基因工程試題及答案

1、 基因工程一、選擇題（每小題1.5分，共15分）1基因工程的創(chuàng)始人是 ( )。 A A. Kornberg B W. Gilbert C P. Berg D S. Cohen2關(guān)于宿主控制的限制修飾現(xiàn)象的本質(zhì)，下列描述中只有( )不太恰當(dāng)。 A 由作用于同一DNA序列的兩種酶構(gòu)成 B 這一系統(tǒng)中的核酸酶都是類限制性內(nèi)切核酸酶 C 這一系統(tǒng)中的修飾酶主要是通過甲基化作用對(duì)DNA進(jìn)行修飾 D 不同的宿主系統(tǒng)具有不同的限制-修飾系統(tǒng)3在DNA的3-5鏈上，基因的起始密碼子是 ( ) A ATG（或GTG） B AGT C TAG D TGA4II限制性內(nèi)切核酸酶可以特異性地識(shí)別 ( )。 A 雙鏈D

2、NA的特定堿基對(duì) B 雙鏈DNA的特定堿基序列 C 特定的三聯(lián)密碼 D 以上都正確5末端轉(zhuǎn)移酶是合成酶類，具有( )活性。 A 3®5DNA聚合酶 B 5®3DNA聚合酶 C 5®3DNA內(nèi)切酶D 5®3DNA外切酶6下面關(guān)于松弛型質(zhì)粒(relaxed plasmid)性質(zhì)的描述中，( )是不正確的。 A 質(zhì)粒的復(fù)制只受本身的遺傳結(jié)構(gòu)的控制，因而有較多的拷貝數(shù)。B 可以在氯霉素作用下進(jìn)行擴(kuò)增。C 通常帶有抗藥性標(biāo)記。D 同嚴(yán)緊型質(zhì)粒融合后，雜合質(zhì)粒優(yōu)先使用松弛型質(zhì)粒的復(fù)制子。7關(guān)于cDNA的最正確的說法是( )。 A 同mRNA互補(bǔ)的單鏈DNA B 同m

3、RNA互補(bǔ)的雙鏈DNA C 以mRNA為模板合成的雙鏈DNA D 以上都正確8關(guān)于T4 DNA Ligase，下列說法中哪一項(xiàng)不正確? ( ) A 是最常用的DNA連接酶。 B 不但能連接粘性末端，還能連接齊平末端。 C 不但能連接粘性末端。 D 最適溫度37 。9下列關(guān)于建立cDNA文庫的敘述中，( )是錯(cuò)誤的?A 從特定組織或細(xì)胞中提取DNA或RNA B 用反轉(zhuǎn)錄酶合成mRNA的對(duì)應(yīng)單鏈DNA C 以新合成的單鏈DNA為模板合成雙鏈DNA D 新合成的雙鏈DNA克隆到載體上，并導(dǎo)入受體細(xì)胞 10用下列方法進(jìn)行重組體的篩選，只有( )說明外源基因進(jìn)行了表達(dá)。 A Southem blot B

4、 Northem blot C Western印跡 D 原位菌落雜交二、填空題（每空1分，共25分）1限制性內(nèi)切核酸酶分為三類，基因工程中應(yīng)用的是_ _。2為了防止DNA的自身環(huán)化，可用_去雙鏈DNA_。3切口平移(nick translation)法標(biāo)記DNA探針時(shí)應(yīng)用的酶是_ _ _。4基因工程中的3種主要類型的載體是_、_、_。5野生型的M13不適合用作基因工程載體，主要原因是 、 和 。6黏粒(cosmid)是 雜合載體。7引物在基因工程中至少有4個(gè)方面的用途：(1) (2) 、 (3) (4) 。8Northern印跡和Southern印跡有兩點(diǎn)根本的區(qū)別：(1)_ _、，(2)_9

5、PCR反應(yīng)中常用的酶是_ _ 。10感受態(tài)的大腸桿菌細(xì)胞在溫度為_ _時(shí)吸附DNA, _時(shí)攝人外源DNA。11.用堿法分離質(zhì)粒DNA時(shí)，染色體DNA之所以可以被除去，是因?yàn)?。12. 除具有較低的分子量外，一個(gè)理想的質(zhì)粒載體必需包括_、_、_三個(gè)部分。13轉(zhuǎn)基因植物操作中常用的載體是 。14. pcDNA3.1用于 。三、名詞解釋（每小題4分，共20分）1目的基因： 2基因工程：3載體：4Western印跡：5核酸分子雜交：四、簡(jiǎn)答題（每小題10分，共20分）1. 基因工程的基本操作程序? 2. 怎樣制備目的基因?基因工程評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)與參考答案一、選擇題：每小題1.5分，共15分；多選不得分。 1

6、d; 2b; 3a; 4b; 5b; 6c; 7c; 8c; 9a; 10c二、填空題: 每空1分，共25分1II類酶。2堿性磷酸酶；5端的磷酸基團(tuán)3DNA聚合酶I。4質(zhì)粒DNA；病毒DNA；質(zhì)粒和病毒DNA雜合體5沒有合適的限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別位點(diǎn)；選擇標(biāo)記6質(zhì)粒和l噬菌體7合成探針；合成cDNA；用于PCR反應(yīng)；進(jìn)行序列分析8印跡的對(duì)象不同：Northern是RNA，Southern是DNA；)電泳條件不同，前者是變性條件，后者是非變性電泳9Tag DNA 聚合酶100°C；42°C11染色體變性后來不及復(fù)性12復(fù)制起點(diǎn)；選擇標(biāo)記；克隆位點(diǎn)13Ti質(zhì)粒14外源基因?qū)氩?/p>

7、乳動(dòng)物細(xì)胞三、名詞解釋（每小題4分，共20分）1在基因工程中被操作的DNA序列；又稱外源基因（foreign gene/exogenous gene)，主要是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因（structural gene）；它們可以從自然界中已有的物種基因組(genome)中分離出來，也可以用人工的方法合成。2按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)密的設(shè)計(jì)，通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，有目的地改造生物種性，生產(chǎn)生物活性物質(zhì)，甚至創(chuàng)造新物種的技術(shù)。3攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA分子。4Western印跡是將蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離后從凝膠中轉(zhuǎn)移到固相支持物上；然后用特異性的抗體進(jìn)行檢測(cè)；可說明基因是否進(jìn)行了表達(dá)。5用標(biāo)記的探針檢測(cè)出DNA或RNA同源序列的技術(shù)；原理是堿基互補(bǔ)；常用的有Southern blot、Northern blot和原位雜交。四、簡(jiǎn)答題（20分）1 目的基因的制備；目的基因與載體連接；目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；目的基因的表達(dá)與檢測(cè)?；蛘撸恨D(zhuǎn)、接、切、增、檢（加以解釋）。2 直接分離法、構(gòu)建基因文庫分離法、PCR擴(kuò)增法、人工合成法等。（加以解釋）五、實(shí)驗(yàn)與論述題（20分）由于基因已被測(cè)序，可通過RT-PCR方法克隆該基因；也或通過基因文