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文檔簡介
1、獸醫(yī)免疫學(xué)課程教學(xué)大綱 (Veterinary Immunology)課程編號:1812025課程類別:專業(yè)基礎(chǔ)課適用專業(yè):動物醫(yī)學(xué)(含動物醫(yī)學(xué)方向、檢驗(yàn)檢疫方向、實(shí)驗(yàn)動物方向)先修課程:動物生物化學(xué)、獸醫(yī)微生物學(xué)、動物生理學(xué)、動物組織學(xué)與胚胎學(xué)等后續(xù)課程:動物傳染病學(xué)、動物寄生蟲病學(xué)、動物病理生理學(xué)、獸醫(yī)外科學(xué)與手術(shù)學(xué)等總 學(xué) 分:3,其中實(shí)驗(yàn)學(xué)分:0.5教學(xué)目的與要求:獸醫(yī)免疫學(xué)是免疫學(xué)的一個重要分支和動物醫(yī)學(xué)專業(yè)重要基礎(chǔ)課之一,主要研究動物免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與功能、免疫應(yīng)答規(guī)律與調(diào)節(jié)、免疫診斷與免疫防治。本課程通過課堂教學(xué)、實(shí)驗(yàn)教學(xué)和自學(xué)等過程,使學(xué)生了解或掌握獸醫(yī)免疫學(xué)基本理論知識、重要免疫
2、學(xué)技術(shù)基本原理及應(yīng)用,為后續(xù)專業(yè)課程的學(xué)習(xí)奠定基礎(chǔ),并結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐,使學(xué)生具有一定的獨(dú)立思考和從事免疫學(xué)診斷與免疫防治工作的能力。 教學(xué)內(nèi)容與學(xué)時安排 序號章目名稱學(xué)時分配序號章目名稱學(xué)時分配講授實(shí)驗(yàn)講授實(shí)驗(yàn)1緒 論2 11第十章 免疫耐受1 2第一章 免疫系統(tǒng)4 12第十一章 抗感染免疫2 3第二章 抗原3 13第十二章 人工免疫2 4第三章 抗體4 14第十三章 血清學(xué)試驗(yàn)概述1 5第四章 抗體的人工制備2315第十四章 凝聚性試驗(yàn)346第五章 免疫遺傳2 16第十五章 免疫標(biāo)記技術(shù)257第六章 補(bǔ)體系統(tǒng)2 17第十六章 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)1 8第七章 細(xì)胞因子1 18第十七章 中和試驗(yàn)129第
3、八章 免疫應(yīng)答4 19第十八章 細(xì)胞免疫檢測技術(shù)2210第九章 變態(tài)反應(yīng)1 緒論(2學(xué)時)第一節(jié) 免疫及免疫學(xué)概述 一、基本概念:免疫的概念,免疫學(xué)定義與研究內(nèi)容,免疫學(xué)科發(fā)展過程及趨勢。 二、免疫的基本特性:免疫系統(tǒng)是動物在長期進(jìn)化過程中形成的防御體系,具有識別異己、特異性、免疫記憶等基本特性。 三、免疫的基本功能:動物機(jī)體通過識別異己產(chǎn)生應(yīng)答反應(yīng),發(fā)揮免疫防御、自身穩(wěn)定、免疫監(jiān)視等基本功能。第二節(jié) 免疫學(xué)發(fā)展史 一、經(jīng)驗(yàn)免疫學(xué)時期:我國民間首創(chuàng)預(yù)防天花的人痘苗,為免疫預(yù)防提供了成功經(jīng)驗(yàn)。 二、經(jīng)典免疫學(xué)時期:主要成就包括牛痘苗、弱毒苗、滅活苗以及抗毒素、補(bǔ)體和吞噬細(xì)胞的發(fā)現(xiàn); 在此基礎(chǔ)上提
4、出體液免疫和細(xì)胞免疫學(xué)學(xué)說,并建立血清學(xué)診斷方法。 三、現(xiàn)代免疫學(xué)時期 標(biāo)志性研究成果包括細(xì)胞免疫、免疫耐受現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn),克隆選擇學(xué)說的提出; 免疫遺傳與免疫應(yīng)答分子機(jī)制的闡明,單克隆抗體技術(shù)的發(fā)明等。第三節(jié) 免疫學(xué)的應(yīng)用 一、免疫學(xué)與醫(yī)學(xué) 二、免疫學(xué)與生物學(xué) 三、免疫學(xué)與生物技術(shù)本章重點(diǎn):免疫的基本概念、特性與功能。難點(diǎn):免疫的特性和功能。教學(xué)基本要求:掌握。第一章 免疫系統(tǒng)(4學(xué)時)第一節(jié) 免疫系統(tǒng)及免疫器官 一、免疫系統(tǒng):包括參與免疫應(yīng)答或執(zhí)行免疫功能的器官、細(xì)胞和分子。 二、免疫器官:指機(jī)體執(zhí)行免疫功能的組織器官,包括中樞和外周免疫器官。第二節(jié) 免疫細(xì)胞及其表面標(biāo)志 一、基本概念:包括免
5、疫細(xì)胞和免疫活性細(xì)胞。 二、免疫活性細(xì)胞:主要有T細(xì)胞和B細(xì)胞,它們的來源、分布、形態(tài)、主要表面標(biāo)志、亞類和功能。 三、殺傷性細(xì)胞:主要包括K細(xì)胞和NK細(xì)胞,是早期、非特異性免疫的重要組成部分。 四、輔佐細(xì)胞:主要包括單核吞噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞,與B細(xì)胞共同組成專業(yè)抗原提呈細(xì)胞。 五、其他免疫細(xì)胞:主要包括顆粒白細(xì)胞、肥大細(xì)胞和參與黏膜免疫有關(guān)的細(xì)胞。 六、淋巴細(xì)胞再循環(huán):基本概念、途徑及意義。本章重點(diǎn):中樞和外周免疫器官的組成與功能,主要免疫細(xì)胞的分類、功能與表面標(biāo)志。難點(diǎn):免疫細(xì)胞的表面標(biāo)志。教學(xué)基本要求:掌握。第二章 抗原(3學(xué)時)第一節(jié) 基本概念 一、基本概念:定義及經(jīng)典和現(xiàn)代抗原的含義
6、。 二、基本特性:完全抗原同時具有免疫原性與反應(yīng)性,而半抗原僅有免疫原性或反應(yīng)原性。第二節(jié) 影響抗原免疫原性的因素 一、異源性 二、化學(xué)組成與分子大小 三、分子構(gòu)象的復(fù)雜性 四、物理狀態(tài)與可降解性 五、進(jìn)入機(jī)體的途徑及劑量 六、動物的遺傳性及其他因素 七、免疫佐劑第三節(jié) 抗原決定簇或抗原表位 一、基本概念 二、抗原決定簇:又稱抗原表位,是決定抗原特異性(與抗體結(jié)合)的分子基礎(chǔ); 根據(jù)其數(shù)量(抗原價)分為單價和多價抗原,在分子構(gòu)象上有構(gòu)象和線性抗原決定簇之分: 根據(jù)識別受體的不同分為T細(xì)胞表位和B細(xì)胞表位。第四節(jié) 半抗原-載體現(xiàn)象 一、定義 二、本質(zhì):在針對人工合成抗原的免疫應(yīng)答中,T細(xì)胞和B細(xì)
7、胞分別識別載體和半抗原; 對于多數(shù)蛋白抗原,半抗原-載體現(xiàn)象科學(xué)解釋了免疫應(yīng)答過程中T、B細(xì)胞的相互作用。 三、應(yīng)用:用半抗原與載體蛋白結(jié)合制成的人工合成抗原免疫動物,可獲得針對半抗原的抗體。第五節(jié) 抗原的交叉性 一、含義:指不同物種和不同抗原分子之間存在相同或相似的抗原決定簇,不同抗原表位之間也可能有部分結(jié)構(gòu)相同; 因此有交叉抗原、類屬抗原、異嗜性抗原(Forssman抗原)等概念。 二、意義與應(yīng)用:是某些免疫病理現(xiàn)象和異源疫苗的分子基礎(chǔ),但干擾免疫診斷。第六節(jié) 抗原的類型 一、根據(jù)抗原性分:完全抗原與不完全抗原(半抗原)。 二、根據(jù)抗原性質(zhì)分:蛋白抗原,多糖抗原,核酸抗原等。 三、根據(jù)來源
8、分:異種抗原,同種異型抗原,自身抗原,異嗜性抗原。 四、根據(jù)對T細(xì)胞依賴性分:胸腺依賴抗原和非胸腺依賴抗原。 五、根據(jù)與抗原提呈細(xì)胞關(guān)系分:細(xì)胞內(nèi)抗原和細(xì)胞外抗原。 六、其他抗原:人工抗原,重組抗原等。第七節(jié) 重要的抗原物質(zhì) 一、細(xì)菌抗原:菌體抗原,鞭毛抗原,莢膜抗原,菌毛抗原,芽胞抗原,毒素抗原等。 二、病毒抗原:病毒表面抗原,衣殼抗原,核蛋白抗原,可溶(分泌)性抗原。 三、寄生蟲等抗原 四、其他抗原:血型抗原,人工抗原,重組抗原等。本章重點(diǎn):抗原的概念,抗原決定簇,構(gòu)成抗原的條件,重要的微生物抗原。難點(diǎn):構(gòu)成抗原的條件,半抗原-載體現(xiàn)象。教學(xué)基本要求:掌握。第三章 免疫球蛋白與抗體(4學(xué)時
9、)第一節(jié) 基本概念 一、免疫球蛋白概念 二、抗體的概念第二節(jié) 免疫球蛋白的分子結(jié)構(gòu) 一、單體結(jié)構(gòu):四鏈單位,重鏈和輕鏈,可變區(qū)和穩(wěn)定區(qū),功能區(qū)。 二、復(fù)合體結(jié)構(gòu):二聚體,五聚體。 三、附屬結(jié)構(gòu):分泌片,J鏈,糖基。 四、水解片段:Fab片段和Fc片段等。第三節(jié) 抗體的類型與生物學(xué)特性 一、種類:多數(shù)哺乳動物有IgA、IgG、IgM、IgD、IgE五類,有的還有不同的亞類。 二、生物學(xué)特性:中和、凝集、黏附、調(diào)理抗原以及激活補(bǔ)體等功能。第四節(jié) 免疫球蛋白的抗原性 一、同種型:類、亞類、型、亞型等概念。 二、同種異型 三、獨(dú)特型本章重點(diǎn):抗體的結(jié)構(gòu)、分類、功能、抗原性。難點(diǎn):抗體的結(jié)構(gòu)及抗原性。教
10、學(xué)基本要求:掌握。第四章 抗體的人工制備(2學(xué)時)第一節(jié) 多克隆抗體 一、基本概念 二、制備方法第二節(jié) 單克隆抗體 一、基本概念 二、雜交瘤技術(shù)原理 三、單克隆抗體的制備過程 四、單克隆抗體的應(yīng)用第三節(jié) 基因工程抗體 一、基本概念 二、制備原理本章重點(diǎn):多克隆抗體和單克隆抗體的制備。難點(diǎn):單克隆抗體的制備。教學(xué)基本要求:掌握。第五章 免疫遺傳(2學(xué)時)第一節(jié) 抗體基因 一、抗體基因:重鏈基因、輕鏈基因。 二、基因重排:抗體多樣性產(chǎn)生機(jī)制。 三、抗體類轉(zhuǎn)換第二節(jié) T細(xì)胞受體基因 一、基因結(jié)構(gòu) 二、T細(xì)胞受體多樣性的發(fā)生機(jī)制第三節(jié) 主要組織相容性復(fù)合體 一、基本概念 二、基因結(jié)構(gòu) 三、MHC分子結(jié)
11、構(gòu)、分布及抗原提呈本章重點(diǎn):抗體、TCR和MHC基因,MHC分子與抗原加工提呈。難點(diǎn):抗體基因重排,MHC分子的結(jié)構(gòu)與功能。教學(xué)基本要求:了解。第六章 補(bǔ)體系統(tǒng)(2學(xué)時)第一節(jié) 概述 一、補(bǔ)體的發(fā)現(xiàn) 二、補(bǔ)體命名 三、補(bǔ)體系統(tǒng)的組成與一般性質(zhì)第二節(jié) 激活途徑 一、經(jīng)典激活途徑 二、旁路激活途徑 三、其他途徑第三節(jié) 補(bǔ)體活化的調(diào)控 一、補(bǔ)體系統(tǒng)的自身調(diào)控 二、補(bǔ)體調(diào)節(jié)因子的作用第四節(jié) 生物學(xué)作用 一、補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞溶解 二、補(bǔ)體活性片段介導(dǎo)的生物學(xué)效應(yīng)本章重點(diǎn):補(bǔ)體一般性質(zhì)、激活途徑及生物學(xué)活性。難點(diǎn):補(bǔ)體激活途徑。教學(xué)基本要求:了解。第七章 細(xì)胞因子(1學(xué)時)第一節(jié) 概述 一、種類 二、來源第
12、二節(jié) 共同特性 一、理化特性 二、分泌特點(diǎn) 三、生物學(xué)作用特點(diǎn) 四、網(wǎng)絡(luò)性第三節(jié) 生物學(xué)活性 一、參與固有免疫 二、調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答 三、刺激造血功能和調(diào)節(jié)細(xì)胞生長 四、參與神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)第四節(jié) 重要的細(xì)胞因子 一、白細(xì)胞介素 二、干擾素 三、腫瘤壞死因子 四、集落刺激因子 五、生長因子 六、趨化因子本章重點(diǎn):細(xì)胞因子特性及生物學(xué)作用。難點(diǎn):細(xì)胞因子的生物學(xué)作用。教學(xué)基本要求:了解。第八章 免疫應(yīng)答(4學(xué)時)第一節(jié) 非特異性免疫應(yīng)答 一、基本概念 二、作用特點(diǎn) 三、組成:屏障結(jié)構(gòu),吞噬細(xì)胞,體液因子,炎癥反應(yīng)等。第二節(jié) 特異性免疫應(yīng)答概述 一、基本概念:體液免疫應(yīng)答,細(xì)胞免疫應(yīng)答,黏膜免疫應(yīng)答。
13、二、基本特點(diǎn):識別異己,特異性,記憶性等。 三、基本過程:致敏階段,反應(yīng)階段,效應(yīng)階段。第三節(jié) 抗原加工與提呈 一、抗原提呈細(xì)胞:分為專業(yè)和非專業(yè)抗原提呈細(xì)胞。 二、基本過程:包括抗原攝取、抗原加工和抗原呈遞。 三、外源性抗原提呈:由MHC II類分子介導(dǎo),主要引起體液免疫應(yīng)答。 四、內(nèi)源性抗原提呈:由MHC I類分子介導(dǎo),主要引起細(xì)胞免疫應(yīng)答。第四節(jié) 細(xì)胞免疫應(yīng)答 一、T細(xì)胞對抗原的識別:T細(xì)胞受體,抗原識別。 二、T細(xì)胞的活化、增殖與分化 三、效應(yīng)T細(xì)胞作用 CD4+T細(xì)胞的作用有介導(dǎo)遲發(fā)型超敏性反應(yīng)、協(xié)助B細(xì)胞產(chǎn)生抗體,協(xié)助殺傷性T細(xì)胞作用; CD8+T細(xì)胞的主要作用是殺傷病毒感染細(xì)胞和
14、腫瘤細(xì)胞。第五節(jié) 體液免疫應(yīng)答 一、B細(xì)胞對抗原的識別:B細(xì)胞受體,TD抗原的識別,TI抗原的識別。 二、B細(xì)胞活化、增殖與分化 三、抗體效應(yīng)機(jī)制:中和作用,調(diào)理作用,協(xié)助補(bǔ)體溶解細(xì)胞,ADCC,變態(tài)反應(yīng),黏膜免疫等。 四、體液免疫應(yīng)答一般規(guī)律:初次應(yīng)答,再次應(yīng)答,免疫記憶,抗體類轉(zhuǎn)換與親和成熟。第六節(jié) 免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié) 一、抗原的調(diào)節(jié):包括抗原性質(zhì)、劑量、進(jìn)入途徑等。 二、免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié):包括T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞和紅細(xì)胞等細(xì)胞的調(diào)節(jié)。 三、抗體的調(diào)節(jié):包括IgG和IgM的調(diào)節(jié)以及獨(dú)特型網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)。 四、細(xì)胞因子的調(diào)節(jié) 五、神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié) 六、免疫應(yīng)答的遺傳控制本章重點(diǎn):非特異性免疫的組成與作
15、用,抗原加工提呈,免疫應(yīng)答基本過程與效應(yīng)機(jī)制。難點(diǎn):抗原加工提呈,免疫應(yīng)答效應(yīng)機(jī)制。教學(xué)基本要求:掌握。第九章 免疫耐受(1學(xué)時)第一節(jié) 概述 一、基本概念 二、分類:中樞與外周免疫耐受,天然免疫耐受與獲得性免疫耐受。 三、臨床意義第二節(jié) 主要機(jī)制 一、克隆清除 二、克隆無能 三、抑制性細(xì)胞的作用本章重點(diǎn):免疫耐受的主要機(jī)制與臨床意義。難點(diǎn):免疫耐受的主要機(jī)制。教學(xué)基本要求:了解。第十章 變態(tài)反應(yīng)(1學(xué)時)第一節(jié) I 型變態(tài)反應(yīng) 一、發(fā)生機(jī)制:參與成分、過程及主要特點(diǎn)。 二、常見的I型變態(tài)反應(yīng)性疾病。第二節(jié) II型變態(tài)反應(yīng) 一、發(fā)生機(jī)制:參與成分、過程及主要特點(diǎn)。 二、常見的型變態(tài)反應(yīng)性疾病第
16、三節(jié) 型變態(tài)反應(yīng) 一、發(fā)生機(jī)制:參與成分、過程及主要特點(diǎn)。 二、常見的型變態(tài)反應(yīng)性疾病第四節(jié) 型變態(tài)反應(yīng) 一、發(fā)生機(jī)制:參與成分、過程及主要特點(diǎn)。 二、常見的型變態(tài)反應(yīng)性疾病本章重點(diǎn):變態(tài)反應(yīng)的類型與發(fā)生機(jī)制。難點(diǎn):變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生機(jī)理。教學(xué)基本要求:了解。第十一章 抗感染免疫(2學(xué)時)第一節(jié) 抗細(xì)菌感染免疫 一、基本概念 二、非特異性防御機(jī)制:屏障結(jié)構(gòu),體液因子,NK細(xì)胞,吞噬細(xì)胞,炎癥反應(yīng)等。 三、特異性機(jī)制:抗胞外菌免疫,抗胞內(nèi)菌免疫,抗毒素免疫。 四、細(xì)菌逃避免疫的主要機(jī)制第二節(jié) 抗病毒感染免疫 一、非特異性因素:主要包括種屬免疫、干擾素和NK細(xì)胞。 二、抗體介導(dǎo)的抗病毒作用:中和作用、
17、調(diào)理吞噬作用、ADCC、激活補(bǔ)體等。 三、細(xì)胞介導(dǎo)的抗病毒作用:主要有Tc介導(dǎo)的感染細(xì)胞殺傷作用和細(xì)胞因子的作用。 四、病毒逃避免疫的主要機(jī)制第三節(jié) 抗寄生蟲感染免疫 一、概述:一般特點(diǎn),表現(xiàn)形式。 二、抗原蟲免疫 三、抗蠕蟲免疫 四、寄生蟲逃避免疫的主要機(jī)制本章重點(diǎn):抗細(xì)菌、病毒、寄生蟲感染免疫的主要機(jī)制。難點(diǎn):微生物逃避宿主免疫的機(jī)制。教學(xué)基本要求:掌握。第十二章 免疫防治(2學(xué)時)第一節(jié) 天然主動免疫 一、定義 二、臨床意義第二節(jié) 天然被動免疫 一、定義:不同動物胎盤結(jié)構(gòu)與母源抗體傳遞方式。 二、臨床意義:母源抗體對新生動物的保護(hù)作用和對主動免疫的干擾。第三節(jié) 人工被動免疫 一、定義 二
18、、臨床應(yīng)用:免疫血清和卵黃抗體的應(yīng)用。第四節(jié) 人工主動免疫 一、疫苗的基本概念 二、疫苗的種類 常規(guī)疫苗包括滅活疫苗、弱毒疫苗、單(多)價疫苗、聯(lián)苗、亞單位疫苗和異源苗等; 基因工程疫苗包括重組活載體苗、基因缺失苗、DNA疫苗等,各有優(yōu)缺點(diǎn)。 三、疫苗使用:免疫途徑,免疫程序,注意事項(xiàng)。 四、免疫失敗原因分析:動物因素,疫苗因素,人為因素。本章重點(diǎn):天然被動免疫、人工被動免疫、人工主動免疫的基本概念,疫苗的分類與使用,各類疫苗優(yōu)缺點(diǎn),免疫失敗原因分析。難點(diǎn):免疫失敗原因分析。教學(xué)基本要求:掌握。第十三章 免疫學(xué)技術(shù)概論(1學(xué)時)第一節(jié) 血清學(xué)技術(shù)概述 根據(jù)抗原性質(zhì)、參與成分、試驗(yàn)敏感性等分類。
19、第二節(jié) 血清學(xué)試驗(yàn)的一般特點(diǎn) 一、特異性與交叉性 二、親合性與解離性 三、抗原抗體的結(jié)合比例 四、影響因素:電解質(zhì)、酸堿度、溫度等。第三節(jié) 血清學(xué)試驗(yàn)的優(yōu)越性 一、特異性強(qiáng),敏感性高 二、檢樣用量少,預(yù)處理相對簡單 三、多種方法可供選用 四、可用于抗原或抗體的定性、定量、定位分析第四節(jié) 血清學(xué)試驗(yàn)的應(yīng)用 一、傳染病診斷與流行病學(xué)調(diào)查 二、微生物鑒定分型 三、免疫效果跟蹤調(diào)查 四、復(fù)雜抗原成分分析 五、生物分子的提取純化與微量測定第五節(jié) 血清學(xué)試驗(yàn)的發(fā)展趨向 一、試驗(yàn)的微量化和自動化 二、試劑的標(biāo)準(zhǔn)化、商品化和試劑盒化 三、方法的快速簡易和標(biāo)準(zhǔn)化 四、不同試驗(yàn)方法的組合與集成本章重點(diǎn):血清學(xué)試驗(yàn)
20、的一般特點(diǎn)、影響因素與應(yīng)用。難點(diǎn):血清學(xué)試驗(yàn)的影響因素。教學(xué)基本要求:掌握。第十四章 凝聚性試驗(yàn)(3學(xué)時)第一節(jié) 凝集試驗(yàn) 一、概念 二、基本原理及特點(diǎn) 三、類型與應(yīng)用 直接凝集試驗(yàn)主要有試管法、玻板法和生長凝集試驗(yàn); 間接凝集試驗(yàn)主要有正向間接凝集試驗(yàn)、反向間接凝集試驗(yàn)和間接凝集抑制試驗(yàn); 其他凝集試驗(yàn)有抗球蛋白試驗(yàn)和協(xié)同凝集試驗(yàn)等。第二節(jié) 沉淀試驗(yàn) 一、概念 二、基本原理及特點(diǎn) 三、分類及應(yīng)用:環(huán)狀沉淀試驗(yàn),免疫濁度試驗(yàn),免疫擴(kuò)散試驗(yàn)以及在此基礎(chǔ)上建立的免疫電泳等。本章重點(diǎn):常用凝集試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)的基本原理、操作方法與應(yīng)用。難點(diǎn):基本原理。教學(xué)基本要求:掌握。第十五章 免疫標(biāo)記技術(shù)(2學(xué)時
21、)第一節(jié) 熒光抗體技術(shù) 一、基本原理:常用熒光色素的發(fā)光特點(diǎn)與抗體標(biāo)記。 二、分類與基本操作程序:直接法,間接法,雙抗體夾心法,抗補(bǔ)體法。 三、應(yīng)用第二節(jié) 免疫酶技術(shù) 一、基本原理:酶標(biāo)抗體(抗原)的要求,常用的酶與底物。 二、免疫酶組化技術(shù):一般操作程序、注意事項(xiàng)與應(yīng)用。 三、酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA):分類、一般操作程序、注意事項(xiàng)與應(yīng)用。 四、免疫印跡(Western-blotting)基本原理、操作流程與應(yīng)用。本章重點(diǎn):熒光標(biāo)記技術(shù)、免疫酶技術(shù)的基本原理、操作程序與應(yīng)用。難點(diǎn):熒光標(biāo)記技術(shù)和免疫酶技術(shù)的基本原理。教學(xué)基本要求:掌握。第十六章 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(1學(xué)時)第一節(jié) 基本原理 一
22、、反應(yīng)系統(tǒng) 二、補(bǔ)體系統(tǒng) 三、指示系統(tǒng)第二節(jié) 試驗(yàn)方法 一、全量法 二、半量法 三、小量法 四、微量法本章重點(diǎn):基本原理及分類。難點(diǎn):基本原理。教學(xué)基本要求:了解。第十七章 中和試驗(yàn)(1學(xué)時)第一節(jié) 毒價滴定 一、常用的毒價單位:MLD、LD50、ELD50、ID50、EID50、TCID50、RD50、IMD50、PD50等。 二、半數(shù)劑量的測定與計(jì)算方法:Karber法等。第二節(jié) 終點(diǎn)法中和試驗(yàn) 一、血清中和價測定:固定病毒稀釋血清法。 二、血清中和指數(shù)測定:固定血清稀釋病毒法。第三節(jié) 空斑減少試驗(yàn) 一、空斑試驗(yàn)與空斑減少試驗(yàn)的原理 二、空斑減少試驗(yàn)測定血清的中和價本章重點(diǎn):常用毒價單位及
23、其計(jì)算方法,中和價與中和指數(shù)測定方法。難點(diǎn):Karber法教學(xué)基本要求:掌握。第十八章 細(xì)胞免疫檢測技術(shù)(2學(xué)時)第一節(jié) 玫瑰花環(huán)試驗(yàn) 一、基本原理 二、分類與意義第二節(jié) 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn) 一、基本原理 二、基本操作程序與應(yīng)用第三節(jié) 細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞試驗(yàn) 一、基本原理 二、基本操作程序與應(yīng)用第四節(jié) 其他細(xì)胞免疫檢測技術(shù)(自學(xué)) 一、流式細(xì)胞術(shù) 二、酸性醋酸萘脂酶試驗(yàn) 三、移動抑制試驗(yàn) 四、外周血白細(xì)胞促血凝活性測定 五、白細(xì)胞介素測定 六、NK細(xì)胞活性測定本章重點(diǎn):淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)與細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞試驗(yàn)的基本原理與應(yīng)用。難點(diǎn):淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)與細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞試驗(yàn)的基本原理。教學(xué)基本要求
24、:了解。教材 楊漢春主編,獸醫(yī)免疫學(xué),中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2003年。主要參考書目: 1、崔治中 崔保安主編,獸醫(yī)免疫學(xué)(全國高等農(nóng)業(yè)院校教材),中國農(nóng)業(yè)出版社,2004年。 2、杜念興主編,獸醫(yī)免疫學(xué),中國農(nóng)業(yè)出版社,1995年。 3、Roitt I, Brostoff J and Male D, Immunology (Sixth Edition), Harcourt Asia Pte Ltd, 2006.執(zhí)筆:成大榮 孫懷昌 獸醫(yī)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)大綱課程編號:1812025課程名稱:獸醫(yī)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)學(xué)分:0.5實(shí)驗(yàn)學(xué)時:16適用專業(yè):動物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)名稱與學(xué)時安排序號章目名稱學(xué)時分配序號章目
25、名稱學(xué)時分配1.實(shí)驗(yàn)一 抗體制備35.實(shí)驗(yàn)五 免疫酶技術(shù)22.實(shí)驗(yàn)二 凝集試驗(yàn)26.實(shí)驗(yàn)六 抗新城疫病毒抗體的檢測23.實(shí)驗(yàn)三 沉淀試驗(yàn)27.實(shí)驗(yàn)七 T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)24.實(shí)驗(yàn)四 熒光抗體技術(shù)3 實(shí)驗(yàn)一、免疫血清的制備及初步純化(3學(xué)時)實(shí)驗(yàn)性質(zhì):驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:本實(shí)驗(yàn)選用合適的抗原并采用適合的免疫程序免疫家兔,獲得針對抗原的高免血清,并利用鹽析法從血清中提出免疫球蛋白。實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求:通過實(shí)驗(yàn),掌握提取血清免疫球蛋白的一般方法;理解鹽析的基本原理;了解純化血清免疫球蛋白的一般方法。注意要點(diǎn):1. 動物免疫的抗原劑量;2. 合理的免疫程序制備;3. 血清的分離;4. 鹽析過程中硫酸銨飽和
26、液的加入速度要嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)二、凝集試驗(yàn)(2學(xué)時)實(shí)驗(yàn)性質(zhì):驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:選用已知大腸桿菌菌毛(如K88、K99、987P、F18等)陽性血清,通過平板凝集反應(yīng)鑒定臨床所分離的大腸桿菌菌毛類型。選用已知大腸桿菌配制為合適濃度(1.51010CFU/mL)作為抗原,通過試管凝集反應(yīng)測定待檢血清中相應(yīng)的抗體滴度。實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求:通過實(shí)驗(yàn),掌握試管凝集反應(yīng)和平板凝集反應(yīng)的操作技術(shù)和判定方法。注意要點(diǎn):電解質(zhì)及其濃度的選擇,反應(yīng)時間,區(qū)分自家凝集、酸凝集實(shí)驗(yàn)三、沉淀試驗(yàn)(2學(xué)時)實(shí)驗(yàn)性質(zhì):驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:選用已知炭疽桿菌沉淀素與炭疽桿菌沉淀原,進(jìn)行環(huán)狀沉淀試驗(yàn)。選用已知傳染性法氏囊病病毒陽性血清,通過瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)鑒定臨床病料中是否存在相應(yīng)的病毒。實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求:1、掌握環(huán)狀沉淀試驗(yàn)的操作方法和結(jié)果的判定;2、掌握瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)的操作方法和結(jié)果的判定。注意要點(diǎn):電解質(zhì)及其濃度的選擇,幾種瓊脂擴(kuò)散類型的判斷實(shí)驗(yàn)四、熒光抗體技術(shù)(3學(xué)時)實(shí)驗(yàn)性質(zhì):驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:選用已知大腸桿菌菌毛F18陽性血清,通過熒光抗體間接染色反
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