì)準(zhǔn)冷凝管下口完全打開旋塞，等到聚集在冷凝管內(nèi)的溶劑流完為止，取出盛有回收溶劑的容器，倒入大容器中以備用。3.1.3.11 使用結(jié)束，關(guān)閉電源，擦洗干凈。3.1.4 時(shí)間表含油量(%)浸泡時(shí)間(h)提抽時(shí)間（h）0.5-50.515-151115-2511.525-351.51.535-452.5245-6032.53.1.5 結(jié)果計(jì)算粗脂肪%W1/W2*100W1-粗脂肪重量W2-試樣

25、重3.2 國標(biāo)法3.2.1 測定原理用乙醚等有機(jī)溶劑反復(fù)浸提飼料樣本，使其中脂肪溶于乙醚，并收集于盛醚瓶中，然后將所有的浸提溶劑加以蒸發(fā)回收，直接稱量盛醚瓶中的脂肪重，即可計(jì)算出飼料樣本中的脂肪含量。3.2.2儀器設(shè)備索氏脂肪抽提器，恒溫水浴鍋，干燥器，坩堝坩，烘箱，鑷子，稱量瓶，分析天平，濾紙或?yàn)V紙筒（中速脫脂）。3.2.3 試劑無水乙醚（化學(xué)純）。3.2.4 測定步驟3.2.4.1 索氏提取器應(yīng)干燥無水，將抽提瓶洗凈于105±2干燥箱中烘干30min，然后置于干燥器中冷卻30min，稱重，如此反復(fù)進(jìn)行，至最后兩次重量之差小于0.0008g為止。3.2.4.2 精稱風(fēng)干樣品2g左右

26、于濾紙筒中或用濾紙包好，并用鉛筆注明標(biāo)號(hào)，放入105烘箱中烘干2h。濾紙筒應(yīng)高于提取器虹吸管的高度，濾紙包長度。應(yīng)以可全部浸泡于乙醚中為準(zhǔn)。3.2.4.3 將濾紙筒或包放入抽提管中，在抽提瓶中加無水乙醚60-100ml，在60-75的水浴上加熱，使乙醚回流每小時(shí)約為8-10次。浸提時(shí)間依樣品中脂肪含量而定。一般約需8-16h或檢查抽提管流出的乙醚揮發(fā)后不留下油跡為抽提終點(diǎn)。3.2.5 結(jié)果計(jì)算3.2.5.1 計(jì)算公式粗脂肪=(W2-W3)/W1*100%式中：W1為樣品重（g）；W3為抽提瓶重（g）；W2為盛有脂肪的抽提瓶重量（g）。3.2.5.2 重復(fù)性每個(gè)試樣取兩平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平

27、均值為結(jié)果。粗脂肪含量在10%以上，允許相對(duì)偏差為3%。粗脂肪含量在10%以下時(shí)，允許相對(duì)偏差為5%。4 飼料中粗纖維的測定4.1 粗纖維測定儀4.1.1儀器和用具4.1.1.1粗纖維測定儀4.1.1.2分析天平4.1.1.3干燥箱4.1.1.4高溫爐4.1.1.5粉碎機(jī)及分樣篩4.1.1.6干燥器4.1.2 試劑硫酸、氫氧化鈉、95%乙醇、乙醚、正辛醇4.1.3 操作前準(zhǔn)備4.1.3.1試劑制備4.1.3.1.1硫酸溶液（0.128mol/L）：取濃硫酸約75ml，用蒸餾水稀釋到1000ml，用已知濃度的NaOH液標(biāo)定后，調(diào)整其濃度至1.28±0.005mol/L的硫酸原液，用前用

28、蒸餾水稀釋10倍即可。4.1.3.1.2堿溶液（0.312mol/L）：取飽和NaOH溶液（680g/L）約190ml，用不含CO2蒸餾水稀釋500ml，用已知濃度的酸液標(biāo)定后，調(diào)整其濃度至3.12±0.005mol/L的堿原液，用前用蒸餾水稀釋10倍即可。4.1.3.2樣品制備4.1.3.2.1取有代表性的樣品，揀去雜質(zhì)，按四分法取25g左右。4.1.3.2.2 將樣品置在60-65烘箱骨干燥8小時(shí)左右，冷卻后粉碎，全部通過0.84mm2(20目)篩子，其中大于40目的不得小于50%，小于60目不得大于10%。4.1.3.2.3樣品中的脂肪含量超過1%需要脫脂，（可用測定粗脂肪后殘

29、渣分析）。4.1.3.2.4將坩鍋用開水洗凈，洗至坩鍋內(nèi)無雜質(zhì)，置于干燥箱內(nèi)105烘1小時(shí)，移入干燥器內(nèi)冷卻至室溫，編號(hào)，再置于干燥箱內(nèi)備用。4.1.4 操作步驟4.1.4.1 在已編號(hào)后的坩鍋內(nèi)準(zhǔn)確地稱取凈干的平均試樣或烘干無水的脫脂1-3g（谷物2-3g）準(zhǔn)確至0.0001g。4.1.4.2接通電源、水源、開啟主機(jī)電源開關(guān)（自來水盡是開足保證冷凝）。4.1.4.3打開酸、堿預(yù)熱瓶上蓋，分別加入已制備的酸堿溶液及蒸餾水，加至預(yù)熱瓶的90%，蓋上冷凝球。4.1.4.4開啟酸預(yù)熱電源開關(guān)，預(yù)熱酸至微沸。4.1.4.5將裝有試樣的坩鍋移入儀器溫室中，下部放入坩鍋?zhàn)行模喜繉?duì)準(zhǔn)消煮管下的保護(hù)套的內(nèi)

30、孔，壓下手柄并鎖緊再一次檢查坩鍋位置是否準(zhǔn)確后，將下閥全部關(guān)閉，逐個(gè)拉出加熱器手柄。4.1.4.6開啟酸閥，逐個(gè)開上閥，在消煮管內(nèi)加入少量約5ml硫酸溶液，再開吸開關(guān)，逐個(gè)開下閥，抽盡溶液，關(guān)吸開關(guān)和全部下閥。然后將乙預(yù)熱好的硫酸溶液加至150ml后，再在每個(gè)消煮管內(nèi)加入3-4滴正辛醇，開定時(shí)器同時(shí)按需要分別開中熱器電源開關(guān)，調(diào)節(jié)選位旋鈕可觀察單個(gè)加熱電壓。并將電壓調(diào)至最高（220V）同時(shí)開啟蒸餾水預(yù)熱開關(guān)（預(yù)熱水至沸點(diǎn)）。待消煮液微沸，將電壓逐個(gè)調(diào)至樣品無沉淀時(shí)將定時(shí)旋鈕旋至30min，保持消煮液微沸（如發(fā)現(xiàn)試樣粘壁可補(bǔ)加消煮液），到時(shí)加溫自動(dòng)停止。4.1.4.7開吸開關(guān)，再逐個(gè)開下閥將消煮

31、液快速抽掉（在10min內(nèi)抽盡）并用熱水洗滌殘?jiān)林行裕s三次）后抽盡洗液，在抽濾過程中如發(fā)現(xiàn)坩鍋被堵塞時(shí)關(guān)吸開關(guān)，開吹開關(guān)用氣流反沖，發(fā)現(xiàn)消煮管內(nèi)出現(xiàn)氣泡后關(guān)吹開關(guān)開吸開關(guān)繼續(xù)抽吸。4.1.4.8按4.6步驟進(jìn)行堿消煮。4.1.4.9按4.7方法抽洗堿消煮液，逐個(gè)推進(jìn)加熱器手柄。4.1.4.10脫色和膠脂，全部關(guān)閉下閥，用胖肚吸管分別在消煮管上口分三次加入95%乙醇浸泡、抽濾（總共約20ml，每次泡浸時(shí)間約1min）后，再分三次加入乙醚沖洗（每次約20ml），若已脫脂樣品不需要用乙醚沖洗。4.1.4.11左手壓下手柄拉出鎖緊勾子緩緩上升，使其復(fù)位，帶好手套取出存有試樣的坩鍋，待乙醚和乙醇全部

32、揮發(fā)完，再移入干燥箱內(nèi)在130溫度下烘2小時(shí)，取出置于干燥器內(nèi)冷卻至室溫稱重（A1）。4.1.4.12將稱重后的坩鍋置入550電阻爐內(nèi)灼燒30min，待爐溫降至200以下，從電阻爐內(nèi)取郵置于干燥器內(nèi)冷卻至室溫稱重（A2）。4.1.5結(jié)果計(jì)算CF%（A1-A2）÷S1×100CF粗纖維的百分含量（%）A1坩鍋+粗纖維+殘?jiān)盎曳仲|(zhì)量（g）A2坩鍋+殘?jiān)盎曳仲|(zhì)量（g）S1-試樣重量(g)4.2 國標(biāo)法4.2.1 測定原理用固定量的酸和堿，在特定條件下消煮樣品，再用乙醇除去醇溶解物，經(jīng)高溫灼燒扣除礦物質(zhì)量，所余量即為粗纖維。粗纖維不是一個(gè)確切的化學(xué)實(shí)體，主要由纖維素和少量半纖維

33、素、木質(zhì)素等組成。4.2.2 儀器設(shè)備抽濾裝置（抽真空裝置、抽濾瓶及漏斗），電爐，馬福爐，高型無嘴燒懷，冷凝球，古氏坩堝，干燥箱，量筒（200、50ml）、酸洗石棉。4.2.3 試劑及配制4.2.3.1硫酸溶液（0.128mol/L）：取濃硫酸約75ml，用蒸餾水稀釋到1000ml，用已知濃度的NaOH液標(biāo)定后，調(diào)整其濃度至1.28±0.005mol/L的硫酸原液，用前用蒸餾水稀釋10倍即可。4.2.3.2 堿溶液（0.312mol/L）：取飽和NaOH溶液（680g/L）約190ml，用不含CO2蒸餾水稀釋500ml，用已知濃度的酸液標(biāo)定后，調(diào)整其濃度至3.12±0.00

34、5mol/L的堿原液，用前用蒸餾水稀釋10倍即可。4.2.3.3 乙醚、95%乙醇、正辛醇。4.2.4 測定步驟4.2.4.1 酸處理：精稱樣本1-2g左右（若樣本脂肪含量在8%以上，須先用乙醚脫脂），小心放入500ml高型無嘴燒杯，用量筒準(zhǔn)確加入200ml硫酸 ,加一滴防泡沫劑，并在液面處劃一刻度線。然后放在電爐上，裝上冷凝球，通入冷水，加熱使溶液在1min內(nèi)沸騰，記時(shí)，維持微沸狀態(tài)30min，取下加入蒸餾水200ml，靜置15-20min，待樣品下沉后，在抽濾裝置上抽去上清液，再用少量蒸餾水沖洗漏斗。濾布處附著樣本于無嘴燒杯中，然后用NaOH溶液中和至沉淀液呈中性（用廣泛試紙檢查）。4.2

35、.4.2 堿處理：在無嘴燒杯中加入NaOH溶液至200ml刻度處，將無嘴燒杯在電爐上如酸處理一樣微沸處理30min，取下加入蒸餾水200ml，靜置15-20min，抽去上層清液，沖洗濾布后，用硫酸調(diào)至中性。4.2.4.3 抽濾：將經(jīng)酸、堿處理后的中性沉淀液移入輔有石棉的古氏坩堝中抽濾，然后將燒杯壁殘?jiān)耆从谯釄逯谐闉V，再用乙醇25ml沖洗坩堝中的殘?jiān)?.2.4.4 烘干灰化：取下坩堝，用紗布將其外壁擦凈，放入105烘箱中烘至恒重，然后于電爐上小心炭化至無煙后，放入550高溫電爐灼燒30min，稱重，再灼燒15min，冷卻稱重，直至恒重為止。4.2.5 結(jié)果計(jì)算4.2.5.1 計(jì)算公式同粗纖

36、維測定儀法4.2.5.2 重復(fù)性：每個(gè)試樣應(yīng)取兩個(gè)平行樣測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。粗纖維含量在10%以下，允許絕對(duì)值相差0.4；粗纖維含量在10%以上，允許相對(duì)偏差為4%。5 飼料中粗灰分的測定試樣經(jīng)灼燒完全后，余下的殘留物質(zhì)（如氧化物和鹽）稱為灰分。灰分有水溶性與水不溶性，酸溶性、酸不溶性。水溶性灰分大部分是鉀、鈉、鈣、鎂等氧化物和可溶性鹽，水不溶性灰分除泥沙外，還有鐵、鋁等的氧化物和堿土金屬的堿式磷酸鹽。酸不溶性灰分大部分為污染摻入的泥沙和原來存在于動(dòng)植物組織中經(jīng)灼燒成的二氧化硅。5.1 測定原理飼料中灰分的測定一般采用灰化法。將試樣在550燒灼，使構(gòu)成飼料有機(jī)物的主要元素C、N、H、等

37、氧化，所余殘?jiān)达暳现兴鞣N礦物元素的氧化物、氯化物及碳酸鹽，以及混雜在飼料中粘土、砂粒等，稱為粗灰分。5.2 儀器設(shè)備樣品粉碎機(jī)，分析天平（感量0.0001g），電爐，坩堝鉗，馬福爐，瓷坩堝(50ml)，干燥器（變色硅膠作干燥劑）、40目分樣篩。5.3 試劑及配制0.5%氯化鐵墨水溶液（稱0.5g氯化鐵溶于100ml藍(lán)墨水中）5.4 測定步驟5.4.1 將帶蓋坩堝洗凈烘干后，用鋼筆蘸0.5%氯化鐵墨水溶液編號(hào)。5.4.2 將坩堝和蓋一起放入馬福爐，在550±20下灼燒30min，稱重再重復(fù)灼燒，冷卻、稱重，直至兩次重量之差小于0.0005g為恒重量。5.4.3 在已知重量的坩堝中

38、稱取2g左右試樣（不超過坩堝容量的一半，灰分重量應(yīng)在0.05g以上），在電爐上低溫碳化至無煙為止。5.4.4 炭化后將坩堝移入馬福爐中，于550下灼燒3h，使全部樣品變成灰白色或紅棕色（含有錳）。待灰化結(jié)束后，待爐溫降至200下時(shí)打開爐門，將坩堝取出于空氣中冷卻1min.，放入干燥器中冷卻30min，稱重。再同樣灼燒1h，冷卻，稱重，直至兩次重量之差小于0.001g 為恒重量。5.5 結(jié)果計(jì)算5.5.1 計(jì)算公式：粗灰分=(W2-W0)/(W1-W0)*100%式中：W0為已恒重量空坩堝重（g）；W1為坩堝加試樣重（g）；W0為灰化后坩堝加灰分重(g)。5.5.2 重復(fù)性：每個(gè)試樣應(yīng)取兩個(gè)平行

39、樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。粗灰分含量在10%以上，允許相對(duì)偏差為0.5%；粗灰分含量在5-10%以上，允許相對(duì)偏差為1%；粗灰分含量在5%以下，允許相對(duì)偏差為5%。5.6 注意事項(xiàng)5.6.1 樣品開始炭化時(shí)，應(yīng)打開部分坩堝蓋，便于氣流流通；溫度應(yīng)逐漸上升，防止火力過大而使部分樣品顆粒被逸出的氣體帶走。5.6.2 為了避免樣品氧化不足，不應(yīng)把樣品磨得太細(xì)，壓得過緊，樣品應(yīng)松松地放在坩堝內(nèi)。5.6.3 灼燒溫度不宜超過600，否則會(huì)引起磷、硫等鹽的揮發(fā)。5.6.4 灼燒殘?jiān)伾c試樣中各元素含量有關(guān)，含鐵高時(shí)為紅棕色，含錳高為淡藍(lán)色。但有明顯黑色炭粒時(shí)，為炭化不完全，應(yīng)延長灼燒時(shí)間。6 飼

40、料中鈣的測定鈣的測定方法有高錳酸鉀氧化還原滴定法、EDTA絡(luò)合滴定法、原子吸收分光光度法等。高猛酸鉀法操作繁復(fù)，但準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好，為國家標(biāo)準(zhǔn)仲裁分析法。EDTA絡(luò)合滴定法手續(xù)簡便、快速、適合于大批樣品的測定，為國家標(biāo)準(zhǔn)快速測定鈣方法。6.1 高錳酸鉀氧化還原滴定法6.1.1 測定原理飼料樣品灰化后，用鹽酸溶解，然后在溶液中加入草酸銨，使鈣成為草酸鈣白色沉淀，然后用硫酸溶解草酸鈣再用標(biāo)準(zhǔn)高錳酸鉀溶液滴定游離的草酸根離子。6.1.2 儀器設(shè)備燒杯，量筒,吸耳球，定量濾紙，洗瓶，電爐，容量瓶（100ml），漏斗，移液管（10、20ml），表面皿，玻璃棒，酸式滴定管（25ml:）。6.1.3 試劑

41、及配制6.1.3.1 1:3鹽酸溶液。6.1.3.2 1:3硫酸溶液。6.1.3.3 1:1氨水溶液。6.1.3.4 4.2%草酸銨溶液。6.1.3.5 甲基紅乙醇溶液(0.1g溶于100ml乙醇中)。6.1.3.6 濃硝酸6.1.3.7 0.05mol/L高錳酸鉀溶液6.1.3.7.1 配制：稱取高錳酸鉀約1.6克，溶于1000ml水中，煮沸10min，冷卻靜置1-2天，用沙芯漏斗過濾，濾液保存于潔凈的棕色瓶中備用。6.1.3.7.2 標(biāo)定：準(zhǔn)確稱取0.1克基準(zhǔn)草酸鈉(105烘干2h)，準(zhǔn)確至0.0002g，溶于50ml水中，再加硫酸溶液10ml，將此溶液加熱至75-85。用配好的高錳酸鉀標(biāo)

42、準(zhǔn)溶液滴定。-滴定至溶液呈粉紅色且1min內(nèi)不褪色為止。滴定結(jié)束后，溶液溫度應(yīng)保持在60以上。按以下公式計(jì)算：C=m/0.067(V-V0)C為高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(mol/L)V滴定時(shí)消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積(ml)V0空白滴定時(shí)消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積(ml)M基準(zhǔn)草酸鈉質(zhì)量(g)6.1.4 測定步驟在粗灰分測定樣本中，加HCL10ml和數(shù)滴濃HNO3 ，小心煮沸，將此液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，再加以熱水沖洗坩堝，冷至室溫后，定容混勻備用。用移液管準(zhǔn)確吸取樣本液10-20ml于燒杯中加入甲基紅兩滴，滴加氨水溶液至溶液由紅變橙黃色。再滴加鹽酸溶液至溶液又呈紅色（PH為2.5-3.0）為止。加

43、熱煮沸后趁熱加入草酸銨10ml邊加熱邊攪拌。若溶液由紅變黃（或桔黃），則需滴加HCL又呈紅色，煮沸3-4min后，放置過夜（或在水浴上加熱2h）。用定量中速濾紙過濾，棄去濾液，用1:50氨水溶液沖洗燒杯及濾紙上的草酸鈣沉淀6-8次，直至草酸鈣被洗凈為止（接取濾液2-3ml，加硫酸數(shù)滴，加熱80后，加高錳酸鉀1滴，如溶液呈微紅色，且1-2min不褪色即可）。沉淀和濾紙轉(zhuǎn)移入原燒杯中，加硫酸溶液10ml，蒸餾水50ml，加熱至75-85，立即用高錳酸鉀-滴定至溶液呈微紅且30s不褪色為止。在干凈燒杯中加濾紙1張，硫酸10ml,蒸餾水50ml,=# > 1#3 后，加熱至75-85，立即用高錳

44、酸鉀-滴定至溶液呈微紅且30s不褪色為止。6.1.5 結(jié)果計(jì)算6.1.5.1 計(jì)算公式：C(Ca)=(V3-V0)*C*0.02*V1/V2/W*100%式中：W為樣本重（g）；V1為樣本灰化液稀釋用量（ml）；V2 為測定鈣時(shí)樣本溶液用量（ml）；V3 為滴定樣本高錳酸鉀用量（ml）；V0為滴定空白液高錳酸鉀用量（ml）；C為高錳酸鉀溶液濃度（mol/L）。6.1.5.2 重復(fù)性：樣品應(yīng)取兩個(gè)平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。Ca含量在5%以上，允許相對(duì)偏差3%；含量在5-1%時(shí)，允許相對(duì)偏差5%；含量在1%以下，允許相對(duì)偏差10%。6.1.6 注意事項(xiàng)6.1.6.1 高錳酸鉀溶液濃度不

45、穩(wěn)定，至少每月標(biāo)定一次；6.1.6.2 每種濾紙空白值不同，消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)液的用量不同，至少每盒濾紙做一次空白測定。6.2 EDTA絡(luò)合滴定法6.2.1 試劑及配制6.2.1.1 硝酸6.2.1.2 三乙醇胺（分析純）(1+1)水溶液6.2.1.3 鈣紅指示劑,1g鈣試劑羧酸鈉鹽與99gNaCl（分析純）混勻研細(xì)。6.2.1.4 鹽酸羥胺（分析純）6.2.1.5 孔雀綠指示劑：0.1g 指示劑溶于100ml蒸餾水。6.2.1.6 20%NaOH6.2.1.7 EDTA標(biāo)準(zhǔn)液(0.05mol/L)：精稱分析純乙二胺乙酸二鈉鹽19g溶于水，稀釋成1000ml，搖勻備用。6.2.1.7.1 標(biāo)定滴

46、定度：含鈣1mg的標(biāo)準(zhǔn)液10ml按樣品測定法進(jìn)行，這時(shí)EDTA:對(duì)鈣的滴定度為：T=CV/V0C為鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度；V為吸取鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積；V0為EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定消耗的體積。6.2.1.7.2 濃度標(biāo)定：稱取1克于800灼燒至恒重的基準(zhǔn)氧化鋅，稱準(zhǔn)至0.0002g。用少量水濕潤，加20%鹽酸溶液至樣品溶解，移入250ml容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。取30-35ml，加70ml水，用10%氨水溶液 中和至PH7-8，加10ml氨-氯化銨緩沖溶液(54gNH4CL，溶于水，加15mol/L氨水394ml，稀釋至1L)及5滴鉻黑T指示液(5g/L)，用配制好的EDTA滴定至溶液由紫色變?yōu)榧兯{(lán)色。

47、同時(shí)作空白試驗(yàn)。計(jì)算公式為C=m/(V1-V0)*0.08138其中：V1為EDTA之用量；V0為空白試驗(yàn)之用量；m為氧化鋅之質(zhì)量。6.3 測定步驟按高錳酸鉀法制各樣本分解液后，準(zhǔn)確吸取分解液10ml于150ml三角瓶中，加三乙醇胺溶液2ml，蒸餾水50ml，孔雀綠指示劑1滴，用20%NaOH溶解至無色，再加以NaOH液2ml，立即加0.1g鹽酸羥胺和少量鈣紅指示劑，并立即用EDTA標(biāo)準(zhǔn)液滴定至溶液由紫紅色變?yōu)榧兯{(lán)色為止。6.4 結(jié)果計(jì)算C(Ca)=TV2V0/(10mV1)式中：T為滴定度V2實(shí)際消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)液的體積V1分取試樣分解液的體積V0試樣分解液的部體積m試樣的質(zhì)量或C(Ca)=

48、CEDTA(V-V0)40.1/m式中V為消耗EDTA的體積，V0為空白試驗(yàn)之用量m為試樣的質(zhì)量。7 總磷的測定7.1 測定原理先將試樣中有機(jī)物破壞，在酸性溶液中使磷酸與偏釩酸和鉬酸銨生成黃色化合物，在波長420mm下進(jìn)行比色測定。7.2 儀器設(shè)備分光光度計(jì)，容量瓶或具塞比色管（50ml），容量瓶（100ml或1000ml），刻度移液管。7.3 試劑及配制7.3.1 鹽酸（1:1水溶液）7.3.2 濃硝酸7.3.3 釩鉬酸銨顯色劑：稱取偏釩酸銨1.25g，加硝酸250ml；另取鉬酸銨25g，加蒸餾水100ml溶解之，在冷卻條件下將此溶液倒入上溶液，且加蒸餾水調(diào)至1000ml，避光保存。如生成沉

49、淀則不能使用。7.3.4 磷酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：將磷酸二氫鉀在105干燥1h，在干燥器中冷卻后稱0.2197g，溶解于蒸餾水中定量轉(zhuǎn)入1000ml溶量瓶中，加硝酸3ml，用蒸餾水稀釋到刻度，即成50ug/ml的磷標(biāo)準(zhǔn)溶液。7.4 測定步驟在粗灰分測定樣本中，加HCL10ml和數(shù)滴濃HNO3 ，小心煮沸，將此液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，再加以熱水沖洗坩堝，冷至室溫后，定容混勻備用。7.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：準(zhǔn)確移取磷標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、15.0ml于50ml容量瓶中，各加入釩鉬酸銨顯色試劑10ml，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，放置10min以上。以0ml溶液作參比，

50、用1cm比色池，在420波下，用分光光度計(jì)測各溶液的吸光度，以磷含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。7.4.2 試樣測定：準(zhǔn)確移取試樣分解液1-10ml（含磷量50-500ug）于50ml容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色試劑10ml，按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制的方法顯色和比色測定，測得試樣分解液的吸光度，由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試樣分解液的含磷量。7.5 結(jié)果計(jì)算7.5.1 計(jì)算公式:P(%)=100X/mV式中：m為試樣重（g）；V為比色測定時(shí)所移取試樣分解液體積（ml）；X為由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試樣分解液含磷量（ug）。7.5.2 重復(fù)性：每個(gè)試樣稱取兩個(gè)平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。含磷量在0.5%以上允許

51、相對(duì)偏差3%；含磷量在0.5%.以下，允許相對(duì)偏差10%。7.6 注意事項(xiàng)7.6.1 比色時(shí)，待測液磷含量不宜過濃，最好控制在每毫升含磷0.5mg以下。7.6.2 待測液在加入試液后應(yīng)靜置10min，再進(jìn)行比色，但不能靜置過久。8 飼料級(jí)DL-蛋氨酸的測定8.1 測定原理在中性介質(zhì)中準(zhǔn)確加入過量的碘溶液，將兩個(gè)碘原子加到蛋氨酸的硫原子上，過量的碘溶液用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液回滴。8.2 試劑與材料8.2.1 磷酸氫二鉀溶液：500g/L8.2.2 磷酸二氫鉀溶液：200g/L。8.2.3 碘化鉀溶液：200g/L。8.2.4 碘溶液：C(1/2 I2)約0.1mol/L。8.2.5 硫化硫酸鈉

52、標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：C(NaS2O4)約0.1mol/L。8.2.6 淀粉溶液：10g/L 。8.3 分析步驟稱取試樣0.23-0.25g(精確至0.0002g)移入500ml碘量瓶中，加入70ml無離子水，然后分別加入下列試劑：10ml磷酸氫二鉀溶液、10ml磷酸二氫鉀溶液、10ml碘化鉀溶液，待全部溶解后準(zhǔn)確加入50ml碘溶液，蓋上瓶蓋，水封，充分搖勻，于暗處放置30min.，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定過量的碘，近終點(diǎn)時(shí)加入1ml淀粉指示劑，滴定至無色并保持30s為終點(diǎn)，同時(shí)做空白試驗(yàn)。8.4 結(jié)果計(jì)算8.4.1 計(jì)算公式以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示的蛋氨酸含量（X1）按下式計(jì)算：X1=C(V-V0)*0.

53、0746/m式中：C為硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的實(shí)際濃度（mol/L）；V為滴定試樣時(shí)消耗的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積（ml）；V0為空白消耗的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積（ml）；m為試術(shù)的質(zhì)量（g）0.0746為與1.0ml硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液C(NaS2O4)=1mol/L相當(dāng)?shù)?、以克表示的蛋氨酸的質(zhì)量。所得結(jié)果應(yīng)表示至一位小數(shù)。8.4.2 允許差取平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值為測定結(jié)果，兩次平行測定結(jié)果的絕對(duì)差值不得大于0.1%。9 飼料級(jí)L-賴氨酸鹽酸鹽含量的測定9.1 試劑和溶液甲酸、冰乙酸、a-萘酚苯基甲醇指示劑0.2%(m/v)冰乙酸指示液、高氯酸：濃度約為0.1mol/L的冰乙

54、酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。9.2 測定步驟試樣預(yù)先在105干燥至恒重，稱取干燥試樣式0.2g，稱準(zhǔn)至0.0002g，加3ml甲酸和50ml冰乙酸，再加入5ml乙酸汞的冰乙酸溶液，加入10滴a-萘酚苯基甲醇指示液，用0.1mol/L高氯酸的冰乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，試樣液由橙黃色變?yōu)辄S綠色即為滴定終點(diǎn)。用同樣方法另作空白試驗(yàn)以校正之。9.3 結(jié)果計(jì)算9.3.1 計(jì)算公式：賴氨酸鹽酸鹽的百分含量按下式計(jì)算：0.09132*C*(V-V0)/m式中：c為高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液之濃度（mol/L）；V為試樣消耗高氯酸標(biāo)準(zhǔn)液之體積（ml）；V0為空白試驗(yàn)消耗高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液之體積（ml）；m為試樣之質(zhì)量（mg）；0.09132為每毫

55、摩爾賴氨酸鹽酸鹽之質(zhì)量（g）。9.3.2 兩個(gè)平行試樣測定結(jié)果之差不得大于0.2%，以其算術(shù)平均值報(bào)告結(jié)果。10 飼料中水溶性氯化物的測定方法本方法適用于配合飼料、濃縮飼料和單一飼料。檢測范圍氯元素含量為0-60mg。10.1 方法原理溶液澄清，在酸性條件下，加過量標(biāo)準(zhǔn)硝酸銀使樣品溶液中的氯化物形成氯化銀沉淀，除去沉淀后，用硫氰酸銨滴定過量的硝酸銀，根據(jù)消耗的硫氰酸銨的量，計(jì)算出其氯化物的含量。10.2 試劑實(shí)驗(yàn)室用水應(yīng)符合GB6682中三級(jí)水用水的規(guī)格。使用的試劑除特殊規(guī)定外應(yīng)為分析純。10.2.1 硝酸。10.2.2 硫酸鐵（60g/L）：稱取硫酸鐵60g，加水微熱溶解后，調(diào)成1000ml

56、。10.2.3 硫酸鐵指示劑：250g/L硫酸鐵水溶液，過濾除去不溶物，與等體積濃硝酸混合均勻。10.2.4 氨水：1+19水溶液。10.2.5 硫氰酸銨c=0.02mol/L ：稱取硫氰酸銨1.52g溶于1000ml水中。10.2.6 氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液：基準(zhǔn)級(jí)氯化鈉于500灼燒1h，干燥器中冷卻保存，稱5.8454g溶解于水中，轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。此氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液的濃度為0.1mol/L。10.2.7 氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確吸取氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液20.00ml于1000ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。此氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為0.02mol/L。10.2.8

57、硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液c=0.02mol/L ：稱取3.4g硝酸銀溶于1000ml水中，貯于棕色瓶內(nèi)。10.2.8.1 體積比：吸取硝酸銀溶液20ml，加硝酸4ml，指示劑2ml，在劇烈搖動(dòng)下用硫氰酸銨溶液滴定，滴至終點(diǎn)為持久的淡紅色，由此計(jì)算兩溶液的體積比（F），計(jì)算公式為：F=20/V2式中：F為硝酸銀與硫氰酸銨溶液的體積比；20為硝酸銀的體積（ml）；V2 為硫氰酸銨溶液體積（ml）。10.2.8.2 標(biāo)定：準(zhǔn)確移取氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液10ml，于100ml容量瓶中，加硝酸4ml，硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液25ml，振蕩使沉淀凝結(jié)，用水稀釋至刻度，搖勻，靜置5min，干過濾入干錐形瓶中。吸取濾液50ml，加硫酸鐵指標(biāo)，用