第18章-生殖毒性研究

1、李相軍李相軍1350431142813504311428年份年份 事件事件作者作者1932193219351935194819481950195019561956196319631966196619711971維生素維生素A A缺乏可使猴胚胎畸形缺乏可使猴胚胎畸形X X射線照射使大鼠胚胎發(fā)生各種畸形射線照射使大鼠胚胎發(fā)生各種畸形氮芥導(dǎo)致大鼠胚胎畸形氮芥導(dǎo)致大鼠胚胎畸形可的松致小鼠胚胎畸形可的松致小鼠胚胎畸形反應(yīng)停（反應(yīng)停（ThalidomideThalidomide）事件）事件美國藥物安全委員會(huì)美國藥物安全委員會(huì)美國美國FDA FDA 人用藥生殖安全評(píng)價(jià)準(zhǔn)則人用藥生殖安全評(píng)價(jià)準(zhǔn)則WHOWHO規(guī)

2、定新藥應(yīng)有生殖毒性研究規(guī)定新藥應(yīng)有生殖毒性研究HaleHaleGobGobHarriuHarriuBaxterBaxter先天愚型先天愚型海豹肢畸形海豹肢畸形 生殖毒性研究（生殖毒性研究（Reproductive toxicity Reproductive toxicity studystudy）是藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)的重要內(nèi)容，）是藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)的重要內(nèi)容，它與急性毒性、長期毒性、遺傳毒性等毒理學(xué)它與急性毒性、長期毒性、遺傳毒性等毒理學(xué)研究有著密切的聯(lián)系，是藥物進(jìn)入臨床研究及研究有著密切的聯(lián)系，是藥物進(jìn)入臨床研究及上市的重要環(huán)節(jié)。上市的重要環(huán)節(jié)。 生殖毒性研究在限定臨床研究受試者范圍、

3、生殖毒性研究在限定臨床研究受試者范圍、降低臨床研究受試者和藥品上市后使用人群的降低臨床研究受試者和藥品上市后使用人群的用藥風(fēng)險(xiǎn)方面發(fā)揮重要作用。用藥風(fēng)險(xiǎn)方面發(fā)揮重要作用。分期分期研究內(nèi)容研究內(nèi)容檢測(cè)方法檢測(cè)方法交配前到懷交配前到懷孕孕成年雄性成年雄性/ /雌性動(dòng)物的生殖功能；配子雌性動(dòng)物的生殖功能；配子的發(fā)育和成熟；交配行為及生育力的發(fā)育和成熟；交配行為及生育力一般生殖毒一般生殖毒性試驗(yàn)性試驗(yàn)懷孕到著床懷孕到著床成年雄性成年雄性/ /雌性動(dòng)物的生殖功能；著床雌性動(dòng)物的生殖功能；著床前的發(fā)育和著床前的發(fā)育和著床著床到硬腭著床到硬腭閉合閉合成年雄性成年雄性/ /雌性動(dòng)物的生殖功能；胚胎雌性動(dòng)物的生

4、殖功能；胚胎發(fā)和大部分器官形成發(fā)和大部分器官形成致畸試驗(yàn)致畸試驗(yàn)硬腭閉合到硬腭閉合到懷孕末期懷孕末期成年雌性動(dòng)物的生殖功能；胚胎生長發(fā)成年雌性動(dòng)物的生殖功能；胚胎生長發(fā)育以及器官發(fā)育和生長育以及器官發(fā)育和生長出生到斷奶出生到斷奶成年雌性動(dòng)物的生殖功能；嬰兒在宮外成年雌性動(dòng)物的生殖功能；嬰兒在宮外生活的適應(yīng)性；斷奶前的發(fā)育和生長生活的適應(yīng)性；斷奶前的發(fā)育和生長圍產(chǎn)期試驗(yàn)圍產(chǎn)期試驗(yàn)斷奶到性成斷奶到性成熟熟斷奶前的發(fā)育和生長；獨(dú)立生活的能力；斷奶前的發(fā)育和生長；獨(dú)立生活的能力；完全達(dá)到性成熟完全達(dá)到性成熟避孕藥、性激素、性功能障礙藥、促精子生成藥、致突變?cè)囼?yàn)避孕藥、性激素、性功能障礙藥、促精子生成藥

5、、致突變?cè)囼?yàn)陽性或有毒作用的新藥，必須進(jìn)行生殖毒性試驗(yàn)。陽性或有毒作用的新藥，必須進(jìn)行生殖毒性試驗(yàn)。 生殖是機(jī)體繁衍種族的生理過程，包括生殖細(xì)胞的發(fā)生殖是機(jī)體繁衍種族的生理過程，包括生殖細(xì)胞的發(fā)育形成、交配、受精、植入、胚胎形成和發(fā)育、分娩和哺育形成、交配、受精、植入、胚胎形成和發(fā)育、分娩和哺乳等過程。每一個(gè)環(huán)節(jié)均可能是化學(xué)物質(zhì)毒性作用的靶部乳等過程。每一個(gè)環(huán)節(jié)均可能是化學(xué)物質(zhì)毒性作用的靶部位，機(jī)體接觸化學(xué)物質(zhì)后干擾了其生理過程，使生殖過程位，機(jī)體接觸化學(xué)物質(zhì)后干擾了其生理過程，使生殖過程的功能出現(xiàn)缺陷和損害，此即化學(xué)物質(zhì)的的功能出現(xiàn)缺陷和損害，此即化學(xué)物質(zhì)的。 ：（：（1 1）對(duì)化學(xué)物質(zhì)的毒

6、性作用）對(duì)化學(xué)物質(zhì)的毒性作用敏感，一定劑量下，其他系統(tǒng)尚未出現(xiàn)損害之前，生殖過敏感，一定劑量下，其他系統(tǒng)尚未出現(xiàn)損害之前，生殖過程中的某個(gè)環(huán)節(jié)或功能已經(jīng)出現(xiàn)障礙；（程中的某個(gè)環(huán)節(jié)或功能已經(jīng)出現(xiàn)障礙；（2 2）化學(xué)物質(zhì)毒性）化學(xué)物質(zhì)毒性作用對(duì)其損害更為深遠(yuǎn)，不僅表現(xiàn)在接觸化學(xué)物的機(jī)體本作用對(duì)其損害更為深遠(yuǎn)，不僅表現(xiàn)在接觸化學(xué)物的機(jī)體本身，還可影響后代。身，還可影響后代。 從胚胎學(xué)和病理學(xué)發(fā)展出來的一個(gè)分支學(xué)科，是研從胚胎學(xué)和病理學(xué)發(fā)展出來的一個(gè)分支學(xué)科，是研究胚胎發(fā)育時(shí)期，由各種內(nèi)外因子引起結(jié)構(gòu)和功能異常的先究胚胎發(fā)育時(shí)期，由各種內(nèi)外因子引起結(jié)構(gòu)和功能異常的先天性畸形的科學(xué)。天性畸形的科學(xué)。 藥

7、物接觸胚胎發(fā)生期后引起藥物接觸胚胎發(fā)生期后引起永久性結(jié)構(gòu)或功能異常的性質(zhì)。永久性結(jié)構(gòu)或功能異常的性質(zhì)。 某些藥物在一定劑量僅某些藥物在一定劑量僅對(duì)胚胎或胎兒有毒性作用而對(duì)母體沒有毒性作用，此作用對(duì)胚胎或胎兒有毒性作用而對(duì)母體沒有毒性作用，此作用被稱為胚胎毒性。胚胎毒性表現(xiàn)為胚胎死亡、胚胎生長遲被稱為胚胎毒性。胚胎毒性表現(xiàn)為胚胎死亡、胚胎生長遲緩、畸形和功能不全。緩、畸形和功能不全。 指藥物引起懷孕動(dòng)物的毒效指藥物引起懷孕動(dòng)物的毒效應(yīng)，如體重不增或減輕等，最嚴(yán)重的是死亡。應(yīng)，如體重不增或減輕等，最嚴(yán)重的是死亡。 永久性結(jié)構(gòu)異常或功能異常的永久性結(jié)構(gòu)異?；蚬δ墚惓５奶汉托律鷥?。通常不包括顯微鏡下

8、細(xì)微結(jié)構(gòu)的異常胎兒和新生兒。通常不包括顯微鏡下細(xì)微結(jié)構(gòu)的異常, , 生生化代謝性缺陷。單純功能異?；x性缺陷。單純功能異常( (如精神缺陷、智力缺陷如精神缺陷、智力缺陷), ), 也不包括分娩過程中各種因素造成的缺陷。也不包括分娩過程中各種因素造成的缺陷。 為一種藥物對(duì)母體的半數(shù)為一種藥物對(duì)母體的半數(shù)致死量與最小致畸量的比值，是表示一種化學(xué)物質(zhì)的致畸致死量與最小致畸量的比值，是表示一種化學(xué)物質(zhì)的致畸強(qiáng)度指標(biāo)。建議致畸指數(shù)在強(qiáng)度指標(biāo)。建議致畸指數(shù)在10以下定為不致畸，以下定為不致畸，10 100為為致畸，致畸，100以上為強(qiáng)致畸。以上為強(qiáng)致畸。 指任何解剖學(xué)的和功能的指任何解剖學(xué)的和功能的異常

9、。既包括形態(tài)結(jié)構(gòu)的異常異常。既包括形態(tài)結(jié)構(gòu)的異常( (大體的和細(xì)微的大體的和細(xì)微的) )，也包，也包括功能、代謝、行為的異常。括功能、代謝、行為的異常。 一般生殖毒性試驗(yàn)（一般生殖毒性試驗(yàn)（reproductive toxicity test）是研究藥物對(duì)整個(gè)生殖過程的影響。包括生殖細(xì)胞是研究藥物對(duì)整個(gè)生殖過程的影響。包括生殖細(xì)胞（精子、卵細(xì)胞）的發(fā)生，卵細(xì)胞受精、著床胚胎（精子、卵細(xì)胞）的發(fā)生，卵細(xì)胞受精、著床胚胎形成，胚胎發(fā)育階段的影響并作出評(píng)價(jià)。形成，胚胎發(fā)育階段的影響并作出評(píng)價(jià)。 至少一種動(dòng)物，一般為大鼠或小鼠，每組雄性至少一種動(dòng)物，一般為大鼠或小鼠，每組雄性動(dòng)物動(dòng)物10只，雌性動(dòng)物至

10、少只，雌性動(dòng)物至少20只。只。 給藥組設(shè)高、中、低三個(gè)劑量；高劑量應(yīng)能產(chǎn)生給藥組設(shè)高、中、低三個(gè)劑量；高劑量應(yīng)能產(chǎn)生輕微毒性反應(yīng)，如體重增長緩慢等，但不應(yīng)出現(xiàn)嚴(yán)輕微毒性反應(yīng)，如體重增長緩慢等，但不應(yīng)出現(xiàn)嚴(yán)重中毒或死亡。重中毒或死亡。 給藥途徑應(yīng)盡量接近臨床。給藥途徑應(yīng)盡量接近臨床。 雄性動(dòng)物交配前給藥雄性動(dòng)物交配前給藥60 80天，雌性動(dòng)物交配天，雌性動(dòng)物交配連續(xù)給藥連續(xù)給藥14天。交配后繼續(xù)給藥至大多數(shù)器官發(fā)生天。交配后繼續(xù)給藥至大多數(shù)器官發(fā)生期（大鼠期（大鼠/小鼠為孕后小鼠為孕后13天）。天）。 1. 雄性與雌性動(dòng)物同籠交配后，每日檢查小鼠陰道中有無雄性與雌性動(dòng)物同籠交配后，每日檢查小鼠陰

11、道中有無陰栓，大鼠則檢查精子，以檢查到陰栓或精子的當(dāng)日作陰栓，大鼠則檢查精子，以檢查到陰栓或精子的當(dāng)日作為妊娠第為妊娠第0天。天。2. 雌鼠于妊娠第雌鼠于妊娠第13天解剖觀察，以確定妊娠、胎兒的吸收天解剖觀察，以確定妊娠、胎兒的吸收和死亡情況，并記錄母鼠的一般狀況、體重變化和胎盤和死亡情況，并記錄母鼠的一般狀況、體重變化和胎盤重量，以確定子宮內(nèi)的活胎數(shù)，對(duì)活胎進(jìn)行性別鑒定、重量，以確定子宮內(nèi)的活胎數(shù)，對(duì)活胎進(jìn)行性別鑒定、體重和身長的測(cè)量以及外表和內(nèi)臟器官的形態(tài)學(xué)觀察，體重和身長的測(cè)量以及外表和內(nèi)臟器官的形態(tài)學(xué)觀察，對(duì)骨骼進(jìn)行茜紅素染色后進(jìn)行檢查，必要時(shí)進(jìn)行組織學(xué)對(duì)骨骼進(jìn)行茜紅素染色后進(jìn)行檢查，

12、必要時(shí)進(jìn)行組織學(xué)和組織化學(xué)的詳細(xì)檢查。和組織化學(xué)的詳細(xì)檢查。 3. 大鼠于孕期第大鼠于孕期第20天處死（小鼠天處死（小鼠18天）。剖腹取天）。剖腹取出子宮及卵巢，辨認(rèn)和記錄活胎數(shù)，早死胎數(shù)、出子宮及卵巢，辨認(rèn)和記錄活胎數(shù)，早死胎數(shù)、晚死胎數(shù)、吸收胎數(shù)和黃體數(shù)，對(duì)活胎仔應(yīng)辨晚死胎數(shù)、吸收胎數(shù)和黃體數(shù)，對(duì)活胎仔應(yīng)辨別性別、稱重，測(cè)量身長及尾長，仔細(xì)檢查活別性別、稱重，測(cè)量身長及尾長，仔細(xì)檢查活胎仔的外觀有無畸形，將每只母鼠的胎仔的外觀有無畸形，將每只母鼠的2/3活胎活胎仔剝?nèi)テつw和內(nèi)臟，經(jīng)脫水透吸及茜紅素染色仔剝?nèi)テつw和內(nèi)臟，經(jīng)脫水透吸及茜紅素染色后，檢查骨骼畸形，將后，檢查骨骼畸形，將1/3活胎

13、仔浸入活胎仔浸入Bouin氏氏溶液中固定，供檢查內(nèi)臟畸形。溶液中固定，供檢查內(nèi)臟畸形。 100 %畸胎率畸胎率% =畸胎總數(shù)畸胎總數(shù)活胎仔總數(shù)活胎仔總數(shù)活胎仔平均畸形數(shù)活胎仔平均畸形數(shù) =畸形總數(shù)畸形總數(shù)活胎仔總數(shù)活胎仔總數(shù)100 %母體畸胎出現(xiàn)率母體畸胎出現(xiàn)率% =出現(xiàn)畸胎母體數(shù)出現(xiàn)畸胎母體數(shù)妊娠母體總數(shù)妊娠母體總數(shù) 凡受試物能引起生殖機(jī)能障礙，干擾配子的形成或使生凡受試物能引起生殖機(jī)能障礙，干擾配子的形成或使生殖細(xì)胞受損，其結(jié)果除可影響受精卵或孕卵的著床而導(dǎo)致殖細(xì)胞受損，其結(jié)果除可影響受精卵或孕卵的著床而導(dǎo)致不孕外，尚可影響胚胎的發(fā)生及胎仔的發(fā)育，如胚胎死亡不孕外，尚可影響胚胎的發(fā)生及胎仔

14、的發(fā)育，如胚胎死亡導(dǎo)致自然流產(chǎn)、胎仔發(fā)育遲緩以及胎仔畸形。如果對(duì)母體導(dǎo)致自然流產(chǎn)、胎仔發(fā)育遲緩以及胎仔畸形。如果對(duì)母體造成不良影響，出現(xiàn)妊娠、分娩和乳汁分泌的異常，亦可造成不良影響，出現(xiàn)妊娠、分娩和乳汁分泌的異常，亦可出現(xiàn)胎仔出生后發(fā)育異常。出現(xiàn)胎仔出生后發(fā)育異常。 本試驗(yàn)檢測(cè)藥物對(duì)整個(gè)生殖過程的毒性作用，通過繁殖本試驗(yàn)檢測(cè)藥物對(duì)整個(gè)生殖過程的毒性作用，通過繁殖試驗(yàn)可以了解藥物對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物的性腺功能、交配能力、受試驗(yàn)可以了解藥物對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物的性腺功能、交配能力、受孕能力、妊娠過程、分娩、哺乳及對(duì)后代生長發(fā)育的影響。孕能力、妊娠過程、分娩、哺乳及對(duì)后代生長發(fā)育的影響。 一般傾向于二代繁殖試驗(yàn)。一般傾

15、向于二代繁殖試驗(yàn)。 大鼠，至少設(shè)三個(gè)劑量級(jí)和一個(gè)對(duì)照組。每組大鼠，至少設(shè)三個(gè)劑量級(jí)和一個(gè)對(duì)照組。每組動(dòng)物應(yīng)至少能產(chǎn)仔動(dòng)物應(yīng)至少能產(chǎn)仔20窩；窩；F0代有生育能力的雄鼠至代有生育能力的雄鼠至少少10只，以后各代每組也應(yīng)至少有只，以后各代每組也應(yīng)至少有10只雄鼠。只雄鼠。 高、中、低三個(gè)劑量；高劑量應(yīng)有毒性作用，高、中、低三個(gè)劑量；高劑量應(yīng)有毒性作用，但不能引起但不能引起10%以上動(dòng)物死亡，且超過人體預(yù)期接以上動(dòng)物死亡，且超過人體預(yù)期接觸水平。低劑量應(yīng)不產(chǎn)生可觀察到的有害作用。觸水平。低劑量應(yīng)不產(chǎn)生可觀察到的有害作用。 以人體可能接觸的方式染毒。以人體可能接觸的方式染毒。 僅對(duì)僅對(duì)F0及及F1代動(dòng)

16、物染毒。代動(dòng)物染毒。 F0代動(dòng)物自離乳起（代動(dòng)物自離乳起（6 w之前）開始染毒，直到之前）開始染毒，直到F1代代離乳；離乳；F1代動(dòng)物離乳（約代動(dòng)物離乳（約30 d）后，部分動(dòng)物（用來繼續(xù)）后，部分動(dòng)物（用來繼續(xù)繁殖的動(dòng)物）每天染毒，直到繁殖的動(dòng)物）每天染毒，直到F2代離乳后代離乳后30天。天。 F0代給藥至少代給藥至少100天后，開始交配，產(chǎn)生天后，開始交配，產(chǎn)生F1代。代。 F1代給藥至少數(shù)代給藥至少數(shù)120天后，開始交配，產(chǎn)生天后，開始交配，產(chǎn)生F2代。代。 包括動(dòng)物一般狀態(tài)、體重、進(jìn)食量及死亡情況；著重觀察包括動(dòng)物一般狀態(tài)、體重、進(jìn)食量及死亡情況；著重觀察受孕率、妊娠率、出生存活率、產(chǎn)

17、仔總數(shù)及平均仔重等與生殖受孕率、妊娠率、出生存活率、產(chǎn)仔總數(shù)及平均仔重等與生殖機(jī)能有關(guān)指標(biāo)。機(jī)能有關(guān)指標(biāo)。 計(jì)算下述生殖指數(shù)：計(jì)算下述生殖指數(shù)：100 %1. 生育力指數(shù)：生育力指數(shù)： 受孕率受孕率% =妊娠雌鼠數(shù)妊娠雌鼠數(shù)交配雌鼠數(shù)交配雌鼠數(shù)100 %2. 受孕指數(shù)：受孕指數(shù)： 正常妊娠率正常妊娠率% =活產(chǎn)雌鼠數(shù)活產(chǎn)雌鼠數(shù)妊娠雌鼠數(shù)妊娠雌鼠數(shù)100 %3. 存活力指數(shù)：出生存活率存活力指數(shù)：出生存活率% =生后生后4 d 存活仔存活仔數(shù)數(shù)出生時(shí)活仔數(shù)出生時(shí)活仔數(shù)100 %4. 哺育指數(shù)：哺育指數(shù)： 哺育存活率哺育存活率% =生后生后21 d 存活仔數(shù)存活仔數(shù)出生后出生后4 d 存活數(shù)存活數(shù)

18、 母體在孕期受到可通過胎盤屏障的藥物作用母體在孕期受到可通過胎盤屏障的藥物作用,影響影響胚胎的器官發(fā)育胚胎的器官發(fā)育,導(dǎo)致結(jié)構(gòu)和機(jī)能的缺陷導(dǎo)致結(jié)構(gòu)和機(jī)能的缺陷,出現(xiàn)胎仔畸出現(xiàn)胎仔畸形。因此在受孕動(dòng)物的胚胎著床后，并已開始進(jìn)入形。因此在受孕動(dòng)物的胚胎著床后，并已開始進(jìn)入細(xì)胞及器官分化期時(shí)，可檢出該物質(zhì)對(duì)胎仔的致畸細(xì)胞及器官分化期時(shí)，可檢出該物質(zhì)對(duì)胎仔的致畸作用。作用。 致畸試驗(yàn)（致畸試驗(yàn)（teratogenic test）為鑒定動(dòng)物致畸物）為鑒定動(dòng)物致畸物的標(biāo)準(zhǔn)方法。不僅能檢測(cè)到藥物的致畸性，也可得的標(biāo)準(zhǔn)方法。不僅能檢測(cè)到藥物的致畸性，也可得到有關(guān)藥物致胚胎死亡及生長遲緩的資料。到有關(guān)藥物致胚胎

19、死亡及生長遲緩的資料。 要求選用對(duì)藥物敏感性高而自發(fā)畸形率低的動(dòng)物，常用大要求選用對(duì)藥物敏感性高而自發(fā)畸形率低的動(dòng)物，常用大鼠、小鼠和兔。一般至少采用鼠、小鼠和兔。一般至少采用2種動(dòng)物，一種為嚙齒類，另一種動(dòng)物，一種為嚙齒類，另一種要求非嚙齒類（狗和猴）。種要求非嚙齒類（狗和猴）。 未交配過的雌鼠，鼠齡未交配過的雌鼠，鼠齡3 m以下，體重以下，體重200 - 250 g，做陰道，做陰道分泌物涂片檢查，若發(fā)現(xiàn)白色分泌物較多，鏡下發(fā)現(xiàn)有核上皮分泌物涂片檢查，若發(fā)現(xiàn)白色分泌物較多，鏡下發(fā)現(xiàn)有核上皮細(xì)胞，則提示大鼠處于動(dòng)情前期。此時(shí)，將其與雄鼠按細(xì)胞，則提示大鼠處于動(dòng)情前期。此時(shí)，將其與雄鼠按2 1

20、或或3 2同籠過夜，次日檢查是否受孕。同籠過夜，次日檢查是否受孕。 檢查是否受孕。（檢查是否受孕。（1）檢查陰栓：陰栓是雄鼠精囊與凝固腺）檢查陰栓：陰栓是雄鼠精囊與凝固腺分泌液在雌鼠陰道凝結(jié)而成的白色塊狀物，形似米粒。大鼠陰分泌液在雌鼠陰道凝結(jié)而成的白色塊狀物，形似米粒。大鼠陰栓易脫落，小鼠陰栓不易脫落。（栓易脫落，小鼠陰栓不易脫落。（2）陰道涂片檢查精子。）陰道涂片檢查精子。 陰栓或精子檢出當(dāng)日記為孕陰栓或精子檢出當(dāng)日記為孕0天，次日為孕第天，次日為孕第1天。天。 分高、中、低三個(gè)劑量組；陰性對(duì)照組；陽性對(duì)照組。分高、中、低三個(gè)劑量組；陰性對(duì)照組；陽性對(duì)照組。 （1）高劑量應(yīng)有母體毒性反應(yīng)，

21、或?yàn)樽畲蠼o藥量；低）高劑量應(yīng)有母體毒性反應(yīng)，或?yàn)樽畲蠼o藥量；低劑量組應(yīng)為母體和胚胎毒性反應(yīng)劑量。劑量組應(yīng)為母體和胚胎毒性反應(yīng)劑量。 （2） 以以 LD50 的的 1/3 1/5 為高劑量組；以為高劑量組；以 LD50 的的 1/30 1/100 為低劑量。為低劑量。 （3） 以人實(shí)際接觸量做為低劑量組，并以其倍數(shù)（以人實(shí)際接觸量做為低劑量組，并以其倍數(shù)（10倍）做為高劑量。倍）做為高劑量。 大鼠、小鼠大鼠、小鼠 15 20 只；兔只；兔 8 10 只；狗和猴只；狗和猴 3 4 只。只。 給藥途徑根據(jù)藥物的性質(zhì)及人類可能的接觸方式定，多給藥途徑根據(jù)藥物的性質(zhì)及人類可能的接觸方式定，多為灌胃和腹腔

22、注射。為灌胃和腹腔注射。 給藥時(shí)間選在胚胎對(duì)致畸物的易感期（器官形成期）。給藥時(shí)間選在胚胎對(duì)致畸物的易感期（器官形成期）。 1 每只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在試驗(yàn)期間的受精日期、給每只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在試驗(yàn)期間的受精日期、給藥日期和劑量、體重等基本指標(biāo)。藥日期和劑量、體重等基本指標(biāo)。 2 對(duì)母體的觀察：每天檢查有無中毒癥狀，對(duì)母體的觀察：每天檢查有無中毒癥狀，對(duì)有流產(chǎn)或早產(chǎn)征兆者（陰道出血）及時(shí)處死對(duì)有流產(chǎn)或早產(chǎn)征兆者（陰道出血）及時(shí)處死檢查。檢查。 3 對(duì)胎仔的觀察對(duì)胎仔的觀察A 活仔外形的檢查活仔外形的檢查B 胎仔內(nèi)臟檢查胎仔內(nèi)臟檢查C 對(duì)胎仔骨骼檢查對(duì)胎仔骨骼檢查部位部位 畸畸 形形頭顱頭顱鼻鼻眼眼耳耳腭腭頜和

23、唇頜和唇肢肢趾趾脊柱脊柱腹部腹部尾尾肛門肛門腦突出，露腦，顱脊柱裂，單純性腦膜膨出腦突出，露腦，顱脊柱裂，單純性腦膜膨出單鼻孔，鼻孔擴(kuò)張單鼻孔，鼻孔擴(kuò)張小眼，無眼，開眼，眼異位小眼，無眼，開眼，眼異位無耳，小耳，耳異位無耳，小耳，耳異位腭裂腭裂頜小，無頜，無口，唇裂頜小，無頜，無口，唇裂短肢，畸形足短肢，畸形足多趾，少趾，缺趾，并趾多趾，少趾，缺趾，并趾脊柱膜膨出，脊柱骨缺失，脊柱側(cè)凸脊柱膜膨出，脊柱骨缺失，脊柱側(cè)凸臍疝臍疝短尾，卷尾，角形尾，螺旋尾，無尾短尾，卷尾，角形尾，螺旋尾，無尾肛門閉鎖肛門閉鎖（外觀畸形）（外觀畸形）部位部位 畸畸 形形顱頂骨顱頂骨枕骨枕骨頸椎骨頸椎骨胸骨胸骨肋骨肋骨

24、腰椎腰椎四肢骨四肢骨盤骨盤骨尾椎骨尾椎骨缺損，骨化遲緩缺損，骨化遲緩缺損，骨化遲緩缺損，骨化遲緩缺損，骨化遲緩缺損，骨化遲緩缺損，錯(cuò)位，骨化遲緩缺損，錯(cuò)位，骨化遲緩多肋，少肋，短肋，分叉肋，波狀肋，融合肋多肋，少肋，短肋，分叉肋，波狀肋，融合肋缺失，分裂，變形缺失，分裂，變形多骨，缺失多骨，缺失缺失缺失缺失，椎弓不連續(xù)，融合缺失，椎弓不連續(xù)，融合部位部位 畸畸 形形頭頭腭腭口腔口腔眼眼心血管心血管肺肺膈膈腸腸肝肝腎腎生殖器生殖器膀胱膀胱腦積水，腦室擴(kuò)大腦積水，腦室擴(kuò)大腭裂腭裂短舌，分叉舌短舌，分叉舌少眼，小眼，無眼少眼，小眼，無眼右位心，室中隔缺損，單房室心，主動(dòng)脈弓橫位右位心，室中隔缺損，單

25、房室心，主動(dòng)脈弓橫位氣管食管瘺，肺倒位，少葉氣管食管瘺，肺倒位，少葉橫膈缺損，并引起腹內(nèi)臟疝或內(nèi)臟側(cè)位橫膈缺損，并引起腹內(nèi)臟疝或內(nèi)臟側(cè)位腸疝腸疝肝異位，少葉肝異位，少葉馬蹄腎，腎積水，腎積水，腎缺失，腎異位馬蹄腎，腎積水，腎積水，腎缺失，腎異位子宮缺失，睪丸缺失或隱睪，睪丸發(fā)育不全（單子宮缺失，睪丸缺失或隱睪，睪丸發(fā)育不全（單側(cè)側(cè)/ /雙側(cè)），兩性畸形雙側(cè)），兩性畸形缺失缺失常見畸形及部位常見畸形及部位（內(nèi)臟畸形）（內(nèi)臟畸形） 1 對(duì)母體動(dòng)物評(píng)定：對(duì)母體動(dòng)物評(píng)定： 100 %100 %母體畸胎出現(xiàn)率（母體畸胎出現(xiàn)率（%）=妊娠母體數(shù)妊娠母體數(shù)交配率交配率% =已交配動(dòng)物數(shù)已交配動(dòng)物數(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)死亡率死亡率% =死亡動(dòng)物數(shù)死亡動(dòng)物數(shù)實(shí)