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1、專題2微生物的培養(yǎng)與應用【高考模擬精練【高考模擬精練】1.(20131.(2013全國卷全國卷)臨床使用抗生素前,有時需要做臨床使用抗生素前,有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時,首先要從病人身上獲取少量細菌耐藥實驗。實驗時,首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病樣本,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。菌對不同抗生素的敏感性?;卮鹣铝袉栴}:回答下列問題:(1)(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用_法或法或_法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。經(jīng)過選

2、擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)(2)取該單菌落適當稀釋,用取該單菌落適當稀釋,用_法接種于固體法接種于固體培養(yǎng)基表面,在培養(yǎng)基表面,在3737培養(yǎng)箱中培養(yǎng)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h24 h,使其均勻生,使其均勻生長,布滿平板。長,布滿平板。平板劃線平板劃線稀釋涂布平板稀釋涂布平板涂布涂布(3)(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含有有A A、B B、C C、D D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時間后,含的不同位置,培養(yǎng)一段時間后,含A A的濾紙片周圍出現(xiàn)的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病

3、菌對抗生素透明圈,說明該致病菌對抗生素A_A_;含;含B B的的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素B_B_;含;含C C的濾紙片周圍的透明圈比含的濾紙片周圍的透明圈比含A A的的小,說明小,說明_;含;含D D的濾紙的濾紙敏感敏感不敏感不敏感該致病菌對該致病菌對C C的敏感性比對的敏感性比對A A的弱的弱片周圍的透明圈也比含片周圍的透明圈也比含A A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素生素D D的的_。(4)(4)根據(jù)上述實驗

4、結果,為達到抗菌目的,最好應選用根據(jù)上述實驗結果,為達到抗菌目的,最好應選用抗生素抗生素_。耐藥菌耐藥菌A A2.(20162.(2016西安模擬西安模擬) )某小組同學為了調查湖水中細菌某小組同學為了調查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)。請回答與此實驗相菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)。請回答與此實驗相關的問題。關的問題。(1)(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉為細菌培養(yǎng)提供了碳培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉為細菌培養(yǎng)提供了碳源和氮源。除此之外,培養(yǎng)基還必須含有的基本成分源和氮源。除此之外,培養(yǎng)基還必須含

5、有的基本成分是是_和和_。無機鹽無機鹽水水(2)(2)為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結果,應將接種了為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結果,應將接種了湖水樣品的平板置于湖水樣品的平板置于_中培養(yǎng),培養(yǎng)的溫度設中培養(yǎng),培養(yǎng)的溫度設定在定在3737。要使該實驗所得結果可靠,還應該同時在。要使該實驗所得結果可靠,還應該同時在另一平板上接種另一平板上接種_作為對照實驗。作為對照實驗。(3)(3)培養(yǎng)培養(yǎng)2020小時后,觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的小時后,觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的_,這說明湖水樣品中有多種細菌。一般來,這說明湖水樣品中有多種細菌。一般來說,菌落總數(shù)越多,湖水遭受細菌污染的程度越說,菌落總

6、數(shù)越多,湖水遭受細菌污染的程度越_(_(填填“高高”或或“低低”) )。恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)箱無菌水無菌水菌落菌落高高(4)(4)某同學在純化土壤中的細菌時,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌某同學在純化土壤中的細菌時,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片,最可能的原因是落連成一片,最可能的原因是_,應當怎樣操作?應當怎樣操作?_。菌液濃度過高菌液濃度過高( (或培養(yǎng)過程被雜菌污染或培養(yǎng)過程被雜菌污染) )增大稀釋倍數(shù)增大稀釋倍數(shù)( (或嚴格無菌操作,原因與操作要對應或嚴格無菌操作,原因與操作要對應) )【高考模擬精練【高考模擬精練】3.(20153.(2015全國卷全國卷)已知微生物已知微生物A A可以產(chǎn)生油脂,微生可以

7、產(chǎn)生油脂,微生物物B B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?;卮鹩嘘P問題:生產(chǎn)?;卮鹩嘘P問題:(1)(1)顯微觀察時,微生物顯微觀察時,微生物A A菌體中的油脂通??捎镁w中的油脂通??捎胈染色。微生物染色。微生物A A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),可產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),可選用選用_(_(填填“萃取法萃取法”或或“水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法”) )從菌體中提取。從菌體中提取。蘇丹蘇丹(或或)萃取法萃取法(2)(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B B的單菌的單菌落,可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣

8、,并應落,可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣,并應選用以選用以_為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。(3)(3)為了確定微生物為了確定微生物B B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度,某同學產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度,某同學測得相同時間內(nèi),在測得相同時間內(nèi),在3535、4040、4545溫度下降解溫度下降解10 g10 g油脂所需酶量依次為油脂所需酶量依次為4 mg4 mg、1 mg1 mg、6 mg6 mg,則上述三個溫,則上述三個溫度中,度中,_條件下該酶活力最小。為了進一步確條件下該酶活力最小。為了進一步確定該酶的最適溫度,應圍繞定該酶的最適溫度,應圍繞_設計后續(xù)實驗。設計后續(xù)實驗

9、。油脂油脂454540404.(20144.(2014全國卷全國卷)為了調查某河流的水質狀況,某研究為了調查某河流的水質狀況,某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量,并進行了細菌分離小組測定了該河流水樣中的細菌含量,并進行了細菌分離等工作。回答下列問題:等工作。回答下列問題:(1)(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。在該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是段時間,這樣做的目的是_;然后,將然后,將1 1 mLmL水樣稀釋水樣稀釋100100倍,在倍,在

10、3 3個平板上用涂布法分別接入個平板上用涂布法分別接入0.1 mL0.1 mL稀釋液;經(jīng)適當培養(yǎng)后,稀釋液;經(jīng)適當培養(yǎng)后,3 3個平板上的菌落數(shù)分別為個平板上的菌落數(shù)分別為3939、3838和和3737,據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為,據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.83.810107 7(2)(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時,該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時,接種環(huán)通過接種環(huán)通過_滅菌,在第二次及以后的劃線滅菌,在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線,這樣做的目時,總是從上一次劃線的末端開

11、始劃線,這樣做的目的是的是_。(3)(3)示意圖示意圖A A和和B B中,中,_表示的是用稀釋涂布平板表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。法接種培養(yǎng)后得到的結果。灼燒灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落B B(4)(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進行靜置培養(yǎng),另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結果發(fā)一部分進行靜置培養(yǎng),另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中析其原因是:振蕩

12、培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含的含量,同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高量,同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高_的利用率。的利用率。溶解氧溶解氧營養(yǎng)物質營養(yǎng)物質5.5.同學們?yōu)榱颂骄客寥乐械奈⑸飳δ蛩厥欠裼蟹纸庾饔?,設計了同學們?yōu)榱颂骄客寥乐械奈⑸飳δ蛩厥欠裼蟹纸庾饔?,設計了以下實驗,并成功篩選到能高效降解尿素的細菌以下實驗,并成功篩選到能高效降解尿素的細菌( (目的菌目的菌) )。培養(yǎng)基。培養(yǎng)基成分如下表所示,實驗步驟如下圖所示。請分析回答問題:成分如下表所示,實驗步驟如下圖所示。請分析回答問題:KHKH2 2POPO4 41.4 g1.4 gNaNa2 2HPOHPO4 42.1 g2.1

13、gMgSOMgSO4 47H7H2 2O O0.2 g0.2 g葡萄糖葡萄糖10.0 g10.0 g尿素尿素1.0 g1.0 g瓊脂瓊脂15.0 g15.0 g將上述物質溶解后,用蒸餾水定容到將上述物質溶解后,用蒸餾水定容到1 000 mL1 000 mL(1)(1)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選目的菌,這種培養(yǎng)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選目的菌,這種培養(yǎng)基屬于基屬于_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。(2)(2)目的菌生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的目的菌生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的_和和_,實驗中需要振蕩培養(yǎng),實驗中需要振蕩培養(yǎng),原因是原因是_。選擇選擇尿素尿素葡萄糖葡萄糖為目的菌提供氧氣為目

14、的菌提供氧氣(3)(3)關于下圖的操作方法和結果,敘述正確的是關于下圖的操作方法和結果,敘述正確的是_。A.A.操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B.B.劃線操作必須在火焰上進行劃線操作必須在火焰上進行C.C.在在5 5區(qū)域中才可以得到所需菌落區(qū)域中才可以得到所需菌落D.D.在在1 1、2 2、3 3、4 4、5 5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌D D【加固訓練【加固訓練】尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料,但若不經(jīng)細菌的尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料,但若不經(jīng)細菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類分解,就不能更好地被植物利

15、用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多,某同學試圖從土壤中篩選出能高效降解尿素的細和數(shù)量繁多,某同學試圖從土壤中篩選出能高效降解尿素的細菌菌( (目的菌目的菌) ),表中所示是該同學配制的培養(yǎng)基成分:,表中所示是該同學配制的培養(yǎng)基成分:成分成分含量含量成分成分含量含量KHKH2 2POPO4 41.4 g1.4 gNaNa2 2HPOHPO4 42.1 g2.1 gMgSOMgSO4 47H7H2 2O O0.2 g0.2 g葡萄糖葡萄糖10.0 g10.0 g(NH(NH4 4) )2 2SOSO4 41.0 g1.0 g瓊脂瓊脂15.0 g15.0 g蒸餾水蒸餾水定容到定容到1 000 m

16、L1 000 mL(1)(1)該培養(yǎng)基中的主要營養(yǎng)物質包括該培養(yǎng)基中的主要營養(yǎng)物質包括_。從。從物理性質上看,該培養(yǎng)基屬于物理性質上看,該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。(2)(2)在微生物的培養(yǎng)中,一般要對配制的培養(yǎng)基采用高在微生物的培養(yǎng)中,一般要對配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌,其中壓蒸汽滅菌,其中“高壓高壓”是為了是為了_。(3)(3)若培養(yǎng)從土壤中分離出來的目的菌,該培養(yǎng)基成分若培養(yǎng)從土壤中分離出來的目的菌,該培養(yǎng)基成分如何調整?如何調整?_,依據(jù)是,依據(jù)是_。固體固體碳源、氮源、水和無機鹽碳源、氮源、水和無機鹽殺死培養(yǎng)基中的細菌芽孢殺死培養(yǎng)基中的細菌芽孢將將(NH4)2SO4(NH4)2S

17、O4換成尿素換成尿素要篩選出降解尿素的細菌,只能以尿素作為唯一的氮源要篩選出降解尿素的細菌,只能以尿素作為唯一的氮源纖維素分解菌的篩選:纖維素分解菌的篩選:(1)(1)培養(yǎng)基:培養(yǎng)基:_的選擇培養(yǎng)基。的選擇培養(yǎng)基。(2)(2)篩選原理:篩選原理:(3)(3)篩選方法:挑選菌落周圍出現(xiàn)篩選方法:挑選菌落周圍出現(xiàn)_的的菌落。菌落。 富含纖維素富含纖維素紅色復合物紅色復合物透明圈透明圈不變紅的透明圈不變紅的透明圈【特別提醒【特別提醒】(1)(1)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中并不只有纖維素一種纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中并不只有纖維素一種碳源。碳源。(2)(2)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上生長的并不只是纖維

18、纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上生長的并不只是纖維素分解菌。素分解菌。(3)(3)纖維素分解菌菌落周圍的透明圈的大小與纖維素分纖維素分解菌菌落周圍的透明圈的大小與纖維素分解菌分解纖維素的能力呈正相關。解菌分解纖維素的能力呈正相關?!靖呖寄M精練【高考模擬精練】6.(20146.(2014全國卷全國卷)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?;卮鹣铝袉栴}:分解?;卮鹣铝袉栴}: (1)(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由分泌纖維素酶,該酶是由3 3種組分組成的復合酶,其中的種組分組成的復合酶,其中的葡萄糖苷酶可將葡萄糖苷酶可將_分

19、解成分解成_。(2)(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)(CR)時,時,CRCR可與纖可與纖維素形成維素形成_色復合物。用含有色復合物。用含有CRCR的該種培養(yǎng)基培的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心養(yǎng)纖維素分解菌時,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的的_。纖維二糖纖維二糖葡萄糖葡萄糖紅紅透明圈透明圈(3)(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)基單菌落,某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)基( (成分見下成分見下表表) ):注:注:“+”+”表示有,

20、表示有,“-”-”表示無。表示無。酵母酵母膏膏無機鹽無機鹽 淀粉淀粉纖維纖維素粉素粉瓊脂瓊脂CRCR溶液溶液水水培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基甲+ + + + +- -+ + +培養(yǎng)基乙培養(yǎng)基乙+ + + +- -+ + + +據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲_(_(填填“能能”或或“不能不能”) )用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是_;培養(yǎng)基乙;培養(yǎng)基乙_(_(填填“能能”或或“不能不能”) )用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是_。酵母酵母膏膏無機鹽無機鹽 淀粉淀粉纖維纖維素粉素粉瓊脂瓊脂CRCR溶液溶液水水培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基甲+ + +

21、+ +- -+ + +培養(yǎng)基乙培養(yǎng)基乙+ + + +- -+ + + +不能不能液體培養(yǎng)基不能分離單菌落液體培養(yǎng)基不能分離單菌落不能不能培養(yǎng)基乙中沒有纖維素,不會形成培養(yǎng)基乙中沒有纖維素,不會形成CR-CR-纖維素紅色復合物,纖維素紅色復合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌7.(20157.(2015江蘇江蘇) )人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動物的胃,可用人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動物的胃,可用來發(fā)酵處理秸稈,提高秸稈的營養(yǎng)價值。為了增強發(fā)酵效來發(fā)酵處理秸稈,提高秸稈的營養(yǎng)價值。為了增強發(fā)酵效果,研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株,并對其降果,研究

22、人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株,并對其降解纖維素能力進行了研究。請回答下列問題:解纖維素能力進行了研究。請回答下列問題:(1)(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中,下列選項不需要的是在樣品稀釋和涂布平板步驟中,下列選項不需要的是_(_(填序號填序號) )。酒精燈酒精燈 培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿 顯微鏡顯微鏡 無菌水無菌水(2)(2)在涂布平板時,滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過在涂布平板時,滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是多的原因是_。培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液,導致菌體堆積,影響分離效果培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液,導致菌體堆積,影響分離效果(3)(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時,若試管口粘

23、附有向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時,若試管口粘附有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈的原因是培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈的原因是_。(4)(4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物,但并不與纖維剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物,但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。研究人員在素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩選到了幾株有透明降解圈的菌落剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩選到了幾株有透明降解圈的菌落( (見下圖見下圖) )。圖中降解圈大小與纖維素酶的。圖中降解圈大小與纖維素酶的_有關。有關。圖中降解纖維素能力最強的菌株是圖中降解纖維素能力最強的菌株是_(_(填圖中序填圖中

24、序號號) )。避免培養(yǎng)基污染棉塞避免培養(yǎng)基污染棉塞量與活性量與活性(5)(5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1J1和和J4J4,在,在不同溫度和不同溫度和pHpH條件下進行發(fā)酵,測得發(fā)酵液中酶活性條件下進行發(fā)酵,測得發(fā)酵液中酶活性的結果見下圖,推測菌株的結果見下圖,推測菌株_更適合用于人更適合用于人工瘤胃發(fā)酵,理由是工瘤胃發(fā)酵,理由是_。J4J4發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,J4J4菌株在較菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高 8.8. (2015(2015臨沂模擬臨沂模擬) )莠去津是一種含氮農(nóng)藥,在土壤中莠去津是一種含氮農(nóng)藥,在土壤中不易降解,為修復被其污染的土壤,可按下面程序選育能不易降解,為修復被其污染的土壤,可按下面程序選育能降解莠去津的細菌降解莠去津的細菌( (目的菌目的菌) )。請據(jù)圖回答:。請據(jù)圖回答:( (已知莠去津已知

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