高效液相色譜測定丹參滴注液中丹酚酸B含量

1、高效液相色譜測定丹參滴注液中丹酚酸B含量作者：稅丕先莊元春何兵朱悻【摘要】目的成立一種用高效液相色譜(HPLC)法測定丹參滴注液中丹酚酸B的含量的方式。方式色譜柱DikmaKromasilC18(5um,10()A250mmXmm)；流動相為甲醇-乙睛-甲酸-水(3()：10：1：59)；流量為ml-min-1;檢測波長286nm；柱溫30；進樣量20川。結(jié)果丹酚酸B的加樣提取平均回收率為%,RSD為,重復(fù)性實驗的RSD為%。結(jié)論該方式簡即靠得住，結(jié)果穩(wěn)固，重復(fù)性好，該方式可用于測定丹參滴注液中丹酚酸B的含量。【關(guān)鍵詞】丹酚酸B含量測定高效液相色譜法丹參滴注液丹參滴注液收載于國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編

2、內(nèi)科心系分冊，由丹參中提取的水溶性化合物總丹酚酸制得。總丹酚酸具有抗肝纖維化、抗動脈粥樣硬化和改善記憶功能障礙等作用L13,由丹參素、丹酚酸A、B、E,原兒茶醛等各類芳香酚酸類化合物組成。丹參滴注液標(biāo)準(zhǔn)中對丹參素鈉、原兒茶醛進行了高效液相色譜含量測定，對其中含量高、活性強的丹酚酸B未進行含量測定。咱們參照有關(guān)文獻2,3,用高效液相色譜柱測定丹參滴注液中丹酚酸B的含量，取得滿意效果。1器材儀器與試藥戴安高效液相色譜儀（P680A四元泵,PDA-100二極管陣列檢測器，TCC-10。柱溫箱，Chromcluon色譜工作站）。丹酚酸B對比品（中國藥品生物制品檢定所提供。批號：），丹參滴注液（安徽華源

3、生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。規(guī)格:250ml,16go批號：061112,061115,061118,061120,061201）0甲醇、乙睛為色譜純（天津四友公司），水為重蒸儲水，甲酸為分析純。色譜條件DikmaKromasilCl8（5p.m,100A25（）mmXmm）；流動相:甲醇-乙睛-甲酸-水（30：1（）：1：59）;流量：ml-min-1;檢測波長286nm；進樣量2（）ulo2方式與結(jié)果溶液的配制對比品溶液的配制取丹酚酸B對比品約5mg,精密稱定,置50ml量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml,置50ml量瓶中,加水至刻度，搖勻，得10mg3的對比品溶液。供試品溶液的

4、配制精密量取丹參滴注液(批號061112)10ml,置5()ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。陰性樣品溶液的制備按丹參滴注液制備方式和“項制得不含丹參的陰性對比品溶液，備用。測定方式精密吸取上述供試品溶液與對比品溶液各20r1,別離注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計算樣品的含量。方式學(xué)驗證標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱取丹酚酸B對比品適量，配成1gL-l的標(biāo)準(zhǔn)儲蓄液；別離吸取10,20,40,8(),100川別離置于5個1ml量瓶中，以水稀釋至刻度，混勻后別離進樣20記錄色譜圖見圖1。以色譜峰面積(A)對成份濃度(C)作回歸統(tǒng)計，回歸方程為:A=-9+13,r=6,線性范圍mg-L-l

5、o穩(wěn)固性考察與精密度實驗取濃度為mg-L-1的供試品溶液別離在0,2,4,6,8h進樣,測得丹酚酸B供試品的峰面積RSD為,表明供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)固。取某一濃度mg-L1)供試品溶液，持續(xù)進樣5次，測得進樣精密度心口為。重復(fù)性實驗取同一批號的丹參滴注液6份，按上述方式操作，測定丹參滴注液中丹酚酸B的含量，RSD為%。結(jié)果表明重復(fù)性良好。a²對比品b²空白c²丹參滴注液1.丹酚酸B圖1HPLC圖（略）加樣回收率實驗取同一批號丹參滴注液（含量為mg-L-l）6份，每份約10ml,精密量取，別離加入丹酚酸B對比品適量，精密稱定，按含量測定方式測定，計算回收率（見表1）

6、。可見，丹酚酸B的平均回收率為%（於0=%）,符合分析方式的要求。表1加樣回收率實驗結(jié)果（略）樣品含量測定取批號別離為061112,061115,061118,061120,061201的丹參滴注液適量,按“2.2”項下操作，測得丹酚酸B的含量見表2O表2樣品含量測定（略）3討論溶劑的選擇本實驗比較了丹酚酸B在5()%甲醇與水中的穩(wěn)固性，結(jié)果均在8h內(nèi)穩(wěn)固，而因水價廉易患，故選用水為溶劑。色譜條件的選擇中國藥典2005版，丹參片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供的色譜條件中，色譜柱選用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。按照單位實際情形，采用不同比例的甲醇-水、甲醇-水-甲酸、乙睛-水-甲酸為流動相進行測試，發(fā)覺乙睛的洗脫效果優(yōu)于甲醇，流動相中存有甲酸時的柱峰形明顯優(yōu)于流動相中存有乙酸時的峰形，故選擇甲醇-乙脯甲酸-水(30：10：1：59)為流動相。【參考文獻】1戈升榮，俞一心，謝更新.丹酚酸的藥理作用研究進展口，中藥材,2002,25(9):683.2曹楓，馬長華,喬延江.HPLC法