前列腺素E_2對急性肝衰竭小鼠肝臟的保護作用及促肝再生作用的研究-內(nèi)科學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文

1、.碩士學(xué)位論文前 列 腺 素 E 2對 急 性 肝 衰 竭 小 鼠肝 臟 的保 護 作 用 及 促肝 再 生 作 用 的研 究AS tu d y of P ro sta g la n d in E 2 o n A llev ia tin g L iv er In d u ry a n d E n h a n cin g L iv er R eg en era tio n A cu te L iv e r F a ilu r e in Mic e院系：中山醫(yī)院專業(yè)：內(nèi)科學(xué)姓名：黃瑩瑩指 導(dǎo) 老 師：孫劍勇 副主任醫(yī)師導(dǎo)師組成員：金建軍主管技師完成日 期 :2 0 12 年 4 月：目錄_棘1巾

2、翅￥2英 文 摘 要4引S6第 一 部 分 前 列 腺 素 E 2對 急 性 肝 衰 竭 小 鼠肝 臟 的 保 護 作 用 研 究11f rs11材 料 與 方 法11142 02 2參 考 文 獻(xiàn)2 2第 二 部 分 前 列 腺 素 E 2 對 急 性 肝 衰 竭 小 鼠肝 再 生 促 進 作 用 及 其 與 H G F 、W n t2及 3 -caten in 關(guān) 系 的 研 究2 6H ITs2 6材 料 與 方 法2 6結(jié)果3 7討論4 34 5參 考 文 獻(xiàn)4 5像5 0It6 1碩 士 期 間 發(fā) 表 的 論 文6 4g CM6 5釔 H 人 7 :碩 上 學(xué) 位 論 文縮 略 語

3、 表英 文 縮 寫英 文 全 稱中 文 全 稱A P A PA cetam in op h en對 乙 酰 氨 基 酚A P SA m m o n iu m p ersu lfate過 硫 酸 銨A L TA la n in e a m in o tra n sfe ra se谷 丙 轉(zhuǎn) 氨 酶A L FA c u te liv e r fa ilu re急 性 肝 衰 竭B S AB o v in e s e ru m a lb u m in牛 血 清 蛋 白C 0 X -2C y clo o x y g en ase-2環(huán) 氧 化 酶 -2D E P CD ieth y l p y ro

4、carb on ate二 乙 基 焦 磷 酰 胺d m P G E 216 ,16 -d im ethy lp ro stag lan d in E 216 ，16 -二 甲基 -前 列 腺 素 E 2E R K 1 /2E x tracellu lar sig n al-reg u lated k ina se 1 an d 2細(xì) 胞 外 信 號 調(diào) 節(jié) 激 酶 1/2E G FE p id erm al grow th facto r表 皮 生 長 因 子H G FH ep ato cy te grow th facto r肝 細(xì) 胞 生 長 因 子H R PH o rserad ish

5、p ero x id ase辣 根 過 氧 化 物 酶iN O Sin d u c ib le n itric o x id e sy nth ase誘 生 型 一 氧 化 氮 合 酶N ON itric o x id e一 氧 化 氮N A P Q IN -acety l-p -b enzo qu in o n im in eN -乙 酰 -對 苯 醌 亞 胺P M S FP h en y lm eth an esu lfo n y l flu o rid e苯 甲基 磺 酰 氟P B SP h o sp h ate b u ffer saline磷 酸 鹽 緩 沖 液P C N AP ro

6、 liferatin g cell n u clear an tigen增 殖 細(xì) 胞 核 抗 原p g e 2P ro stag lan d in E 2前 列 腺 素 E 2P I3 KP h o sp h atidy lin o sito l 3-k in ase磷 脂酰肌 醇(-3)激 酶P V D FP o ly v iny liden e flu o ride m em bran e聚 偏 二 氟 乙 烯 膜R T -P C RR eal-tim e p o ly m erase ch ain reaction實 時 定 量 P C RS D SS o d iu m d o d e

7、cy lsu lfateS P S SS tatistical p ack ag e fo r so cial scien ce s社 會 科 學(xué) 統(tǒng) 計 軟 件 包T B ST ris b u ffe r s a lin e二羥 甲基氨 基 甲烷 緩沖 鹽水T E M E DT etram eth y leth y len ed iam in e四 甲 基 乙 二 胺T risT ris(h y d ro xy m ethy l) am ino m eth an e三 羥 甲基 氨 基 甲烷T B ILT o ta l B iliru b in總 膽 紅 素W BW e ste rn B l

8、o t蛋 白 印 跡釔 H 人 7 '碩 丄 7 '位 論 文中 文 摘 要第 一 部 分前 列 腺 素 E 2對 急 性 肝 衰 竭 小 鼠肝 臟 的保 護 作 用 研 究【摘 要 】目的 ：本 研 究通 過 建立 對 乙酷氨 基 般 (acetam inophen ,A PA P ) 誘 導(dǎo) 的小 鼠急 性 肝 衰竭 模 型 ，研 究前 列 腺素 E 2 (prostaglandin E 2,P G E 2) 對 A PA P 導(dǎo)致 的急性 肝 哀 竭 小 鼠 肝 臟 的 保 護 作 用 。方 法 ：健 康 8 周 齡 IC R 小 鼠 ， 隨 機 分 為模 型 別 照 組

9、 、P G E 2 治 療 組 和 正 常劉 照 組 。 正 常 對 照 組 小 鼠給 予 生 理 鹽 水 腹 腔 注 射 和 無 菌 P B S 皮 下 注 射 ；模 型 對 照 組 小 鼠 A PA P 腹 腔 注 射 造 模 后 給 予 無 菌 P B S 皮 下 注 射 治 療 ；P G E 2 治 療 組 小 鼠A PA P 腹 腔 注 射 造 模 后 給 予 d m P G E 2 S 下 注 射 治 療 。各 組 小 鼠造 模 后 第 12 小 時 、 24 小 時 、4 8h 處 死 米 血 檢 測 血 清 谷 丙 轉(zhuǎn) 氧 酶 （alan in e am inotran sfe

10、rase, A L T ) 和 總 膽 紅 素 （total b ilirubin , T B IL ) 濃 度 ，取 肝 臟 組 織 進 行 病 理 檢 查 并 對 肝 組 織 損 傷 程 度 進 行 分 級 。結(jié) 果 ： 模 型 劉 照 組 小 鼠血 清 A L T 在 造 模 后 12h 、24h 、4 8h 均 顯 著 高 于 正 常 對 照 組 （P C O .O S ); 造 模 后 12 h 、2 4 h P G E 2 治 療 組 小 鼠 血 清 A L T 低 于 同 時 間 點 模 型 對 照 組 （P < 0 .0 5 )，4 8h 兩 組 差 別 未 達(dá) 到 統(tǒng)

11、計 學(xué) 顯 著 性 （P > 0 .0 5 )。造 模 后 12 h 模 型 劉 照 組 小 鼠血 清 T B IL 較 正 常 對 照 組 升 高 （尸< 0 .0 5 ), P G E j g 療 組 較 模 型 劉 照 組 降 低 （P < 0 .0 5 ); 2 4 h 、4 8h 各 處 理 組 間 無 明 顯 差 異 （P C 0 .0 5 )。肝 組 織 病 理 學(xué) 檢 查 顯 示 模 型 劉 照 組 小 鼠在 造 模 后 12 h 已 經(jīng) 出 現(xiàn) 了 明 顯 的 肝 臟 損 害 表 現(xiàn) ，12h 、 2 4 h 、4 8h 肝 損 傷 分 級 分 別 為 4

12、.0 ±0 .7 級 、 3 .8 ±0 .8 級 、2 .4 ± 1.1 級 。P G E 2 治 療 組 造 模 后 12 h 、 2 4 h 、4 8h 肝 損 傷 平 均 分 級 分 別 為 1.4 ± 0 .5 級 、 2 .2 ±0 .8 級 、 1.2±0.4 級 與 模 型 X、j照 組 相 比 明 顯 減 輕 （P < 0 .0 5 )。結(jié) 論 ：P G E 2 不 但 能 減 輕 A PA P 所 造 成 的 肝 損 傷 ，還 可 以加 快 肝 損 傷 的 恢 復(fù) ， 具 有 開 發(fā) 為 治 療 急 性 肝

13、哀 竭 的 有 效 藥 物 的潛 力 ?！娟P(guān) 鍵 詞 】 急 性 肝 功 能 哀 竭 、 劉 乙酰 氨 基 酚 、 前 列 腺 素 E 2、 小 鼠2k 旦 大 卞 碩 丄 7 位 論 文第 二 部 分 前 列 腺 素 對 急 性 肝 衰 竭 小 鼠肝 再 生 促 進 作 用 及 其與 H G F 、 W n t2 及 0 -caten in 關(guān) 系 的研 究【摘 要 】目的 ： 通 過 觀 察 A PA P 誘 導(dǎo) 的 肝 衰 竭 小 鼠肝 臟 再 生 情 況 及 檢 測 H G F 、W nt2 及 0 -caten in 在 肝 臟 的 表 達(dá) 水 平 ,研 究 P G E 2 對 肝

14、衰 竭 小 鼠肝 再 生 的 影 響 ，及 H G F 、 W nt2 及 P -catenin 在 P G E 2 調(diào) 節(jié) 肝 再 生 過 程 中所 發(fā) 揮 的 作 用 。方 法 ：取 各 處 理 組 小 鼠造 模 后 12 h 、2 4 h 、4 8h 肝 組 織 石 蠟 切 片 進 行 增 殖 細(xì) 胞 核抗 原 （proliferating cell nuclear antigen, P C N A ) 免疫組化染 色 ， 以檢測肝細(xì)胞 分 裂 增 殖 情 況 ；用 R T -P C R 及 W estern B lot 檢 測 肝 臟 組 織 中 H G F 、W nt、P -cate

15、n in m R N A 及 蛋 白水 平 的 改 變 。結(jié) 果 ： 在 造 模 后 12 h 、24 h , 模 型 對 照 組 小 鼠肝 臟 P C N A 陽 性 率 低 于 正 常 對 照 組 ， 但 差 別 未 達(dá) 到 統(tǒng) 計 學(xué) 顯 著 性 （P > 0 .0 5 ) , 4 8h 模 型 對 照 組 小 鼠 肝 臟 P C N A 陽 性 率 高 于 正 常 對 照 組 （15 .4 ± 4 .8% u ? 10 .0 ± 1.9 % , 尸 < 0 .0 5 ); 同 時 間 點 相 比 ， P G E 2 治 療 組 小 鼠肝 臟 P C N

16、A 陽 性 率 均 高 于 正 常 對 照 組 和 模 型 對 照 組 ，其 中 2 4h 、4 8h 差 別 達(dá) 到 統(tǒng) 計 學(xué) 顯 著 性 （戶 < 0 .0 5 ) 。 各 時 間 點 模 型 對 照 組 小 鼠 與 正 常 對 照 組 小 鼠相 比 ， 肝 臟 H G F 和 P -caten in m R N A 表 達(dá) 無 顯 著 差 異 （P > 0 .0 5 ); P G E 2 治 療 組 小 鼠 肝 臟 H G F 和 0 -caten in m R N A 表 達(dá) 較 模 型 對 照 組 升 高 (P < 0 .0 5 ) 。造 模 后 12h P G

17、E 2 治 療 組 小 鼠肝 臟 W nt2 m R N A 表 達(dá) 高 于 模 型 對 照 組 （/ 0 .05 ), 但 在 2 4 h 、4 8h 兩 組 相 比 無 明 顯 差 別 (尸0 .0 5 )。 12 h 、24h P G E 2 治 療 組 小 鼠 H G F 蛋 白表 達(dá) 水 平 高 于 模 型 對 照 組 ， 各 組 小 鼠肝 臟 3 -caten in 、W n t2 蛋 白 水 平 表 達(dá) 改 變 ? 明 顯 。結(jié) 論 ：P G E 2 具 有 促 進 A PA P 導(dǎo) 致 的 急 性 肝 衰 竭 小 鼠肝 臟 再 生 的 作 用 ，其 促肝 再 生 效 應(yīng) 可 能

18、 與 H G F 和 P -caten in 作 用 相 關(guān) 。【關(guān) 鍵 詞 】 肝 再 生 、 前 列 腺 素 E 2、 肝 細(xì) 胞 生 長 因 子 、 0 -caten in 、 W n t2 中 圖 分 類 號 ：R 5 75 .33人學(xué)碩士學(xué)位論文A b s tr a c tP a r t IT h e R o le o f P ro sta g la n d in E 2 in A llev ia tin g L iv er In d u ry inA c u te L iv e r F a ilu r e in Mic eA im s: T o inv estigate th e

19、ro le of p ro staglan din E 2 (P G E 2) in allev iatin g acute liv er injury in d uced b y acetam in op h en (A PA P ) in m ice .M eth od s: E ight-w eek IC R m ice w ere ran d om ly d iv id ed into three grou p s: (1) th e n orm al control grou p : n o rm al m ice treated w ith salin e; (2 ) th e l

20、iv er failure g roup : A PA P -in du ced liv er failu re m ice treated by p h o sp h ate b u ffer salin e; an d (3 ) P G E 2-treated gro up : A PA P -in d u ced liv er failure m ice treated b y d m P G E 2; T h e m ice w ere k illed an d sam p les w ere o btain ed at 12 h ou rs, 2 4 h o u rs, 4 8h o

21、u rs after A PA P adm in istratio n ,resp ectiv ely. S eru m alan in e am in otran sferase (A L T ) an d total b iliru b in (T B IL ) w ere m easured an d section s of liv er w ere p rep ared for h isto lo g ical e x a m in a tio n .R esu lts: T he lev el o f seru m A L T o f th e liver failu re gro

22、 up m ice w as elev ated at 12 h , 2 4 h , 4 8h after A PA P ad m in istration com p arin g to n orm al m ice; an d it w as lo w er in P G E 2 treated m ice at 12 h an d 2 4 h co m p arin g to the liv e failure group (P < 0 .0 5), w h ile th ere w as n o sig n ifican t d ifferen ce at 4 8h (P >

23、; 0 .0 5). T h e lev el o f seru m T B IL o f liv er failu re m ice w as elev ated at 12h after A PA P ad m in istratio n co m p arin g to n o rm al m ice w h ereas d o w n -reg u lated in m ice o f P G E 2-treated group (P < 0 .0 5); h o w ev er, n o sig n ifican t d ifferen ce w ere fo un d am

24、on g th e th ree gro u p s at 2 4 h an d 4 8h (P > 0 .0 5). S ev ere liv er d am ag e w as ob serv ed at 12h after A P A P ad m in istratio n b y h isto log ical ex am in ation , an d the d eg ree of liv er inju ry o f th e m ice in liv er failu re g roup at 12h , 2 4 h , 4 8h w ere 4 .0 土0 .7 ,

25、3 .8 土0 .8, 2 .4 土1.1 ，resp ectiv ely ; w h ile h ed eg ree o f liv er inju ry o f th e m ice in P G E 2-treated gro up at 12 h , 2 4 h , 4 8h w ere 1.4 土 0 .5 , 2 .2 ±0 .8 ，1.2 ±0 .4 , resp ectiv ely. T h e P G E 2 gro up sh ow ed slig h ter liv er inju ry th an th e liv er failu re g ro

26、u p (P < 0 .0 5 ).C o n clu sio n s: P G E 2 can allev iate A PA P -in du ced acu te liv er inju ry in m ice an d facilitate th e reco very o f th e liv er. It m ig h t b e a p otential m ed ication fo r treatin g liv er fa ilu re .K ey w o rd s A cu te L iv er F a ilu re,A cetam ino p h en ,P ro

27、 stag lan d in E 2,M ice4復(fù) 旦 人 7 :碩 丄 7 :位 論文P a r t I IT h e E ffect o f P ro sta g la n d in E 2 in L iv er R eg en era tio n o f A cu te L iv er F a ilu re in M ice a n d th e C o r rela tio n sh ip w ith H G F ，W n t2 a n d p -ca ten inA im s: T o in v estig ate th e effect o f P G E 2 in en h a

28、n cin g liv er regen eration in m ice w ith A PA P -in d u ce d ac u te liv er failu re an d th e ro le o f H G F , W n t2 an d 3 -caten in in regu latio n o f liv er reg en eration by P G E 2.M eth o d s: P ro liferatin g cell n u clear an tig en (P C N A ) w h ich in d icatin g th e lev el o f liv

29、 er reg en eratio n w as ev alu ate by im m un ohisto ch em istry 011 sectio n s o f p araffin -em b ed d ed liv er tissu e. T h e ex p ression o f H G F, W nt2 an d 0 -caten in w as ev alu ated by rev erse tran scrip tio n -p o ly m erase ch ain reactio n an d w estern b lot.R esu lts: T h e rate o

30、f P C N A -p o sitiv e cells in liv er of liv er failu re m ice grou p w as d ow n -reg u lated at 12 h an d 2 4 h after A PA P ad m in istration co m p arin g to n o rm al g rou p , b u t th e d ifferen ce d id n ot rea ch the statistic sign ifican ce (P > 0 .0 5); an d it w as u p -reg u lated

31、at 4 8h (15 .4 ±4 .8%v s 10 .0 ± 1.9 % , P < 0 .0 5). T reatm en t o f P G E 2 u p -regu lated th e rate o f P C N A -p o sitive cells at 24 h an d 4 8 after A PA P ad m in istratio n resp ectiv ely , co m p arin g to o th er grou p s (P < 0 .0 5 ). T h e ex p ressio n o f H G F an d

32、P-caten in m R N A w as u p -regu lated in m ice o f P G E 2 -treated grou p com p arin g to liv erfailu re gro up (P < 0 .0 5), w h ile th ere w as n o sig n ifican t differen ce b etw een n o rm al group an d liv er failu re group (尸 > 0 .05). T he expression of W nt2 m R N A w as up -regu l

33、ated in P G E 2 -treated grou p com p arin g to liv er failure g ro u p at 12h after A PA P -adm in istration (尸< 0 .0 5).T he level of P -caten in an d W nt2 p rotein sh ow ed n o ch an ged by w estern blot; w h ile the level o f H G F protein w as up -regulated in m ice o f P G E 2-treated grou

34、 p co m p arin g to liv er failu re g ro up at 12 h an d 2 4 h ,resp ectiv ely .C on clu sion s: P G E 2 w as capab le of enh an cin g liv er reg eneratio n in m ice w ith A PA P -in du ced acu te liv er failu re and th is effect m ig h t co rrelate to H G F an d |3-c a te n in .K ey W o rd s L iv e

35、r R eg en eration , P ro stag lan d in E 2,H ep ato cy te G ro w th F acto r, |3-c aten in , W n t2D iscip lin e C atego ry N u m b e r: R 5 7 5 .3復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文引言急 性 肝 功 能 衰 竭 （acute liv er failu re, A L F ) 是 由于 各 種 原 因 如 病 毒 性 肝 炎 、 使 用 肝 臟 損 傷 藥 物 等 造 成 的 肝 細(xì) 胞 大 量 壞 死 從 而 導(dǎo) 致 肝 功 能 嚴(yán) 重 受 損 為 特 征 的

36、綜 合 征 ，其 預(yù) 后 差 ，病 死 率 極 高 。不 同 的 國 家 和 地 區(qū) 肝 衰 竭 的 主 要 病 因 不 同 ，在 我 國 ，以嗜 肝 病 毒 感 染 為 主 ，藥 物 所 致 的 肝 衰 竭 也 呈 上 升 趨 勢 ，在 西 方 國 家 ，主 要 以藥物性肝衰竭 為主 ，其 中由對 乙酰氧基酷 (acetam inophen , A PA P ) 所導(dǎo)致的肝 衰 竭 占了大 部 分 1，2。對 乙酰 氨 基 酷 是 常用 解 熱 鎮(zhèn) 痛 藥 ，使 用 治療 劑 量 的A PA P 比較 安 全 ，但 過 量 或 長 期 使 用 A PA P 可 導(dǎo) 致 急 性 肝 衰 竭 。

37、來 自美 國 的 統(tǒng) 計 數(shù) 據(jù) 顯 示 ，約 50% 的 A L F 和 30% 的 A L F 死 亡 病 例 肝 衰 竭 病 因為 A PA P 過 量 3。 對 乙 醜 氨 基 酹 所 引 起 的 原 發(fā) 性 肝 細(xì) 胞 毒 性 主 要 是 因 為 在 藥 物 的 生 物 轉(zhuǎn) 化 過 程 中 生 成 毒 性 較 大 的自 由 基 代 謝 產(chǎn) 物N - 乙 酰 - 對 苯 醌 亞 胺 (N -acety l-p -benzoquinonim ine , N A P Q I) , 該產(chǎn) 物 與肝臟 大分 子 不可逆 共 價 結(jié)合 ， 通 過 引 發(fā) 線 粒 體 功 能 障 礙 、脂 質(zhì) 過

38、 氧 化 反 應(yīng) 、 氧 化 應(yīng) 激 和 D N A 斷 裂 ，造 成 細(xì) 胞 損 害和肝壞死 4_6。N -乙酰半胱 氨酸對 A PA P 所致肝衰竭有解 毒作用 ，但 僅在A PA P 使 后 前 或 者 A PA P 使 用 后 很 短 一 段 時 間 有 效 ，治 療 時 間 窗 很 短 ，使 其 臨 床 應(yīng)用 受到 限制 7，8。隨著研 究進 展 ，對 肝衰竭 的發(fā)病機制有 了較深 入 的 了解 ，A L F 治 療 方 法 也 有 較 大 改 進 ， 內(nèi)科 對 癥 治 療 下 A L F 患 者 的 存 活 率 有 了 一 定 的 提 高 ， 但仍不容 樂觀9。目前肝移植是治療肝衰

39、竭最有效 的方法 ，挽救 了部分 患者 的生 命 ，但 由于 供 肝 資 源 稀 少 、治 療 費 用 昂 貴 等 原 因 ，有 相 當(dāng) 大 一 部 分 需 要 通 過 移 植 治療 患者 得 不 到手 術(shù) 而 最 終死 于肝 衰 竭及 其 并 發(fā)癥 I。，|1。因此 ，研 究 治療 肝 衰 竭 的 藥 物 ， 具 有 重 大 的 臨 床 意 義 。肝 臟 出現(xiàn) 功 能 衰 竭 ， 除 了肝 損 傷 過 于 嚴(yán) 重 造 成 肝 細(xì) 胞 丟 失 過 多 外 ， 肝 再 生 遲 滯 或 抑 制 也 是 原 因 之 一 。哺 乳 動 物 的 肝 臟 具 有 強 大 的 再 生 能 力 ，在 正 常

40、的 情 況 下 ，成 熟 的 肝 細(xì) 胞 處 于 靜 止 期 ，當(dāng) 肝 臟 因 為 藥 物 、病 毒 、手 術(shù) 等 損 傷 造 成 肝 細(xì) 胞 丟 失 的 情 況 下 ， 能 快 速 啟 動 肝 再 生 程 序 ， 處 于 G O 期 的 成 熟 肝 細(xì) 胞 進 入 G 1 期 并 分 裂 增 殖 至 肝 體 積 恢 復(fù) ，從 而 恢 復(fù) 肝 臟 體 積 和 功 能 ，是 肝 再 生 的 最 迅 速 、有 效 的 方 式I2，" 。但 在肝 臟 受到嚴(yán) 重 的損 害造成 肝 細(xì)胞 大量 壞 死 時 ，肝 細(xì)胞增 殖 受 到 抑 制 ，此 時 ，需要通 過激 活肝 臟前 體 細(xì) 胞來

41、完 成 肝 再 生過程 14，15。肝 再 生 啟 動 機 制 復(fù) 雜 ，涉 及 多 種 細(xì) 胞 、 細(xì) 胞 因 子 及 生 長 因 子 ， 它 們 之 間 互 相協(xié)作、關(guān)聯(lián)，形成網(wǎng)絡(luò)I4，I619。肝細(xì)胞生長因子 （hepatocyte grow th factor,H G F ) 是 促 肝 再 生 因 子 中 最 重 要 的 生 長 因 子 之 一 ，主 要 由枯 否 細(xì) 胞 等 間 質(zhì) 細(xì) 胞 產(chǎn) 生 ，在6公：11人學(xué)碩士學(xué)位論文細(xì) 胞 損 傷 時 具 有 保 護 肝 細(xì) 胞 、抑 制 肝 細(xì) 胞 的 凋 亡 的 作 用 ，也 是 肝 再 生 啟 動 所 必 需 的信 號34，35。

42、研 究表 明，H G F 小-但 能促進 成熟肝 細(xì)胞增 殖 ，還 可 以加快肝 卵 圓 細(xì)胞 的增殖 、分化 ，從成熟肝 細(xì)胞及 肝前 體細(xì)胞兩個方 面有 效促進肝 臟 再生36 37，但 目前 對 于 其 促 進 肝 再 生 的具 體 機 制 尚未 完全 明 了 。W nt/ f5-catenin 信 號通路 是 保 守 信 號 通 路 ，存 在 于 各 種 動 物 體 內(nèi) ，在 肝 臟 的 發(fā) 育 過 程 中 起 著 調(diào) 節(jié) 生 長 分 化 的 作 用 31。在 最 近 的一 個研 究 發(fā)現(xiàn) ，在 肝 生理 性 再 生 的早 期 階 段 ，肝 竇 內(nèi)皮 細(xì)胞 可通過釋放 H G F 和

43、W nt 誘 導(dǎo)血管生成 ，從而激發(fā)肝細(xì)胞增殖38。另外一個 研 究 結(jié) 果 表 明 ，H G F 基 因 轉(zhuǎn) 染 可 以促 進 野 生 型 小 鼠肝 臟 增 生 ，但 對 fK caten in 基 因 敲 除 小 鼠則 無 效 ，這 提 示 W nt/ P -caten in 信 號 通 路 活 化 是 H G F 促 進 肝 再 生 的 一個 重要 的機制39。P G E 2 是花生 四烯酸 的代 謝 產(chǎn)物 ，在磷 脂酶 A 2 (phospholipase A 2,P L A 2)、環(huán) 氧酶(cyclooxygenase，C O X )和 P G E 2 合酶（prostaglandi

44、n E2 synthase, P G E S)的順 序 催 化 作 用 下 所 產(chǎn) 生 ， 可 由單 核 /巨 暖 細(xì) 胞 、 中 性 粒 細(xì) 胞 等 多 種 細(xì) 胞 合 成 ， 對 多 種 原 因造 成 的 胃腸 道 粘 膜 損 傷 具 有 保 護 作 用 L i 等 發(fā) 現(xiàn) ，P G E 2 的 合 成 酶 之 一環(huán)氧酶-2(cyclooxygenase,C O X -2 )在肝臟遭受肝毒性物質(zhì) 時，可 以減少肝 細(xì)胞調(diào)亡和破壞 ，其肝臟保護機制 與 PG E 2 相關(guān)2324。多個研究結(jié)果表 明 ，P G E 2 對多種 原 因?qū)е?的損傷具有保護 功 能25_27, 這提示我們 P G

45、 E 2 具有發(fā)展成 治療肝衰 竭 藥 物 的 潛 能 ，但 目前 對 于 其 肝 保 護 機 制 尚 需 進 一 步 研 究 。P G E 2 除 具 有 肝 臟 保 護 作 用 外 ，還 可 能 具 有 促 進 組 織 的 再 生 的 功 能 。前 人 研 究 發(fā) 現(xiàn) ，大 鼠 部 分 肝 臟 切 除后體 內(nèi) P G E 2水平上升28，29, 將 PG E 2加入 的原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)液 中，肝細(xì)胞 D N A 合 成增 加3。多項研 究提 示 P G E 2 的損傷 保護及調(diào) 節(jié)生長 分化 作 用 與信 號 分 子 111 或 0 -031611丨11 相關(guān)21，3233。鑒 于前 人

46、的研 究 ，我們推 測 P G E 2對 于肝 衰 竭 小 鼠可 能 具 有 肝 臟 保 護 及 促 肝 再 生 作 用 ，其 機 制 可 能 與 H G F 和 W n t、3 -caten in 相 關(guān) 。在 本 實 驗 中 ， 我 們 利 用 小 鼠 A PA P 誘 導(dǎo) 的 肝 衰 竭 模 型 ， 檢 測 P G E 2 是 否 對 藥 物 性 肝 衰 竭 具 有 保 護 肝 臟 及 促 進 肝 臟 再 生 作 用 ，同 時 探 討 其 中 可 能 機 制 ，檢 測 其 是 否 與 H G F 及 W n t/ P -caten in 通 路 相 關(guān) 。參 考 文 獻(xiàn)1 B o w e

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