2013級(jí)細(xì)胞生物學(xué)半期考復(fù)習(xí)提綱_第1頁(yè)
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1、2013級(jí)細(xì)胞生物學(xué)復(fù)習(xí)提綱第一章:緒論一、基礎(chǔ)知識(shí)1.細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容 生物膜與細(xì)胞器細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)細(xì)胞骨架體系細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞增殖及其調(diào)控細(xì)胞分化及干細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞死亡細(xì)胞衰老細(xì)胞工程10細(xì)胞的起源與進(jìn)化2.細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展歷史(重要事件) 細(xì)胞生物學(xué)的歷史大致可以劃分為四個(gè)主要的階段: 第一階段:從16世紀(jì)末19世紀(jì)30年代,是細(xì)胞發(fā)現(xiàn)和細(xì)胞知識(shí)的積累階段。1590年荷蘭眼鏡制造商J.Janssen和Z.Janssen父子制作了第一臺(tái)復(fù)式顯微鏡,盡管其放大倍數(shù)不超過(guò)10倍,但具有劃時(shí)代的意義。1665年英國(guó)人Robert Hook用自己設(shè)計(jì)與制造的顯微鏡(放大倍數(shù)為40-

2、140倍,)觀察了軟木(櫟樹(shù)皮)的薄片,第一次描述了植物細(xì)胞的構(gòu)造,并首次用拉丁文cella(小室)這個(gè)詞來(lái)稱呼他所看到的類似蜂巢的極小的封閉狀小室(實(shí)際上只是觀察到到纖維質(zhì)的細(xì)胞壁)。1680 年荷蘭人A. van Leeuwenhoek制作的顯微鏡,他是第一個(gè)看到活細(xì)胞的人。 第二階段:從19世紀(jì)3020世紀(jì)中期,細(xì)胞學(xué)說(shuō)形成后,主要進(jìn)行細(xì)胞顯微形態(tài)的研究。 第三階段:從20世紀(jì)30年代70年代,以細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)、核型、帶型研究為主要內(nèi)容。1932年德國(guó)人M. Knoll和E. A. F. Ruska描述了一臺(tái)最初的電子顯微鏡, 1939年Siemens公司生產(chǎn)商品電鏡。1981年

3、瑞士人G. Binnig和H. RoherI在IBM蘇黎世實(shí)驗(yàn)中心(Zurich Research Center)發(fā)明了掃描隧道顯微鏡而與電鏡發(fā)明者Ruska同獲1986年度的諾貝爾物理學(xué)獎(jiǎng)。 第四階段:分子細(xì)胞生物學(xué)的時(shí)代。細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)的結(jié)合愈來(lái)愈緊密,基因調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞分化和凋亡、腫瘤生物學(xué)等領(lǐng)域成為當(dāng)前的主流研究?jī)?nèi)容。3. 細(xì)胞學(xué)說(shuō)認(rèn)為細(xì)胞是有機(jī)體,一切動(dòng)植物都是由細(xì)胞發(fā)育而來(lái),并由細(xì)胞和細(xì)胞產(chǎn)物所構(gòu)成;每個(gè)細(xì)胞作為一個(gè)相對(duì)獨(dú)立的單位,既有它“自己的”生命,又對(duì)與其它細(xì)胞共同組成的整體的生命有所助益;新的細(xì)胞可以通過(guò)老的細(xì)胞繁殖產(chǎn)生。2、 要點(diǎn):從細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展簡(jiǎn)史理解

4、科學(xué)與技術(shù)的發(fā)展關(guān)系p5第二章:細(xì)胞的統(tǒng)一性與多樣性一、基礎(chǔ)知識(shí)1.對(duì)細(xì)胞的基本理解P10-12細(xì)胞是生命活動(dòng)的基本單位 細(xì)胞是構(gòu)成有機(jī)體的基本單位:一切有機(jī)體都由細(xì)胞構(gòu)成 細(xì)胞是代謝與功能的基本單位:細(xì)胞具有獨(dú)立的、有序的自控代謝體系 細(xì)胞是有機(jī)體生長(zhǎng)與發(fā)育的基礎(chǔ):細(xì)胞分裂 細(xì)胞是繁殖的基本單位,是遺傳的橋梁 細(xì)胞是生命起源的歸宿,是生物進(jìn)化的起點(diǎn)細(xì)胞的基本共性 所有的細(xì)胞都有相似的化學(xué)組成:元素(C H O N P S),有機(jī)物(氨基酸、核苷酸、脂質(zhì)和糖類)¿ 所有的細(xì)胞表面均有由磷脂雙分子層與鑲嵌蛋白質(zhì)構(gòu)成的生物膜,即細(xì)胞膜。¿ 所有的細(xì)胞都含有兩種核酸:即DNA與R

5、NA作為遺傳信息復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的載體。¿ 作為蛋白質(zhì)合成的機(jī)器核糖體,毫無(wú)例外地存在于一切細(xì)胞內(nèi)。¿ 所有細(xì)胞的增殖都以一分為二的方式進(jìn)行分裂。2. 病毒的基礎(chǔ)知識(shí)P23 病毒(virus):核酸分子(DNA或RNA)與蛋白質(zhì)構(gòu)成的核酸-蛋白質(zhì)復(fù)合體;一類非細(xì)胞形態(tài)的介于生命與非生命形式之間的物質(zhì)。有以下主要特征:個(gè)體微小,可通過(guò)除菌濾器,大多數(shù)必須用電鏡才能看見(jiàn);僅具有一種類型的核酸,或DNA或RNA,沒(méi)有含兩種核酸的病毒;專營(yíng)細(xì)胞內(nèi)寄生生活;具有受體連結(jié)蛋白(receptor binding protein),與敏感細(xì)胞表面的病毒受體連結(jié),進(jìn)而感染細(xì)胞。 根據(jù)病毒的核酸類型

6、可以將其分為兩大類:DNA病毒與RNA病毒 病毒的多樣性: 一個(gè)成熟有感染性的病毒顆粒稱“病毒體”(Virion)。電鏡觀察有五種形態(tài): 球形(Sphericity):大多數(shù)人類和動(dòng)物病毒為球形,如脊髓灰質(zhì)炎病毒、禽流感病毒、艾滋病毒、皰疹病毒及腺病毒等; 絲形(Filament):多見(jiàn)于植物病毒,如煙草花葉病病毒,人類流感病毒有時(shí)也是絲形; 彈形(Bullet-shape):形似子彈頭,如狂犬病毒、皰疹性口炎病毒等,其他多為植物病毒。 磚形(Brick-shape):如天花病毒、牛痘苗病毒等; 蝌蚪形(Tadpole-shape):由一卵圓形的頭及一條細(xì)長(zhǎng)的尾組成,如噬菌體。 類病毒(vir

7、oid)僅由一個(gè)有感染性的RNA構(gòu)成,它們不能像病毒那樣感染細(xì)胞,只有當(dāng)植物細(xì)胞受到損傷,失去了膜屏障,它們才能在供體植株與受體植株間傳染。例如,馬鈴薯錘管類病毒僅由一個(gè)含359個(gè)核苷酸的單鏈環(huán)狀RNA分子組成,鏈內(nèi)有一些互補(bǔ)序列。分子長(zhǎng)約4050nm,不能制造衣殼蛋白。 朊病毒(蛋白質(zhì)感染因子 prion) 僅由感染性的蛋白質(zhì)亞基構(gòu)成;1982年SBPrusiner發(fā)現(xiàn)羊瘙癢?。╯crapie)的病原體是一種蛋白質(zhì),不含核酸,命名為prion,意即Proteinnaceous Infection Only,譯為蛋白質(zhì)感染因子或朊病毒,Prusiner因此項(xiàng)發(fā)現(xiàn)更新了醫(yī)學(xué)感染的概念,獲1997

8、年的諾貝爾生理與醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。 性質(zhì):一種結(jié)構(gòu)變異的蛋白質(zhì),對(duì)高溫和蛋白酶均具有較強(qiáng)的抵抗力。它能轉(zhuǎn)變細(xì)胞內(nèi)的此類正常的蛋白PrPC(cellular prion protein),使PrPC發(fā)生結(jié)構(gòu)變異,變?yōu)榫哂兄虏∽饔玫腜rPSc(scrapie-associated prion protein)。 3. 原核細(xì)胞的類型及特征 支原體的直徑通常為0.10.3m,可通過(guò)濾菌器。無(wú)細(xì)胞壁,不能維持固定的形態(tài)而呈現(xiàn)多形性 ,其基因組為一環(huán)狀雙鏈DNA,分子量?。▋H有大腸桿菌的五分之一)。 細(xì)菌是在自然界分布最廣、個(gè)體數(shù)量最多的有機(jī)體,是大自然物質(zhì)循環(huán)的主要參與者。細(xì)菌主要由細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)

9、體等部分構(gòu)成,有的細(xì)菌還有夾膜、鞭毛、菌毛等特殊結(jié)構(gòu)。絕大多數(shù)細(xì)菌的直徑大小在0.55m之間??筛鶕?jù)形狀分為三類,即:球菌、桿菌和螺旋菌。 藍(lán)藻:又稱藍(lán)細(xì)菌(cyanobacterium),能進(jìn)行與高等植物類似的光合作用 ,但與光合細(xì)菌的光合作用的機(jī)制不一樣,因此被認(rèn)為是最簡(jiǎn)單的植物。 藍(lán)藻沒(méi)有葉綠體,僅有十分簡(jiǎn)單的光合作用結(jié)構(gòu)裝置。藍(lán)藻細(xì)胞遺傳信息載體與其它原核細(xì)胞一樣,是一個(gè)環(huán)狀DNA分子,但遺傳信息量很大,可與高等植物相比。藍(lán)藻細(xì)胞的體積比其它原核細(xì)胞大得多,直徑一般10um左右,甚至可達(dá)70m(顫藻)。藍(lán)藻屬單細(xì)胞生物,有些藍(lán)藻經(jīng)常以絲狀的細(xì)胞群體存在。4. 古核細(xì)胞的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及進(jìn)化地

10、位 一些生長(zhǎng)在極端特殊環(huán)境中的細(xì)菌 ,如鹽細(xì)菌,產(chǎn)甲烷細(xì)菌等。所棲息的環(huán)境和地球發(fā)生的早期有相似之處,如:高溫、缺氧等,以前把它們歸屬于原核細(xì)胞,現(xiàn)認(rèn)為其很可能是真核細(xì)胞的祖先。主要證據(jù):(1)細(xì)胞壁的成分與真核細(xì)胞一樣,而非像細(xì)菌那樣由肽聚糖構(gòu)成。(2)DNA與基因結(jié)構(gòu):古細(xì)菌DNA中有重復(fù)序列的存在。此外,某些古核細(xì)胞的基因中存在內(nèi)含子。(3)有類核小體結(jié)構(gòu):古細(xì)菌具有組蛋白,而且能與DNA構(gòu)建成類似核小體結(jié)構(gòu)。(4)有類似真核細(xì)胞的核糖體:多數(shù)古細(xì)菌類的核糖體較真細(xì)菌有增大趨勢(shì),含有60種以上蛋白,介于真核細(xì)胞(7084)與真細(xì)菌(55)之間??股赝瑯硬荒芤种乒藕思?xì)胞類的核糖體的蛋白質(zhì)

11、合成。(5)5S rRNA:根據(jù)對(duì)5S rRNA的分子進(jìn)化分析,認(rèn)為古細(xì)菌與真核生物同屬一類,而真細(xì)菌卻與之差距甚遠(yuǎn)。5S rRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的研究也說(shuō)明很多古細(xì)菌與真核生物相似。 除上述各點(diǎn)外,根據(jù)DNA聚合酶分析,氨基酰tRNA合成酶的作用,起始氨基酰tRNA 與肽鏈延長(zhǎng)因子等分析,也提供了以上類似依據(jù),說(shuō)明古細(xì)菌與真核生物在進(jìn)化上的關(guān)系較真細(xì)菌類更為密切。因此近年來(lái),真核細(xì)胞起源于古細(xì)菌的觀點(diǎn)得到了加強(qiáng)。2、 要點(diǎn)1. 病毒與進(jìn)化的關(guān)系P29 第一種觀點(diǎn)認(rèn)為生物大分子先組裝成病毒,再由病毒進(jìn)化為細(xì)胞。第二種觀點(diǎn)認(rèn)為在生物起源中,由生物大分子分別演化出細(xì)胞與病毒這兩種不同類型的生命體。第三種

12、觀點(diǎn)認(rèn)為病毒是由細(xì)胞或細(xì)胞組分演化來(lái)的,這一觀點(diǎn)得到更多實(shí)驗(yàn)的支持。2.原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的比較P213.古核細(xì)胞的進(jìn)化地位及其依據(jù)(同上)第三章:細(xì)胞生物學(xué)研究方法一、基礎(chǔ)知識(shí)1.顯微鏡的基本原理(分辨率公式)N=介質(zhì)折射率;=鏡口角,=入射光波長(zhǎng)2. 各類光學(xué)顯微鏡的基本用途普通復(fù)式光學(xué)顯微鏡:直接用于觀察單細(xì)胞生物或體外培養(yǎng)細(xì)胞。熒光顯微鏡:在光鏡水平用于蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的定性定位:如綠色熒光蛋白(GFP)的應(yīng)用。激光掃描共焦顯微鏡:可以用于觀察細(xì)胞形態(tài),也可以用于細(xì)胞內(nèi)生化成分的定量分析、光密度統(tǒng)計(jì)以及細(xì)胞形態(tài)的測(cè)量。 相差顯微鏡:用于觀察活細(xì)胞。微分干涉顯微鏡:使細(xì)胞的結(jié)構(gòu),

13、特別是一些較大的細(xì)胞器,如核、線粒體等,立體感特別強(qiáng),適合于顯微操作。目前像基因注入、核移植、轉(zhuǎn)基因等的顯微操作常在這種顯微鏡下進(jìn)行。倒置顯微鏡:用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞,具有相差物鏡。3. 透射電鏡的基本原理及制樣技術(shù)P35 原理:電鏡的高分辨率(0.2nm),是因?yàn)槭褂昧瞬ㄩL(zhǎng)比可見(jiàn)光短得多的電子束作為光源,通過(guò)電磁透鏡聚焦,電鏡鏡筒中為高度中空,利用樣品對(duì)電子的散射和透射形成明暗反差。制樣技術(shù):超薄切片技術(shù)負(fù)染色技術(shù) 負(fù)染就是用重金屬鹽(如磷鎢酸、醋酸雙氧鈾)對(duì)鋪展在載網(wǎng)上的樣品進(jìn)行染色;吸去染料,樣品干燥后,樣品凹陷處鋪了一薄層重金屬鹽,而凸的出地方則沒(méi)有染料沉積,從而出現(xiàn)負(fù)染效果,分辨力可

14、達(dá)1.5nm左右。 冰凍蝕刻技術(shù) 也稱冰凍斷裂(freeze-fracture)。標(biāo)本置于-100C的干冰或-196C的液氮中,進(jìn)行冰凍,然后用冷刀驟然將標(biāo)本斷開(kāi),升溫后,冰在真空條件下迅即升華,暴露出斷面結(jié)構(gòu),稱為蝕刻(etching)。蝕刻后,向斷面以45度角噴涂一層蒸汽鉑,再以90度角噴涂一層碳,加強(qiáng)反差和強(qiáng)度。然后用次氯酸鈉溶液消化樣品,把碳和鉑的膜剝下來(lái),此膜即為復(fù)膜(replica)。復(fù)膜顯示出了標(biāo)本蝕刻面的形態(tài),在電鏡下得到的影像即代表標(biāo)本中細(xì)胞斷裂面處的結(jié)構(gòu)。4. 了解各種細(xì)胞成分分析方法的原理 離心分離技術(shù) 差速離心:在密度均一的介質(zhì)中由低速到高速逐級(jí)離心,用于分離不同大小的

15、細(xì)胞和細(xì)胞器。 密度梯度離心:用一定的介質(zhì)在離心管內(nèi)形成密度梯度,將細(xì)胞混懸液或勻漿置于介質(zhì)的頂部,通過(guò)重力或離心力場(chǎng)的作用使細(xì)胞分層、分離,又分為速度沉降和等密度沉降兩種。常用的介質(zhì)為氯化銫,蔗糖和多聚蔗糖。細(xì)胞內(nèi)核酸、蛋白質(zhì)、酶、糖與脂類等的顯示方法 原理:利用一些顯色劑與所檢測(cè)物質(zhì)中一些特殊基團(tuán)特異性結(jié)合的特征,通過(guò)顯色劑在細(xì)胞中的定位及顏色的深淺來(lái)判斷某種物質(zhì)在細(xì)胞中的分布和含量。特異蛋白抗原的定位與定性(免疫細(xì)胞化學(xué) ) 定義:根據(jù)免疫學(xué)原理,利用抗體同特定抗原專一結(jié)合,對(duì)抗原進(jìn)行定位測(cè)定的技術(shù)。 免疫熒光技術(shù):分為直接免疫熒光與間接免疫熒光??焖?、靈敏、有特異性,但其分辨率有限。

16、免疫電鏡技術(shù):¿ 免疫鐵蛋白技術(shù)¿ 免疫酶標(biāo)技術(shù)¿ 免疫膠體金技術(shù) 應(yīng)用:通過(guò)對(duì)分泌蛋白的定位,可以確定某種蛋白的分泌動(dòng)態(tài);胞內(nèi)酶的研究;膜蛋白的定位與骨架蛋白的定位等細(xì)胞內(nèi)特異核酸的定位與定性(原位分子雜交技術(shù) ) 用來(lái)檢測(cè)染色體上的特殊DNA序列。最初是使用帶放射性的DNA探針,通過(guò)放射自顯影來(lái)顯示位置。后來(lái)又發(fā)明了免疫探針?lè)?,將探針核苷酸的?cè)鏈加以改造,探針雜交后,其側(cè)鏈可被帶有熒光標(biāo)記的抗體所識(shí)別,從而顯示出位置。 光鏡水平的原位雜交技術(shù) 探針用同位素標(biāo)記或熒光素標(biāo)記 電鏡水平的原位雜交技術(shù) 探針用生物素標(biāo)記,用與抗生物素抗體相連的膠體金標(biāo)記顯示定量細(xì)胞化

17、學(xué)分析技術(shù) 細(xì)胞顯微分光光度術(shù)(Microspectrophotometry):利用細(xì)胞內(nèi)某些物質(zhì)對(duì)特異光譜的吸收,測(cè)定這些物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的含量。 流式細(xì)胞儀(Flow Cytometry):流式細(xì)胞術(shù)是對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行快速定量分析與分選的一門技術(shù)。用于定量測(cè)定細(xì)胞中的DNA、RNA或某一特異蛋白的含量;測(cè)定細(xì)胞群體中不同時(shí)相細(xì)胞的數(shù)量;從細(xì)胞群體中分離某些特異染色的細(xì)胞;分離DNA含量不同的中期染色體。 第四章:細(xì)胞質(zhì)膜與細(xì)胞表面一、基礎(chǔ)知識(shí)1.生物膜的基本成分、結(jié)構(gòu)、特征 生物膜的基本成分是膜脂,膜脂主要包括磷脂、糖脂和膽固醇三種類型。 u磷脂雙分子層是組成生物膜的基本結(jié)構(gòu)成分,尚未發(fā)現(xiàn)膜結(jié)構(gòu)

18、中起組織作用的蛋白;u 蛋白分子以不同方式鑲嵌在脂雙層分子中或結(jié)合在其表面, 膜蛋白是賦予生物膜功能的主要決定者; 生物膜是磷脂雙分子層嵌有蛋白質(zhì)的二維溶液。2. 膜脂流動(dòng)性相關(guān)因素 膜脂的流動(dòng)性主要由脂分子本身的性質(zhì)決定的,不飽和程度越高,脂肪酸鏈越短,則膜脂的流動(dòng)性越大;溫度對(duì)膜脂的運(yùn)動(dòng)有明顯的影響。在細(xì)菌和動(dòng)物細(xì)胞中常通過(guò)增加不飽和脂肪酸的含量來(lái)調(diào)節(jié)膜脂的相變溫度以維持膜脂的流動(dòng)性。在動(dòng)物細(xì)胞中,膽固醇對(duì)膜的流動(dòng)性起重要的雙向調(diào)節(jié)作用。 膜的流動(dòng)性受多種因素影響:細(xì)胞骨架不但影響膜蛋白的運(yùn)動(dòng),也影響其周圍膜脂的流動(dòng)。膜蛋白與膜脂分子的相互作用也是影響膜流動(dòng)性的重要因素3. 脂質(zhì)體及其應(yīng)用

19、 脂質(zhì)體是根據(jù)磷脂分子可在水相中形成穩(wěn)定的脂雙層膜的趨勢(shì)而制備的人工膜。應(yīng)用于: 研究膜脂與膜蛋白及其生物學(xué)性質(zhì); 脂質(zhì)體中裹入DNA可用于基因轉(zhuǎn)移; ² 在臨床治療中,脂質(zhì)體作為藥物等的載體。4. 細(xì)胞連接的類型和功能封閉連接緊密連接是封閉連接的主要形式,存在于上皮細(xì)胞之間。功能是:形成滲漏屏障,起重要的封閉作用;但免疫細(xì)胞可通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接;某些小分子可以細(xì)胞旁路途徑轉(zhuǎn)運(yùn)。隔離作用,形成上皮細(xì)胞膜蛋白和膜脂側(cè)向擴(kuò)散的屏障,維持上皮細(xì)胞的極性。支持功能錨定連接 分為與中間絲相連的錨定連接、與肌動(dòng)蛋白纖維相連的錨定連接。 功能:通過(guò)錨定連接將相鄰細(xì)胞的骨架系統(tǒng)或?qū)⒓?xì)胞與基質(zhì)相

20、連形成一個(gè)堅(jiān)挺、有序的細(xì)胞群體。通訊連接 間隙連接:分布廣泛,幾乎所有的動(dòng)物組織中都存在間隙連接。 參與細(xì)胞分化:胚胎發(fā)育的早期,細(xì)胞間通過(guò)間隙連接相互協(xié)調(diào)發(fā)育和分化。小分子物質(zhì)可在一定細(xì)胞群范圍內(nèi),以分泌源為中心,建立起遞變的擴(kuò)散濃度梯度,以不同的分子濃度為處于梯度范圍內(nèi)的細(xì)胞提供”位置信息”,從而誘導(dǎo)細(xì)胞按其在胚胎中所處的局部位置向著一定方向分化。 協(xié)調(diào)代謝:例如,在體外培養(yǎng)條件下,把不能利用外源次黃嘌呤合成核酸的突變型成纖維細(xì)胞和野生型成纖維細(xì)胞共同培養(yǎng),則兩種細(xì)胞都能吸收次黃嘌呤合成核酸。如果破壞細(xì)胞間的間隙連接,則突變型細(xì)胞不能吸收次黃嘌呤合成核酸。 構(gòu)成電緊張突觸:平滑肌、心肌、神

21、經(jīng)末梢間均存在的這種間隙連接,稱為電突觸。電緊張突觸無(wú)須依賴神經(jīng)遞質(zhì)或信息物質(zhì)即可將一些細(xì)胞的電興奮活動(dòng)傳遞到相鄰的細(xì)胞。 化學(xué)突觸: 存在于可興奮細(xì)胞之間的細(xì)胞連接方式,它通過(guò)釋放神經(jīng)遞質(zhì)來(lái)傳導(dǎo)神經(jīng)沖動(dòng)。 胞間連絲:高等植物細(xì)胞之間通過(guò)胞間連絲相互連接,完成細(xì)胞間的通訊聯(lián)絡(luò)。功能: 實(shí)現(xiàn)細(xì)胞間由信號(hào)介導(dǎo)的物質(zhì)選擇性的轉(zhuǎn)運(yùn); 實(shí)現(xiàn)細(xì)胞間的電傳導(dǎo); 在發(fā)育過(guò)程中,胞間連絲結(jié)構(gòu)的改變可以調(diào)節(jié)植物細(xì)胞間的物質(zhì)運(yùn)輸。 某些植物病毒能制造特殊的蛋白質(zhì),這種蛋白質(zhì)同胞間連絲結(jié)合后,可使胞間連絲的有效孔徑擴(kuò)大,使病毒粒子得以通過(guò)胞間連絲在植物體內(nèi)自由播散和感染。二、要點(diǎn):生物膜的基本特征,細(xì)胞連接的類型和功

22、能(同上)第五章:物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸一、基礎(chǔ)知識(shí)1.主動(dòng)運(yùn)輸?shù)念愋?由ATP直接提供能量的主動(dòng)運(yùn)輸 (ATP驅(qū)動(dòng)泵) 由ATP間接提供能量的主動(dòng)運(yùn)輸 光驅(qū)動(dòng)泵,見(jiàn)于細(xì)菌。2.被動(dòng)運(yùn)輸?shù)念愋?簡(jiǎn)單擴(kuò)散 協(xié)助擴(kuò)散3.膜泡運(yùn)輸?shù)念愋?胞吞作用,分為吞噬作用和胞飲作用 胞吐作用2、 要點(diǎn):鈉鉀泵的工作原理 鈉鉀泵(也稱鈉鉀轉(zhuǎn)運(yùn)體),為蛋白質(zhì)分子,進(jìn)行鈉離子和鉀離子之間的交換。每消耗一個(gè)ATP分子,逆電化學(xué)梯度泵出三個(gè)鈉離子和泵入兩個(gè)鉀離子。保持膜內(nèi)高鉀膜外高鈉的不均勻離子分布。第六章:線粒體和葉綠體一、基礎(chǔ)知識(shí)1.線粒體的結(jié)構(gòu)和酶的定位 顆?;蚨叹€狀,常發(fā)生融合與分裂,分布及數(shù)目與能量需求相關(guān)。 外膜(o

23、uter membrane):脂類和蛋白質(zhì)約各50%,含孔蛋白,通透性較高,標(biāo)志酶為單胺氧化酶。 內(nèi)膜(inner membrane):含100種以上的多肽,蛋白質(zhì)和脂類的比例高于3:1。高度不通透性,向內(nèi)折疊形成嵴(cristae),含有與能量轉(zhuǎn)換相關(guān)的蛋白,標(biāo)志酶為細(xì)胞色素C氧化酶 膜間隙(intermembrane space):含許多可溶性酶、底物及輔助因子。 基質(zhì)(matrix):含三羧酸循環(huán)酶系、線粒體基因表達(dá)酶系等以及線粒體DNA, RNA,核糖體。2. 氧化磷酸化的分子基礎(chǔ)和偶聯(lián)機(jī)制 分子基礎(chǔ): 氧化(電子傳遞、消耗氧, 放能)與磷酸化(ADP+Pi,儲(chǔ)能)同時(shí)進(jìn)行,密切偶連,

24、分別由兩個(gè)不同的結(jié)構(gòu)體系執(zhí)行。 ATP合酶(ATP synthase)(磷酸化的分子基 礎(chǔ)) 電子傳遞鏈(electron-transport chain)的四種復(fù)合物,組成兩種呼吸鏈:NADH呼吸鏈, FADH2呼吸鏈。 偶聯(lián)機(jī)制:化學(xué)滲透假說(shuō)內(nèi)容 電子傳遞鏈各組分在線粒體內(nèi)膜中不對(duì)稱分布,當(dāng)高能電子沿其傳遞時(shí),所釋放的能量將H+從基質(zhì)泵到膜間隙,形成H+電化學(xué)梯度。在這個(gè)梯度驅(qū)使下,H+穿過(guò)ATP合成酶回到基質(zhì),同時(shí)合成ATP,電化學(xué)梯度中蘊(yùn)藏的能量?jī)?chǔ)存到ATP高能磷酸鍵中。3. 半自主性細(xì)胞器的問(wèn)題P106 4. 真核細(xì)胞起源的內(nèi)共生假說(shuō) 真核細(xì)胞的祖先是一種體積較大,不需氧具有吞噬能力

25、的細(xì)胞,線粒體的祖先是一種革蘭氏陰性細(xì)菌;葉綠體的祖先是一種原核生物藍(lán)細(xì)菌(Cyanobacteria),即藍(lán)藻。2、 要點(diǎn)1. F1F0-ATP合酶的結(jié)構(gòu)和功能及工作過(guò)程p90-912. 為什么說(shuō)線粒體和葉綠體是半自主性的細(xì)胞器線粒體和葉綠體的DNA mtDNA和cpDNA均以半保留方式進(jìn)行復(fù)制, mtDNA復(fù)制的時(shí)間主要在細(xì)胞周期的S期及G2期,DNA先復(fù)制,隨后線粒體分裂。cpDNA復(fù)制的時(shí)間在G1期。復(fù)制仍受核控制。 mtDNA表現(xiàn)為母系遺傳,突變率高于核DNA,且缺乏修復(fù)能力。有些遺傳病,如Leber遺傳性視神經(jīng)病,肌陣攣性癲癇等均與線粒體基因突變有關(guān)。 線粒體和葉綠體中的蛋白質(zhì) 線

26、粒體和葉綠體自身有蛋白質(zhì)合成的能力 線粒體和葉綠體自身合成蛋白質(zhì)的種類有限 線粒體或葉綠體蛋白質(zhì)合成體系對(duì)核基因組具有依賴性 不同來(lái)源的線粒體基因,其表達(dá)產(chǎn)物既有共性,也存在差異線粒體、葉綠體基因組與細(xì)胞核的關(guān)系 線粒體、葉綠體的生命活動(dòng)受到細(xì)胞核與它們自身基因組的雙重調(diào)節(jié),在進(jìn)化過(guò)程中,細(xì)胞核與線粒體、葉綠體之間通過(guò)共進(jìn)化的方式建立了精確有效地分子協(xié)作機(jī)制核質(zhì)互作:細(xì)胞核與線粒體、葉綠體之間遺傳信息和基因表達(dá)調(diào)控等層次上建立的分子協(xié)作機(jī)制 。核質(zhì)沖突:細(xì)胞核或線粒體、葉綠體基因單方面發(fā)生突變,引起細(xì)胞中的分子協(xié)作機(jī)制出現(xiàn)嚴(yán)重障礙時(shí),細(xì)胞或個(gè)體會(huì)出現(xiàn)異常表型,其分子機(jī)制統(tǒng)稱為核質(zhì)沖突。3. 線

27、粒體DNA的特點(diǎn) 為雙鏈環(huán)狀。不同物種mtDNA大小有一定差異,通常植物細(xì)胞中的較大。動(dòng)物細(xì)胞線粒體中有多個(gè)拷貝的mtDNA,而植物細(xì)胞中每個(gè)線粒體中通常不足1個(gè)拷貝。4. 人線粒體DNA的基本情況 16,569bp,37個(gè)基因(編碼12S,16S rRNA;22種tRNA;13種多肽:NADH脫氫酶7個(gè)亞基,cyt b-c1復(fù)合物中1個(gè)cytb,細(xì)胞色素C氧化酶3個(gè)亞基, ATP合成酶2個(gè)Fo亞基)動(dòng)物細(xì)胞中的線粒體mtDNA拷貝數(shù)較多:約100010000個(gè)/細(xì)胞;植物細(xì)胞中的線粒體mtDNA拷貝數(shù)較少:50個(gè)/細(xì)胞(擬南芥),每個(gè)線粒體中不到0.1個(gè)。第七、八章:細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)與內(nèi)膜系統(tǒng)及蛋

28、白分選和膜泡運(yùn)輸一、基礎(chǔ)知識(shí)1、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的結(jié)構(gòu)和功能粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(rER)多呈扁囊狀,排列整齊,附有大量核糖體。功能有蛋白質(zhì)合成、蛋白質(zhì)的修飾與加工、新生肽的折疊與組裝。光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(sER)多為分支管狀,沒(méi)有核糖體附著。功能有脂類的合成和轉(zhuǎn)運(yùn)、類固醇激素的合成(生殖腺內(nèi)分泌細(xì)胞和腎上腺皮質(zhì))、肝的解毒作用、儲(chǔ)存鈣離子(肌質(zhì)網(wǎng)膜上的Ca2+-ATP酶將細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中Ca2+ 泵入肌質(zhì)網(wǎng)腔中)2、高爾基體的結(jié)構(gòu)和功能結(jié)構(gòu):由數(shù)個(gè)扁平膜囊和大小不等的囊泡構(gòu)成的有極性的細(xì)胞器,呈弓形或半球形,順面和反面都有一些或大或小的運(yùn)輸小泡。高爾基體的3個(gè)組成部分:高爾基體順面網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)(CGN)是高爾基體的入口區(qū)域,接

29、受由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的物質(zhì)并分類后轉(zhuǎn)入中間膜囊。小部分蛋白和脂質(zhì)再返回內(nèi)質(zhì)網(wǎng);高爾基體中間膜囊(medial Golgi),多數(shù)糖基修飾,糖脂的形成以及與高爾基體有關(guān)的糖合成均發(fā)生此處;高爾基體反面膜囊以及反面網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)(TGN):是高爾基體的出口區(qū)域,參與蛋白質(zhì)的分類與包裝,最后輸出。功能:將內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工、分類、與包裝,然后分門別類地送到細(xì)胞特定的部位或分泌到細(xì)胞外。(1)參與細(xì)胞分泌活動(dòng) :對(duì)細(xì)胞合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工,分類和運(yùn)出,其過(guò)程是ER上合成蛋白質(zhì)進(jìn)入ER腔以出芽形成囊泡進(jìn)入CGN在medial Gdgi中加工在TGN形成囊泡囊泡與質(zhì)膜融合、排出。(2)蛋白質(zhì)的糖基化及其修飾(

30、3)蛋白酶的水解和其它加工過(guò)程(4)其它功能 1、進(jìn)行膜的轉(zhuǎn)化功能:在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的新膜轉(zhuǎn)移至高爾基體后,經(jīng)過(guò)修飾和加工,形成運(yùn)輸泡與質(zhì)膜融合,使新形成的膜整合到質(zhì)膜上。 2、參與形成溶酶體。 3、參與植物細(xì)胞壁的形成。 4、合成植物細(xì)胞壁中的纖維素和果膠質(zhì)。3、溶酶體的功能和分類分類:初級(jí)溶酶體 、次級(jí)溶酶體(自噬溶酶體、異噬溶酶體)、殘質(zhì)體(又稱后溶酶體)。 功能: 1 清除無(wú)用的生物大分子、衰老的細(xì)胞器及衰老損傷和死亡的細(xì)胞 2 防御功能(病原體感染刺激單核細(xì)胞分化成巨噬細(xì)胞而吞噬、消化) 3 其它重要的生理功能: 作為細(xì)胞內(nèi)的消化“器官”為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng);分泌腺細(xì)胞中,溶酶體攝入分泌顆粒參與分泌過(guò)程的調(diào)節(jié);參與清除贅生組織或退行性變化的細(xì)胞;受精過(guò)程中的精子的頂體反應(yīng)。 4、 蛋白分選與加工分選途徑:(1)門控運(yùn)輸::核孔復(fù)合體(2)跨膜運(yùn)輸:通過(guò)跨膜通道進(jìn)入目的細(xì)胞器(3)膜泡運(yùn)輸:在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或高爾基體中被包裝成小泡,選擇性地運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞器。(4)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn):細(xì)胞骨架系統(tǒng)修飾加工:(1)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾

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