顯微鏡的基礎(chǔ)介紹

1、顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)可分為光學(xué)系統(tǒng)和機械裝置兩大部分。一、顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)主要包括物鏡、目鏡、聚光鏡和光源系統(tǒng)四個主要部件。其次還包括濾光片、載玻片和蓋玻片。（一）物鏡物鏡一般都是在物鏡轉(zhuǎn)換器上旋著。它是顯微鏡的最主要部件。顯微鏡的放大及分辯作用主要由它來擔(dān)當(dāng)。其優(yōu)劣直接決定了顯微鏡的主要光學(xué)性能。為了校正象差和色差（所謂象差是指所成的像與原物在形狀上的差別；色差是指所成的像與原物在顏色上的差別），物鏡都由多塊透鏡組成，而且放大倍數(shù)越高，結(jié)構(gòu)越復(fù)雜。一般的物鏡所觀察到的像面總是有些彎曲，即靠中間部分清晰，靠邊緣部分比較模糊，要想讓邊緣清楚，需要調(diào)節(jié)顯微鏡的微調(diào)鈕。但是邊緣部分清楚后

2、，中間部分又變的模糊了。這除了不便觀察外，更主要地是無法對其進行攝影。有鑒于此尼康開發(fā)了平場物鏡可以較好地校正像面彎曲，使整個視場平坦，但其結(jié)構(gòu)也相應(yīng)地復(fù)雜些。在有的尼康高倍物鏡和油鏡內(nèi)還裝有彈簧，在物鏡前端受壓時，鏡頭可以退縮回來。這樣一方面可以保護鏡頭，另一方面也不會把載玻片和蓋玻片壓碎。這種物鏡稱為彈簧物鏡。（1） 1,物鏡的分類顯微鏡的物鏡雖然細(xì)分起來多達(dá)數(shù)百種，但是一般可采用下述三種分法：根據(jù)象差消正情況可分三類：A,消色差物鏡：這是最常見的物鏡，雖然能完全校正光譜中的C線（紅光）和F線（青光）的色差，但嚴(yán)格地說還不能完全矯正其他色光的色差，消色差物鏡通常與惠通斯目鏡配合。B,復(fù)消色

3、差的物鏡：這種物鏡中的透鏡一部分用熒石制成，性能很高，能使光譜中的紅光、藍(lán)光和黃光在同一焦平面上成象，通常與補償目鏡配合使用。C.平場物鏡：以上兩種物鏡都存在共有的缺點，即是象面彎曲問題（場曲）。由于場曲的存在而使視場邊緣的象模糊不清，為此科學(xué)工作者前后又研制成功了平場消色差物鏡和平場復(fù)消色差物鏡。所謂平場消色差物鏡就是將物鏡的場現(xiàn)象消除到最小程度，使視場邊緣部分同樣得到清晰的象，不過這種物鏡的結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜，從設(shè)計到制造到增加了困難，尤其是平場復(fù)消色差物鏡，它是在光學(xué)系統(tǒng)中加入彎月形厚透鏡用來矯正物鏡的象面彎曲。有一部分透鏡是用熒石材料制成的，而熒石材料的化學(xué)穩(wěn)定性很差，再加透鏡的精度要求又較

4、高，這樣的材料的來源和加工工藝上都存在著一定的困難。（2）根據(jù)物鏡的方大倍率不同，分為低倍、中倍和高倍物鏡。A.低倍物鏡：放大倍率1X-5X,數(shù)值孔徑0.04-0.15B.中倍物鏡：放大倍率>5x-25x,數(shù)值孔徑0.15-0.6C.高倍物鏡：放大倍率>25x-100x,數(shù)值孔徑0.60-1.40（3）根據(jù)使用方法的差異，物鏡可分下列兩大類A.浸液系物鏡：這是物鏡與標(biāo)本之間加入某種液體的物鏡。根據(jù)浸液的種類，可分為油浸系和水浸系兩種。使用油浸系物鏡時，通常加入柏木油（折射率為10515）;使用水浸系物鏡時，加入水（折射率為1.33）。止匕外，還有甘油浸或石臘油浸系的特殊物鏡。B.干

5、燥系、水浸系和浸油系物鏡，各有特殊的用法。干燥系物鏡不可用油浸，油浸性物鏡不可用水浸。此外，還有能改變放大倍率的物鏡它有各種不同的結(jié)構(gòu)，有的改變透鏡間的距離，有的能卸掉部分透鏡，有的使鏡筒上下顛倒，這種物鏡放大率不高。高倍的干燥系物鏡或水浸系物鏡，也有帶核正環(huán)的，這種裝置能校正由蓋玻片的厚度不一致引起的相差，不帶校正環(huán)的物鏡，也有在鏡筒外側(cè)刻有蓋片的適當(dāng)厚度的，止匕外，還有各種攝影用的物鏡，這種物鏡不能用于普通的觀察。尼康Edipse系列生物顯微鏡一般有五個物鏡，分別是4X、10X、20X、40X、100X,其中前四種是干燥系統(tǒng)，后一種是油浸系統(tǒng)，都是消色差物鏡或更高級的物鏡所謂物鏡的工作距離

6、，指的是從物鏡前組最前面一塊透鏡的表面到被觀察標(biāo)本的距離。這個距離不大，如上所述的10X、40X和100X物鏡的工作距離分別為7.634、0.53和0.198毫米。如果再考慮到透鏡的金屬零件的厚度，這個距離就更小了。因此，在使用時，物鏡和標(biāo)本是靠得很近的，高倍物鏡尤為如此，幾乎要碰上標(biāo)本了，這就要求我們在調(diào)焦時要特別小心，以免碰壞鏡頭或損壞標(biāo)本。物鏡通常都標(biāo)有表示物鏡光學(xué)性能和使用條件的一些數(shù)字和符號。如"40/0.65"和"160/0.17"。此處的40表示它的放大倍數(shù)（有的寫成40X或40:1）;0.65表示它的"數(shù)值孔徑"（有的

7、寫成N.A.1.65或A.0.65）;160表示使用該物鏡時，顯微鏡的機械筒長應(yīng)為160mm（所謂機械筒長是指取下物鏡和目鏡以后，所剩下的鏡筒長度。顯微鏡的機械筒長現(xiàn)已統(tǒng)一規(guī)定為160mm）;0.17表示使用該物鏡時，蓋玻片的厚度應(yīng)為0.17mm。有些低倍物鏡，在有、無蓋玻片的情況下都可以使用，所以不標(biāo)0.17而代之以橫線"-"o有些油鏡上標(biāo)有"油（oil）"字（二）目鏡目鏡通常插在鏡筒上。其作用是把物鏡放大后的像作進一步的放大，使人眼睛能夠清楚地觀察標(biāo)本。它有單目和雙目兩種工作方式。在目視光學(xué)儀器中接近眼睛的光學(xué)系統(tǒng)部件，我們稱為目鏡。現(xiàn)代目鏡均用復(fù)合

8、透鏡，這樣便于將倍率色差、慧差和象差等缺點加以糾正。目鏡有兩個透鏡，近物的稱為場鏡，近目的稱為目鏡，前者使軸外光束不過分發(fā)散，后者則在于放大成象。目鏡的出射光瞳，一般在目鏡象方焦點之外與焦點很靠近的地方。自目鏡最后一面到目鏡出射光瞳的距離，叫出瞳距離或鏡目距，因為人眼瞳孔要與出射瞳孔相重合，所以鏡目距不能太短，一般不應(yīng)小于68mm,出射瞳孔直徑也不能小于1mm,以保證觀察時清晰。由目鏡的第一面到其物方焦點，既到物鏡象平面的距離稱為目鏡的工作距離。從象差矯正情況來看，目鏡與物鏡不同，目鏡是一種大視場系統(tǒng)，主要考慮軸外象差（垂軸色差、彗星和象散），至于場曲，由于眼睛有調(diào)節(jié)能力，可依情況稍許放寬處理

9、。目鏡的作用是把物鏡已經(jīng)放大的實象作一步放大，其目鏡的放大倍率可用下式計算：公式：M目=（250/f目）式中f目-目鏡的焦距目鏡可分為惠更斯目鏡、冉斯登目鏡、平常補償目鏡、平場廣視野目鏡和其他特殊目鏡等多種。其中上下兩塊透鏡的凸透面都朝下的惠更斯目鏡在普通顯微鏡上用的最多。平場補償目鏡一般標(biāo)有"P",國產(chǎn)也有標(biāo)有"PB"的。它和平場物鏡相配用。屬于高檔目鏡。（三）聚光器聚光器大都通過手旋螺絲固定在鏡臺下面。它由聚光鏡和可變光闌兩個部件組成。聚光鏡的作用是將光源來的光線會聚到標(biāo)本上，以便觀察?？勺児怅@又叫光圈或虹彩光闌，裝在聚光鏡的下方，由十幾塊金屬薄片組

10、成。中央通光孔為圓形，移動可變光闌的把手，可以任意調(diào)節(jié)通光孔的大小。聚光器的主要參數(shù)是數(shù)值孔徑。但它的數(shù)值孔徑是可變的，受光闌孔的大小控制，光孔開大，數(shù)值孔徑增大，反之則減小。聚光鏡外殼上的是數(shù)值孔徑的最大值。除了上述普通的聚光鏡外，還有暗視場聚光鏡、相襯聚光鏡、偏光聚光鏡等多種用途的聚光鏡，以滿足不同場合的使用。四）光源系統(tǒng)光源系統(tǒng)用來供給照明標(biāo)本用的光線。顯微鏡所用的光源有自然光和電光源兩種。使用電光源的顯微鏡，其光源系統(tǒng)由光源燈電路、光源燈、透鏡、反射鏡的等組成，系統(tǒng)通常安裝在燈座內(nèi)。使用電光源的顯微鏡一般都采用柯勒照明方式。它是將光源的燈絲像經(jīng)兩路成像在標(biāo)本的上方，而不是像臨界照明那樣

11、直接落在標(biāo)本上。這種照明方式可得到比較均勻的照明。如下圖所示，尼康采用了獨有的CFI無限遠(yuǎn)光路系統(tǒng).在物鏡與鏡筒透鏡之間是一條平行光路，因此無需另加別的附件就可加載其他光學(xué)器件，如熒光,DIC等。光源燈一般使用鴇燈或鹵素?zé)?。燈的功率從十幾瓦到?shù)十瓦不等。光源燈的電路部分大都設(shè)有光亮調(diào)節(jié)器，可以很方便調(diào)節(jié)照在標(biāo)本上光的亮度。（五）其它1.濾光片有些顯微鏡配有不同波長的濾光片供選用。使用濾光片后可以有選擇地濾除某些光線，如在觀察相差時通常配GIF濾光片以使觀察效果更佳。2載玻片和蓋玻片顧名思義，載玻片是用來承載樣本的，蓋玻片是用來覆蓋樣本的。即，通常觀察標(biāo)本時，標(biāo)本夾在兩塊玻璃之間。下面的一塊叫載

12、玻片，上面的叫蓋玻片。二者一般是用長方形的透明玻璃片制成，只是薄厚有所區(qū)別。標(biāo)準(zhǔn)蓋玻片的厚度為0.17mm;載玻片的厚度則為1.1mm.。一般二者的長和寬分別為45和26mm.。二、顯微鏡的機械裝置顯微鏡的機械裝置是為光學(xué)系統(tǒng)服務(wù)的。只有精密、靈活、準(zhǔn)確的機械裝置與良好的光學(xué)系統(tǒng)密切配合，顯微鏡才能發(fā)揮其最好性能。一般顯微鏡的機械裝置由下列部件組成：鏡座與鏡臂、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺與移動器、粗動調(diào)焦機構(gòu)、微動調(diào)焦機構(gòu)、（一）鏡座與鏡臂1 .鏡座它是顯微鏡的基座，用以支撐整個鏡體。簡易顯微鏡的多呈馬蹄形，用鑄鐵制造電光源顯微鏡的鏡座為多方形，其內(nèi)部裝有電光源系統(tǒng)。即照明燈、聚光鏡、反光鏡及其

13、電路等均裝在其鏡座內(nèi)。尼康現(xiàn)在采用"T"型主體，及穩(wěn)定有美觀.2 .鏡臂呈弓形，立于鏡座的上端。對直筒顯微鏡來說，用它來支撐整個光學(xué)大部分機械零件。其下有一個傾斜關(guān)節(jié)，用以傾斜鏡筒。對斜筒顯微鏡來說，鏡臂的，主要用它來支撐鏡筒和與鏡筒相連接的光學(xué)元件。但現(xiàn)在的高級顯微鏡都和主體并在了一起.。（二）鏡筒鏡筒是金屬制的圓筒。其上端可插目鏡，下端連接物鏡。為了避免入射光發(fā)射，現(xiàn)在的高級顯微鏡內(nèi)壁都涂以無光黑漆。鏡筒可分為單目、雙目和三目三種。1 .單目鏡筒單目鏡筒又有直筒和斜筒之分。雙目和三目鏡筒則都是斜筒式的，直筒因使用不太方便使用量較少。單筒斜筒是在鏡筒內(nèi)安裝一個反射棱鏡，從

14、標(biāo)本到達(dá)鏡筒的光線被棱鏡以45度角發(fā)射進入目鏡。斜筒式可作360度旋轉(zhuǎn)，使用起來更加方便。2 .雙目鏡筒雙目鏡筒是由左右兩個鏡筒組成。鏡筒的下部裝有一套復(fù)雜的反射機構(gòu)。來自物鏡的光線經(jīng)半五角棱鏡兩次反射后，折轉(zhuǎn)45度進入分光棱鏡。分光棱鏡模塊由多組直角棱鏡膠合而成。膠合面上鍍有分光膜。當(dāng)光到達(dá)分光膜時，有一半發(fā)射，進入下棱鏡，另一半透過，進入上棱鏡。被上下兩個棱鏡反射后進入兩個目鏡中成像。為了適應(yīng)不同人眼的瞳距，復(fù)合棱鏡兩側(cè)的反射棱鏡的間距通常都設(shè)計為可調(diào)的。目的是為了適應(yīng)兩眼距離不同的人使用。調(diào)節(jié)范圍通常是在5575mm.之間，雙目鏡筒一般設(shè)計成可伸縮調(diào)節(jié)方式。其目的是為了適應(yīng)視力不同的人使

15、用。調(diào)節(jié)范圍通常在500度近視和遠(yuǎn)視之間。3 .三目鏡筒三目鏡筒是攝影顯微鏡需要配置的。它是在雙目鏡筒的上方又增加一個鏡筒.在此鏡筒上可加配攝影設(shè)備。這樣既可以觀察，又可以攝影。它有兩種方式；一種是安裝有一個可推拉的棱鏡。推入時供平時觀察用，拉出時光線全部進入攝影鏡筒供照相用。還有一種是即可觀察又可同時攝影的三目鏡筒。它的光線20%30%供觀察用，70%80%供攝影用。在攝影時，可用攝影目鏡進行調(diào)焦，當(dāng)看到清晰的物象時，再攝影，便可攝出清晰的照片。（三）物鏡轉(zhuǎn)換器物鏡轉(zhuǎn)換器裝于鏡筒下端，用來安裝和轉(zhuǎn)換物鏡。按安裝物鏡的孔數(shù)不同，可分為四孔式、五孔式、六孔式、七孔式等幾種。以五、六孔居多，按定位

16、方式的不同，可分為外定位式和內(nèi)定位式兩種。但無論那種方式，其基本結(jié)構(gòu)都是由上下兩塊凸面朝下的圓盤組成。上面一塊固定在鏡筒的下端，稱為固定盤。下面一塊可以饒其中心的大頭螺釘旋轉(zhuǎn)，稱為轉(zhuǎn)動盤。物鏡就分別安裝在轉(zhuǎn)動盤的幾個對稱的螺絲口上。外定位式的轉(zhuǎn)換器，其定位彈簧安裝在外面；內(nèi)定位式的轉(zhuǎn)換器，其定位彈簧片安裝在固定盤里面。當(dāng)轉(zhuǎn)動盤旋轉(zhuǎn)至某一位置時，定位彈簧片上的凸棱落入定位槽中，發(fā)出咔嗒一聲響，便有一個物鏡進入光路。繼續(xù)旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)動盤，可將各個物鏡依次調(diào)在顯微鏡的光軸位置上。對物鏡轉(zhuǎn)換器的精度有兩點要求：同軸和齊焦。所謂同軸，是指每個物鏡被定位即調(diào)入光路后，物鏡和目鏡的光軸應(yīng)在一條直線上，所謂齊焦，是

17、指用低倍物鏡調(diào)焦后，從低倍轉(zhuǎn)換到高倍物鏡，無須使用粗調(diào)，即可初見物象（但允許細(xì)調(diào)）。齊焦又稱為"等高轉(zhuǎn)換"。物鏡的齊焦是建筑在下列三條的基礎(chǔ)上：（1）機械筒長m為200毫米；（2）目鏡前焦面應(yīng)在鏡筒上端面之下10毫米處（目鏡中間象距離d）全部目鏡設(shè)計均以此作為基準(zhǔn);（3）物鏡后聚焦與目鏡焦面之間的光學(xué)筒長是隨著物鏡焦距而變，不是固定的。（四）載物臺與移動器載物臺用于承放標(biāo)本。它與顯微鏡的光軸垂直。常用的載物臺有固定式和帶移動器式兩種。固定式結(jié)構(gòu)簡單，它只有一個臺面，臺面中央有一個圓形的通光孔，孔的兩側(cè)各有一個夾標(biāo)本玻片用的片夾。觀察時，只能用手來移動標(biāo)本，不太方便。這種載物

18、臺用于低檔顯微鏡。為了便于操作，常在固定式的載物臺上增加一個移動器，叫做帶移動器的載物臺。當(dāng)標(biāo)本被夾入移動器后，使用移動器的橫向和縱向調(diào)節(jié)旋鈕，便可以上下左右移動標(biāo)本，十分方便，這種載物臺和移動器是靠移動器上的一只滾花螺絲連接的。安裝移動器時，只要把移動器上兩個固定銷插入臺面的螺絲孔內(nèi)，在擰緊滾花螺絲即行。（五）粗動調(diào)焦機構(gòu)粗動調(diào)焦機構(gòu)簡稱粗調(diào)，是用來快速調(diào)焦的裝置。由粗動手輪控制。旋轉(zhuǎn)手輪，可以使物、目鏡與載物臺快速相對移動。粗調(diào)有三種方式；一種是鏡筒升降式，一種是鏡臂升降式，第三種是載物臺升降式，無論哪種方式，粗調(diào)的基本結(jié)構(gòu)都是由齒輪來帶動赤條運動。齒輪固定在粗動手輪的轉(zhuǎn)軸上，齒條固定在鏡

19、筒或鏡座上。齒輪和赤條咬合在一起。轉(zhuǎn)動手輪時，齒輪通過齒條帶動鏡筒（或鏡臂或載物臺）作相應(yīng)的上升或下降。其上下運動的方向，由燕尾導(dǎo)軌作精確控制。燕尾導(dǎo)軌是精密加工的部件，由燕尾導(dǎo)條和燕尾槽組成。燕尾條在燕尾槽內(nèi)滑動或燕尾槽在燕尾條上滑動。他們之間的配合緊密、平穩(wěn)、沒有松動，可保證光學(xué)系統(tǒng)作平穩(wěn)而準(zhǔn)確的直線運動。直筒顯微鏡的粗調(diào)裝于鏡臂的上端，斜筒顯微鏡的粗調(diào)裝與鏡臂下端。（六）微動調(diào)焦機構(gòu)微動調(diào)焦機構(gòu)簡稱微調(diào)，是顯微鏡作精細(xì)調(diào)焦用的一種慢動裝置。它的總調(diào)節(jié)距離一般為1.83mm,由微動手輪控制旋轉(zhuǎn)微動手輪時，光學(xué)系統(tǒng)的移動非常慢。例如，上升或下降2mm的距離，需要轉(zhuǎn)動十幾圈。微調(diào)裝置常見的有杠

20、桿式、齒輪式和偏心輪式三種結(jié)構(gòu)。后者在老產(chǎn)品中常見。1 .杠桿式微調(diào)其工作原理如下：當(dāng)反時針旋轉(zhuǎn)手輪時，螺桿向右移動，杠桿的下端受到擋輪向右的推力作用，使杠桿繞其支點徐徐上擺，從而推動頂桿上升，直至手輪上的銷釘被固定銷釘限位為止。由于頂桿的上端與微動燕尾相連，因此，頂桿上升時，就將微動燕尾抬起，使光學(xué)系統(tǒng)向上作微調(diào)。在微動燕尾上裝有壓縮彈簧。這一彈簧的彈力，通過頂桿傳遞到杠桿上，使杠桿下端始終緊貼在擋輪的端面上。因此，當(dāng)順時針方向旋轉(zhuǎn)手輪時，杠桿在壓縮彈簧的作用下，緊跟擋輪徐徐下擺，頂桿下降，光學(xué)系統(tǒng)向下作微調(diào)，直至手輪上的銷釘被固定銷釘限位為止。另一種杠桿式的微調(diào)它的工作原理與前面一種基本相

21、同。其區(qū)別之處是螺母套在螺桿上，螺桿只能在原地轉(zhuǎn)動，不能左右移動。由于杠桿的下端緊貼著螺母的側(cè)面，限制了螺母的轉(zhuǎn)動。因此，當(dāng)旋轉(zhuǎn)微調(diào)手輪時，螺母只能在螺桿上左右移動而不能轉(zhuǎn)動。當(dāng)螺母左右移動時，即帶動杠桿繞其支點往復(fù)擺動，使頂桿上升或下降，從而帶動光學(xué)系統(tǒng)作相應(yīng)的上升或下降。2 .齒輪式微調(diào)齒輪式微調(diào)是一套齒輪組件。微動手輪套在齒輪的兩端，軸齒輪-第一級齒輪-第二級齒輪-扇形齒輪，依次咬合。因此，當(dāng)旋轉(zhuǎn)手輪時，齒輪組件中的各個齒輪都跟著轉(zhuǎn)動。當(dāng)扇形齒輪轉(zhuǎn)動時，帶動頂桿上升或下降。由于齒輪轉(zhuǎn)動過程中經(jīng)過了三次減速。因此，手輪轉(zhuǎn)過一個很大的角度時，扇形齒輪才轉(zhuǎn)動一個很小的角度。再加上頂桿的安裝位置

22、距扇形齒輪的轉(zhuǎn)動軸很近，所以，頂桿的升降很微小。使用一、使用環(huán)境與工作習(xí)慣（一）使用環(huán)境顯微鏡的工作場所應(yīng)當(dāng)清潔、干燥、無震動、無腐蝕性氣體存在。（二）工作習(xí)慣1 .臺面和凳子的高度要適當(dāng)。2 .鏡檢時，即便用單目顯微鏡，也須兩眼同時睜開。用左眼觀察。以便右眼繪圖或記錄。左手用來旋轉(zhuǎn)微動手輪，右手用來旋轉(zhuǎn)移動器。如一只眼睜。一只眼閉，眼睛容易疲勞，無法久看。工作時間較長時，可兩眼輪流觀察。二、使用前的準(zhǔn)備（一）光學(xué)系統(tǒng)的安裝對新購或已經(jīng)卸掉光學(xué)系統(tǒng)的顯微鏡，使用前必須安裝光學(xué)系統(tǒng)。安裝時，為了防止向下掉灰塵，應(yīng)按照先上后下的順序，即按照目鏡、物鏡、聚光鏡、反射鏡的順序來安裝。安裝物鏡時，應(yīng)先將

23、鏡筒升高，使轉(zhuǎn)換器與載物臺之間保持一定的距離。然后，握住物鏡，把它放入轉(zhuǎn)換器的螺絲口處，先略向反時針方向旋轉(zhuǎn)，待物鏡配上絲紋后，在按順時針方向旋入，旋至中等程度松緊即可。安裝三個以上的物鏡時，應(yīng)根據(jù)物鏡的放大倍數(shù)，從小到大順時針安裝，轉(zhuǎn)換物鏡時,不要用手推著物鏡旋轉(zhuǎn)，那樣會使物鏡的光軸歪斜。最好用手捏著轉(zhuǎn)換器的轉(zhuǎn)動盤旋轉(zhuǎn)，或用手扶著與物鏡轉(zhuǎn)換器銜接處的滾花外圓旋轉(zhuǎn)。目鏡和物鏡裝好后，再將聚光器插入載物臺的下面的聚光器支架內(nèi)。插入的高度應(yīng)使聚光器生至最高時，聚光鏡上透鏡的端面稍低于載物臺的平面，以免載玻片與聚光器的鏡頭相碰。然后，將聚光器的固定螺絲旋緊。對不是電光源的顯微鏡，最后再把反射鏡插入聚

24、光器下面的插孔內(nèi)。（二）校正光軸校正光軸的意義在于使物鏡、目鏡、聚光鏡的主光軸和可變光欄的中心點重合在一條直線上。所以又叫做合軸調(diào)節(jié)或中心調(diào)節(jié)。如果光軸歪斜，會使象差增大，分辨率和清晰度都要下降。檢查方法是將可變光欄開至最大，把低倍物鏡旋入光軸，降低鏡筒，使物鏡與載物臺之間的距離小于該物鏡的工作距離（5mm以下）。不放標(biāo)本，調(diào)節(jié)反射鏡的角度，使視場最亮，或調(diào)節(jié)光源燈的亮度，使視場明暗合適。然后，拔掉目鏡，直接從鏡筒中觀察。一邊把可變光欄慢慢縮小或打開數(shù)次，當(dāng)光欄關(guān)至最小時，光欄的像（此時只有一點點）應(yīng)正好落在物鏡通光孔的中心。當(dāng)光欄開大到一定程度時，光欄孔的像應(yīng)正好與物鏡通光孔的黑圈相重合。若

25、符合上述兩個條件，說明它們"合軸"。否則，就需要調(diào)整。目鏡和物鏡都是固定的，無法進行調(diào)整。合軸調(diào)節(jié)主要是調(diào)整聚光鏡的位置。有些顯微鏡設(shè)有光軸調(diào)節(jié)螺絲，其聚光器支架兩旁有兩個光軸校正螺絲，調(diào)節(jié)這兩個螺絲，即可合軸。另一種聚光器是由框架上三個相隔120。的螺絲支持住其中一個裝有彈簧，可以伸縮。另外兩個螺絲，可以旋動。調(diào)整這兩個螺絲，便可合軸。顯微鏡的光軸校正好后，如果沒有拆下聚光器或其它特殊原因，不必經(jīng)常校正。（三）準(zhǔn)備好標(biāo)本準(zhǔn)備好高質(zhì)量的標(biāo)本備用三、反射鏡、聚光器的用法和對光方法（一）反射鏡的用法一般都使用平面反射鏡，反射太陽的散射光。只有在光線不足或窗外有干擾時，才使用凹面

26、反射鏡。（二）聚光器的用法1 .聚光器高度的調(diào)節(jié)一般的聚光鏡，在平行光照射的情況下，其焦點落在它上端透鏡平面中心上方約1.25mm處。當(dāng)使用高倍或油鏡時，由于放大率大，鏡像亮度小，需要較強的照明。因此，應(yīng)把聚光器升至最高，以便使聚光鏡的焦點正好落在標(biāo)本平面上。但在使用低倍鏡時，可將聚光器適當(dāng)下降。2 .可變光欄的用法可變光欄起兩個作用。一是控制射向標(biāo)本的光通量；二是改變聚光器的數(shù)值孔徑。在這兩個作用中，后者是主要的。為了使物鏡的分辨率得到充分的利用，從原則上說，聚光器的數(shù)值孔徑應(yīng)與物鏡的相同。否則，分辨率或清晰度就要下降。（三）對光方法對電光源顯微鏡來說，使用時，只要將光調(diào)節(jié)在合適的亮度即行。

27、不需要進行對光。但對使用自然光的低檔顯微鏡來說，要想獲得良好的觀察效果，必須充分利用照明光線。因此，鏡檢之前應(yīng)先對光。對光時，將低倍鏡旋入光軸，聚光鏡適當(dāng)升高，可變光欄開至最大。然后，從目鏡中觀察，同時轉(zhuǎn)動反射鏡，直至視場最明亮、清晰為止。如果利用自然光，則盡量躲避窗框和窗外樹枝的干擾。四、物鏡的正確調(diào)焦對光完成后，升高鏡筒，將標(biāo)本玻片夾在移動器上，并將欲檢查的部分移至載物臺通光孔的中央，然后開始調(diào)焦。無論作何種檢查，均應(yīng)從低倍鏡開始。調(diào)焦時，先用粗動手輪將鏡筒下降，使低倍鏡的前透鏡與蓋玻片之間的距離略縮小于該物鏡的工作距離（5mm以下）。為了避免物鏡壓在標(biāo)本玻片上，可從側(cè)面窺視。然后，一邊從

28、目鏡中觀察視野，一邊利用粗動手輪將鏡筒徐徐上升，待初見物像后，改用微動手輪作精細(xì)調(diào)焦，直至物像最清晰為止。低倍物鏡的視場大，有利于觀察標(biāo)本的全貌。也可利用移動器尋覓觀察的目標(biāo)，如有必要，可將尋得的目標(biāo)移至視場的中心，為高倍鏡觀察作好準(zhǔn)備。從低倍鏡轉(zhuǎn)換為高倍鏡時，如果物鏡是顯微鏡的原配物鏡，所用的載玻片、蓋玻片有符合標(biāo)準(zhǔn)，一般都可以進行"等高轉(zhuǎn)換"。即轉(zhuǎn)換后，只要稍微調(diào)節(jié)一下微調(diào)旋鈕，即可看到清晰的圖象。但油鏡不強求齊焦，最好先將鏡筒升高后再轉(zhuǎn)換，最后按低倍鏡的調(diào)焦方法重新調(diào)焦。使用油鏡的方法如下：先將鏡筒升高，取下標(biāo)本玻片，稍稍降低聚光器，并在聚光器的鏡頭上滴兩滴香柏油（油

29、中不應(yīng)有氣泡。如有，可用小木簽除去），再將標(biāo)本蓋玻片放回原處，把聚光器升高，使載玻片的底面與香柏油接觸。這樣，就完成了聚光鏡的油浸。接著，在蓋玻片上滴上一滴香柏油。然后從側(cè)面窺視，利用粗調(diào)使鏡筒盡量下降，直至油鏡的前透鏡浸沒在香柏油中（但尚未接觸玻片），這樣，又完成了物鏡的油浸。然后，一邊從目鏡中觀察，一邊利用微動手輪將鏡筒緩緩上升（注意不要擰錯了方向，壓碎蓋玻片），直至視野中出現(xiàn)最清晰的物像為止。聚光鏡的油浸，還可以采用另一種滴油方法：即不直接把油滴在聚光器的鏡頭上，而是把載玻片翻過來，將油滴在載玻片的底面上，然后在翻過去，對準(zhǔn)放置于聚光器上面，再使聚光器上升。來完成聚光器的油浸。這種方法雖

30、然不那么順手，但比較安全。有些人使用玻璃棒直接與聚光鏡接觸來涂抹香柏油，這種方法容易劃傷鏡片，不宜采用。在使用油鏡時，允許在聚光鏡與標(biāo)本之間不加香柏油，即聚光鏡上仍以空氣為介質(zhì)，但這會犧牲物鏡的分辨率。如果油鏡觀察后，有需要轉(zhuǎn)回高倍物鏡觀察，應(yīng)將蓋玻片上的油擦去，以免沾污高倍物鏡。但聚光器上的油可以不擦，只要把光欄適當(dāng)縮小一點即可。油鏡使用完畢后，要及時將香柏油擦拭干凈。鏡頭上可先用干凈的擦鏡紙擦干凈即行。聚光鏡的擦拭方法與此相同。如標(biāo)本需要保存，玻片上的香柏油可用"拉紙法"擦拭干凈。即將擦鏡紙覆蓋在玻片上，在紙上滴上一滴二甲苯，趁濕將紙條平拖著往外拉，連續(xù)幾次即可擦干凈。

31、最后指出：在整個調(diào)焦過程中（尤其是高倍物鏡和油鏡的調(diào)焦），每個動作都要緩慢進行。否則，物像會一閃而過，找不到觀察目標(biāo)。維護一、顯微鏡的維護（一）經(jīng)常性的維護1 .防潮如果室內(nèi)潮濕，光學(xué)鏡片容易生霉，生霧。一旦生霉，很難除去。內(nèi)部的鏡片由于不便擦拭，潮濕對其危害性更大。機械零件受潮，容易生銹。為了防潮，除了選擇干燥的房間外，存放地點也應(yīng)離墻、離地、遠(yuǎn)離潮濕。顯微鏡箱內(nèi)應(yīng)放置12袋硅膠作干燥劑。2 .防塵光學(xué)元件表面落入灰塵，不僅影響光線通過，而且經(jīng)光學(xué)系統(tǒng)放大后，會生成很大的污斑，影響觀察?；覊m、砂粒落入機械部分，還會增加磨損，引起運動受阻，危害同樣很大。因此，必須經(jīng)常保持顯微鏡的清潔。3防腐蝕

32、顯微鏡不能和具有腐蝕性的化學(xué)試劑放在一起，如硫酸、鹽酸、強堿等。4 .防熱防熱的目的主要是為了避免熱脹冷縮引起的開膠與脫落。（二）使用中的維護使用時一定要正確操作，小心謹(jǐn)慎。在不少情況下，儀器的損壞是由于操作粗心或操作方法錯誤引起的。例如：1 .微調(diào)是顯微鏡機械裝置中較精細(xì)而又容易損壞的元件，擰到了限位以后，就擰不動了。此時決不能強擰。否則，必然損壞。調(diào)焦時，遇到這樣情況，應(yīng)將微調(diào)退回35圈，重用粗調(diào)調(diào)焦，待初見物像后，在改用微調(diào)。如能事先將微調(diào)調(diào)至中間位置（一般在微動燕尾的側(cè)面上刻有位置標(biāo)記"-="當(dāng)微動燕尾上的單線對著兩橫線的中間時，微調(diào)即處于中間位置），使正反兩個方向

33、都有大體相等的調(diào)節(jié)余量，當(dāng)然更好。2 .使用高倍鏡觀察液體標(biāo)本時，一定要加蓋玻片。否則，不僅清晰度下降，而且試液容易浸入高倍鏡的鏡頭內(nèi)，使鏡片遭受污染和腐蝕。3油鏡使用后，一定要擦拭干凈。香柏油在空氣中暴露時間過長，就會變稠和干涸，到這時再去擦拭就比較困難了。鏡片上留有油漬，清晰度必然下降。4儀器出了故障，不要勉強使用。否則，可能引起更大的故障和不良后果。例如，在粗動手輪不靈活時，如果強行旋動，會使齒輪、赤條變形或損壞。（三）光學(xué)系統(tǒng)的擦拭平時對顯微鏡的各光學(xué)部分的表面，用干凈的毛筆清掃或用擦鏡紙擦拭干凈即行。在鏡片上有摸不掉的污物、油漬或手??；鏡片生霉、生霧；長期挺用后復(fù)用時，需要進行比較認(rèn)

34、真的擦拭。1.擦拭范圍目鏡和聚光鏡允許拆開。物鏡因結(jié)構(gòu)復(fù)雜，裝配時又要專門的儀器來校正才能恢復(fù)原有的精度，故嚴(yán)禁拆開。拆卸目鏡和聚光鏡時，要注意以下幾點：（1）小心謹(jǐn)慎（2）拆卸時要標(biāo)記各元件的相對位置（可在外殼上劃線作標(biāo)記）、相對順序和鏡片的正反面，以防重裝時弄錯。（3）操作環(huán)境保持清潔、干燥。拆卸目鏡時，只要從兩端旋出上下兩塊透鏡即可。目鏡內(nèi)的視場光欄不能移動，否則會使視場界線模糊，聚光鏡旋開后嚴(yán)禁進鏡，因其上透鏡是油浸的，出廠時經(jīng)過良好的密封，在分解會破壞它的密封性2.擦拭方法先用干凈的毛筆或吹風(fēng)球除去鏡片表面的灰塵。然后用干凈的絨布在鏡片中心開始向邊緣作螺旋形單向運動。擦完一次把絨布換

35、個地方，直至擦干凈為止。如果鏡片上有油漬、污物或指印等擦不掉時，可用柳枝條裹上脫脂棉，蘸少量酒精和乙酸合液（酒精80%,乙醛20%）擦拭。如果有較重的霉點或霉斑無法除去是4?？捎妹藓灊窈笳成咸妓徕}粉（含量為99%以上）進行擦拭。擦拭后，應(yīng)將粉末清除干凈。鏡片是否干凈可用可用鏡片上的反射光線進行檢查。要注意的是，擦拭前一定要將灰塵除凈，否則灰塵中的砂粒會將鏡面劃起溝紋。不準(zhǔn)用毛巾、手帕、衣服等去擦拭。酒精乙醛混合不可用的太多，以免脫膠。鏡片表面有一層紫藍(lán)色的透光膜，不要誤作污物來擦拭。（四）機械部分的擦拭表面涂漆部分，可用布擦拭。但不能使用酒精、乙醛等有機溶劑，以免脫漆機械裝置故障的排除（一）粗

36、調(diào)部分的故障排除粗調(diào)的主要故障是自動下滑或升降時松緊不一。所謂自動下滑是指鏡筒或鏡臂靜在某一位置時，不經(jīng)調(diào)節(jié)，在它本身重量作用下，自動地慢慢滑下來的現(xiàn)象。其原因是鏡筒或鏡臂本身的重力大于靜摩擦力引起的。解決的辦法是增大靜摩擦力，使之2鏡筒或鏡臂本身的重力。直筒顯微鏡的靜摩擦力來源于手輪和齒桿套之間的賽璐珞墊圈。如果手輪和齒輪桿套從兩側(cè)把它壓得愈緊，靜摩擦力就愈大。調(diào)整時，用一只手握住粗動手輪雙眼螺母上打有固定銷的一端，另一只手用雙眼螺母插入無固定銷的一端，用力旋緊，即可制止下滑。如不奏效，說明墊圈太薄，應(yīng)將不打固定銷的雙眼螺母旋出，拔出手輪，更換或加厚墊圈，然后上緊，即可排除故障。另一種直筒顯

37、微鏡的粗調(diào)機構(gòu)，其齒桿套是夾頭式的，兩只螺絲緊壓著夾頭，使齒輪獲得足夠的靜摩擦力。當(dāng)下滑是4,只要適當(dāng)旋緊這兩個螺絲，即可排除故障。第三種直筒顯微鏡的粗調(diào)機構(gòu)是壓板式的。當(dāng)下滑時，只要旋緊螺絲，即可制止下滑。斜筒顯微鏡的粗調(diào)機構(gòu)。當(dāng)鏡臂自動下滑時，可用兩手分別握住手輪，用力擰緊，即可制止下滑，如不奏效，則應(yīng)更換較厚的墊圈或錐形軸套。鏡筒自動下滑，往往給人與錯覺，誤認(rèn)為是齒輪與齒條配合的太松引起的。于是就在齒輪下加墊片。這樣，鏡筒的下滑雖然被暫時止住，但卻使齒輪和齒條處于不正常的咬合狀態(tài)。運動的結(jié)果，使得齒輪和齒條都變形。尤其是墊得不平時，齒條的變形更厲害。結(jié)果是一部分咬得緊，一部分咬得松。因此

38、，這種方法不宜采用。此外，由于粗調(diào)機構(gòu)長久失修，潤滑油干枯，升降時會產(chǎn)生不舒服的感覺，甚至可以聽到機件的摩擦聲。這時，應(yīng)將機械裝置拆下清洗，上油脂后重新裝配。（二）微調(diào)部分故障的排除微調(diào)最常見的故障是卡死與失效。杠桿式微調(diào)的主要故障是卡死。其原因一是由于限位螺釘經(jīng)常受到摩擦和撞擊，產(chǎn)生了摩損和變形；其次是操作時，到了限位后沒有感覺出來，繼續(xù)用力旋轉(zhuǎn)，使兩個零件的限位部分發(fā)生對卡。這時，應(yīng)更換與限位銷釘連接的零件、限位器或限位螺釘、甚至全套微調(diào)裝置后才行。如果損壞不嚴(yán)重，也可把限位銷釘?shù)亩嗣驿嚾ミm量，讓螺桿多走一圈才限位。若微調(diào)上升時有效，下降時失效，則可能是微動燕尾上的壓縮彈簧彈力不足或燕尾槽

39、由于缺油，或撞擊變形等原因配合得過緊所至。前者應(yīng)更換彈簧，后者應(yīng)加油或修理燕尾槽。此外，裝配不正確也會使微調(diào)失效。例如，缺乏經(jīng)驗者，拆開微調(diào)重新裝配說，沒有把頂桿頂至燕尾上。碰到這種情況，只要重新裝配合適即行。齒輪式微調(diào)的主要故障是失效。原因是限位螺釘長期磨損或到了限位以后繼續(xù)用力旋轉(zhuǎn)，使限位跳過，造成扇形齒輪過位脫落所至。這時應(yīng)更換限位螺釘，并使扇形齒輪正確復(fù)位。微調(diào)機構(gòu)零件細(xì)小，結(jié)構(gòu)緊湊，是顯微鏡中最精細(xì)的部分，并且又安裝在儀器內(nèi)部，修理時一定要小心。沒有一定把握，不要隨便亂拆。（三）物鏡轉(zhuǎn)換器的故障排除物鏡轉(zhuǎn)換器的主要故障是定位裝置失靈。一般是定位彈簧片損壞（變形、斷裂、失去彈性、彈簧片

40、的固定螺釘松動等）所致。更換新彈簧片時，暫不要把固定螺釘旋緊，應(yīng)按第三節(jié)中所講的方法，先作光軸校正。等合軸以后，在旋轉(zhuǎn)螺絲。若是內(nèi)定位式的轉(zhuǎn)換器，則應(yīng)旋下轉(zhuǎn)動盤中央的大頭螺釘，取下轉(zhuǎn)動盤，才能更換定位彈簧片，光軸校正的方法與前面相同。（四）聚光器升降機構(gòu)故障排除這部分的主要故障也是自動下滑，排除方法如下：1 .直筒顯微鏡聚光器的升降機構(gòu)調(diào)整時，一只手用雙眼螺母扳手插入手輪端面上的雙眼螺母內(nèi)，另一只手用螺絲刀插入另一端的大頭螺釘槽口內(nèi)，用力旋緊即可制止下滑。2 .斜筒顯微鏡的升降機構(gòu)調(diào)整時，首先用螺絲刀把雙眼螺母中間的駐鏢退出12圈，軸承墊圈是與駐鏢壓緊配合的,因此，也會跟著它一起退出，并脫離齒

41、桿的端面。然后，用雙眼螺母扳手把雙眼螺母向調(diào)節(jié)座旋進。同時，用另一只手轉(zhuǎn)動手輪，進行實驗，直到升降機構(gòu)松緊合適，又能停留在任意位置上時，才停止雙眼螺母的旋進。最后，再把駐鑲旋入，是軸承墊圈接觸齒桿就行了。這樣調(diào)整之所以能夠排除故障，是因為調(diào)節(jié)座的內(nèi)孔是錐形的。錐形軸套在軸向有槽口。當(dāng)雙眼螺母向里旋進時，將錐形套向里頂，使錐形套在前進時，槽口變小，內(nèi)孔收縮，將齒桿夾得更緊，加大了齒輪轉(zhuǎn)動的摩擦阻力，從而制止自動下降。其他顯微鏡簡介一、暗視場顯微鏡暗視場顯微鏡又叫暗視野顯微鏡。它與普通的顯微鏡的主要區(qū)別是照明方式不同。它用強而窄的斜射光束照射標(biāo)本，而又不讓光束進入物鏡。在沒有光進入物鏡時，視場是黑暗的，故叫暗視場顯微鏡。但由于標(biāo)本中的微粒受光照射后能夠散射光線，當(dāng)散射光線進入物鏡時，在顯微鏡中能夠看到微粒的散射光點，好象微粒本身在發(fā)光一樣。這道理正如在一間較暗的室內(nèi)，從墻上的小孔中射入一束強烈的陽光，我們在光路上能夠看見灰塵的存在一樣。這種現(xiàn)象，在光學(xué)上被稱為丁道爾現(xiàn)象。暗視場顯微鏡就是根據(jù)這一原理設(shè)計的。暗視場顯微鏡能夠觀察到0.004gm以上的微粒存在。普通顯微鏡看不見的微粒，它可以看見。但它只能看到物體的外表輪廓和運動狀態(tài)，而不能辨認(rèn)其內(nèi)部結(jié)構(gòu)。從結(jié)構(gòu)上看，只需將普通顯微鏡更換上一個暗視場聚光器即可變?yōu)榘狄晥鲲@微鏡。常用的暗視場顯微鏡有拋物