雙氯芬酸鈉鎮(zhèn)痛抗炎研究

1、前言： 雙氯芬酸鈉1為非甾體抗炎藥，是具有較強(qiáng)的抗炎、解熱和鎮(zhèn)痛功效的苯基乙酸衍生物，其鎮(zhèn)痛作用比阿司匹林和吲哚美辛強(qiáng)，約為阿司匹林的2650倍 2，系外周型鎮(zhèn)痛藥。阿司匹林為非甾體鎮(zhèn)痛抗炎藥3。主要是通過抑制前列腺素及其其他能使痛覺對機(jī)械性或化學(xué)性刺激敏感的物質(zhì)（如緩激肽、組胺）的合成，屬于外周性鎮(zhèn)痛藥4。但不能排除中樞鎮(zhèn)痛（可能作用于下視丘）的可能性。通過抑制前列腺素或其他能引起炎性反應(yīng)的物質(zhì)的合成而起抗炎作用。抑制溶酶體酶的釋放及白細(xì)胞趨化性等也可能與其有關(guān)。IC50 COX-2/IC50 COX-1 比值越小，不良反應(yīng)越少，阿司匹林該項(xiàng)比值為173，雙氯芬酸鈉僅為0.70。 摘要：研究

2、雙氯芬酸鈉片劑對鎮(zhèn)痛、抗炎動物模型的影響。采用熱刺激小鼠疼痛、醋酸致扭體、二甲苯致小鼠耳腫脹等實(shí)驗(yàn)方法研究雙氯芬酸鈉腸溶片的陣痛及抗炎作用。關(guān)鍵詞 雙氯芬酸鈉 阿司匹林 二甲苯 冰乙酸動物 健康昆明種小鼠 120只藥物 雙氯芬酸鈉腸溶片 阿司匹林泡騰片 0.6%醋酸（0.3g冰醋酸，加蒸餾水定容至50mL） 二甲苯 0.9%生理鹽水（稱取0.9克氯化鈉，溶解在少量蒸餾水中，稀釋到100毫升） 儀器 電子天平 打耳器 熱板儀 燒杯 一次性注射器 6號注射針頭 鑷子 組織剪 實(shí)驗(yàn)步驟1、鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)1.1雙氯芬酸鈉對冰醋酸致疼痛5的影響 1.1.1 選取健康小鼠40只，雌雄各半。1.1.2 將動物隨即

3、分為4個組，空白組、阿司匹林組(5mg/10g)、分別灌胃雙氯芬酸鈉實(shí)驗(yàn)組（0.05mg/10g、0.1mg/10g、1mg/10g），每組8只。各組給藥劑量 均為0. 1 mL/ 10 g，空白組灌胃生理鹽水。0.1mg/10g=0.001g/mL= 0.001g的藥物溶解到100mL水中。1.1.3 于藥后 45min后，每組腹腔注射0.2m/只0.6%冰醋酸，觀察給冰醋酸后15min內(nèi)小鼠發(fā)生扭體現(xiàn)象的次數(shù)，比較組間差異。1.1.4 將給藥組與對照組相比，以給藥后扭體次數(shù)減少50% 為有效鎮(zhèn)痛作用指標(biāo), 計算藥物對扭體反應(yīng)的抑制率。抑制率= 對照組平均扭體次數(shù)- 給藥組平均扭體次數(shù)) 對

4、照組平均扭體次數(shù)× 抑制率= ( 對照組平均扭體次數(shù)- 給藥組平均扭體次數(shù)) / 對照組平均扭體次數(shù)× 100% 組別 劑量(mg/10g) 數(shù)量 (只) 15min內(nèi)扭體次數(shù) 雙氯芬酸鈉低劑量組 0.05 8 雙氯芬酸鈉中劑量組 0.1 8 雙氯芬酸鈉高劑量組 1 8 阿司匹林組 5 8 空白對照組 0.9 81.2 熱板法6測雙氯芬酸鈉對疼痛的影響1.1.1 動物篩選 將熱板儀調(diào)至55±0.5，將小鼠置于熱板上，密切觀察小鼠反應(yīng)，以舔后足為痛覺敏感指標(biāo)。秒表記錄從置于熱板上到舔后后足的時間，共兩次，每次間隔5min,取其為該鼠的痛閾值，用此法篩選痛閾值在30s

5、 以內(nèi)的小鼠供實(shí)驗(yàn)用。 1.1.2 藥物實(shí)驗(yàn) （1）取篩選出的小鼠40 只，稱重，隨機(jī)分成五組：阿司匹林組，空白對照組，雙氯芬酸鈉高、中、低劑量實(shí)驗(yàn)組，并編號標(biāo)記。 （2）小鼠分別腹腔注射雙氯芬酸鈉溶液 0.1ml/10g,（0.05mg/10g 0.1mg/10g 1mg/10g） 和空白對照組小鼠腹腔注射同等劑量的生理鹽水0.1ml/10g。陽性對照組阿司匹林同上 （3）給藥后15min、30min、45min 60min 依次測定各鼠痛閾值，如小鼠在 60s 內(nèi)仍無產(chǎn)生疼痛反應(yīng)，應(yīng)立即取出不再刺激，按60s 計算。1.1.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果處理 (1) 將給藥前后小鼠平均痛閾值及痛閾改變百分率填

6、入表中（熱板法測定藥物鎮(zhèn)痛作用實(shí)驗(yàn)記錄） 組別 給藥前平均痛閾值 給藥后平均痛閾值 痛閾改變百分率（%） 15min 30min 45min 60min 15min 30min 45min 60min 生理鹽水雙氯芬酸鈉高劑量組雙氯芬酸鈉中劑量組雙氯芬酸鈉低劑量組阿司匹林組注：痛閾改變百分率=(用藥后平均痛閾值用藥前平均痛閾值)/用藥前平均痛閾值 （2）根據(jù)全實(shí)驗(yàn)室結(jié)果，以痛閾改變百分率為縱坐標(biāo)，時間為橫坐標(biāo)，畫出時效曲線，比較阿司匹林的鎮(zhèn)痛強(qiáng)度、作用開始時間及維持時間?！咀⒁馐马?xiàng)】 1 不同個體對熱板刺激反應(yīng)有不同表現(xiàn)，多數(shù)為舔足；有些動物反應(yīng)為跳躍而 不舔足。舔足反應(yīng)為保護(hù)反應(yīng)，而跳躍則為

7、逃避反應(yīng)，故實(shí)驗(yàn)中宜只選其一為指 標(biāo)。實(shí)驗(yàn)前動物應(yīng)先篩選，正常痛域值30 s ，10 s 以及喜跳躍小鼠應(yīng)棄用。 2 熱板法應(yīng)選用雌性小鼠，雄性小鼠遇熱時陰囊松弛下垂，與熱板接觸影響實(shí) 驗(yàn)結(jié)果。 3 動物體重對結(jié)果有影響，小鼠的體重以20g 左右為宜。 4 室溫以18左右為宜，此溫度小鼠對痛刺激的反應(yīng)較穩(wěn)定。 5 測痛閾時若60 s 無反應(yīng)立即取出，以免燙傷足部，其痛閾值按60 s 計2、抗炎實(shí)驗(yàn)2.1雙氯芬酸鈉對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響 2.1.1取小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分成五組，每組8只。分為空白對照組（.氯化鈉注射液組）；實(shí)驗(yàn)組（雙氯芬酸鈉組0.05mg/10g、0.1mg/10

8、g、1mg/10g）.；陽性對照組（阿司匹林組5mg/10g）。2.1.2各組小鼠于右耳前后涂以二甲苯0.1只，以左耳作對照。0.5h時間后，按上述給藥劑量灌胃給藥，給藥量0.1ml/10g.2.1.3.后頸椎脫臼處死小鼠，沿耳廓基線剪下雙耳，將A4紙墊于桌面,以直徑打孔器于兩耳相同部位沖出耳片，電子天平稱量，以兩耳質(zhì)量差為腫脹度，并比較各組差異。組別 動物數(shù)（n） 耳腫脹度(g) 腫脹率（%）雙氯芬酸鈉低劑量組 雙氯芬酸鈉中劑量組雙氯芬酸鈉高劑量組阿司匹林組生理鹽水組參考文獻(xiàn)：1 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部，p.60 2USAMA H.RAMAD

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