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文檔簡(jiǎn)介

1、周清一、 基因工程2、(a)基因工程的原理及技術(shù)原理:基因重組技術(shù):(一)基因工程的基本工具1.“分子手術(shù)刀”限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)(1)來(lái)源:主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的。(2)功能:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi),因此具有專一性。(3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。2.“分子縫合針”DNA連接酶(1)兩種DNA連接酶(EcoliDNA連接酶和T4DNA連接酶)的比較:相同點(diǎn):都縫合磷酸二酯鍵。區(qū)別:EcoliDNA連接酶來(lái)源于大腸桿菌,只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端

2、之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái);而T4DNA連接酶能縫合兩種末端,但連接平末端的之間的效率較低。(2)與DNA聚合酶作用的異同: DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。3.“分子運(yùn)輸車”載體(1)載體具備的條件:能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn),供外源DNA片段插入。具有標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等。(二)基因工程的基本操

3、作程序第一步:目的基因的獲取1.目的基因是指: 主要是編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 。2.原核基因采取直接分離獲得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法_和化學(xué)合成法_。3.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1)原理:DNA雙鏈復(fù)制(2)過(guò)程:第一步:加熱至9095DNA解鏈;第二步:冷卻到5560,引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈;第三步:加熱至7075,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。第二步:基因表達(dá)載體的構(gòu)建(是基因工程的核心)1.目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。2.組成:目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因(1)啟動(dòng)子:是一段有特殊結(jié)

4、構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。(2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段 ,位于基因的尾端。(3)標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。第三步:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞_1.轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程。2.常用的轉(zhuǎn)化方法:將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有 基因槍法和 花粉管通道法等。此方法的受體細(xì)胞是受精卵或體細(xì)胞。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是 顯

5、微注射技術(shù)。此方法的受體細(xì)胞多是 受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:常用大腸桿菌做受體細(xì)胞。3.重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。第四步:目的基因的檢測(cè)和鑒定1.首先要檢測(cè) 轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因,方法是采用 DNA分子雜交技術(shù)。2.其次還要檢測(cè) 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,方法是采用 用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。3.最后檢測(cè) 目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取 蛋白質(zhì),用相應(yīng)的 抗體進(jìn)行 抗原抗體雜交。4.前三步是分子水平的鑒定;有時(shí)還需進(jìn)行 個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。如 轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植物是否出現(xiàn)抗蟲(chóng)性狀。(三

6、)(b)基因工程的應(yīng)用1.植物基因工程:抗蟲(chóng)、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。2.動(dòng)物基因工程:提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物。3.基因治療:把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用。(四)(a)蛋白質(zhì)工程的概念蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過(guò)基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì))(1)蛋白質(zhì)工程崛起的緣由:基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)(2)蛋白質(zhì)工程的基本原理:它可以根據(jù)人的需求來(lái)設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的

7、結(jié)構(gòu),又稱為第二代的基因工程?;就緩剑簭念A(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā),設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列,找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因),以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑;以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。(注意:目的基因只能用人工合成的方法)設(shè)計(jì)中的困難:如何推測(cè)非編碼區(qū)以及內(nèi)含子的脫氧核苷酸序列。周清一、 基因工程1、(a)基因工程的誕生(一)基因工程的概念基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),通過(guò) 和 ,賦予生物以 ,創(chuàng)造出 ?;蚬こ淌窃?上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,又叫做 。2、(a)基因工程的原理及技術(shù)原理: 技術(shù):(一)基因工程的基本工具1.“分子手術(shù)刀” (1)來(lái)源:主要是從 中分

8、離純化出來(lái)的。(2)功能:能夠識(shí)別 的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中 部位的兩個(gè)核苷酸之間的 斷開(kāi),因此具有 。(3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式: 和 。2.“分子縫合針” (1)兩種DNA連接酶(EcoliDNA連接酶和T4DNA連接酶)的比較:相同點(diǎn):都縫合 。區(qū)別:EcoliDNA連接酶來(lái)源于 ,只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái);而T4DNA連接酶能縫合 ,但連接平末端的之間的效率 。(2)與DNA聚合酶作用的異同: DNA聚合酶只能將 加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接 段的末端,形成磷酸二酯鍵。3

9、.“分子運(yùn)輸車” (1)載體具備的條件:能在受體細(xì)胞中 。具有 ,供外源DNA片段插入。具有 ,供重組DNA的 。(2)最常用的載體是 ,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于 ,并具有 的 分子。(3)其它載體: 、 。(二)基因工程的基本操作程序第一步: 1.目的基因是指: 主要是 。2.原核基因采取 獲得,真核基因是 。人工合成目的基因的常用方法有 _和 _。3.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1)原理: (2)過(guò)程:第一步:加熱至9095 ;第二步:冷卻到5560,引 ;第三步:加熱至7075, 。第二步: (是基因工程的核心)1.目的:使目的基因在受體細(xì)胞中 ,并且可以 ,使目的基因能夠 。2.

10、組成: (1)啟動(dòng)子:是一段有 ,位于基因的 ,是 識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因 ,最終獲得所需的 。(2)終止子:也是一段有 ,位于基因的 。(3)標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中 ,從而將 篩選出來(lái)。常用的標(biāo)記基因是 。第三步:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞_1.轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因 受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi) 的過(guò)程。2.常用的轉(zhuǎn)化方法:將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是 ,其次還有 和 等。此方法的受體細(xì)胞是 。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是 。此方法的受體細(xì)胞多是 。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:常用 做受體細(xì)胞。3.重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依

11、據(jù)是 。第四步: 1.首先要檢測(cè) ,方法是采用 。2.其次還要檢測(cè) ,方法是采用 。3.最后檢測(cè) ,方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取 ,用相應(yīng)的 進(jìn)行 。4.前三部是 的鑒定;有時(shí)還需進(jìn)行 的鑒定。如 轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植物是否出現(xiàn)抗蟲(chóng)性狀。(三)(b)基因工程的應(yīng)用1.植物基因工程: 、 、 轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因 。2.動(dòng)物基因工程:提高動(dòng)物 、改善 、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 。3.基因治療:把 導(dǎo)入病人體內(nèi),使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用。(四)(a)蛋白質(zhì)工程的概念蛋白質(zhì)工程是指以 作為基礎(chǔ),通過(guò) ,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行 ,或制造一種 ,以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn) 的蛋白質(zhì))(1)蛋白質(zhì)工程

12、崛起的緣由: (2)蛋白質(zhì)工程的基本原理:它可以根據(jù)人的需求來(lái) ,又稱為 的基因工程?;就緩剑簭念A(yù)期的 出發(fā),設(shè)計(jì)預(yù)期的 ,推測(cè)應(yīng)有的 ,找到相對(duì)應(yīng)的 (基因),以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑;以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。(注意:目的基因只能用 的方法)設(shè)計(jì)中的困難:如何推測(cè) 的脫氧核苷酸序列。 周清二、細(xì)胞工程(一)植物細(xì)胞工程 1.理論基礎(chǔ)(原理):細(xì)胞全能性2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)(b)(1)過(guò)程:離體的植物器官、組織或細(xì)胞 愈傷組織 試管苗 植物體(2)用途:微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。A 植物繁殖微型繁殖:可以高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖作物脫毒

13、:采用莖尖組織培養(yǎng)來(lái)除去病毒(因?yàn)橹参锓稚鷧^(qū)附近的病毒極少或沒(méi)有)人工種子:以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料,經(jīng)人工薄膜包裝得到的種子。優(yōu)點(diǎn):完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性,不受季節(jié)的限制;方便儲(chǔ)藏和運(yùn)輸B 作物新品種培育單倍體育種:a過(guò)程:植株(AaBb)通過(guò)減數(shù)分裂得到花粉(AB、Ab、aB、ab四種類型);對(duì)花粉進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)(技術(shù)是植物組織培養(yǎng));得到單倍體植株;對(duì)其幼苗時(shí)期進(jìn)行秋水仙素處理;得到了正常的純合二倍體植株(AABB、AAbb、aaBB、aabb四種類型)。b 優(yōu)點(diǎn):明顯縮短育種年限C 突變體利用:在組織培養(yǎng)中會(huì)出現(xiàn)突變體,通過(guò)從有用的突變體中選育出新品

14、種(如篩選抗病、抗鹽、含高蛋白的突變體)細(xì)胞產(chǎn)物的生產(chǎn):通過(guò)能夠產(chǎn)生對(duì)人們有利的產(chǎn)物的細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng),從而讓它們能夠產(chǎn)生大量的細(xì)胞產(chǎn)物。(3)地位:是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。3.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B雜種細(xì)胞愈傷組織雜種植株圖(2)(1)過(guò)程:酶解法去壁;原生質(zhì)體融合;雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁;脫分化;再分化(2)誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等?;瘜W(xué)法一般是用聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑。(3)意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。1如圖是“白菜一甘藍(lán)”雜種植株的培育過(guò)程。下列說(shuō)法正確的是 (D)A圖示“白菜甘藍(lán)”植株不能結(jié)籽 B愈

15、傷組織的代謝是自養(yǎng)需氧型C上述過(guò)程中包含著有絲分裂,細(xì)胞分化和減數(shù)分裂等過(guò)程D“白菜甘藍(lán)”雜種植株具有的性狀是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果2我國(guó)科學(xué)家在利用基因工程培育抗蟲(chóng)棉的過(guò)程中,經(jīng)提取目的基因、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞這三個(gè)步驟后,在全部受體細(xì)胞中,能夠攝入抗蟲(chóng)基因的受體細(xì)胞占 A全部 B大部分 C一半D很少 (D)3. 質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體,它存在于許多細(xì)菌體內(nèi)。質(zhì)粒上有標(biāo)記基因如圖所示,通過(guò)標(biāo)記基因可以推知外源基因(目的基因)是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同,細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況也不同,下表是外源基因插入位置(插入點(diǎn)有a、b、c),請(qǐng)根據(jù)表中提供的細(xì)菌生長(zhǎng)

16、情況,推測(cè)三種重組后細(xì)菌的外源基因插入點(diǎn),正確的一組是 (A) A.是c;是b;是a B.是a和b;是a;是bC.是a和b;是b;是aD.是c;是a;是b4目前基因治療主要是 (C)A 對(duì)有基因缺陷的細(xì)胞進(jìn)行基因修復(fù),使其恢復(fù)正常,達(dá)到治療疾病的目的B 運(yùn)用人工誘導(dǎo)方法,使有基因缺陷的細(xì)胞發(fā)生基因突變,使功能恢復(fù)正常C 把正常的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中,達(dá)到治療疾病的目的D 運(yùn)用基因工程技術(shù),把有缺陷的基因切除,達(dá)到治療疾病的目的5.植物細(xì)胞A和植物細(xì)胞B經(jīng)過(guò)體細(xì)胞雜交及組織培養(yǎng),下列說(shuō)法不正確的是 (C)A 植物體細(xì)胞雜交的最大優(yōu)點(diǎn)是可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙B 雜種細(xì)胞經(jīng)過(guò)植物組織

17、培養(yǎng)成雜種植株說(shuō)明雜種細(xì)胞具有全能性C 盡管愈傷組織可以進(jìn)行光合作用,但其培養(yǎng)基中仍需要糖類、氨基酸等有機(jī)營(yíng)養(yǎng)D 若A的基因型為Rr,B的基因型為Yy,則最終形成的雜種植株的基因型為RrYy周清二、細(xì)胞工程(一)植物細(xì)胞工程 1.理論基礎(chǔ)(原理): 2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)(b)(1)過(guò)程: 試管苗 (2)用途: 。A 植物繁殖 :可以 地實(shí)現(xiàn)種苗的 :采用 來(lái)除去病毒(因?yàn)橹参?) :以植物組織培養(yǎng)得到的 等為材料,經(jīng)人工薄膜包裝得到的種子。優(yōu)點(diǎn):完全 B 作物新品種培育單倍體育種:a過(guò)程:植株(AaBb)通過(guò) 得到花粉(AB、Ab、aB、ab四種類型);對(duì)花粉進(jìn)行 (技術(shù)是植物組織培養(yǎng));得到

18、 植株;對(duì)其 時(shí)期進(jìn)行 處理;得到了 植株(AABB、AAbb、aaBB、aabb四種類型)。b 優(yōu)點(diǎn): C 突變體利用:在組織培養(yǎng)中會(huì)出現(xiàn)突變體,通過(guò)從有用的 (如篩選抗病、抗鹽、含高蛋白的突變體)D 細(xì)胞產(chǎn)物的生產(chǎn):通過(guò)能夠產(chǎn)生對(duì)人們有利的產(chǎn)物的 ,從而讓它們能夠產(chǎn)生大量的 。(3)地位:是培育 、 培育植物新品種的 。3.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B雜種細(xì)胞愈傷組織雜種植株圖(2)(1)過(guò)程: (2)誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括 等?;瘜W(xué)法一般是用 作為誘導(dǎo)劑。(3)意義: 。1如圖是“白菜一甘藍(lán)”雜種植株的培育過(guò)程。下列說(shuō)法正確的是 A圖示“白菜甘藍(lán)”植株不能結(jié)籽 B愈傷組織的

19、代謝是自養(yǎng)需氧型C上述過(guò)程中包含著有絲分裂,細(xì)胞分化和減數(shù)分裂等過(guò)程D“白菜甘藍(lán)”雜種植株具有的性狀是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果2我國(guó)科學(xué)家在利用基因工程培育抗蟲(chóng)棉的過(guò)程中,經(jīng)提取目的基因、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞這三個(gè)步驟后,在全部受體細(xì)胞中,能夠攝入抗蟲(chóng)基因的受體細(xì)胞占 A全部 B大部分 C一半D很少 3. 質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體,它存在于許多細(xì)菌體內(nèi)。質(zhì)粒上有標(biāo)記基因如圖所示,通過(guò)標(biāo)記基因可以推知外源基因(目的基因)是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同,細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況也不同,下表是外源基因插入位置(插入點(diǎn)有a、b、c),請(qǐng)根據(jù)表中提供的細(xì)菌生長(zhǎng)情況,推測(cè)三種

20、重組后細(xì)菌的外源基因插入點(diǎn),正確的一組是 A.是c;是b;是a B.是a和b;是a;是bC.是a和b;是b;是aD.是c;是a;是b4目前基因治療主要是 A 對(duì)有基因缺陷的細(xì)胞進(jìn)行基因修復(fù),使其恢復(fù)正常,達(dá)到治療疾病的目的B 運(yùn)用人工誘導(dǎo)方法,使有基因缺陷的細(xì)胞發(fā)生基因突變,使功能恢復(fù)正常C 把正常的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中,達(dá)到治療疾病的目的D 運(yùn)用基因工程技術(shù),把有缺陷的基因切除,達(dá)到治療疾病的目的5.植物細(xì)胞A和植物細(xì)胞B經(jīng)過(guò)雜交及組織培養(yǎng),下列說(shuō)法不正確的是 A 植物體細(xì)胞雜交的最大優(yōu)點(diǎn)是可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙B 雜種細(xì)胞經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)成雜種植株說(shuō)明雜種細(xì)胞具有全能性C

21、盡管愈傷組織可以進(jìn)行光合作用,但其培養(yǎng)基中仍需要糖類、氨基酸等有機(jī)營(yíng)養(yǎng)D 若A的基因型為Rr,B的基因型為Yy,則最終形成的雜種植株的基因型為RrYy(二)動(dòng)物細(xì)胞工程 1. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(a)(1)概念:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織)剪碎用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。(3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制:懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上

22、,稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。營(yíng)養(yǎng):合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。溫度:適宜溫度:哺乳動(dòng)物多是36.50.5;pH:7.27.4。氣體環(huán)境:95%空氣5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。(5)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:制

23、備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測(cè)有毒物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各種細(xì)胞。2.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(1)哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植(比較容易)和體細(xì)胞核移植(比較難)。(2)選去核卵(母)細(xì)胞的原因:卵(母)細(xì)胞比較大,容易操作;卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多,營(yíng)養(yǎng)豐富。(3)體細(xì)胞核移植的大致過(guò)程是:高產(chǎn)奶牛(提供體細(xì)胞)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng);同時(shí)采集卵母細(xì)胞,在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞,去核(顯微操作)注:為什么要用卵細(xì)胞?它可以提供充足的營(yíng)養(yǎng);操作簡(jiǎn)便;細(xì)胞質(zhì)不會(huì)抑制細(xì)胞核全能性的表達(dá);將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞;通過(guò)電刺激使兩細(xì)胞融合,供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞,構(gòu)建重組胚胎;將胚

24、胎移入受體(代孕)母牛體內(nèi);生出與供體奶牛遺傳基因基本相同的犢牛。(4)體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用:加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)良畜群繁育;保護(hù)瀕危物種,增大存活數(shù)量;生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白;作為異種移植的供體;用于組織器官的移植等。(5)體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題:克隆動(dòng)物存在著健康問(wèn)題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。1、在克隆羊培育過(guò)程中,將雄羊的體細(xì)胞核移入雌羊的卵細(xì)胞中。產(chǎn)生該克隆羊的方式及該克隆羊發(fā)育成熟后所分泌的性激素依次是 ( A )A無(wú)性生殖雄性激素 B無(wú)性生殖雌性激素C有性生殖雄性激素 D有性生殖雌性激素2、用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用( B )A.受精卵 B. 10代以內(nèi)的細(xì)胞 C.傳代

25、1050代以內(nèi)的細(xì)胞 D.處于減數(shù)分裂第二次分裂中期的次級(jí)卵母細(xì)胞3.關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述錯(cuò)誤的是 ( D )A 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)B 用于培養(yǎng)的細(xì)胞最好取自動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物個(gè)體的細(xì)胞C 將所取的組織先用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進(jìn)行處理,使其分散成單個(gè)細(xì)胞,再稀釋制成細(xì)胞懸液培養(yǎng)D 傳代培養(yǎng)的細(xì)胞在傳至10-50代左右時(shí),增殖會(huì)逐漸減慢,以至完全停止,所培育的細(xì)胞全部衰老死亡4下圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病的過(guò)程圖解。請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)圖中所示的結(jié)構(gòu)名稱是_。(2)圖中、所示的生物技術(shù)名稱分別是_、_。(3)過(guò)程通常用去核的卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因除了它體積大、易

26、操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富外,還因?yàn)樗黖。(2分)(4)過(guò)程通常用做受體細(xì)胞的原因是_。(5)圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是_,該種基因治療所屬類型為_(kāi)。4(1)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(胚胎干細(xì)胞) (2)核移植技術(shù) 轉(zhuǎn)基因技術(shù)(基因工程、DNA重組技術(shù)、基因拼接技術(shù))(3)含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì) (4)這些細(xì)胞分化程度極低,具有全能性,可以定向地誘導(dǎo)分化為各類細(xì)胞 (5)沒(méi)有排斥反應(yīng) 體外基因治療(二)動(dòng)物細(xì)胞工程 1. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(a)(1)概念:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的 ,將它分散成 ,然后放在 中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊( )剪碎用 處

27、理分散成 制成 轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行 培養(yǎng)貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù) 培養(yǎng)。(3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制:懸液中分散的細(xì)胞很快就 ,稱為 。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面 時(shí),細(xì)胞就會(huì) ,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的 。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件 的環(huán)境:培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的 ,以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外,應(yīng)定期更換 ,防止 對(duì)細(xì)胞自身造成危害。 :合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入 等天然成分。 :適宜溫度:哺乳動(dòng)物多是 ;pH: 。 :95% 5% 。O2是 所必需的,CO2的主要作用

28、是 。(5)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:制備病毒疫苗、 、 、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各種細(xì)胞。2.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(1)哺乳動(dòng)物核移植可以分為 核移植(比較容易)和 核移植(比較難)。(2)選去核卵(母)細(xì)胞的原因:卵(母)細(xì)胞 ;卵(母)細(xì)胞 。(3)體細(xì)胞核移植的大致過(guò)程是:高產(chǎn)奶牛(提供體細(xì)胞)進(jìn)行 ;同時(shí)采集卵母細(xì)胞,在體外培養(yǎng)到 的卵母細(xì)胞,去核( )注:為什么要用卵細(xì)胞?它可以提供 ;將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞;通過(guò) 使兩細(xì)胞融合,供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞,構(gòu)建 ;將胚胎移入受體(代孕)母牛體內(nèi);生出與供體奶牛遺傳基因 的犢牛。(4)體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用:加速 進(jìn)程,促進(jìn) ;保護(hù)

29、 物種, 存活數(shù)量;生產(chǎn)珍貴的 ;作為異種移植的 ;用于組織 等。(5)體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題:克隆動(dòng)物存在著 問(wèn)題、表現(xiàn)出 缺陷等。1、在克隆羊培育過(guò)程中,將雄羊的體細(xì)胞核移入雌羊的卵細(xì)胞中。產(chǎn)生該克隆羊的方式及該克隆羊發(fā)育成熟后所分泌的性激素依次是 ( )A無(wú)性生殖雄性激素 B無(wú)性生殖雌性激素C有性生殖雄性激素 D有性生殖雌性激素2、用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用( )A.受精卵 B. 10代以內(nèi)的細(xì)胞 C.傳代1050代以內(nèi)的細(xì)胞 D.處于減數(shù)分裂第二次分裂中期的次級(jí)卵母細(xì)胞3.關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述錯(cuò)誤的是 ( )A 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)B 用于培養(yǎng)的細(xì)胞最好取自動(dòng)

30、物胚胎或幼齡動(dòng)物個(gè)體的細(xì)胞C 將所取的組織先用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進(jìn)行處理,使其分散成單個(gè)細(xì)胞,再稀釋制成細(xì)胞懸液培養(yǎng)D 傳代培養(yǎng)的細(xì)胞在傳至10-50代左右時(shí),增殖會(huì)逐漸減慢,以至完全停止,所培育的細(xì)胞全部衰老死亡4下圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病的過(guò)程圖解。請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)圖中所示的結(jié)構(gòu)名稱是_。(2)圖中、所示的生物技術(shù)名稱分別是_、_。(3)過(guò)程通常用去核的卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因除了它體積大、易操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富外,還因?yàn)樗黖。(2分)(4)過(guò)程通常用做受體細(xì)胞的原因是_。(5)圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是_,該種基因治療所屬類型為_(kāi)。高二生物周清3.動(dòng)物細(xì)胞

31、融合(1)動(dòng)物細(xì)胞融合也稱 ,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為 。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似,常用的誘導(dǎo)因素有 、 、 等。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合的意義:克服了 ,成為研究細(xì)胞 、細(xì)胞 、 和生物 的重要手段。(4)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較:細(xì)胞工程植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合理論基礎(chǔ)細(xì)胞的 、細(xì)胞膜的 細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜的 融合前處理 法去除細(xì)胞壁( 酶、 酶)注射特定 ,免疫處理正常小鼠誘導(dǎo)手段 法:離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法: 物理法:離心、振

32、動(dòng)、電激化學(xué)法:聚乙二醇 法:滅活的病毒(滅活的仙臺(tái)病毒)誘導(dǎo)過(guò)程第一步:原生質(zhì)體的制備(酶解法)第二步:原生質(zhì)體融合 (物、化法)第三步: 的篩選和培養(yǎng)第四步:雜種植株的誘導(dǎo)與鑒定正常小鼠免疫處理動(dòng)物細(xì)胞的融合(物、化、生法) 的篩選與培養(yǎng)專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)胞培養(yǎng)單克隆抗體的提純用途和意義克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和障礙,大大擴(kuò)展雜交的親本組合范圍應(yīng)用:白菜-甘藍(lán)等雜種植株 (1) 制備 (2) 診斷、治療、預(yù)防疾病,例如“生物導(dǎo)彈”治療癌癥4.單克隆抗體(1)抗體:一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌 特異性抗體。從血清中分離出的抗體 、 、 。(2)單克隆抗體的制備過(guò)程:對(duì)免疫小鼠注射特定的抗原蛋白(目的使小鼠

33、產(chǎn)生了將細(xì)胞);提取B淋巴細(xì)胞;同時(shí)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞并提?。淮偈顾鼈兗?xì)胞融合注:融合的結(jié)果是有很多不符合要求的;如有2個(gè)B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞等,所以要進(jìn)行篩選;在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細(xì)胞特點(diǎn)是能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生專一的抗體;然后對(duì)它進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)篩選出能夠分泌所需抗體的雜種細(xì)胞;最后將雜交瘤細(xì)胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內(nèi)增殖,從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體。(3)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能 ,又能產(chǎn)生 。(4)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn): , , 。(5)單克隆抗體的作用:作為 :準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)

34、合,具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。用于 和 :主要用于 治療 ,可制成“ ”,也有少量用于治療其它疾病。1某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí),列表比較了動(dòng)植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容,你認(rèn)為有幾處不正確? 植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段植物組織培養(yǎng) 植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和融合 單抗制備等特殊處理酶解法去除細(xì)胞壁胰蛋白酶處理制備細(xì)胞懸浮液融合方法物理方法化學(xué)方法物理方法 化學(xué)方法 生物方法典型應(yīng)用生產(chǎn)人工種子 培育種間植物單克隆抗體的制備培養(yǎng)液區(qū)別蔗糖是離體組織賴以生長(zhǎng)的成分動(dòng)物血清不可缺少A 0 B 1 C 2 D 32在現(xiàn)代生物工程技術(shù)中,下列研究方案能實(shí)現(xiàn)其目的是選項(xiàng)方案目的A誘導(dǎo)人胰島B細(xì)

35、胞和奶牛卵細(xì)胞融合培育轉(zhuǎn)基因克隆奶牛B將外源基因?qū)胧荏w植物葉綠體中防止外源基因擴(kuò)散C通過(guò)體外培養(yǎng)或體內(nèi)培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞制備單克隆抗體D用胃蛋白酶處理剪碎的動(dòng)物組織塊制備動(dòng)物細(xì)胞懸浮液3. 在目前現(xiàn)有技術(shù)條件下,還不能將從動(dòng)物體內(nèi)分離出來(lái)的成熟的體細(xì)胞直接培養(yǎng)成一個(gè)新個(gè)體,而是必須將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中才能發(fā)育成新個(gè)體。你認(rèn)為哪個(gè)是最可能原因 A卵細(xì)胞大,便于操作 B卵細(xì)含有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多C卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞胞核全能性得到表達(dá) D重組細(xì)胞才具有全能性4在將動(dòng)物組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞時(shí),可以使用胰蛋白酶。由此不可以推測(cè)出的是 A動(dòng)物細(xì)胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系 B處理時(shí)一定要注意

36、處理時(shí)間、加酶量C胰蛋白酶一定不會(huì)對(duì)動(dòng)物細(xì)胞造成損傷D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液pH應(yīng)與胰蛋白酶作用的適宜pH基本一致5下列對(duì)動(dòng)物核移植技術(shù)的描述不正確的是A哺乳動(dòng)物核移植包括胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎核移植B體細(xì)胞核移植的過(guò)程中可通過(guò)顯微操作去核法去除卵母細(xì)胞中的核C體細(xì)胞核移植過(guò)程中通常采用M期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞D通過(guò)體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制 6、下面兩幅圖分別是單克隆抗體制備過(guò)程和克隆羊培育過(guò)程示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)圖甲和圖乙所示的過(guò)程中,都必須用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段是_ 。(2)圖甲中過(guò)程常在_ 誘

37、導(dǎo)下完成,圖甲顯示單克隆抗體制備過(guò)程中有兩次篩選:第一次篩選是B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后有 種類型(僅考慮細(xì)胞兩兩融合),在選擇培養(yǎng)基上篩選出 。第二次篩選是在眾多類型的雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生 的細(xì)胞群。(3)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是: 。(4)若不考慮環(huán)境因素影響,克隆羊的性狀全部像白面綿羊嗎? _,理由是_ 。(5)圖乙過(guò)程的技術(shù)具有多種用途,但是不能 ( ) A有選擇地繁殖某一性別的家畜 B繁殖家畜中的優(yōu)良個(gè)體 C用于保存物種 D改變動(dòng)物的核基因(6)在目前現(xiàn)有技術(shù)條件下,還不能將從動(dòng)物體內(nèi)分離出來(lái)的成熟的體細(xì)胞直接培養(yǎng)成一個(gè)新個(gè)體,而是必須將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中才能發(fā)育成新

38、個(gè)體,你認(rèn)為原因最可能是 ( )A卵細(xì)胞大,便于操作 B卵細(xì)胞含有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多C卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞細(xì)胞核全能性得到表達(dá) D重組細(xì)胞才具有全能性7.下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。(1) 技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。(2)在圖中HAT培養(yǎng)上,未有融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡,只有 才能生長(zhǎng)。(3)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最主要的優(yōu)點(diǎn)是 _ 。(4)選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的迅速 特點(diǎn),又具備淋巴細(xì)胞的_ 特點(diǎn),經(jīng)過(guò)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和_,經(jīng)多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。最后將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)

39、,或小鼠腹腔內(nèi)增殖,從_或_中,就可以提取出大量的單克隆抗體了。(5)淋巴細(xì)胞是由動(dòng)物體 中的 細(xì)胞分化、發(fā)育而來(lái)。周清3.動(dòng)物細(xì)胞融合(1)動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似,常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合的意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性的障礙,成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。(4)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較:細(xì)胞工

40、程植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合理論基礎(chǔ)細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜的流動(dòng)性融合前處理酶解法去除細(xì)胞壁(纖維素酶、果膠酶)注射特定抗原,免疫處理正常小鼠誘導(dǎo)手段物理法:離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)物理法:離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法:聚乙二醇生物法:滅活的病毒(滅活的仙臺(tái)病毒)誘導(dǎo)過(guò)程第一步:原生質(zhì)體的制備(酶解法)第二步:原生質(zhì)體融合 (物、化法)第三步:雜種細(xì)胞的篩選和培養(yǎng)第四步:雜種植株的誘導(dǎo)與鑒定正常小鼠免疫處理動(dòng)物細(xì)胞的融合(物、化、生法)雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)胞培養(yǎng)單克隆抗體的提純用途和意義克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和障礙,大大擴(kuò)展雜交的親本組合范圍應(yīng)用:白菜-甘藍(lán)等雜種植株 (1) 制備單克隆抗體(2) 診斷、治療、預(yù)防疾病,例如“生物導(dǎo)彈”治療癌癥4.單克隆抗體(1)抗體:一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。(2)單克隆抗體的制備過(guò)程:對(duì)免疫小鼠注射特定的抗原蛋白(目的使小鼠產(chǎn)生了將細(xì)胞);提取B淋巴細(xì)胞;同時(shí)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞并提??;促使它們細(xì)胞融合注:融合的結(jié)果是有很多不符合要求的;如有2個(gè)B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞等,所以要進(jìn)行篩選;在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細(xì)胞特點(diǎn)是能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生專一的抗體;然后對(duì)它進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)篩選出能夠分泌所需

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