凝血試劑應(yīng)用手冊(cè)20104

1、PT 凝血酶原時(shí)間一、 名稱(chēng)：PT凝血酶原時(shí)間。二、 原理：在受檢血漿中加入過(guò)量的因子 III（人胎盤(pán)的浸出液）和 Ca2+，使凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟福笳呤估w維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，血漿凝固所需要的時(shí)間即為PT。它是外源性凝血系統(tǒng)常用篩選試驗(yàn)之一。三、 試劑：Thromborel S 試劑，為人胎盤(pán)浸出液和 Ca2+的混合試劑，試劑說(shuō)明書(shū)中包含本試劑用在不同型號(hào)、不同方法學(xué)的儀器上的國(guó)際敏感度指數(shù)（ISI）。試劑溶解 時(shí)分別按包裝用 10ML 或 4.0ML 的蒸餾水復(fù)溶。四、 儀器品牌：日本進(jìn)口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自動(dòng)血凝儀。五、 操作步驟：SYSME

2、X 的 CA 系列血凝儀采用的是散射光比濁，百分比檢測(cè)，監(jiān)測(cè)樣品凝集開(kāi)始到凝集完全的散射光強(qiáng)度的變化，50%凝集時(shí)所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為凝血 酶原時(shí)間。1、 將 PT 的試劑按照說(shuō)明溶解好以后，放到確定的位置上。2、 將樣本離心準(zhǔn)備好以后，放到樣本架上，樣本架放到自動(dòng)進(jìn)樣器上。3、 在屏幕上進(jìn)入 WORK LIST 菜單，設(shè)好 ID 號(hào)，及要檢測(cè)的項(xiàng)目，一切準(zhǔn)備好便可 按 START 開(kāi)始。六、 參考值： PT9-13 秒七、 臨床意義：PT 延長(zhǎng)：先天性見(jiàn)于因子 II、V、VII、X 缺乏和無(wú)（或）低纖維蛋白原血癥；獲 得性見(jiàn)于彌散性血管內(nèi)凝血、原發(fā)性纖溶癥、維生素 K 缺乏癥、肝臟疾?。谎?環(huán)

3、中有抗凝物質(zhì)，如肝素、FDP、以及抗因子 II、V、VII、X 的抗體存在等情況。 PT 縮短：見(jiàn)于因子 V 增多癥、口服避孕藥、高凝狀態(tài)和血栓性疾病等。 口服抗凝劑的監(jiān)測(cè)：凝血酶原時(shí)間是監(jiān)測(cè)口服抗凝劑的常用指標(biāo)，中國(guó)人 INR 在1.52.5 用藥較為安全和有效。八、 標(biāo)本制備：9 份靜脈血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸櫞酸鈉抗凝，立即混勻，3000r/min×15min，血漿可在 15-25保存 4 小時(shí)，在-20至少可以保存 24 小時(shí)。九、 注意事項(xiàng)：試劑溶解后，可在 15放置 8 小時(shí)，2-8可保存 5 天。復(fù)溶要充分，溶解后的試劑最好不要在低溫冷凍保存。十

4、、 編寫(xiě)者：VASTEC公司血栓止血臨床應(yīng)有技術(shù)專(zhuān)員 陳中超十一、 參考文獻(xiàn)：1 SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL2 曾照芳，翟箋才，臨床檢驗(yàn)儀器學(xué)，北京：人民衛(wèi)生出版社，20013 姚泰，生理學(xué)（第六版），北京：人民衛(wèi)生出版社，20034 趙桂芝，臨床檢驗(yàn)學(xué)，成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，19975 陸永綏，李清華，張偉明，臨床檢驗(yàn)自動(dòng)化儀器分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，浙江：浙江大學(xué)出版社，2006十二、 科室主任：APTT 部分凝血活酶時(shí)間一、 名稱(chēng)：APTT部分凝血活酶時(shí)間。二、 原理：在 37下，以鞣花酸為激活劑活化凝血因子 XII 和 XI，以腦磷脂（部分凝血活酶）代替血

5、小板提供凝血的催化表面，在 Ca2+的參與下，觀(guān)察貧血小板血漿凝固所需要的時(shí)間。APTT 測(cè)定是內(nèi)源性凝血系統(tǒng)較為敏感、簡(jiǎn)便和常用的篩選試驗(yàn)。三、 試劑：Actin 試劑（鞣花酸做為激活劑，磷脂為兔腦粉），及 CaCl2 試劑，試劑為 液體不需復(fù)溶。2-8可保存到效期。四、 儀器品牌：日本進(jìn)口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自動(dòng)血凝儀。五、 操作步驟：SYSMEX 的 CA血凝儀采用的是散射光比濁，百分比檢測(cè)，監(jiān)測(cè) 樣品凝集開(kāi)始到凝集完全的散射光強(qiáng)度的變化，50%凝集時(shí)所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為凝血酶原時(shí)間。a) 將 APTT 的試劑和 CaCl2 放到確定的位置上。b) 將

6、樣本離心準(zhǔn)備好以后，放到樣本架上，樣本架放到自動(dòng)進(jìn)樣器上。c) 在屏幕上進(jìn)入 WORK LIST 菜單，設(shè)好 ID 號(hào)，及要檢測(cè)的項(xiàng)目，一切準(zhǔn)備好便可 按 START 開(kāi)始。六、 參考值： APTT 20-40 秒七、 臨床意義： a)APTT 延長(zhǎng)：1、 因子 VIII、IX 和 XI 血漿中水平減低，如血友病 A、B 及凝血因子 XI 缺乏癥；因子 VIII 減少還見(jiàn)于部分血管性血友病患者；2、 嚴(yán)重的凝血酶原、因子 V、因子 X 和纖維蛋白原缺乏，如肝臟疾病、阻塞性黃疸、 新生兒出血癥、腸道滅菌綜合癥、吸收不良綜合征、口服抗凝劑、應(yīng)用肝素以及纖 維蛋白原缺乏血癥等；3、 纖溶活性增強(qiáng)，如

7、繼發(fā)性、原發(fā)性纖溶亢進(jìn)及循環(huán)血液中有纖維蛋白（原）降解產(chǎn) 物（FDP）;4、 血循環(huán)中有抗凝物質(zhì)，如抗因子 VIII 或 IX 抗體，狼瘡抗凝物質(zhì)等。b)APTT 縮短：1、 高凝狀態(tài)，如彌散性血管內(nèi)凝血的高凝期、促凝物質(zhì)進(jìn)入血流以及凝血因子的活性增高等；2、 血栓性疾病，如心肌梗死、不穩(wěn)定性心絞痛、腦血管病變、糖尿病伴血管病變、肺 梗死、深靜脈血栓形成、妊娠高血壓綜合征和腎病綜合征以及嚴(yán)重的灼傷等。八、 標(biāo)本制備：9 份靜脈血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸櫞酸鈉抗凝，立即混勻，3000r/min×15min，血漿可在 15-25保存 4 小時(shí)，在-20至少可以保存

8、24 小時(shí)。九、 注意事項(xiàng)：APTT 試劑為液體試劑無(wú)需復(fù)溶，需要在 2-8下保存，切勿凍存。十、 編寫(xiě)者：VASTEC公司血栓止血臨床應(yīng)有技術(shù)專(zhuān)員 陳中超十一、 參考文獻(xiàn)：1 SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL2 曾照芳，翟箋才，臨床檢驗(yàn)儀器學(xué)，北京：人民衛(wèi)生出版社，20013 姚泰，生理學(xué)（第六版），北京：人民衛(wèi)生出版社，20034 陸永綏，李清華，張偉明，臨床檢驗(yàn)自動(dòng)化儀器分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，浙江：浙江大學(xué)出版社，2006十二、 科室主任：FBG 纖維蛋白原測(cè)定一、 名稱(chēng)：FBG纖維蛋白測(cè)定。二、 原理：采用 Clauss 凝固法原理，根據(jù)纖維蛋白原與凝血酶作用最終

9、形成纖維蛋白的原理。以國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品為參比血漿制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，用過(guò)量的凝血酶來(lái)測(cè)定血漿凝固 時(shí)間，所得凝固時(shí)間與血漿中纖維蛋白原濃度呈負(fù)相關(guān)，從而得到纖維蛋白原的含 量。三、 試劑：Thrombin 試劑（凝血酶凍干品），1ml 的蒸餾水復(fù)溶。Owens Buffer 緩沖液，注意試劑是否結(jié)晶會(huì)影響結(jié)果。四、 儀器品牌：日本進(jìn)口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自動(dòng)血凝儀。五、 操作步驟：SYSMEX 的 CA 系列血凝儀采用的是散色光比濁，百分比檢測(cè)，監(jiān)測(cè)樣品凝集完全的散射光強(qiáng)度的變化，50%凝集時(shí)所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為凝血酶時(shí)間。1.將 FBG 試劑按照說(shuō)明溶解好以后，放到確

10、定的位置上。2.將樣本離心準(zhǔn)備好后，放到樣本架上，樣本架放到自動(dòng)進(jìn)樣器上。3.在屏幕上進(jìn)入 WORK LIST 菜單，設(shè)好 ID 號(hào)，以及要檢測(cè)的項(xiàng)目，一切準(zhǔn)備好后 可按 START 開(kāi)始。六、 參考值： FBG：2-4g/l七、 臨床意義：FBG 含量增高：見(jiàn)于糖尿病及其酸中毒，動(dòng)脈粥樣硬化，急性傳染病，急性腎炎 尿毒癥，骨髓瘤，休克，外科術(shù)后及輕，度肝炎等。FBG 含量減低：見(jiàn)于 DIC，原發(fā)性纖溶癥，重癥肝炎，肝硬化等。八、 標(biāo)本制備：9 份靜脈血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸櫞酸鈉抗凝，立即混勻，3000r/min×15min，血漿可在 15-25保存4小時(shí)，

11、在-20至少可以保存 24 小時(shí)。九、 注意事項(xiàng)：試劑溶解后，可在 15放置 10 小時(shí)，2-8可放 7 天。復(fù)溶要充分，復(fù)溶好的試劑可冷凍分裝保存十、 編寫(xiě)者：VASTEC公司血栓止血臨床應(yīng)有技術(shù)專(zhuān)員 陳中超十一、 參考文獻(xiàn)：1 SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL2 曾照芳，翟箋才，臨床檢驗(yàn)儀器學(xué)，北京：人民衛(wèi)生出版社，20013 姚泰，生理學(xué)（第六版），北京：人民衛(wèi)生出版社，20034 趙桂芝，臨床檢驗(yàn)學(xué)，成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，19975 陸永綏，李清華，張偉明，臨床檢驗(yàn)自動(dòng)化儀器分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，浙江：浙江大學(xué)出版社，2006十二、 科室主任：TT 凝血酶時(shí)間

12、一、 名稱(chēng)：TT凝血酶時(shí)間。二、 原理：待測(cè)血漿加入標(biāo)定的凝血酶溶液，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，測(cè)定凝固所需的時(shí)間，即為待測(cè)血漿凝血酶時(shí)間。三、 試劑：TestThrombin 試劑（凝血酶凍干品。）。試劑溶解時(shí)用 TT 特有的緩沖液以 5ml 復(fù)溶。四、 儀器品牌：日本進(jìn)口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自動(dòng)血凝儀。五、 操作步驟：SYSMEX 的 CA 系列血凝儀采用的是散色光比濁，百分比檢測(cè)，監(jiān)測(cè)樣品凝集完全的散射光強(qiáng)度的變化，30%凝集時(shí)所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為凝血酶時(shí)間。1. 將 TT 試劑按照說(shuō)明溶解好以后，放到確定的位置上。2. 將樣本離心準(zhǔn)備好后，放到樣本架

13、上，樣本架放到自動(dòng)進(jìn)樣器上。3. 在屏幕上進(jìn)入 WORK LIST 菜單，設(shè)好 ID 號(hào)，以及要檢測(cè)的項(xiàng)目，一切準(zhǔn)備好后可按 START 開(kāi)始。六、 參考值： TT14-21 秒七、 臨床意義：TT 延長(zhǎng)：見(jiàn)于肝素增多或類(lèi)肝素物質(zhì)存在，SLE，肝病，腎病，低（無(wú)）纖維蛋白 原血癥，異常纖維蛋白原血癥，F(xiàn)DP 增多等疾病。八、 標(biāo)本制備：9 份靜脈血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸櫞酸鈉抗凝，立即混勻，3000r/min×15min，血漿可在 15-25保存 4 小時(shí)，在-20至少可以保存 24 小時(shí)。九、 注意事項(xiàng)：試劑溶解后，可在 15放置 10 小時(shí)，2-8可放 7

14、 天。復(fù)溶要充分，復(fù)溶好的試劑可冷凍分裝保存。十、 編寫(xiě)者：VASTEC公司血栓止血臨床應(yīng)有技術(shù)專(zhuān)員 陳中超十一、 參考文獻(xiàn)：1 SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL2 曾照芳，翟箋才，臨床檢驗(yàn)儀器學(xué)，北京：人民衛(wèi)生出版社，20013 姚泰，生理學(xué)（第六版），北京：人民衛(wèi)生出版社，20034 趙桂芝，臨床檢驗(yàn)學(xué)，成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，19975 陸永綏，李清華，張偉明，臨床檢驗(yàn)自動(dòng)化儀器分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，浙江：浙江大學(xué)出版社，2006十二、 科室主任：抗凝血酶 III 檢測(cè)（ATIII）一、 名稱(chēng)：抗凝血酶III測(cè)定。二、 原理：ATIII 是血液凝固的一種主要抑制劑

15、，其功能分析依賴(lài)于血漿中有肝素存在的情況下降低凝血酶活性的能力。樣本中的 ATIII 在肝素的存在下與未激活的凝血酶形成凝血酶抗凝血酶復(fù)合物。剩余的凝血酶與試劑中的底物結(jié)合，在 405nm 波長(zhǎng)下檢 測(cè)吸光度的變化。以國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品為參比血漿作濃度與吸光度的曲線(xiàn)。所測(cè)樣本的吸光 度將會(huì)根據(jù)曲線(xiàn)得到樣本的濃度。三、 試劑：Thrombin Reagent6 X15ml（凝血酶試劑 用 15ml 的緩沖液復(fù)溶）Substrate Reagent6X3 ml（底物用 3ml 的去離子水復(fù)溶）uffer Solution1X100ml （緩沖液 液體用于復(fù)溶凝血酶試劑）四、 儀器品牌：日本進(jìn)口SYSMEX

16、公司的CA550、CA1500、CA7000型全自動(dòng)血凝儀。五、 操作步驟：SYSMEX 的 CA 系列血凝儀采用的是發(fā)色底物法來(lái)檢測(cè) ATIII。1.將 AT III 試劑盒中所有試劑按照說(shuō)明溶解好以后，放到確定的位置上。4. 將樣本離心準(zhǔn)備好后，放到樣本架上，樣本架放到自動(dòng)進(jìn)樣器上。5. 在屏幕上進(jìn)入 WORK LIST 菜單，設(shè)好 ID 號(hào)，以及要檢測(cè)的項(xiàng)目，一切準(zhǔn)備好 后可按 START 開(kāi)始。六、 參考值： ATIII75125%七、 臨床意義：定量測(cè)定血漿中抗凝血酶（ATIII）的活性，能用于診斷ATIII合成減少或消耗增加性疾病，和監(jiān)測(cè)替代治療效果。ATIII 缺乏主要見(jiàn)于肝臟疾病、彌散性血管內(nèi)凝血、敗血癥、肺栓塞、腎病綜合癥、中風(fēng)及深靜脈血栓等。八、 標(biāo)本制備：9 份靜脈血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸櫞酸鈉抗凝，立即混勻，3000r/min×15min，在 60 分鐘以?xún)?nèi)分離血漿，分離血漿時(shí)用塑料吸頭、且用塑料試管儲(chǔ)存血漿。分析血漿標(biāo)本在 2 小時(shí)內(nèi)完成；另外，冰凍保存，融化使用等。九、 注意事項(xiàng)：凝血酶試劑溶解后，使用時(shí)在 15-25-孵育 30 分鐘。凝血酶試劑復(fù)溶后在原始瓶中可冰凍 5 次，底物可冰凍 10 次。緩沖液 2-8可保存 6 個(gè)月。2-8凝血酶穩(wěn)