儀分實驗-熒光法測定維生素B2藥物中核黃素含量解析

1、2022-4-23實驗報告格式實驗報告格式1、實驗?zāi)康模ê唵危嶒災(zāi)康模ê唵危?、實驗原理（詳細(xì)）、實驗原理（詳細(xì)）3、試劑儀器（簡單）、試劑儀器（簡單）4、實驗步驟（簡單）、實驗步驟（簡單）5、數(shù)據(jù)處理（詳細(xì)，表格，圖）數(shù)據(jù)處理（詳細(xì)，表格，圖）6、結(jié)果討論、結(jié)果討論（重點）（重點） 、回答思考題的問題、回答思考題的問題 、討論引入誤差的原因、討論引入誤差的原因 、實驗操作中的注意事項及減小誤差的方法、實驗操作中的注意事項及減小誤差的方法熒光法測定維生素?zé)晒夥y定維生素B2藥物中核黃素含量藥物中核黃素含量實驗二實驗二維生素維生素B22022-4-23維生素B2易溶于水而不溶于乙醚等有機溶劑

2、，在中性或酸性溶液中穩(wěn)定，光照易分解，對熱穩(wěn)定。稀釋后稀釋后有強烈熒光，有強烈熒光，維生素維生素B2溶液在溶液在430440 nm藍(lán)光的照藍(lán)光的照射下，發(fā)出綠色熒光，其峰值波長為射下，發(fā)出綠色熒光，其峰值波長為525 nm。一、實驗原理一、實驗原理 2022-4-23（1）定量依據(jù)：維生素B2在水中是強的熒光物質(zhì)，并且在在低濃度低濃度時，熒光強度與維生素B2濃度呈正比： If = kc （2）定量方法（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）：測定一系列已如濃度的維生素B2的熒光強度，然后以熒光強度對維生素B2濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線，再測定未知濃度維生素B2的熒光強度，把它代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程求出其濃度。 If = kc 熒光強度熒

3、光強度 vs.vs.濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線熒光強度熒光強度核黃素濃度核黃素濃度樣本樣本二、實驗儀器二、實驗儀器2022-4-23 測量熒光的測量熒光的儀器主要由儀器主要由四個四個部分部分組成：激發(fā)組成：激發(fā)光源、樣品池、光源、樣品池、雙單色器系統(tǒng)、雙單色器系統(tǒng)、檢測器。檢測器。 特殊點特殊點：有兩個單色器，光源與檢測器通常成直角。三、實驗步驟及注意事項三、實驗步驟及注意事項吸量管的使用，吸量管的使用，溶液轉(zhuǎn)移，定容溶液轉(zhuǎn)移，定容同樣條件下測定同樣條件下測定讀取熒光數(shù)據(jù)讀取熒光數(shù)據(jù)熒光儀的操作，發(fā)射光譜熒光儀的操作，發(fā)射光譜和激發(fā)光譜繪制和激發(fā)光譜繪制I If f對濃度對濃度C C擬合擬合標(biāo)準(zhǔn)

4、曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線4.4.數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)處理處理2.2.標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)溶液熒溶液熒光測定光測定3.3.未知未知樣品熒樣品熒光測定光測定1.1.配制標(biāo)配制標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)溶液移液管的使用移液管的使用 常見移液管：標(biāo)有常見移液管：標(biāo)有溫度和容量溫度和容量(注意是注意是否標(biāo)有否標(biāo)有吹吹) 用途：用途：準(zhǔn)確移取一準(zhǔn)確移取一定體積的液體定體積的液體 操作：操作：洗滌洗滌(蒸餾水蒸餾水)、潤洗、潤洗(3次次)、移液、移液、洗滌干凈、洗滌干凈注意事項：注意事項：1、整個操作過程中，保持移液管的垂直；、整個操作過程中，保持移液管的垂直；2、讀數(shù)、讀數(shù)時視線與凹液面平齊時視線與凹液面平齊溶液下端溶液下端1-2cm四、數(shù)據(jù)處理四、數(shù)據(jù)處理2022-4-23濃度（濃度（10-1 g.mL-1）012345X熒光強度熒光強度扣除空白扣除空白1.原始數(shù)據(jù)2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制和未知樣品的濃度計算五、實驗注意事項五、實驗注意事項1.實驗過程中，注意使用石英比色池時必須保持四面干凈，拿穩(wěn)棱角注意不要摔落;2.實驗完畢，注意檢查儀器是否運行正常，關(guān)閉程序是否正確。3.試劑取后，得放回原處，保持試驗臺整潔。2022-4-231.為什么熒光光度法較吸收光度法靈敏度高？2.維生素B2在pH = 67