分解纖維素的細菌

1、關(guān)于分解纖維素的細菌現(xiàn)在學習的是第一頁，共41頁在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基現(xiàn)在學習的是第二頁，共41頁1直接計數(shù)法：最常用顯微鏡直接計數(shù)法。測定微生物數(shù)量的方法：現(xiàn)在學習的是第三頁，共41頁湖南長郡衛(wèi)星遠程學校2009年上學期制作 032間接計數(shù)法：最常用稀釋平板計數(shù)法?，F(xiàn)在學習的是第四頁，共41頁湖南長郡衛(wèi)星遠程學校2009年上學期制作 03現(xiàn)在學習的是第五頁，共41頁現(xiàn)在學習的是第六頁，共41頁閱讀閱讀2727頁基礎(chǔ)知識部分第一、二段，回答下列問題：頁基礎(chǔ)知識部分第一、二段，回答下列問題：1. 1. 纖維素在生物圈的分布狀

2、況？纖維素在生物圈的分布狀況？纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。植物的根、莖纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素。其中、葉等器官都含有大量的纖維素。其中棉花棉花是自然界中纖維素含是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。量最高的天然產(chǎn)物。一、纖維素和纖維素酶一、纖維素和纖維素酶2.2.纖維素酶的組成及作用？纖維素酶的組成及作用？纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分，即，即C C1 1酶酶、 C CX X酶酶和和葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種

3、酶將纖維二糖分解成葡萄糖。維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖?，F(xiàn)在學習的是第七頁，共41頁3 3、纖維素的分解、纖維素的分解 能分解能分解纖維素纖維素的微生物有各種細菌、的微生物有各種細菌、真菌和少數(shù)放線菌。真菌和少數(shù)放線菌。方法：濾紙崩潰法方法：濾紙崩潰法4 4、纖維素酶活性的測定實驗：、纖維素酶活性的測定實驗：現(xiàn)在學習的是第八頁，共41頁下列生物能分解纖維素的是（下列生物能分解纖維素的是（ ） 人人 兔兔 牛牛 蘑菇蘑菇 纖維桿菌纖維桿菌A A、 B B、 C C、 D D、C C現(xiàn)在學習的是第九頁，共41頁二、纖維素分解菌的篩選二、纖維素分解菌的篩選1.1.纖維素分解菌的篩選方法纖維

4、素分解菌的篩選方法剛果紅染色法：剛果紅染色法：這種方法能夠通過顏色反應直接這種方法能夠通過顏色反應直接對微生物進行篩選對微生物進行篩選 閱讀課本第閱讀課本第2828頁的相關(guān)部分，回答頁的相關(guān)部分，回答下列問題：下列問題：現(xiàn)在學習的是第十頁，共41頁2.2.纖維素分解菌的篩選方法的原理纖維素分解菌的篩選方法的原理 剛果紅是一種染料，它可以與纖維素形成紅色復合物剛果紅是一種染料，它可以與纖維素形成紅色復合物，但并不和纖維二糖、葡萄糖發(fā)生這種反應。當纖維素被，但并不和纖維二糖、葡萄糖發(fā)生這種反應。當纖維素被纖維素酶分解后剛果紅纖維素酶分解后剛果紅纖維素的復合物就無法形成，纖維素的復合物就無法形成，培

5、養(yǎng)基中會出培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解為中心的現(xiàn)以纖維素分解為中心的透明圈透明圈。這樣我們可以通。這樣我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。纖維素分解菌?，F(xiàn)在學習的是第十一頁，共41頁練一練：練一練：1.1.下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯誤的是下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯誤的是A. 纖維素酶是一種復合酶，至少包括三種纖維素酶是一種復合酶，至少包括三種B. 纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C. 纖維素酶可用于去掉植物的細胞壁纖維素酶可用于去掉植物的細胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖現(xiàn)在學習的是第十二頁，共

6、41頁練一練：練一練：1.1.下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯誤的是下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯誤的是A. 纖維素酶是一種復合酶，至少包括三種纖維素酶是一種復合酶，至少包括三種B. 纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C. 纖維素酶可用于去掉植物的細胞壁纖維素酶可用于去掉植物的細胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖現(xiàn)在學習的是第十三頁，共41頁2.利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌，下列說法錯誤的是，下列說法錯誤的是A. 剛果紅能與纖維素形成紅色復合物剛果紅能與纖維素形成紅色復合物 B. 剛果紅能與纖維二糖

7、形成紅色復合物剛果紅能與纖維二糖形成紅色復合物 C. 剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復合物剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復合物D. 若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈，則說明已篩若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈，則說明已篩選出了纖維素分解菌選出了纖維素分解菌現(xiàn)在學習的是第十四頁，共41頁三、實驗操作三、實驗操作土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)梯度稀釋梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基維素分解菌的培養(yǎng)基上上挑選產(chǎn)生透挑選產(chǎn)生透明圈的菌落明圈的菌落現(xiàn)在學習的是第十五頁，共41頁土壤取樣土壤取樣取樣環(huán)境取樣環(huán)境富含纖維素的環(huán)境中富含纖維素的環(huán)境中 由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在由于生物與環(huán)境的相互依

8、存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對提高，因此從這種土樣中獲得目的量相對提高，因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。微生物的幾率要高于普通環(huán)境。原因原因現(xiàn)在學習的是第十六頁，共41頁土壤取樣土壤取樣 實例：樹林中多年落葉形成的腐殖土實例：樹林中多年落葉形成的腐殖土，多年積累的枯枝敗葉等。，多年積累的枯枝敗葉等。 討論討論: :如果找不到合適的環(huán)境，可將濾如果找不到合適的環(huán)境，可將濾紙埋在土壤中，將濾紙埋在土壤中有什么作紙埋在土壤中，將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認為濾紙應埋進土壤中多深？用？你認為濾紙應埋進土壤中多深？ 將濾紙埋

9、在土壤中能使纖維素分解菌將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對集中，實際上是人工設(shè)置纖維素分解相對集中，實際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應將濾紙埋于深菌生存的適宜環(huán)境。一般應將濾紙埋于深約約10cm10cm左右的土壤中。左右的土壤中?，F(xiàn)在學習的是第十七頁，共41頁1.1.選擇培養(yǎng)的目的：選擇培養(yǎng)的目的：增加纖維素分解菌的濃度，以確保增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物能夠從樣品中分離到所需要的微生物選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)現(xiàn)在學習的是第十八頁，共41頁參照課本參照課本2929頁旁欄中的比例配置，回頁旁欄中的比例配置，回答下列問題答下列問題a.a.旁欄中的配方是液

10、體培養(yǎng)基還是固體旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基？為什么？培養(yǎng)基？為什么？b.b.這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用？這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用？如果具有，是如何進行選擇的？如果具有，是如何進行選擇的？是液體培養(yǎng)基，原因是配方中無凝固劑是液體培養(yǎng)基，原因是配方中無凝固劑有選擇作用，本配方中的碳源是纖維素，所有選擇作用，本配方中的碳源是纖維素，所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖2.2.制備選擇培養(yǎng)基制備選擇培養(yǎng)基現(xiàn)在學習的是第十九頁，共41頁3.3.操作方法：操作方法：將土樣加入裝有將土樣加入裝有30ml選擇培養(yǎng)基的選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中，將錐形瓶

11、固定在搖床上，在一錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖床上，在一定溫度下振蕩培養(yǎng)定溫度下振蕩培養(yǎng)12天，直至培養(yǎng)液變天，直至培養(yǎng)液變渾濁。也可重復選擇培養(yǎng)渾濁。也可重復選擇培養(yǎng)現(xiàn)在學習的是第二十頁，共41頁思考：為什么選擇培養(yǎng)能夠思考：為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃濃縮縮”所需的微生物？所需的微生物？在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅能夠適應這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應這種營養(yǎng)條件的速繁殖，而那些不適應這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮濃縮”的作用的作用現(xiàn)在學習的是第二十一頁，共41頁

12、梯度稀釋梯度稀釋按照課題按照課題1 1的稀釋操作方法，將的稀釋操作方法，將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進行等比稀釋，選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進行等比稀釋，稀釋最大倍數(shù)到稀釋最大倍數(shù)到10106 6現(xiàn)在學習的是第二十二頁，共41頁將樣品涂布到鑒別纖維素將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上分解菌的培養(yǎng)基上1. 制備培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基:參照旁欄中的比例參照旁欄中的比例2. 涂布平板：涂布平板：將稀釋度為將稀釋度為104106的菌懸液各取的菌懸液各取0.1ml涂布在培養(yǎng)基上，涂布在培養(yǎng)基上，30倒置培養(yǎng)倒置培養(yǎng)現(xiàn)在學習的是第二十三頁，共41頁挑選產(chǎn)生透明圈的菌落挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 挑取產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落，一挑取

13、產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落，一般即為分解纖維素的菌落。般即為分解纖維素的菌落。 接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上，在上，在30300 0C C 37370 0C C培養(yǎng)，可獲得純培養(yǎng)培養(yǎng)，可獲得純培養(yǎng)。現(xiàn)在學習的是第二十四頁，共41頁剛果紅染色法剛果紅染色法方法一：方法一：先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應顏色反應方法二：方法二：在倒平板時就加入剛果紅在倒平板時就加入剛果紅思考：這兩種方法各有哪些優(yōu)點與思考：這兩種方法各有哪些優(yōu)點與不足？不足？現(xiàn)在學習的是第二十五頁，共41頁 方法一方法一缺點是操作繁瑣，加入剛果缺點是操作繁瑣，加入剛

14、果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；優(yōu)點是這紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；優(yōu)點是這樣顯示出的顏色反應基本上是纖維素分解樣顯示出的顏色反應基本上是纖維素分解菌的作用菌的作用 方法二方法二優(yōu)點是操作簡便，不存在菌落優(yōu)點是操作簡便，不存在菌落混雜問題混雜問題缺點一是由于培養(yǎng)基中還含有淀粉類缺點一是由于培養(yǎng)基中還含有淀粉類物質(zhì)，可以使能產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)物質(zhì)，可以使能產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應；缺點二有些微生物具有降解假陽性反應；缺點二有些微生物具有降解色素的能力，它們在長時間培養(yǎng)過程中會色素的能力，它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅，形成明顯的透明圈，與纖維降解剛果紅，形成明顯的透明圈，與纖維素分

15、解菌不易區(qū)分素分解菌不易區(qū)分現(xiàn)在學習的是第二十六頁，共41頁實驗錄像現(xiàn)在學習的是第二十七頁，共41頁1.在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌，符合下列哪一生物學觀點？，符合下列哪一生物學觀點？A.生物結(jié)構(gòu)與功能相適應的觀點生物結(jié)構(gòu)與功能相適應的觀點B.生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點C.生物與環(huán)境相適應的觀點生物與環(huán)境相適應的觀點D.生物發(fā)展進化的觀點生物發(fā)展進化的觀點練一練：練一練：現(xiàn)在學習的是第二十八頁，共41頁2.從土壤中分離獲得某種微生物的步驟是從土壤中分離獲得某種微生物的步驟是土壤取樣梯度稀釋土壤取樣梯度稀釋選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng) 菌懸液

16、涂布平板菌懸液涂布平板挑選出單個菌落挑選出單個菌落A. B.C. D.現(xiàn)在學習的是第二十九頁，共41頁3. 有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是A. 可以增加纖維素分解菌的濃度可以增加纖維素分解菌的濃度B. 可以減少纖維素分解菌的濃度可以減少纖維素分解菌的濃度C. 所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基D. 所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基現(xiàn)在學習的是第三十頁，共41頁四、課題延伸四、課題延伸 本課題對分解纖維素的微生物進行了初本課題對分解纖維素的微生物進行了初步的篩選，但是這只是分離純化的第一步。步的篩選，但是這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，

17、還需要進行為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，纖維素酶的測定方發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，纖維素酶的測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量的測定。產(chǎn)生的葡萄糖進行定量的測定?，F(xiàn)在學習的是第三十一頁，共41頁4鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中碳源為（ ）A、CMC-Na B、木聚糖 C、纖維素 D、裂解酶A現(xiàn)在學習的是第三十二頁，共41頁5剛果紅染色時，加入剛果紅應在（ ）（1）制備培養(yǎng)基時（2）梯度稀釋時 （3）倒平板時（4）涂布時 （5）長出菌落時A、（1）（3） B、（2）（5） C、（3）（5） D、（4）（5）

18、C現(xiàn)在學習的是第三十三頁，共41頁6為以纖維素為唯一碳源篩選出真菌和細菌，試分析此類微生物在生態(tài)系統(tǒng)中的作用與下列哪種生物類似？（ ）A 硝化細菌 B、 藍藻 C、蚯蚓 D、兔子C現(xiàn)在學習的是第三十四頁，共41頁7.有關(guān)平板劃線操作正確的是（ ）A.使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過程中不再滅菌B.打開含菌種的試管需要通過火焰滅菌，取出菌種后需要馬上塞上棉塞C.將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線即可D.最后將平板倒置，放入恒溫箱中培養(yǎng)D現(xiàn)在學習的是第三十五頁，共41頁練一練：1、下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯誤的是A、纖維素酶是一種復合酶，至少包括三種B、纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C、纖維素酶可用于去掉植物的細胞壁D、葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖2、利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌，下列說法錯誤的是A、剛果紅能與纖維素形成紅色復合物 B、剛果紅能與纖維二糖形成紅色復合物 C、剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復合物D、若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈，則說明已篩選出了纖維素分解菌現(xiàn)在學習的是第三十六頁，共41頁1、在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌，符合下列哪一生物學觀點？（ ）A、生物結(jié)構(gòu)與功能相適應的觀點 B、生物