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文檔簡介
1、微生物復(fù)習(xí)題一、選擇題1、微生物是一些個體微小、構(gòu)造簡單的低等生物的總稱,它們的大小一般小于( C )A、1cm B、1mm C、0.1mm D、1m2、在微生物學(xué)發(fā)展史上曾出現(xiàn)過尋找重要病原菌的“黃金時期”,其原因主要是( C )A、顯微鏡的應(yīng)用 B、消毒滅菌術(shù)的建立C、微生物純種分離技術(shù)的成功 D、純種微生物培養(yǎng)技術(shù)的創(chuàng)立3、人類已消滅的第一個傳染病是( C )A、麻疹 B、脊髓灰質(zhì)炎 C、天花 D、水痘4、微生物五大共性的基礎(chǔ)是( A )。A、體積小,面積大 B、吸收多,轉(zhuǎn)化快 C、生長旺,繁殖快D、適應(yīng)強,易變異 E、分布廣,種類多5、在以下四大類微生物中,只含DNA或RNA一種核酸的
2、是( D )。 A、真菌 B、真細(xì)菌 C、古生菌 D、病毒6、土壤中三大類群體微生物以數(shù)量排序為(A)A、細(xì)菌放線菌真菌 B、細(xì)菌真菌放線菌 C、放線菌細(xì)菌真菌 D、真菌細(xì)菌放線菌7、在以下六類微生物中,細(xì)胞壁不含肽聚糖的是( C )。A、真細(xì)菌 B、放線菌 C、古生菌 D、藍(lán)細(xì)菌E、支原體 F、立克次氏體8、在G+細(xì)菌細(xì)胞壁中缺乏的化學(xué)成分是( D )A、肽聚糖 B、磷壁酸 C、類脂質(zhì) D、蛋白質(zhì)9、在G細(xì)菌細(xì)胞壁中缺乏的化學(xué)成分是( B )A、肽聚糖 B、磷壁酸 C、類脂質(zhì) D、蛋白質(zhì)10、革蘭氏染色的關(guān)鍵步驟是( C )A.結(jié)晶紫(初染) B.碘液(媒染) C.酒精(脫色) D.蕃紅(復(fù)
3、染)11、多數(shù)霉菌細(xì)胞壁的主要成分為( B )A、纖維素 B、幾丁質(zhì) C、肽聚糖 D、葡聚糖和甘露聚糖12、下列微生物能通過細(xì)菌濾器的是( C )A、細(xì)菌 B、酵母菌 C、病毒 D、霉菌13、在放線菌發(fā)育過程中,吸收水分和營養(yǎng)的為( A )A、基質(zhì)菌絲 B、氣生菌絲 C、孢子絲 D、孢子14、 分生孢子頭呈掃帚狀的霉菌是(C )A. 毛霉 B. 根霉 C. 青霉 D. 曲霉15、用溶菌酶水解G細(xì)菌的細(xì)胞壁通??色@得一種稱為( D )的缺壁細(xì)菌。A、支原體 B、L型細(xì)菌 C、原生質(zhì)體 D、球狀體16、目前用于解釋細(xì)胞膜功能的學(xué)說,主要是( B )A、滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說 B、液態(tài)鑲嵌模型C、化學(xué)
4、滲透學(xué)說 D、構(gòu)象假說17、異染粒在細(xì)菌中的生理功能是( D )A、碳源貯藏物 B、氮源貯藏物 C、能源貯藏物 D、磷素貯藏物18、有一種芽孢桿菌可產(chǎn)生具有殺蟲作用的伴孢晶體,這種細(xì)菌稱為( B )。A、地衣芽孢桿菌 B、蘇云金芽孢桿菌 C、蕈狀芽孢桿菌 D、凝結(jié)芽孢桿菌19、在以下六類微生物中,不屬于真核微生物的是( D )A、真菌 B、微藻 C、原生動物 D、藍(lán)綠藻 E、地衣 F、黏菌20、在固態(tài)基質(zhì)上會不斷蔓延,以致不能形成菌落的霉菌是( D )。A、青霉 B、曲霉 C、白地霉 D、根霉21、決定病毒感染專一性的物質(zhì)基礎(chǔ)是(B)A、核酸 B、蛋白質(zhì) C、脂類 D、糖類22、病毒對(C)不
5、敏感A、高溫 B、紫外線 C、抗生素 D、干擾素23、下列微生物耐溫順序為( B )A.營養(yǎng)體孢子芽孢 B.芽孢孢子營養(yǎng)體 C.孢子營養(yǎng)體芽孢 D.芽孢營養(yǎng)體孢子24、動物病毒在其宿主的單層細(xì)胞培養(yǎng)物上所形成的聚集體,稱為( C )A、包含體 B、噬菌斑 C、空斑 D、枯斑25、在噬菌體一步生長曲線中,若人為地用氯仿等破壞宿主細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液呈現(xiàn)侵染性,此期稱( C )。A、潛伏期 B、隱晦期 C、胞內(nèi)累積期 D、裂解期26、噬菌體屬于病毒類別中的( A )A. 微生物病毒 B. 昆蟲病毒 C. 植物病毒 D. 動物病毒27、對多數(shù)微生物來說,最適宜的碳源是( B )A、C·G
6、83;I·B·N類 B、C·H·O類 C、C·H類 D、C·O類28、在C·H·O類化合物中,微生物最適宜的碳源是( A )A、糖類 B、有機酸類 C、醇類 D、脂類29、培養(yǎng)真菌時,培養(yǎng)基常加0.3%乳酸,其目的是( D )A.提供能源 B.提供碳源 C.調(diào)節(jié)pH D.三者都是30、微酸環(huán)境下適宜生長的微生物是(C)A、細(xì)菌 B、放線菌 C、真菌 D、病毒31、下列哪種培養(yǎng)法適用于厭氧菌的培養(yǎng)( D )A. 固體平板 B. 固體斜面 C. 液體表面 D. 高層瓊脂柱32、以高糖培養(yǎng)酵母菌,其培養(yǎng)基類型為( A )
7、A. 加富培養(yǎng)基 B. 選擇培養(yǎng)基 C. 鑒別培養(yǎng)基 D. 普通培養(yǎng)基33、向培養(yǎng)基中加入青霉素篩選轉(zhuǎn)化子,此培養(yǎng)基屬( C )A.基礎(chǔ)培養(yǎng)基 B.加富培養(yǎng)基 C.選擇培養(yǎng)基 D.鑒別培養(yǎng)基34、藍(lán)細(xì)菌屬于( A )微生物。A、光能自養(yǎng)型 B、光能異養(yǎng)型 C、化能自養(yǎng)型 D、化能異養(yǎng)型35、葡萄糖和果糖等營養(yǎng)物進(jìn)入原核生物細(xì)胞膜的機制是通過( D )A、單純擴散 B、促進(jìn)擴散 C、主動運送 D、基團(tuán)移位36、發(fā)酵是以(D)作為最終電子受體的生物氧化過程A.O2 B.CO2 C.無機物 D.有機物37、高氏1號培養(yǎng)基適合培養(yǎng)( B )A、細(xì)菌 B、放線菌 C、酵母菌 D、霉菌38、要對含菌量較少
8、的水樣進(jìn)行細(xì)菌計數(shù),較好的方法是應(yīng)用固體培養(yǎng)基中的( C )法。A、固化培養(yǎng)基 B、非可逆性固化培養(yǎng)基 C、濾膜固體培養(yǎng)基 D、天然固態(tài)培養(yǎng)基39、要對細(xì)菌進(jìn)行動力觀察,最好采用( C )A、液體培養(yǎng)基 B、固體培養(yǎng)基 C、半固體培養(yǎng)基 D、脫水培養(yǎng)基40、下列哪種結(jié)構(gòu)與細(xì)菌的侵襲力無直接關(guān)系( C )A. 菌毛 B. 鏈激酶 C. 細(xì)胞膜 D. 莢膜41、新陳代謝研究中的核心問題是( C )。A、分解代謝 B、合成代謝 C、能量代謝 D、物質(zhì)代謝42、反硝化作用的最終產(chǎn)物( C )A. NH3 B. HNO3 C. N2 D. HNO243、在典型生長曲線中,細(xì)胞形態(tài)最大的時期是( A )。
9、A. 延滯期 B. 指數(shù)期 C. 穩(wěn)定期 D. 衰亡期44、在典型生長曲線中,代時最短的時期是( )A. 延滯期 B. 指數(shù)期 C. 穩(wěn)定期 D. 衰亡期45、質(zhì)粒是細(xì)菌的( B )。A. 核質(zhì)DNA B. 胞質(zhì)DNA C. 胞質(zhì)RNA D. 核質(zhì)DNA46、黏質(zhì)沙雷氏菌在25培養(yǎng)時會產(chǎn)生深紅色的靈桿菌素,可是,當(dāng)培養(yǎng)基在37下時就不產(chǎn)此色素,但若再降到25時又重新恢復(fù)產(chǎn)色素能力,此即(D )A. 遺傳型 B. 表型 C. 變異 D. 飾變47、今從土壤中分離到一株菌,欲對其進(jìn)行鑒定,首先應(yīng)進(jìn)行的是:( A ) A、獲得該菌株的純培養(yǎng) B、細(xì)胞形態(tài)和習(xí)性水平研究 C、查找權(quán)威鑒定手冊 D、基因
10、或DNA水平鑒定 48、干熱滅菌法要求的溫度和時間為( C )A. 105,2小時 B. 121,30分鐘 C. 160,2小時 D. 160,4小時49、下列哪種情況不屬于微生物與生物間共生關(guān)系的體現(xiàn)。( D )A. 根瘤 B. VA菌根C. 反芻動物的瘤胃 D. 固氮菌與纖維素分解菌的共培養(yǎng)50、下列微生物耐溫順序為( B )A、營養(yǎng)體孢子芽孢 B、芽孢孢子營養(yǎng)體 C、孢子營養(yǎng)體芽孢 D、芽孢營養(yǎng)體孢子三、填空1、根據(jù)形態(tài)、結(jié)構(gòu)等生物學(xué)特征,可將微生物劃分為 原核微生物 、 真核微生物 、 非細(xì)胞型微生物 三大類。2、專性活細(xì)胞內(nèi)寄生的微生物有 衣原體 、 立克次氏體 、 病毒 。 3、真
11、核微生物的鞭毛為 9+2 型。4、列出四種觀察細(xì)菌鞭毛方法 電鏡觀察 、 鞭毛染色法 、 懸滴法 、 半固體穿刺法 。5、測定噬菌體效價的常用方法是 雙層平板法 。6、細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)中,與致病性直接相關(guān)的是 菌毛 和 莢膜 。7、連續(xù)培養(yǎng)器的原理按控制方式可分為 恒濁器 和 恒化器 。8、細(xì)菌生長繁殖需要 營養(yǎng) , 溫度 , pH , 氣體 條件。9、細(xì)菌的6類營養(yǎng)要素包括 碳源 、 氮源 、 能源 、 生長因子 、無機鹽 和 水 。 10、營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式有四種,其中可以逆濃度梯度運輸營養(yǎng)物質(zhì)的方式有 主動運輸 和 基團(tuán)轉(zhuǎn)運 。11、將病毒分為三種對稱體制。例如,腺病毒屬于 二十面立體
12、 對稱體制,TMV屬于 螺旋 對稱體制。12、利用“曲頸瓶試驗”否定自然發(fā)生學(xué)說的是 巴斯德 ,首次分離到衣原體的是我國的微生物學(xué)家 湯飛凡 。13、肽聚糖是細(xì)菌細(xì)胞壁的特有成分,是由肽和聚糖骨架鏈組成,而后者是 乙酰胞壁酸 和 乙酰葡糖胺 經(jīng) ,糖苷鍵 連接而成。14、絲狀真菌結(jié)構(gòu)由孢子和菌絲體組成,其中菌絲按功能分為 營養(yǎng)菌絲 和 氣生菌絲 兩種。15、細(xì)菌的基本形態(tài)包括 球狀 , 桿狀 , 螺形狀 三種。 16、采用原生質(zhì)體融合進(jìn)行微生物遺傳育種時,制備細(xì)菌的原生質(zhì)體常用 青霉素 處理,酵母菌常用 蝸牛酶 處理獲得相應(yīng)的原生質(zhì)體。17、根據(jù)核酸的形式,病毒可分為 dsRAN 病毒, ds
13、DNA 病毒, -ssRNA病毒 , +ssRNA病毒, ssDNA病毒 , 反轉(zhuǎn)錄病毒 六種。18、衣原體的生活史包括 始體 和 原體 兩個階段,無繁殖能力的階段是 原體 。19、證實核酸是遺傳物質(zhì)的3個經(jīng)典實驗分別是 轉(zhuǎn)化實驗、_噬菌體侵染實驗 和_植物病毒重建實驗 。20、證明基因突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性的三個經(jīng)典實驗分別是 變量實驗 , 涂布實驗 、 影印實驗 。 四、名詞解釋1、microorganism:微生物,指一大類形體微小、結(jié)構(gòu)簡單的低等生物的總稱。包括真核細(xì)胞型、原核細(xì)胞型和非細(xì)胞結(jié)構(gòu)三大類微生物。2、真核微生物:是一大類群具有真核生物特點的微生物,包括菌物界的真菌、屬于植物
14、界的顯微藻類和屬于動物界的原生動物。3、原核生物:是一大類細(xì)胞微小、只有核區(qū)的單細(xì)胞生物,包括真細(xì)菌和古生菌兩大類。原核生物和真核生物的主要區(qū)別是:原核生物細(xì)胞膜無核膜包裹,缺少由單位膜分隔而成的細(xì)胞器,核糖體為70S型。4、古生菌:又稱古細(xì)菌,是一類在進(jìn)化早期就與真細(xì)菌和真核生物的遠(yuǎn)祖相互獨立演化的原核生物,主要包括一些與地球早期環(huán)境有聯(lián)系的極端微生物,如嗜熱菌、嗜酸菌、嗜鹽菌和產(chǎn)甲烷菌等。主要特點為細(xì)胞壁無肽聚糖,細(xì)胞膜脂由醚鍵連接,以及與細(xì)菌有明顯差別的16S rRNA序列等。5、立克次氏體:是大小介于通常的細(xì)菌與病毒之間,在許多方面類似細(xì)菌,專性活細(xì)胞內(nèi)寄生的原核微生物。主要特征為:專
15、性寄生于真核細(xì)胞內(nèi)的原核生物;有細(xì)胞壁,細(xì)胞較大, G-;產(chǎn)能代謝途徑不完整;以二分裂方式進(jìn)行繁殖;需在相應(yīng)的細(xì)胞中進(jìn)行培養(yǎng)繁殖;對熱敏感;對青霉素等抗生素敏感;為斑疹傷寒、恙蟲病等疾病的病原體;采用“外斐氏反應(yīng)”檢測病原;通過節(jié)肢動物叮咬和排泄物傳播給人和其他動物。6、莢膜:糖被的一種,包裹在細(xì)菌細(xì)胞壁外、有固定層次的膠黏物,一般成分為多糖,少數(shù)為多肽或多糖與多肽的復(fù)合物。莢膜具有保護(hù)、貯藏、附著和堆積代謝廢物等生理功能。7、糖被:包被于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層厚度不定的膠狀物,其成分一般為多糖。因厚度不同等原因,可把糖被分成莢膜、黏液層或菌膠團(tuán)等。糖被德生理功能是保護(hù)細(xì)胞、貯藏養(yǎng)料、附著和堆
16、積代謝產(chǎn)物等。8、 L型細(xì)菌:實驗室或宿主體內(nèi)通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷菌株。對滲透壓敏感,在固體培養(yǎng)基上形成“油煎蛋”似的小菌落。9、 鞭毛:某些細(xì)菌細(xì)胞表面著生的一至數(shù)十條長絲狀、螺旋形的附屬物,具有推動細(xì)菌運動功能,為細(xì)菌的“運動器官”。10、水活度:在天然環(huán)境中,微生物可實際利用的自由水或游離水的含量,一般用在一定的溫度和壓力條件下,溶液的蒸汽壓力與同樣條件下純水蒸汽壓力之比表示,即:w =Pw/Pow。11、伴孢晶體:少數(shù)芽孢桿菌形成芽孢時產(chǎn)生的菱形、方形或不規(guī)則堿溶性蛋白質(zhì)晶體,可作為生物農(nóng)藥。12、溶原性細(xì)菌:溫和噬菌體基因組整合到宿主基因組中去,并隨細(xì)菌基因組的
17、復(fù)制而復(fù)制,不能形成子代噬菌體。此時的宿主菌就是溶原性細(xì)菌。13、前噬菌體: 溫和噬菌體感染宿主菌后, 其基因整合到宿主染色體上,隨宿主染色體的復(fù)制而復(fù)制. 14、呼吸:又稱好氧呼吸,指葡萄糖等底物按一定途徑脫氫后,氫經(jīng)完整呼吸鏈的傳遞,最終被外源分子氧接受并釋放水,在此過程中完成氧化磷酸化作用而產(chǎn)生ATP形式的能量。15、無氧呼吸:又稱厭氧呼吸,一類呼吸鏈末端的氫受體為外源無機氧化物或有機氧化物的生物氧化,是在無氧條件下進(jìn)行的、產(chǎn)能效率較低的特殊呼吸。其特點是葡萄糖等底物按常規(guī)途徑脫氫后,經(jīng)呼吸鏈傳遞氫(或電子),最終由氧化態(tài)的無機物(NO3-,SO42-等)或有機物受氫,并完成氧化磷酸化產(chǎn)
18、ATP功能。16、發(fā)酵:在無氧條件下,底物脫氫后所產(chǎn)生的還原力H未經(jīng)呼吸鏈而直接交中間產(chǎn)物接受;以實現(xiàn)底物水平磷酸化產(chǎn)能的一類生物氧化反應(yīng)。17、LPS:脂多糖(LPS):是位于革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁最外層的一層較厚的類脂多糖類物質(zhì),由類脂A、核心多糖和O-特異側(cè)鏈三部分組成。18、PHB: 聚-羥丁酸。是一種存在于某些細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的一類顆粒狀物質(zhì),具有貯存能源、碳源和降低細(xì)胞內(nèi)滲透壓的物質(zhì)。19、一步生長曲線:一步生長曲線是指能定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律的實驗曲線。一步生長曲線可分為三個時期:潛伏期;裂解期;穩(wěn)定期20、菌落形成單位(cfu):用平板菌落計數(shù)法對活菌進(jìn)行計數(shù)時的一個計數(shù)單位,對
19、充分分散、稀釋度合適的單細(xì)胞微生物來講,1 cfu即表示樣品中有一個活細(xì)胞,但對成團(tuán)或呈鏈狀、絲狀生長的微生物來說,則cfu并非一個活細(xì)胞。21、生長因子:通常指那些微生物生長所必需而且需要量很小,但微生物自身不能合成的或合成量不足以滿足機體生長需要的有機化合物。根據(jù)生長因子的化學(xué)結(jié)構(gòu)與它們在機體內(nèi)的生理功能不同,可以將生長因子分為維生素、氨基酸和嘌呤及嘧啶堿基三大類。22、正常菌群: 在正常人體與外界相通的部位,長期寄居的不同種類和不同數(shù)量的微生物。一般對人體無害,與機體相互制約相互依存,與機體保持動態(tài)平衡的關(guān)系。23、條件致病菌:人體的正常微生物菌群一旦進(jìn)入非正常聚居部位,或生態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生改
20、變而引起人類疾病的微生物。主要包括(1)由于機體的防衛(wèi)功能減弱2)由于正常菌群寄居部位的改變 ()不合理使用抗生素等。24、消毒:采用一種較溫和的理化因素,僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分有害的病原菌,而以被消毒的對象基本無害的措施。25、巴氏消毒法:用于啤酒、牛奶等不耐熱的食品德低溫消毒法。主要是消除不耐熱的無芽孢的病原體。有低溫維持法(63 min)和高溫瞬時法(s)五、簡答題1、科赫定律的內(nèi)容及其在科學(xué)研究中的指導(dǎo)意義。內(nèi)容:在患病的動物體內(nèi)總能發(fā)現(xiàn)特定微生物,而健康的動物體內(nèi)則沒有; 在動物體外可以純培養(yǎng)此微生物;將該培養(yǎng)物接種到易感動物體內(nèi)會引起同樣的疾?。粡脑囼瀯游锛皩嶒炇遗囵B(yǎng)物中重新分
21、離得到的微生物應(yīng)該是同種微生物。意義:鑒定一種微生物;確定一種新微生物種類。2、試述細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)與功能。細(xì)胞壁細(xì)胞壁的主要功能有:固定細(xì)胞外形和提高機械強度;為細(xì)胞的生長、分裂和鞭毛運動所必需。阻攔酶蛋白和某些抗生素等大分子物質(zhì).賦予細(xì)菌具有特定的抗原性、致病性以及對抗生素和噬菌體的敏感性。革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞壁含90%肽聚糖和10%磷壁酸。革蘭氏陽性菌肽聚糖厚,層數(shù)多,呈網(wǎng)格狀分子交織成的網(wǎng)套覆蓋在整個細(xì)胞上。肽聚糖分子是由肽與聚糖兩部分組成,其中的肽有四肽尾和肽橋兩種,聚糖則由N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸相互間隔連接而成,呈長鏈骨架狀。磷壁酸是結(jié)合在革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞壁上的一種酸性多糖
22、,主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。磷壁酸可分為壁磷壁酸和膜磷壁酸。革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁由肽聚糖和外膜。其肽聚糖薄 僅由12層,呈網(wǎng)狀分子,只形成較為疏稀、機械強度較差的肽聚糖網(wǎng)套沒有特殊的肽橋。外膜位于革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁外層,由脂多糖、磷脂和脂蛋白等若干種蛋白質(zhì)組成的膜。3、有關(guān)鞭毛運動的機制曾有過“旋轉(zhuǎn)論”和“揮鞭論”的爭議。1974年,美國學(xué)者M(jìn).Silverman和M.Simon曾通過“逆向思維”方式創(chuàng)造性地設(shè)計了一個巧妙的“拴菌”試驗,即設(shè)法把單毛菌鞭毛的游離端用相應(yīng)抗體牢固地“拴”在載玻片上,然后在光鏡下觀察該細(xì)胞的行為,結(jié)果發(fā)現(xiàn),該菌只能在載玻片上不斷打轉(zhuǎn)而未作伸縮“揮動”。從
23、該試驗所提供的事實,你認(rèn)為細(xì)菌是以何種方式運動的?該試驗的“逆向思維”逆在哪里?“拴菌”試驗指把單毛菌鞭毛的游離端用相應(yīng)抗體牢固地”拴”在載玻片上,然后在光鏡下觀察該細(xì)菌的運動,結(jié)果發(fā)現(xiàn),該菌只能在載玻片上不斷打轉(zhuǎn)而未作伸縮揮動,證明了細(xì)菌的運動是因為鞭毛旋轉(zhuǎn)的結(jié)果,而不是鞭毛“揮動”的結(jié)果。其創(chuàng)新思維在于“逆向思維“,通過固定鞭毛的游離端,使細(xì)菌細(xì)胞變成了指示鞭毛運動的指示物,進(jìn)而在光鏡下就可觀察鞭毛的作用機制。4、如何初步判斷并進(jìn)一步驗證某一細(xì)菌是否長有鞭毛?初步判斷可采用半固體瓊脂穿刺培養(yǎng)法和懸滴法(水封片法),進(jìn)一步驗證可采用暗視野顯微鏡法和鞭毛染色法。 1)半固體培養(yǎng)基穿刺接種法:將
24、欲檢查的細(xì)菌穿刺接種至牛肉膏蛋白胨半固體直立柱培養(yǎng)基中培養(yǎng),若細(xì)菌有運動能力,就會沿著穿刺線向四周擴散生長,使穿刺線變粗且周緣不整齊。無運動能力的細(xì)菌僅能沿穿刺線生長,穿刺線顯得纖細(xì)濃密和整齊。2)懸滴法:將菌液滴加在潔凈的蓋玻片中央,在其四周涂上凡士林,然后將它覆蓋在凹玻片上,使菌液對準(zhǔn)凹槽中央,直接觀察。此法快速、簡便。3)暗視野顯微鏡法:裝暗視野聚光器,調(diào)節(jié)光源,將1小滴香柏油滴于聚光器頭頸頂端平面上,再將樣品的水封片置于鏡臺上,使玻片的下表面與透鏡上的香柏油接觸,然后觀察。4)鞭毛染色法:染色前用媒染劑處理,讓其沉積在鞭毛上,使鞭毛直徑加粗,然后再進(jìn)行染色。常用染色方法有銀染色法、Le
25、ifson氏染色法、Bailey氏染色法等。5、試述劃線分離的操作方法。 1)取9ml無菌平板一套在火焰旁按無菌操作法倒人15-20ml營養(yǎng)瓊脂,讓其冷凝成平板。2)左手拿上述平板,右手拿接種環(huán)在火焰上滅菌后沾取原始分離物在平板上平行劃線三條。3)將接種環(huán)在火焰上滅菌,左手平板轉(zhuǎn)動大約70度,用滅菌接種環(huán)通過第一次劃線的地方作二次劃線,以此類推,重復(fù)操作多次。7、某微生物發(fā)酵廠的發(fā)酵液出現(xiàn)疑似噬菌體感染的異常情況,試設(shè)計簡便快速實驗證實之。在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基平板上涂布接種大腸桿菌,同時接種疑似噬菌體感染的發(fā)酵液(提前進(jìn)行適當(dāng)稀釋),培養(yǎng)后若出現(xiàn)噬菌斑,即證明該發(fā)酵液受到噬菌體感染。8、
26、何謂病毒?以噬菌體為例,試述病毒的增殖周期。病毒是超顯微的,沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的,具有以下特點:無細(xì)胞結(jié)構(gòu),專性活細(xì)胞內(nèi)寄生;沒有酶或酶系統(tǒng)極不完全,不能進(jìn)行代謝活動;個體極小,能通過細(xì)菌濾器;對抗生素不敏感,對干擾素敏感。它們在活細(xì)胞外具有一般化學(xué)大分子特征,一旦進(jìn)入宿主細(xì)胞又具有生命特征。病毒增殖周期五個階段1、吸附 吸附是病毒感染宿主細(xì)胞的前提,具有高度的專一性。在通常情況下,敏感細(xì)胞表面具有特異性表面接受部位,可與相應(yīng)的病毒結(jié)合。2、侵入 病毒侵入的方式 取決于宿主細(xì)胞的性質(zhì),尤其是它的表面結(jié)構(gòu)。一般來說有三種情況:整個病毒粒子進(jìn)入宿主細(xì)胞;核衣殼進(jìn)入宿主細(xì)胞;只有核酸進(jìn)入宿主細(xì)胞。3、生物
27、生物合成 包括核酸的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成。首先,噬菌體以其核酸中的遺傳信息向宿主細(xì)胞發(fā)出指令并提供“藍(lán)圖”,使宿主細(xì)胞的代謝系統(tǒng)按次序地逐一轉(zhuǎn)向合成噬菌體的組分和“部件”,合成所需“原料”可通過宿主細(xì)胞原有核酸等的降解、代謝庫內(nèi)的貯存物或從環(huán)境中取得。烈性噬菌體體的增殖方式按核酸類型的不同主要分成三類:即按早期、次早期和晚期基因的順序來進(jìn)行轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯和復(fù)制的雙鏈DNA噬菌體的增殖方式;按“滾環(huán)”模型復(fù)制單鏈DNA的增殖方式;按“花朵”模式復(fù)制A蛋白(成熟蛋白)、衣殼蛋白和復(fù)制酶蛋白的增殖方式。4、裝配 病毒核酸的復(fù)制與病毒蛋白質(zhì)的合成是分開進(jìn)行的,由分別合成好的核酸與蛋白質(zhì)組成完整的新的病毒粒子
28、的過程。5、釋放 成熟的病毒粒子從被感染細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到外界的過程稱為病毒釋放。病毒的釋放是多樣的,有的通過破裂,出芽作用或通過細(xì)胞之間的接觸而擴散。9、培養(yǎng)基中各營養(yǎng)要素的含量間一般遵循何種規(guī)律?其中的原因是什么?由于微生物細(xì)胞內(nèi)各種成分間的比例是穩(wěn)定的,因此,設(shè)計微生物培養(yǎng)基時,考慮微生物細(xì)胞組成元素的比例有重要的意義。培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,其中碳氮比(CN)的影響較大。在大多數(shù)化能異養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中,除水分外,碳源的含量最高,其次是氮源、大量元素和生長因子,它們之間大體上存在著10倍序列的遞減趨勢,即:要素:含量:H2O (1
29、0-1)C源+能源 (10-2)N源 (10-3 )K、Mg (10-5 )P、S(10-4 )生長因子(10-6 )10、試述革蘭氏染色的步驟及機理。革蘭氏染色的步驟: 結(jié)晶紫初染、碘液媒染、 95 乙醇脫色、紅色染料復(fù)染 4 步;革蘭氏染色的機制: 革蘭氏染色結(jié)果的差異主要基于細(xì)菌細(xì)胞壁的構(gòu)造和化學(xué)組分不同。通過初染和媒染,在細(xì)菌細(xì)胞膜或原生質(zhì)體上染上了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的大分子復(fù)合物。 G + 細(xì)菌由于細(xì)胞壁較厚、肽聚糖含量較高和交聯(lián)緊密,故用乙醇洗脫時,肽聚糖層網(wǎng)孔會因脫水而明顯收縮,再加上的 G + 細(xì)菌細(xì)胞壁基本上不含類脂,故乙醇處理不能在壁上溶出縫隙,因此,結(jié)晶紫與碘復(fù)合物仍牢
30、牢阻留在其細(xì)胞壁內(nèi),使其呈現(xiàn)藍(lán)紫色。 G - 細(xì)菌因其細(xì)胞壁薄、肽聚糖含量低和交聯(lián)松散,故遇乙醇后,肽聚糖層網(wǎng)孔不易收縮,加上它的類脂含量高,所以當(dāng)乙醇將類脂溶解后,在細(xì)胞壁上就會出現(xiàn)較大的縫,這樣結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物就極易被溶出細(xì)胞壁。因此,通過乙醇脫色,細(xì)胞又呈現(xiàn)無色。這時,再經(jīng)番紅等紅色染料復(fù)染,就使 G - 細(xì)菌獲得了新的顏色 紅色,而 G + 細(xì)菌則仍呈藍(lán)紫色(實為紫中帶紅)。11、什么是溶源菌?它有何特點?如何檢出溶源菌?在染色體組上整合有溫和噬菌體并能進(jìn)行正常生長繁殖的宿主稱為溶源菌。特點:能“收養(yǎng)”溫和噬菌體并能與其長期共存,通常不呈現(xiàn)對宿主細(xì)胞有害的影響;常以較低頻率(10-3
31、10-5)進(jìn)行自發(fā)裂解(能使位于宿主基因組上的整合態(tài)前噬菌體從染色體上解離出來),使前噬菌體由整合態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞內(nèi)的營養(yǎng)態(tài)(脫離宿主核基因組而處于積極復(fù)制、合成和裝配的狀態(tài));溶源菌對同種或關(guān)系密切與的噬菌體具有免疫性(免遭其再侵染指特性);溶源菌也會失去前噬菌體而復(fù)愈為正常菌株。檢測某一菌株是否屬于溶源菌,可利用溶源菌所攜帶的前噬菌體的低頻裂解性,與其相對應(yīng)敏感菌株以適當(dāng)比例混合,然后與瓊脂培養(yǎng)基混合后倒平板,經(jīng)培養(yǎng)后形成特殊菌落(中央有溶源菌的小菌落,四周有透明圈圍著)。 14、什么是細(xì)菌的生長曲線?生長曲線對微生物發(fā)酵生產(chǎn)有何指導(dǎo)意義?(B卷)細(xì)菌接種到適當(dāng)?shù)囊后w培養(yǎng)基后,以時間為橫坐標(biāo),以菌數(shù)為縱坐標(biāo),根據(jù)不同培養(yǎng)時
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