江蘇部分地市高三生物模擬測試分項(xiàng)匯編 15現(xiàn)代生物技術(shù)無答案

1、江蘇部分地市2019屆高三生物模擬測試分項(xiàng)匯編15-現(xiàn)代生物技術(shù)單選：1.（南京市2019屆高三5月第三次模擬考試）下列有關(guān)生態(tài)工程的敘述，錯誤的是A.農(nóng)村綜合發(fā)展型生態(tài)工程遵循了物質(zhì)循環(huán)再生和整體性原理B.我國南方的?；~塘是運(yùn)用系統(tǒng)整體性原理的典型實(shí)例C.小流域綜合治理的目標(biāo)是建立穩(wěn)定高效的復(fù)合系統(tǒng)，獲得最大的生態(tài)和經(jīng)濟(jì)效益D.“環(huán)境友好技術(shù)”及低污染淸潔生產(chǎn)工藝可以減少城市污染的產(chǎn)出2.（南京市2019屆高三5月第三次模擬考試）小鼠是現(xiàn)代生物科技中常用的實(shí)驗(yàn)材料。下列有關(guān)小鼠實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是A.體外受精時，從卵巢中采集的卵子能直接與獲能精子受精B.利用小鼠制備取克隆抗體時，需要篩選出

2、能產(chǎn)生特異性抗體的骨髓瘤細(xì)胞C.胚胎分割過程中，可將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割產(chǎn)生的裸半胚直接移入受體D.克隆小鼠時，需將供體細(xì)胞核移植至減數(shù)第二次分裂中期的次級卵母細(xì)胞中3.（南通市2019屆高三上學(xué)期教學(xué)質(zhì)量調(diào)研二）下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述，正確的是A.限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶均能特異性地識別核苷酸序列B.基因工程又稱轉(zhuǎn)基因技術(shù)，其原理為基因突變，屬于可遺傳的變異C.受體細(xì)胞中提取出的待測基因通常需要先高溫處理再用基因探針檢測D.基因表達(dá)栽體上的啟動子序列是DNA聚合酶識別的位點(diǎn)4.（南通市2019屆高三上學(xué)期教學(xué)質(zhì)量調(diào)研二）下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述中，正確的是A.由根尖細(xì)胞形成愈傷組織

3、的過程中，沒有發(fā)生細(xì)胞分化和基因重組B.將胰島素基因?qū)氪竽c桿菌可表達(dá)獲得具有生物活性的胰島素 C.由花粉培育產(chǎn)生的愈傷組織分化成的單倍體植株均能穩(wěn)定遺傳D.將兩種植物細(xì)胞直接用PEG處理后，可獲得具有雙親遺傳特性的雜種細(xì)胞5.（淮陰中學(xué)南師附中海門中學(xué)天一中學(xué)2019屆高三第二學(xué)期期初“四校聯(lián)考”）下列關(guān)于動物細(xì)胞工程和胚胎工程的敘述，錯誤的是A.采用胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胎或多胎，可以看作動物的無性繁殖B.細(xì)胞核移植主要在同種動物、同種組織的細(xì)胞之間進(jìn)行C.胚胎移植時，供體母畜需要具備優(yōu)良的遺傳性能D.試管動物技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù) 6.（淮陰中學(xué)南師附中海門中學(xué)

4、天一中學(xué)2019屆高三第二學(xué)期期初“四校聯(lián)考”）下列關(guān)于對轉(zhuǎn)基因生物安全性發(fā)生爭論的原因中，錯誤的是A.對基因的結(jié)構(gòu)和調(diào)控機(jī)制等的了解仍相當(dāng)有限B.所轉(zhuǎn)移的基因有不少是異種生物之間的基因轉(zhuǎn)移C.外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機(jī)的D.DNA重組技術(shù)需要有精心設(shè)計(jì)的“分子工具”7.（南京市、鹽城市2019屆高三年級第一次模擬）下列有關(guān)高等哺乳動物胚胎工程的敘述，錯誤的是A.早期胚胎培養(yǎng)通常需要加入動物血清B.為了獲得更多的卵母細(xì)胞，需對受體動物進(jìn)行同期發(fā)情處理C.從動物體內(nèi)獲取的精子不能直接與卵母細(xì)胞結(jié)合完成受精過程D.為了進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖規(guī)模，可通過胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胎8.（蘇錫常鎮(zhèn)四市

5、2019屆高三教學(xué)情況調(diào)研）西瓜花葉病毒（WMV）是危害西瓜與甜瓜等瓜類作物的主要病害之一。為了能快速有效檢測出該病毒，研究人員利用WMV的病毒粒子免疫健康小鼠，進(jìn)而制備出了相應(yīng)的單克隆抗體。下列有關(guān)敘述正確的是A.以WMV病毒粒子免疫健康小鼠，直接分離獲得分泌相應(yīng)抗體的B細(xì)胞B.從小鼠體內(nèi)中分離獲得的B細(xì)胞，應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)至10代左右C.用感染W(wǎng)MV的西瓜汁液，檢測經(jīng)篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞是否呈陽性D.分別用未感染和感染W(wǎng)MV的西瓜汁液，檢測相應(yīng)的單克隆抗性的特異性9.（南通、徐州、揚(yáng)州、泰州、淮安、宿遷六市2019屆高三第二次調(diào)研）在利用細(xì)胞融合技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體的過程中，不需要考慮A.多次注射

6、特定抗原蛋白，對實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行免疫B.淋巴B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞之間的免疫排斥C.向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入促融劑的種類和處理時間D.選擇特定試劑篩選能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞10.（南通、徐州、揚(yáng)州、泰州、淮安、宿遷六市2019屆高三第二次調(diào)研）農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒是植物基因工程中常用的運(yùn)載體，相關(guān)敘述正確的是A.Ti質(zhì)粒是能夠自主復(fù)制的單鏈DNAB.Ti 質(zhì)粒中磷酸基團(tuán)都與兩個脫氧核糖相連接C.重組Ti質(zhì)粒的受體細(xì)胞只能是植物愈傷組織細(xì)胞D.Ti質(zhì)粒上的基因可全部整合到受體細(xì)胞染色體上11.（南京市、鹽城市2019屆高三年級第二次模擬）下列關(guān)于動物細(xì)胞工程的敘述，正確的是A.用胰蛋白酶處理動物組織后，可用

7、培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液 B.少數(shù)細(xì)胞在連續(xù)培養(yǎng)50代后可獲得不死性，是某些基因選擇性表達(dá)的結(jié)果 C.根據(jù)在高倍鏡下觀察到基因突變的比例可推知某化學(xué)藥品的毒性D.PEG誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞，經(jīng)動物細(xì)胞培養(yǎng)能得到優(yōu)良動物個體12.（南京市、鹽城市2019屆高三年級第二次模擬）某小鼠生活過程中被多種病原體感染過，科學(xué)家以該小鼠為實(shí)驗(yàn)材料，利用單克隆抗體技術(shù)，獲得了抗某種病原體的髙純度單克隆抗體。下列有關(guān)敘述錯誤的是A.被多種病原體感染過的小鼠體內(nèi)會產(chǎn)生多種漿細(xì)胞B.經(jīng)細(xì)胞融合后形成的單個雜交瘤細(xì)胞可分泌多種特異性抗體 C.使用人鼠嵌合單克隆抗體進(jìn)行疾病治療可減少副作用的發(fā)生 D

8、.單克隆抗體的制備過程中應(yīng)用了動物細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù)多選：13.（淮陰中學(xué)南師附中海門中學(xué)天一中學(xué)2019屆高三第二學(xué)期期初“四校聯(lián)考”）下圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程。下列敘述正確的是A.反復(fù)給小鼠注射甲的目的是讓小鼠體內(nèi)產(chǎn)生更多的抗體 B.人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙的常用方法是用滅活的病毒 C.丁細(xì)胞既能無限增殖又能產(chǎn)生抗甲抗原的抗體D.制備的單克隆抗體可以早沴斷人體胃癌的發(fā)生情況14.（南京市、鹽城市2019屆高三年級第二次模擬）梅花鹿屬于單胎動物，季節(jié)性發(fā)情，育種工作者希望通過胚胎工程技術(shù)對優(yōu)良品種進(jìn)行擴(kuò)大繁殖。下列有關(guān)敘述錯誤是A.給供體母鹿注射促激素可使其一次排出多個卵子

9、B.培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)液中含有維生素、激素等多種能源物質(zhì) C.當(dāng)受體數(shù)量有限時，可采用胚胎分割技術(shù)以獲得更多的后代 D.梅花鹿的胚胎形成后一直處于游離狀態(tài)，為胚胎收集提供可能15. (南通市2019屆高三上學(xué)期第一次調(diào)研測試)下列關(guān)于細(xì)胞工程技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用的敘述，正確的是()A. 愈傷組織細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，可作為體細(xì)胞誘變育種的材料B. 植物花粉粒細(xì)胞容易獲取，可作為培養(yǎng)單倍體植株的理想材料C. 自體皮膚生發(fā)層細(xì)胞分裂能力強(qiáng)且不會排斥，可作為燒傷患者皮膚移植母細(xì)胞D. 動物胚胎細(xì)胞分化程度低、易恢復(fù)全能性，可優(yōu)先作為核移植的受體細(xì)胞16.（南京市2019屆高三5月第三次模擬考試）用經(jīng)過處理

10、后的雞糞沼液來培養(yǎng)小球藻，以降低沼液中的氨氮、總磷等含量。下列敘述正確的是A.雞糞便中所含的能量屬于雞未攝入的能量B.此生態(tài)系統(tǒng)中，小球藻既是生產(chǎn)者，又是分解者C.小球藻吸收沼液中的無機(jī)氮可用于合成自身的葉綠素、核酸等D.對雞糞沼液的處理能提高能量的利用率15.（南京市2019屆高三5月第三次模擬考試）SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復(fù)后的血淸中有抗S蛋白的特異性抗體。研制預(yù)防SARS病毒的疫苗簡要的操作流程如下，有關(guān)敘述正確的是A.步驟所代表的反應(yīng)過程是逆轉(zhuǎn)錄B.將大量擴(kuò)增的S基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，也能得到表達(dá)的S蛋白C.步驟和常用的方法分別是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和顯微注射

11、法D.可用抗原-抗體雜交法檢測細(xì)胞中是否真正成功表達(dá)了病毒S蛋白非選擇題：16.（蘇錫常鎮(zhèn)四市2019屆高三教學(xué)情況調(diào)研）某植物蛋白酶抑制劑基因是重要的抗蟲基因，該基因轉(zhuǎn)錄的mRNA下游序列已知，但其上游序列未知?，F(xiàn)利用PCR等技術(shù)擴(kuò)增該基因，具體原理如下圖所示，其中表示有關(guān)過程，表示有關(guān)物質(zhì)。請回答下列問題：（1）過程反應(yīng)體系中，需要加入 種引物，還需加入 酶，生成雜合鏈物質(zhì)。（2）利用DNA末段轉(zhuǎn)移酶催化過程，使cDNA單鏈左側(cè)末端增加十多個腺嘌呤脫氧核苷酸序列（AAA(A)n），其目的是 ，進(jìn)而利于過程擴(kuò)增獲得目的基因序列，過程反應(yīng)體系需要添加的新引物序列是 。（3）與物質(zhì)相比，物質(zhì)化學(xué)

12、組成不同的是 。與過程相比，過程中堿某配對方式的不同之處是 。（4）在物質(zhì)的兩端通常還需要增加 序列，以便與相應(yīng)的載體重組，再利用 處理大腸桿菌等，以利于將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞，構(gòu)建cDNA文庫。17.（南京市、鹽城市2019屆高三年級第一次模擬）為研究肝癌致病機(jī)理，科研工作者利用下圖所示的差異雜交法和基因工程獲取相關(guān)癌基因以作進(jìn)一步研究。請據(jù)圖回答問題：（1）圖1中，A過程需要用 酶，D過程需要回收 （填“未雜交”或“雜交分子”）的含32P的cDNA單鏈，繼而通過人工合成，獲得 ， 并用其構(gòu)建基因文庫。（2）從圖1構(gòu)建的基因文庫中獲取的目的基因，一般還需進(jìn)行人工改造后才能用于基因表達(dá)載體的構(gòu)建，

13、改造內(nèi)容除了在基因兩端添加限制酶的識別序列外，還需添加 ，以便其隨載體導(dǎo)入到受體細(xì)胞后，能正常調(diào)控表達(dá)過程。（3）上圖2為改造后的目的基因。圖3為兩種質(zhì)粒，其中Ampr為氨芐青霉素抗性基因，Tetr為四環(huán)素抗性基因，lacZ為藍(lán)色顯色基因，其表達(dá)產(chǎn)物可使底物X-Gal呈藍(lán)色。EcoR（0.7Kb）、Not（1.2Kb）等為限制酶及其切割位點(diǎn)與復(fù)制原點(diǎn)之間的距離（1kb=1000個堿基對）。圖3中能作為載體的最理想的質(zhì)粒是 （填“X”或“Y”），用選定的質(zhì)粒與圖2的目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時，應(yīng)選用的限制酶是 。為篩選出成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞，培養(yǎng)基中應(yīng)適量添加 。若用EcoR完全酶切上述中

14、獲得的重組質(zhì)粒，并進(jìn)行電泳觀察，可出現(xiàn)四種長度不同的片段，其長度分別為1.7kb、5.3kb、 。18.（淮陰中學(xué)南師附中海門中學(xué)天一中學(xué)2019屆高三第二學(xué)期期初“四校聯(lián)考”）基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心。圖1為限制酶EcoR的識別序列，圖2表示目的基因及限制酶切點(diǎn)，圖3表示目的基因上的DNA片段，圖4表示質(zhì)粒?；卮鹣铝袉栴}：（1）若用圖1所示的限制酶EcoR切割外源DNA，就其特異性而言，切開的是 之間相連的鍵。（2）圖3為目的基因中的某一片段，下列有關(guān)敘述正確的是 。A.若圖中的ACT能決定一個氨基酸，則ACT可稱為一個密碼子B.DNA聚合酶和DNA連接酶都可作用于處，解旋酶作用于

15、處 C.若只用這個片段中的3個堿基對，排列出的DNA片段有64種D.就游離的磷酸基而言，該片段與重組質(zhì)粒相比多了2個游離的磷酸基（3）若利用PCR技術(shù)增加目的基因的數(shù)量，由圖2可知，A、B、C、D四種單鏈DNA片段中應(yīng)選取 作為引物（DNA復(fù)制子鏈的延伸方向53）。該DNA分子在PCR儀中經(jīng)過4次循環(huán)后會產(chǎn)生等長的目的基因片段 個。（4）為了使目的基因和質(zhì)粒定向連接并且有利于受體細(xì)胞的篩選，提高重組效率，應(yīng)該選擇的限制酶是 。如果用限制酶Pst、EcoR和Hind同時對質(zhì)粒進(jìn)行切割，假設(shè)同時只有任意兩個位點(diǎn)被切斷且每次機(jī)會相等，則形成含有完整抗四環(huán)素基因的DNA片段有 種。（5）如果大腸桿菌是

16、受體細(xì)胞，則其體內(nèi)應(yīng)不含 基因，以利于篩選出含重組質(zhì)粒的受體菌。目的基因能在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)出相同的蛋白質(zhì)，其遺傳學(xué)基礎(chǔ)是 。19.（南京市、鹽城市2019屆高三年級第二次模擬）人類是乙型肝炎病毒的唯一宿主，接種乙肝疫苗是預(yù)防乙肝病毒感染的最有效方法。下圖為“轉(zhuǎn)基因酵母乙肝疫苗”的生產(chǎn)過程示意圖，該過程所用酵母菌為畢赤酵母菌，其體內(nèi)無天然質(zhì)粒，科學(xué)家改造出了下圖所示的pPIC9K質(zhì)粒（松弛控制型，復(fù)制不受宿主細(xì)胞控制）用作載體，其與目的基因形成的重組質(zhì)粒經(jīng)酶切后可以與酵母菌染色體發(fā)生同源重組，將目的基因整合與染色體組已實(shí)現(xiàn)表達(dá)。請回答下列問題：（1）如果要將HBsAg基因和pPIC9K質(zhì)粒重

17、組，應(yīng)該在HBsAg基因兩側(cè)的A和B位置接上限制酶 的識別序列，這樣設(shè)計(jì)的優(yōu)點(diǎn)是可避免質(zhì)粒和目的基因的自身環(huán)化。步驟1應(yīng)選用 （填“Ecoli”或“T4”）DNA連接酶。（2）步驟2的目的是 。已知大腸桿菌每20分鐘分裂一次，若1個大腸桿菌中導(dǎo)入了 10個重組質(zhì)粒，則1小時后可從1個大腸桿菌的后代中得到重組質(zhì)粒的個數(shù) 。（3）步驟4中應(yīng)選用限制酶 切割重組質(zhì)粒以獲得一段線性DNA，然后將其導(dǎo)入畢赤酵母菌細(xì)胞。為了確認(rèn)畢赤酵母菌轉(zhuǎn)化是否成功，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入 以便篩選。除此以外，還可以用分子雜交技術(shù)鑒定上圖中的畢赤酵母菌轉(zhuǎn)化是否成功，過程如下圖所示:根據(jù)圖中顯示結(jié)果推算，若要獲得16個成功導(dǎo)入該

18、基因的酵母菌菌落，則上圖中的酵母菌菌落數(shù)至少要為 個。（4）已知質(zhì)粒在細(xì)胞傳代過程中有丟失現(xiàn)象，試分析畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)的遺傳穩(wěn)定性高于大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的主要原因 。20. (南通市2019屆高三上學(xué)期第一次調(diào)研測試)乙型腦炎和偽狂犬病是豬的兩種常見傳染病。下圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)能同時預(yù)防這兩種病疫苗的流程圖，其中PrM為乙型腦炎的特異性抗原基因，PK、gG、gD為偽狂犬病的主要抗原基因，TK為偽狂犬病的毒性基因，pgG為啟動子，BamH和EcoR為兩種限制酶，其識別序列及切割位點(diǎn)分別是GGATCC、GAATTC。請回答下列問題：(1) 過程所需的酶有_和_。下列四種引物中適用于過程的一對引

19、物是_。P1：5TTGGATCCATGGAAGGCTCAATCATGTG 3P2：5CACAAGCTTAGATGACGTATCCAAGGAG 3P3：5TACGGTACCTTAGGGGTTAAGTGGG 3P4：5GCGAATTCTAACTGTAAGCCGGAGCG 3(2) 過程所需的酶有_。過程中要用Ca2處理大腸桿菌，其目的是_。(3) 重組偽狂犬病毒中不帶TK基因的優(yōu)點(diǎn)是_。(4) 將獲得的病毒疫苗注射到豬體內(nèi)，一方面病毒中抗原基因在豬細(xì)胞中大量表達(dá)，誘導(dǎo)豬獲得_免疫；另一方面_，使得病毒疫苗具有用量小、作用更持久等優(yōu)點(diǎn)。21.（南通市2019屆高三上學(xué)期教學(xué)質(zhì)量調(diào)研二）下圖表示的是一

20、種常用質(zhì)粒（pIJ702），其中tsr為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因，nel是黑色素合成基因，表達(dá)后能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；限制酶 CLa、Bgl、Pst、Sac 、Sph在pIJ702上分別只有一處識別序列。以Ac和 Sph切取質(zhì)粒PIJ702獲得一個0.4kb（1 kb= 1000 對堿基）的較小片段，現(xiàn)用一段目的基因替換了該小片段，重新構(gòu)成了重組質(zhì)粒pZHZ8。表中列出了這兩種質(zhì)粒被相應(yīng)的限制酶切割后的DNA片段長度。請回答下列問題：pLJ702pZHZ8Bgl5.7kb6.7kbCLa5.7kb2.2kb，4.5kbPst5.7kbL.6kb，5.1kb（1）質(zhì)粒是許多細(xì)

21、菌以及酵母菌等生物細(xì)胞中的非染色體或核區(qū)DNA，大部分的質(zhì)粒為環(huán)狀構(gòu)型，但也存在線形質(zhì)粒。如圖所示質(zhì)粒含有 個游離的磷酸某.若要使用PCR 擴(kuò)增該質(zhì)粒，則需要在反應(yīng)體系中添加的物質(zhì)有 、4種脫氧核苷酸、耐熱性的 DNA聚合酶。（2）限制酶切割出該0.4kb小片段的過程需蚜消耗 個水分子，該目的基因的獲取使用的工具酶最可能為 ；重組質(zhì)粒pZHZ8中至少含有 個限制酶切位點(diǎn)。（3）綜上分析重組質(zhì)粒pZHZ8中目的基因的長度為 ，已知PIJ702上含mel基因的 Cla/Pst 區(qū)域長度為2.5kb，若用Clu 和Pst聯(lián)合酶切pZHZ8，則參照表中數(shù)據(jù)分析酶切所得片段長度為 kb。（4）在含硫鏈絲

22、菌素的固體培養(yǎng)基上能夠生長的鏈霉菌細(xì)胞含有的雨粒為 。如果菌落的顏色為 ，可以確定鏈霉菌細(xì)胞中含有有重組質(zhì)粒pZHZ8。22.（南通市2019屆高三上學(xué)期教學(xué)質(zhì)量調(diào)研二）人的血清白蛋白（HSA）在臨床上需求量很大，通常從人血中提取。如果應(yīng)用基因工程和克隆技術(shù)，將人的血清白蛋白基因轉(zhuǎn)入奶牛細(xì)胞中，那么利用牛的乳汁生產(chǎn)人的血清白蛋白耽成為可能，其大致過程如下圖所示。請回答下列問題：（1）圖中單細(xì)胞的獲取通常需用 進(jìn)行處理，動物細(xì)胞在培養(yǎng)過程中培養(yǎng)箱所需的氣體環(huán)境為 ，此過程需將裝有細(xì)胞培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶的瓶蓋 。（2）可用“基因探針”進(jìn)行篩選或檢測，這里的“基因探針”是指 ，其長度不能太短的原因是 。

23、（3）過程中要對囊胚進(jìn)行分割，分割時需注意 。胚胎發(fā)育過程中胚胎從透明帶中伸展出來的過程叫做 。（4）過程中將胚胎移入受體牛體內(nèi)屬于 技術(shù)，在畜牧生產(chǎn)中采用這種技術(shù)的優(yōu)勢主要是 。23.（蘇州市2019屆高三學(xué)業(yè)質(zhì)量陽光指標(biāo)調(diào)研）黑胸大蠊是一種生活在我國南方地區(qū)的主要衛(wèi)生害蟲，通過生物防治手段可以起到一定抑制蟲害的作用。某研究小組對黑胸大蠊?jié)夂瞬《镜腜fDNV基因與pUCl19質(zhì)粒進(jìn)行重組構(gòu)建，通過感染黑胸大蠊研究其病理特征，已知Kpn、Pst、Hind3種限制酶的酶切位點(diǎn)不同，Amp為氨芐青霉素抗性基因，實(shí)驗(yàn)過程圖解如下。請分析回答下列問題：（1）純化后的PfDNV基因可通過 技術(shù)擴(kuò)增。常將

24、PfDNV基因與pUC119 質(zhì)粒采取加GC尾的連接方式構(gòu)建重組質(zhì)粒，該加尾的連接方式能使重組質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性 。（2）研究小組將獲得的重組質(zhì)粒通過 法轉(zhuǎn)染大腸桿菌，在含有 的培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間后，挑選出部分菌株，用Wind酶酶解菌株中的重組質(zhì)粒，經(jīng)電泳分析后發(fā)現(xiàn)有些菌株顯示有5kb和3.7kb片段，還有些菌株顯示有1.8kb和6.9kb片段，出現(xiàn)這種情況的原因是 。（3）選擇可以正常表達(dá)的重組質(zhì)粒PfDNV-pUCl19，利用Kpn酶酶解后回收7.3kb的片段，通過 的作用獲得PfAKpn-pUC119重組質(zhì)粒，將兩種重組質(zhì)粒通過腹部注射法注入黑胸大蠊幼蟲體內(nèi)，所得的結(jié)果如下表所示。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染

25、黑胸大蠊實(shí)驗(yàn)結(jié)果從上表中可以看出，當(dāng)注射的重組質(zhì)粒PfDNV-pUCl19的量在 ng及以上時，蟲體最終死亡率與野生型病毒感染的結(jié)果致。PfAlCpn-pUCU9重組質(zhì)粒注射幼蟲后沒有感染的根本原因是：Kpn酶酶解后再連接，導(dǎo)致 。24.（南京市2019屆高三5月第三次模擬考試）育種專家為獲得菠菜(2N=12，XY型)更多的突變體，先將其種子用EMS溶液浸泡，再在大田種植，發(fā)現(xiàn)一雄性菠菜植株性狀與野生植株有明顯差異，并且該地區(qū)從未發(fā)現(xiàn)過該種性狀的植株。請分析回答下列問題：（1）為確定該雄性菠菜植株的突變性狀產(chǎn)生原因是染色體變異還是基因突變，最直接的方法是利用高倍鏡觀察比較 。（2）經(jīng)研究確定該

26、突變性狀是由一條染色體上的某個基因突變產(chǎn)生的。為了進(jìn)一步了解突變基因的顯隱性和所在的染色體，設(shè)計(jì)了如下雜交實(shí)驗(yàn)方案:將該突變雄株與多株野生純合雌株雜交，觀察并記錄F1雌、雄植株中野生型和突變型的數(shù)量及有關(guān)比例，如下表1。F1野生型突變型突變型/(野生型+突變型）雄株M1M2Q雌株N1N2P若突變基因位于X染色體上且為顯性時，則Q和P值分別為 。若Q和P值分別為1/2、1/2時，則突變性狀的遺傳方式為 遺傳。（3）現(xiàn)已確認(rèn)，突變性狀和野生性狀是由常染色體上一對等位基因(B、b)控制。育種專家利用現(xiàn)代生物技術(shù)進(jìn)一步對此基因的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了檢測，結(jié)果如下圖1所示。該基因內(nèi)部有限制酶X識別序列，基因兩側(cè)分

27、別有限制酶EcoR和BamH識別序列，如表2。由圖可知該突變基因產(chǎn)生的原因是由 而引起基因結(jié)構(gòu)的改變。已知限制酶X識別序列為CCGG，若從某菠菜植株中分離出其中所含的各種B(b)基因部分區(qū)域，經(jīng)限制酶X完全切割后，共出現(xiàn)170、220、290和460對堿基的四種片段，那么該菠菜植株的基因型是 。若利用PCR技術(shù)擴(kuò)增B基因，設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是 ，最好還在兩種引物的一端分別加上 和 序列，以便于后續(xù)的剪切和連接。25.（南京市2019屆高三5月第三次模擬考試）7歲的哈?；加薪唤缧痛蟀捫员砥に山獍Y(JEB)，該病的病因是編碼層粘連蛋白332的基因之一LAMB3發(fā)生了突變，導(dǎo)致表皮和真皮很容易脫離，進(jìn)而產(chǎn)生水皰和糜爛，并伴有多種炎癥威脅其生命?？茖W(xué)家實(shí)施了表皮干細(xì)胞基因療法拯救了哈桑