分光光度計的校正和檢驗

1、 made by 15340721可見分光光度計可見分光光度計使用方法使用方法n721型分光光度計其波長范圍360800nm，色散元件為三角棱形.n1.檢查儀器各調(diào)節(jié)鈕的起始位置是否正確，接通電源開關(guān)，打開樣品室暗箱蓋，使電表指針處于“0”位，預(yù)熱20min后，再選擇須用的單色光波長和相應(yīng)的放大靈敏度檔，用調(diào)“0”電位器調(diào)整電表為T=0%。n2.蓋上樣品室蓋使光電管受光，推動試樣架拉手，使參比溶液池（溶液裝入4/5高度，置第一格）置于光路上，調(diào)節(jié)100%透射比調(diào)節(jié)器，使電表指針指T=100%。n3.重復(fù)進行打開樣品室蓋，調(diào)0，蓋上樣品室蓋，調(diào)透射比為100%的操作至儀器穩(wěn)定。n4.蓋上樣品室蓋

2、，推動試樣架拉手，使樣品溶液池置于光路上，讀出吸光度值。讀數(shù)后應(yīng)立即打開樣品室蓋。n5.測量完畢，取出比色皿，洗凈后倒置于濾紙上晾干。各旋鈕置于原來位置，電源開關(guān)置于“關(guān)”，拔下電源插頭。n6.放大器各檔的靈敏度為：“l(fā)” 1倍；“2”10倍；“3”20倍，靈敏度依次增大。由于單色光波長不同時，光能量不同，需選不同的靈敏度檔。選擇原則是在能使參比溶液調(diào)到T= 100%處時，盡量使用靈敏度較低的檔，以提高儀器的穩(wěn)定性。改變靈敏度檔后，應(yīng)重新調(diào)“0”和“100”。n4.蓋上樣品室蓋，推動試樣架拉手，使樣品溶液池置于光路上，讀出吸光度值。讀數(shù)后應(yīng)立即打開樣品室蓋。n5.測量完畢，取出比色皿，洗凈后倒

3、置于濾紙上晾干。各旋鈕置于原來位置，電源開關(guān)置于“關(guān)”，拔下電源插頭。n6.放大器各檔的靈敏度為：“l(fā)” 1倍；“2”10倍；“3”20倍，靈敏度依次增大。由于單色光波長不同時，光能量不同，需選不同的靈敏度檔。選擇原則是在能使參比溶液調(diào)到T= 100%處時，盡量使用靈敏度較低的檔，以提高儀器的穩(wěn)定性。改變靈敏度檔后，應(yīng)重新調(diào)“0”和“100”。1.波長校正波長校正n分光光度計常需要波長校正，檢查儀器的波長刻度與實際波長是否能較好的保持一致，以減小誤差。n稀土玻璃（鐠釹玻璃，鈥玻璃）在相當(dāng)寬的波長范圍內(nèi)特征吸收峰，如通常采用鐠釹玻璃在573nm和586nm的雙峰以及741nm和808nm等處的吸

4、收峰來對分光光度計的波長刻度進行校正。一般情況下，可見分光光度計的波長誤差允許在3nm范圍內(nèi)。利用某些本身有較強特征譜線的光源也可對波長進行校正，如氘燈和汞燈廣泛用于紫外線分光光度計的校正。此外，苯蒸汽在紫外區(qū)有很強的特征吸收峰，用它來校正波長也很方便。2.吸光度校正吸光度校正n在實際工作中，有時需要對儀器的吸光度標準進行檢查和校正。校正的方法是將0.0303g干燥衡重的K2Cr2O7 溶于1L0.05mol.L-1 的H2SO4溶液中，用1cm吸收池，在25C測定不同波長下的吸光度。表3-6 重鉻酸鉀溶液吸光度3.散雜光的檢驗散雜光的檢驗n由于儀器光源表面對光的反射和散射，單色光中有一定的雜散光。雜散光可影響摩爾吸光系數(shù)與吸光度之間的直線關(guān)系。在儀器的光路系統(tǒng)中，往往采用一定的措施避免雜散光的影響。如在721型分光光度計中就裝有保護玻璃片，以減少雜散光的影響。雜散光的檢驗是在較短波長下，測定某選定溶液的透射比。藥典規(guī)定用一定濃度的NaI或NaNO3溶液檢查，其投射比應(yīng)小于規(guī)定值。4.穩(wěn)定性的檢驗穩(wěn)定性的檢驗n穩(wěn)定性通常檢驗如下：將儀器預(yù)熱后，精確調(diào)節(jié)投射比為0%，在規(guī)定時間內(nèi)觀察其