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文檔簡(jiǎn)介

1、【一、 基因工程】一、一、DNADNA重組所需的三種工具:重組所需的三種工具:1 1、限制性內(nèi)切酶、限制性內(nèi)切酶“手術(shù)刀手術(shù)刀” 作用:切割磷酸二酯鍵作用:切割磷酸二酯鍵 EcoREcoR產(chǎn)生粘性末端產(chǎn)生粘性末端 SmaSma產(chǎn)生平末端產(chǎn)生平末端2 2、DNADNA連接酶連接酶“分子縫合針?lè)肿涌p合針” 作用:鏈接磷酸二酯鍵作用:鏈接磷酸二酯鍵 EcoliDNAEcoliDNA連接酶連接酶連接粘性末端連接粘性末端 T T4 4DNADNA連接酶連接酶連接平末端或粘性末端連接平末端或粘性末端3 3、載體、載體“分子運(yùn)輸車分子運(yùn)輸車” 條件:有一個(gè)或者多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)條件:有一個(gè)或者多個(gè)限制酶切割

2、位點(diǎn) 能自我復(fù)制能自我復(fù)制 有特殊的標(biāo)記基因有特殊的標(biāo)記基因 (常用質(zhì)粒作為載體)(常用質(zhì)粒作為載體) 二、二、基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序1 1、目的基因的獲取目的基因的獲?。? 1)從基因文庫(kù)獲取)從基因文庫(kù)獲取種類:種類:基因組文庫(kù):基因組文庫(kù):部分基因文庫(kù):部分基因文庫(kù):( (如如cDNAcDNA文庫(kù)文庫(kù)) )含有一種生物的含有一種生物的全部全部基因基因含有一種生物的含有一種生物的部分部分基因基因(2 2)利用利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因(3 3)人工合成人工合成比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目DNADNA復(fù)制復(fù)制PCRPCR技術(shù)技術(shù)區(qū)區(qū)別別解旋解旋方式方式解旋酶催

3、化解旋酶催化DNADNA在高溫下變性解旋在高溫下變性解旋場(chǎng)所場(chǎng)所細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi)( (主要在細(xì)胞核內(nèi)主要在細(xì)胞核內(nèi)) )細(xì)胞外細(xì)胞外( (主要在主要在PCRPCR擴(kuò)增儀擴(kuò)增儀中中) )酶酶解旋酶、解旋酶、DNADNA聚合酶聚合酶耐熱的耐熱的DNADNA聚合酶聚合酶溫度溫度細(xì)胞內(nèi)溫和條件細(xì)胞內(nèi)溫和條件控制溫度,需控制溫度,需90 90 95 95 高溫高溫結(jié)果結(jié)果合成合成DNADNA分子分子合成合成DNADNA片段或基因片段或基因聯(lián)系聯(lián)系(1)(1)模板:均需要脫氧核苷酸雙鏈作為模板模板:均需要脫氧核苷酸雙鏈作為模板(2)(2)原料:均為四種脫氧核苷酸原料:均為四種脫氧核苷酸(3)(3)酶:均需酶:

4、均需DNADNA聚合酶聚合酶(4)(4)引物:都需要引物,使引物:都需要引物,使DNADNA聚合酶從引物的聚合酶從引物的33端開(kāi)始連端開(kāi)始連接脫氧核苷酸接脫氧核苷酸PCRPCR技術(shù)與技術(shù)與DNADNA復(fù)制的比較復(fù)制的比較質(zhì)粒質(zhì)粒DNADNA分子分子限制酶處理限制酶處理一個(gè)切口一個(gè)切口兩個(gè)黏性末端兩個(gè)黏性末端兩個(gè)切口兩個(gè)切口獲得目的基因獲得目的基因DNADNA連接酶連接酶重組重組DNADNA分子(重組質(zhì)粒)分子(重組質(zhì)粒) 核心核心2 2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程過(guò)程:: :組成:必須有啟動(dòng)子、組成:必須有啟動(dòng)子、目的基因目的基因、終止子以及標(biāo)記基、終止子以及標(biāo)記基因等。因等。方

5、法方法導(dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞導(dǎo)入微生物細(xì)胞導(dǎo)入微生物細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法基因槍法(單子葉)(單子葉)花粉管通道法花粉管通道法顯微注射法顯微注射法 感受態(tài)細(xì)胞吸收感受態(tài)細(xì)胞吸收DNADNA分子分子( Ca2+法)法)3 3、將將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4 4、目的基因的檢測(cè)與鑒定目的基因的檢測(cè)與鑒定檢查是否成功檢查是否成功檢測(cè)檢測(cè)鑒定鑒定檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA DNA 上是否插入了目的基因上是否插入了目的基因檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNAmRNA檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)檢測(cè)目的基因

6、是否翻譯成蛋白質(zhì)個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定,如個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定,如抗蟲(chóng)鑒定、抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等抗病鑒定、活性鑒定等方法方法方法方法方法方法 抗原抗原- -抗體雜交抗體雜交三、基因工程的應(yīng)用三、基因工程的應(yīng)用(1 1)植物方面)植物方面1 1、抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物、抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物2 2、抗病轉(zhuǎn)基因植物、抗病轉(zhuǎn)基因植物3 3、抗逆轉(zhuǎn)基因植物、抗逆轉(zhuǎn)基因植物4 4、改良植物品質(zhì)、改良植物品質(zhì)(2 2)動(dòng)物方面)動(dòng)物方面1 1、提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度、提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度2 2、改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)、改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)3 3、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物4 4、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體、用轉(zhuǎn)基因

7、動(dòng)物作器官移植的供體(3 3)基因治療:)基因治療:將外源基因通過(guò)基因轉(zhuǎn)移技術(shù)將其插將外源基因通過(guò)基因轉(zhuǎn)移技術(shù)將其插入病人的適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞中,使外源基因制造的產(chǎn)物入病人的適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞中,使外源基因制造的產(chǎn)物能治療某種疾病能治療某種疾病。(只是改變體細(xì)胞的基因,生殖細(xì)。(只是改變體細(xì)胞的基因,生殖細(xì)胞未改變,后代可能還會(huì)患病。)胞未改變,后代可能還會(huì)患病。)1 1、 在基因工程中,把選出的目的基因(共在基因工程中,把選出的目的基因(共10001000個(gè)脫個(gè)脫氧核苷酸對(duì),其中腺嘌嶺脫氧核苷酸是氧核苷酸對(duì),其中腺嘌嶺脫氧核苷酸是460460個(gè))放入個(gè))放入DNADNA擴(kuò)增儀中擴(kuò)增擴(kuò)增儀中擴(kuò)增4 4

8、代,那么,在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧代,那么,在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)是(啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)是( )個(gè))個(gè)A. 540 B. 8100 C. 17280 D. 75602 2、在判斷抗蟲(chóng)基因是否成功轉(zhuǎn)入棉花基因組的方法中,在判斷抗蟲(chóng)基因是否成功轉(zhuǎn)入棉花基因組的方法中,不屬于分子檢測(cè)的是不屬于分子檢測(cè)的是( () )。A A通過(guò)觀察害蟲(chóng)吃棉葉是否死亡通過(guò)觀察害蟲(chóng)吃棉葉是否死亡B B檢測(cè)目的基因片段與檢測(cè)目的基因片段與DNADNA探針能否形成雜交帶探針能否形成雜交帶C C檢測(cè)目的基因轉(zhuǎn)錄形成的檢測(cè)目的基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNAmRNA與與DNADNA探針能否形成雜探針能否形成雜交帶交帶D D檢

9、測(cè)目的基因表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)能否與特定抗體形成雜檢測(cè)目的基因表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)能否與特定抗體形成雜交帶交帶3 3、哪項(xiàng)不是基因表達(dá)載體的組成部分哪項(xiàng)不是基因表達(dá)載體的組成部分( )( ) A.A.啟動(dòng)子啟動(dòng)子 B.B.終止密碼終止密碼 C.C.標(biāo)記基因標(biāo)記基因 D.D.目的基因目的基因4 4、(2008,(2008,全國(guó)高考全國(guó)高考) )已知某種限制酶在一線性已知某種限制酶在一線性DNADNA分子上有分子上有3 3個(gè)酶切位點(diǎn)。如果該線性個(gè)酶切位點(diǎn)。如果該線性DNADNA分子在分子在3 3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶?jìng)€(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷,則會(huì)產(chǎn)生切斷,則會(huì)產(chǎn)生a a、b b、c c、d d四種不同長(zhǎng)度的四種

10、不同長(zhǎng)度的DNADNA片段。現(xiàn)有片段?,F(xiàn)有多個(gè)上述線性多個(gè)上述線性DNADNA分子,若在每個(gè)分子,若在每個(gè)DNADNA分子上至少有分子上至少有1 1個(gè)酶切個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷,則從理論上講,經(jīng)該酶酶切后,這些線性位點(diǎn)被該酶切斷,則從理論上講,經(jīng)該酶酶切后,這些線性DNADNA分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的DNADNA片段種數(shù)是片段種數(shù)是 ( )【二、蛋白質(zhì)工程二、蛋白質(zhì)工程】1 1、蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì):定向改造或生產(chǎn)人類所、蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì):定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)。需的蛋白質(zhì)。2 2、結(jié)果:可以生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)、結(jié)果:可以生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)3 3、操作對(duì)象:基

11、因結(jié)構(gòu)、操作對(duì)象:基因結(jié)構(gòu)4 4、過(guò)程:先、過(guò)程:先,后順中心法則。,后順中心法則。預(yù)期的蛋白質(zhì)功能預(yù)期的蛋白質(zhì)功能設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)序列(基因)【三、細(xì)胞工程三、細(xì)胞工程】1 1、細(xì)胞全能性:已經(jīng)分化的、細(xì)胞全能性:已經(jīng)分化的細(xì)胞細(xì)胞仍仍具有具有發(fā)發(fā)育育成成完完整個(gè)體的潛能整個(gè)體的潛能。原因:生物的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種原因:生物的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所特有所特有的的全套遺傳物質(zhì)全套遺傳物質(zhì)。2 2、全能性大?。菏芫焉臣?xì)胞體細(xì)胞全能性大小:受精卵生殖細(xì)胞體細(xì)胞植物細(xì)胞植

12、物細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞分化程度低分化程度低 分化程度高分化程度高細(xì)胞分裂能力強(qiáng)細(xì)胞分裂能力強(qiáng) 細(xì)胞分裂能力弱細(xì)胞分裂能力弱幼嫩的細(xì)胞幼嫩的細(xì)胞 衰老的細(xì)胞衰老的細(xì)胞 3 3、植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)(1 1)培養(yǎng)基:)培養(yǎng)基: 水水 無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽 有機(jī)小分子有機(jī)小分子:糖:糖、氨基酸等、氨基酸等 激素激素:生長(zhǎng)素,:生長(zhǎng)素,細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素 瓊脂瓊脂:起支持:起支持作用作用還需提供適宜的條件(如無(wú)菌環(huán)境和適宜溫度)還需提供適宜的條件(如無(wú)菌環(huán)境和適宜溫度)(2 2)過(guò)程)過(guò)程:離體細(xì)胞、組織、器官離體細(xì)胞、組織、器官 脫分化(無(wú)光)脫分化(無(wú)光)再分化(有光)再分化(有光)愈傷組織愈傷組

13、織 胚狀體或叢芽胚狀體或叢芽 試管苗試管苗愈傷組織特點(diǎn):細(xì)胞排列疏松、高度液泡化、細(xì)胞壁愈傷組織特點(diǎn):細(xì)胞排列疏松、高度液泡化、細(xì)胞壁薄、呈無(wú)定形狀態(tài)薄、呈無(wú)定形狀態(tài)注意:取材注意:取材須取形成層,須取形成層,生長(zhǎng)素和細(xì)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的胞分裂素的比例。比例。(二)(二)植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交意義:克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙、培育新品種意義:克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙、培育新品種胚胚 狀狀 體體胚胚薄膜薄膜種皮種皮培養(yǎng)基培養(yǎng)基胚乳胚乳應(yīng)用:應(yīng)用:(1 1)微型繁殖)微型繁殖(2 2)作物脫毒)作物脫毒(3 3)人工種子)人工種子(4 4)單倍體育種)單倍體育種(5 5)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)

14、)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)二、動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物 的組織、器官的組織、器官細(xì)胞懸浮液細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶胰蛋白酶(分解彈性纖維)(分解彈性纖維)細(xì)胞株細(xì)胞株細(xì)胞系細(xì)胞系遺傳物遺傳物質(zhì)未改質(zhì)未改變變遺傳物質(zhì)改遺傳物質(zhì)改變,無(wú)限增變,無(wú)限增殖殖原代原代細(xì)胞細(xì)胞1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 的條件的條件(1)無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境(2)營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)(3)溫度和溫度和pH(4)氣體環(huán)境氣體環(huán)境2、植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較項(xiàng)目原理培養(yǎng)基結(jié)果培養(yǎng)目的植 物 動(dòng) 物蔗糖葡萄糖多莉羊的培育過(guò)程卵細(xì)胞C母綿羊子宮母綿羊母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)

15、胞核移植胚胎移植早期胚胎多莉羊分娩卵裂融合后的卵細(xì)胞細(xì)胞拆合技術(shù)妊娠3 3、4 4、克隆技術(shù)克隆技術(shù)1 1、概念:、概念:是指從一個(gè)共同的祖先,通過(guò)無(wú)性繁殖是指從一個(gè)共同的祖先,通過(guò)無(wú)性繁殖的方法產(chǎn)生出來(lái)的一群遺傳特性相同的的方法產(chǎn)生出來(lái)的一群遺傳特性相同的DNADNA分子、分子、細(xì)胞或個(gè)體,是一種人工誘導(dǎo)的無(wú)性繁殖方式細(xì)胞或個(gè)體,是一種人工誘導(dǎo)的無(wú)性繁殖方式。分子水平克隆:分子水平克?。篜CRPCR技術(shù)技術(shù)細(xì)胞水平克隆:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(單克隆抗體)細(xì)胞水平克?。簞?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(單克隆抗體)個(gè)體水平克?。嚎寺⊙蚨嗬麄€(gè)體水平克?。嚎寺⊙蚨嗬? 2、哺乳動(dòng)物核移植:胚胎細(xì)胞移植、體細(xì)胞移植、哺乳動(dòng)物核

16、移植:胚胎細(xì)胞移植、體細(xì)胞移植 5、動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞細(xì)胞A細(xì)胞細(xì)胞B雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞滅活的病毒滅活的病毒物理法物理法(電擊)(電擊)化學(xué)法化學(xué)法(聚乙二醇)(聚乙二醇)仙臺(tái)病毒仙臺(tái)病毒皰疹病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒新城雞瘟病毒過(guò)程:過(guò)程:6、單克隆抗體單克隆抗體(1)概念:)概念:由單個(gè)由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖(克?。?,形成基因型相同的細(xì)胞群,殖(克?。纬苫蛐拖嗤募?xì)胞群,這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。 (2)特點(diǎn):特點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高特異性強(qiáng)、靈敏度高,可大

17、量制備,可大量制備 (3)單克隆抗體制備過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程 注射抗原注射抗原B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔單克隆抗體單克隆抗體5 5、植物植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞工程中所用技術(shù)與原理不體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞工程中所用技術(shù)與原理不相符的相符的是是 ( ) A A纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理酶的專酶的專一性一性 B B植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物

18、組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性 C C原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合生物膜的流動(dòng)性生物膜的流動(dòng)性 D D紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)細(xì)胞分裂細(xì)胞分裂6 6、下列下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是(是( )A A培養(yǎng)中的人效應(yīng)培養(yǎng)中的人效應(yīng)T T細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體B B培養(yǎng)中的人培養(yǎng)中的人B B細(xì)胞能夠無(wú)限地增殖細(xì)胞能夠無(wú)限地增殖C C人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)能形成細(xì)胞株人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)能形成細(xì)胞株D D用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)

19、肝細(xì)胞7 7、(多選)下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用(多選)下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中的敘述中,正確的,正確的是是 ( )A AB B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合,一般不需淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合,一般不需要滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)要滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)B B融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖,又融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生單克隆抗體能產(chǎn)生單克隆抗體C C體外培養(yǎng)時(shí),一個(gè)效應(yīng)體外培養(yǎng)時(shí),一個(gè)效應(yīng)B B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體,但不能無(wú)限增殖抗體,但不能無(wú)限增殖D D單克隆抗體與常規(guī)抗體相比,特異性強(qiáng),靈單克隆抗體與常規(guī)抗體相比,特異性強(qiáng),靈敏

20、度高,優(yōu)越性明顯敏度高,優(yōu)越性明顯精原細(xì)胞精原細(xì)胞有絲分裂有絲分裂初級(jí)精母細(xì)胞初級(jí)精母細(xì)胞次級(jí)精母細(xì)胞次級(jí)精母細(xì)胞精子細(xì)胞精子細(xì)胞精子精子M第一階段第一階段第二階段第二階段第三階段第三階段M1.精精子子發(fā)發(fā)生生的的過(guò)過(guò)程程多個(gè)精原細(xì)胞多個(gè)精原細(xì)胞染色體復(fù)制染色體復(fù)制變形變形!精原細(xì)胞經(jīng)過(guò)有絲精原細(xì)胞經(jīng)過(guò)有絲分裂產(chǎn)生多個(gè)初級(jí)分裂產(chǎn)生多個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞。精母細(xì)胞。初級(jí)精母細(xì)胞經(jīng)初級(jí)精母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成含減數(shù)分裂形成含有單倍染色體的有單倍染色體的精子細(xì)胞。精子細(xì)胞。細(xì)胞核細(xì)胞核 -高爾基體高爾基體 - -中心體中心體 -線粒體線粒體 -其他物質(zhì)其他物質(zhì)-頭部頭部頂體頂體尾尾原生質(zhì)滴原生質(zhì)滴線粒體鞘線

21、粒體鞘(能量)(能量)初情期初情期卵原細(xì)胞卵原細(xì)胞有絲分裂有絲分裂多個(gè)卵原細(xì)胞多個(gè)卵原細(xì)胞染色體復(fù)制染色體復(fù)制初級(jí)卵母細(xì)胞初級(jí)卵母細(xì)胞M第一極體第一極體次級(jí)卵母細(xì)胞次級(jí)卵母細(xì)胞兩個(gè)第二極體兩個(gè)第二極體第二極體第二極體卵子卵子退化消失退化消失M排卵前后排卵前后完成完成! !在受精在受精過(guò)程完過(guò)程完成成! !被卵泡細(xì)胞包圍被卵泡細(xì)胞包圍, ,形成卵泡形成卵泡2 2、卵子卵子的形成的形成過(guò)程過(guò)程:性別分化后性別分化后即精子必須即精子必須在在雌性動(dòng)物雌性動(dòng)物生殖道內(nèi)生殖道內(nèi)發(fā)發(fā)生相應(yīng)生理生相應(yīng)生理變化后,才變化后,才能獲得能獲得受精受精能力能力的現(xiàn)象。的現(xiàn)象。即卵子在即卵子在輸卵管內(nèi)輸卵管內(nèi)達(dá)到達(dá)到減

22、減數(shù)第二分裂中期(數(shù)第二分裂中期(MM)時(shí),才具備時(shí),才具備受精能力受精能力。包括包括精子穿越放射冠精子穿越放射冠和和透透明帶明帶,進(jìn)入,進(jìn)入卵黃膜卵黃膜,原核原核形成形成和和配子結(jié)合配子結(jié)合。3 3、受精受精4、受精過(guò)程的要點(diǎn)受精過(guò)程的要點(diǎn):1.1.精子在受精前必須精子在受精前必須。精子精子獲能獲能的地點(diǎn)是的地點(diǎn)是_。 2.2.在受精過(guò)程中在受精過(guò)程中, ,精子連續(xù)突破精子連續(xù)突破放射冠放射冠和和透明帶透明帶兩道障礙都是依靠精子的哪些部分兩道障礙都是依靠精子的哪些部分?_.?_.3.3.防止多個(gè)精子進(jìn)入卵中受精的兩道屏障分別是防止多個(gè)精子進(jìn)入卵中受精的兩道屏障分別是_和和_._.( (排他性

23、排他性!)!)4.4.卵子是在什么時(shí)候才徹底完成第二次減數(shù)分裂卵子是在什么時(shí)候才徹底完成第二次減數(shù)分裂的的?_.?_.透明帶反應(yīng)透明帶反應(yīng)卵黃膜的封閉作用卵黃膜的封閉作用頂體等頂體等雌性動(dòng)物的生殖道里雌性動(dòng)物的生殖道里受精時(shí)受精時(shí)5.5.受精受精作用作用完成完成的的標(biāo)志標(biāo)志是是_._.透明帶和卵黃膜之間出現(xiàn)兩個(gè)極體透明帶和卵黃膜之間出現(xiàn)兩個(gè)極體. .這兩個(gè)極體分別是這兩個(gè)極體分別是_第一、第二極體各一個(gè)第一、第二極體各一個(gè):最初發(fā)育在輸卵管進(jìn)行有絲分裂。最初發(fā)育在輸卵管進(jìn)行有絲分裂。:在透明帶內(nèi)進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞數(shù)量不在透明帶內(nèi)進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞數(shù)量不斷增加,但胚胎總體積并不增加,或略有減少。

24、斷增加,但胚胎總體積并不增加,或略有減少。:由具有由具有全能性細(xì)胞全能性細(xì)胞構(gòu)成,細(xì)胞數(shù)在構(gòu)成,細(xì)胞數(shù)在32 32 個(gè)個(gè)左右,排列緊密,形似桑椹。左右,排列緊密,形似桑椹。(內(nèi)含囊胚腔):(內(nèi)含囊胚腔):開(kāi)始分化。開(kāi)始分化。 內(nèi)細(xì)胞團(tuán):發(fā)育成胎兒各組織內(nèi)細(xì)胞團(tuán):發(fā)育成胎兒各組織; ; 滋養(yǎng)層細(xì)胞:發(fā)育成胎膜和胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞:發(fā)育成胎膜和胎盤(pán)內(nèi)含原腸腔)內(nèi)含原腸腔)8 8、精子與卵子結(jié)合過(guò)程中穿越的兩道屏障是()精子與卵子結(jié)合過(guò)程中穿越的兩道屏障是() 頂體反應(yīng)頂體反應(yīng) 透明帶反應(yīng)透明帶反應(yīng) 卵黃膜封閉作用卵黃膜封閉作用 精子穿越放射冠精子穿越放射冠 A A B B C C D D 9 9、在受

25、精過(guò)程中在受精過(guò)程中 ()() 精子必須發(fā)生頂體反應(yīng),釋放頂體酶精子必須發(fā)生頂體反應(yīng),釋放頂體酶 頂體酶可使精子穿過(guò)放射冠、透明帶、卵細(xì)胞膜頂體酶可使精子穿過(guò)放射冠、透明帶、卵細(xì)胞膜 卵細(xì)胞恢復(fù)并很快完成了第一次成熟分裂卵細(xì)胞恢復(fù)并很快完成了第一次成熟分裂 精子和卵細(xì)胞的細(xì)胞核分別形成雄原核和雌原核精子和卵細(xì)胞的細(xì)胞核分別形成雄原核和雌原核 透明帶反應(yīng)防止了多精入卵和多精受精的發(fā)生透明帶反應(yīng)防止了多精入卵和多精受精的發(fā)生 A AB BC CD D6 6、體外受精體外受精(1 1)卵卵子的收集子的收集和培養(yǎng)和培養(yǎng)沖卵法沖卵法: :用用促性腺激素促性腺激素處理母畜處理母畜, ,促使促使其其超數(shù)排卵

26、超數(shù)排卵, ,并從其輸卵管里并從其輸卵管里沖取沖取卵子卵子, ,直接直接和獲能精子在和獲能精子在體外受精體外受精采集法采集法: : 從已被屠宰的母畜的卵巢里從已被屠宰的母畜的卵巢里采集采集卵母卵母細(xì)胞細(xì)胞, ,經(jīng)體外經(jīng)體外人工培人工培養(yǎng)養(yǎng)后后, ,再與獲能精子體外受精再與獲能精子體外受精(2 2)精子的精子的采采集和集和獲能獲能: 采集:采集:假陰道法假陰道法, ,手握法手握法和和電刺激電刺激等等。獲能:培養(yǎng)法、化學(xué)誘導(dǎo)法獲能:培養(yǎng)法、化學(xué)誘導(dǎo)法(3 3)受精:)受精:在在獲能溶液獲能溶液或或?qū)S玫氖芫芤簩S玫氖芫芤褐型曛型瓿墒芫^(guò)程成受精過(guò)程。7 7、胚胎的早期培養(yǎng)胚胎的早期培養(yǎng): :(

27、1 1)培養(yǎng)液的培養(yǎng)液的成分成分應(yīng)包括應(yīng)包括: :水、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、水、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動(dòng)物血清等核苷酸以及動(dòng)物血清等。試管牛試管牛的哪些階段是在的哪些階段是在試管試管中完成的中完成的? ? _. _.培育培育試管牛試管牛要利用哪些重要的生物技術(shù)要利用哪些重要的生物技術(shù)? ? _. _. 體外受精體外受精,早期胚胎發(fā)育早期胚胎發(fā)育( (如卵裂如卵裂) )體外受精體外受精,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),胚胎移植胚胎移植8 8、胚胎工程的應(yīng)用前景、胚胎工程的應(yīng)用前景(一一)胚胎工程技術(shù)包括哪些胚胎工程技術(shù)包括哪些? 1.體外受精體外受精 2.胚胎

28、移植胚胎移植 3.胚胎分割胚胎分割 4體外生產(chǎn)胚胎技術(shù)體外生產(chǎn)胚胎技術(shù) 5.胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)( (二二) )目前應(yīng)用較多的是哪些目前應(yīng)用較多的是哪些? ? 胚胎移植、胚胎分割、體外生產(chǎn)胚胎技術(shù)。胚胎移植、胚胎分割、體外生產(chǎn)胚胎技術(shù)。(1 1)胚胎移植胚胎移植 概念概念: :將雌性動(dòng)物體內(nèi)的將雌性動(dòng)物體內(nèi)的早期胚胎早期胚胎( (或者或者通過(guò)其他方式得到的胚胎通過(guò)其他方式得到的胚胎) ), ,移植到移植到同種的、同種的、生理狀態(tài)相同生理狀態(tài)相同的的其他其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)雌性動(dòng)物的體內(nèi), ,使之發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。使之發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。胚胎移植的基本程序胚胎移植的基本程序: :(1 1

29、)供體、受體的選擇和處理)供體、受體的選擇和處理(2 2)配種或進(jìn)行人工受精)配種或進(jìn)行人工受精(3 3)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存(4 4)胚胎移植)胚胎移植(手術(shù)法、非手術(shù)法)(手術(shù)法、非手術(shù)法)(5 5)移植后的檢查)移植后的檢查選擇選擇供體母牛供體母牛( (良種良種!) !)受體母牛受體母牛【同期發(fā)情處理同期發(fā)情處理】超數(shù)排卵超數(shù)排卵(!)(!)供體公牛供體公牛( (良種良種) )配種配種沖卵沖卵( (收集胚胎收集胚胎) )質(zhì)量檢查、培養(yǎng)質(zhì)量檢查、培養(yǎng)胚胎移植胚胎移植妊娠檢查妊娠檢查分娩(胚胎移植的犢牛)分娩(胚胎移植的犢牛)胚胎移植的胚胎移植的基本程序

30、基本程序( (以牛為例以牛為例):):1)1)加速加速育種工作和品種改良;育種工作和品種改良; 2)2)可以可以充分發(fā)揮充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力, ,縮短繁殖周期縮短繁殖周期, ,增加其一生中繁殖的后代增加其一生中繁殖的后代數(shù)量數(shù)量。3)3)大量大量節(jié)省節(jié)省購(gòu)買種畜的費(fèi)用;購(gòu)買種畜的費(fèi)用;4)4)一一胎胎多多產(chǎn);產(chǎn);5)5)保存保存品種資源和瀕危物種;品種資源和瀕危物種;胚胎移植的現(xiàn)狀和意義胚胎移植的現(xiàn)狀和意義:(2 2)胚胎分割)胚胎分割(無(wú)性繁殖、克隆)(無(wú)性繁殖、克隆)概念概念: :采用顯微手術(shù)(機(jī)械方法)的方法將采用顯微手術(shù)(機(jī)械方法)的方法將早早期胚胎期胚

31、胎分割成分割成2 2分胚分胚, ,4 4分胚或分胚或8 8分胚分胚, ,經(jīng)體內(nèi)或體經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng)后植入受體,以得到外培養(yǎng)后植入受體,以得到同卵雙胎同卵雙胎或或同卵多胎同卵多胎的技術(shù)。的技術(shù)。理論基礎(chǔ)理論基礎(chǔ): : 動(dòng)物胚胎細(xì)胞的動(dòng)物胚胎細(xì)胞的全能性全能性。 所以胚胎分割的時(shí)期為:所以胚胎分割的時(shí)期為:囊胚或桑椹胚囊胚或桑椹胚。注意:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)要均等分割。注意:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)要均等分割。(3)干細(xì)胞)干細(xì)胞概念:概念:是一種未充分分化,尚不成熟的細(xì)是一種未充分分化,尚不成熟的細(xì)胞,具有分裂、分化為各種組織、器官和人胞,具有分裂、分化為各種組織、器官和人體的潛在功能體的潛在功能。分類:分類:受精卵(具全

32、能性)受精卵(具全能性):胚胎干細(xì)胞(具全能性)胚胎干細(xì)胞(具全能性):(骨髓中的造血干細(xì)胞、神經(jīng)骨髓中的造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、皮膚干細(xì)胞、皮膚干細(xì)胞干細(xì)胞等,不能發(fā)育成個(gè)體。)等,不能發(fā)育成個(gè)體。):(只能產(chǎn)生一種細(xì)胞(只能產(chǎn)生一種細(xì)胞,如,如腸上腸上皮細(xì)胞)皮細(xì)胞)胚胎干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞:簡(jiǎn)稱:簡(jiǎn)稱ESES或或EKEK細(xì)胞細(xì)胞, ,是由是由早期早期胚胎胚胎( (卵裂、桑椹胚、囊胚期卵裂、桑椹胚、囊胚期) )或或原始性腺原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞,能分裂、分化成中分離出來(lái)的一類細(xì)胞,能分裂、分化成各種組織器官各種組織器官。用途:用途:1)1)治療人類的某些頑癥。治療人類的某些頑癥。 利用利

33、用ESES細(xì)胞可以誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞可以誘導(dǎo)分化形成新的組織 細(xì)細(xì)胞的特性,胞的特性,移植移植ESES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能以修復(fù)并恢復(fù)正常功能。2)培育出人造組織器官,用于器官移植。)培育出人造組織器官,用于器官移植。3)ES細(xì)胞也是研究體外細(xì)胞分化的理想材料細(xì)胞也是研究體外細(xì)胞分化的理想材料。1010、下列有關(guān)動(dòng)物胚胎移植的敘述中,下列有關(guān)動(dòng)物胚胎移植的敘述中,錯(cuò)誤的是(錯(cuò)誤的是( ) A.A.受孕母畜體內(nèi)的受精卵或胚胎均能受孕母畜體內(nèi)的受精卵或胚胎均能移植移植 B.B.受體母畜必須處于與供體母畜同步受體母畜必須處于與供體母畜同步發(fā)情

34、的狀態(tài)發(fā)情的狀態(tài) C.C.超數(shù)排卵技術(shù)要使用一定的激素超數(shù)排卵技術(shù)要使用一定的激素 D.D.試管嬰兒只是受精及早期卵裂過(guò)程試管嬰兒只是受精及早期卵裂過(guò)程在試管中進(jìn)行在試管中進(jìn)行11 11、下列對(duì)于優(yōu)良種畜的胚胎移植的說(shuō)下列對(duì)于優(yōu)良種畜的胚胎移植的說(shuō)法不正確的是(法不正確的是( ) A.A.供體母牛供體母牛必須是同一物種的良種必須是同一物種的良種 B.B.受體母牛必須是同一物種的良種受體母牛必須是同一物種的良種 C.C.供體公牛必須是同一物種的良種供體公牛必須是同一物種的良種 D.D.受體母??梢允峭晃锓N的一般健受體母??梢允峭晃锓N的一般健康??蹬?212、利用胚胎干細(xì)胞治療肝衰竭,實(shí)現(xiàn)此過(guò)

35、程的利用胚胎干細(xì)胞治療肝衰竭,實(shí)現(xiàn)此過(guò)程的重要原因是(重要原因是( )A.A.細(xì)胞分裂細(xì)胞分裂 B.B.細(xì)胞特化細(xì)胞特化C.C.細(xì)胞分化細(xì)胞分化 D.D.細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖1313、下列下列能正確表示高等動(dòng)物胚胎發(fā)育順序能正確表示高等動(dòng)物胚胎發(fā)育順序的是的是 ( )A A、受精卵、受精卵卵裂卵裂原腸胚原腸胚囊胚囊胚組織器官的組織器官的分化分化 B B、卵、卵卵裂卵裂原腸胚原腸胚組織器官分化組織器官分化C C、受精卵、受精卵囊胚囊胚原腸胚原腸胚幼體幼體D D、受精卵、受精卵桑椹胚桑椹胚囊胚囊胚原腸胚原腸胚組織器官組織器官的分化的分化(三)(三)生物生物技術(shù)技術(shù)的安全性的安全性和倫理問(wèn)題和倫理問(wèn)題1

36、 1、轉(zhuǎn)基因生物的安全性、轉(zhuǎn)基因生物的安全性(1 1)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性問(wèn)題轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性問(wèn)題 安全:滯后效應(yīng)、過(guò)敏原、營(yíng)養(yǎng)成分安全:滯后效應(yīng)、過(guò)敏原、營(yíng)養(yǎng)成分改變。改變。 安全:對(duì)生物多樣性的影響。安全:對(duì)生物多樣性的影響。 安全:對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響。安全:對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響。食物食物環(huán)境環(huán)境生物生物(2 2)轉(zhuǎn)基因生物存在安全性的原因轉(zhuǎn)基因生物存在安全性的原因目前對(duì)基因的結(jié)構(gòu)基因間的目前對(duì)基因的結(jié)構(gòu)基因間的 、基因、基因的的調(diào)控調(diào)控機(jī)制等都了解得相當(dāng)有限。機(jī)制等都了解得相當(dāng)有限。目的基因往往是目的基因往往是 的基因。的基因。外源基因插入宿主基因組的部位是外源基因插入宿主基因組的

37、部位是 的。的。相互作用相互作用異種生物異種生物隨機(jī)隨機(jī)2 2、生物技術(shù)中的倫理問(wèn)題生物技術(shù)中的倫理問(wèn)題(1):兩種不同觀點(diǎn),多數(shù)人持否定態(tài)度。:兩種不同觀點(diǎn),多數(shù)人持否定態(tài)度。 否定的理由:克隆人嚴(yán)重違反了人類倫理道德,是否定的理由:克隆人嚴(yán)重違反了人類倫理道德,是克隆技術(shù)的濫用;克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻、家庭和克隆技術(shù)的濫用;克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念;克隆人是在人為地兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念;克隆人是在人為地制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人等。制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人等。 肯定的理由:技術(shù)性問(wèn)題可以通過(guò)胚胎分級(jí)、肯定的理由:技術(shù)性問(wèn)題可以

38、通過(guò)胚胎分級(jí)、基因診基因診斷和染色體檢查等方法解決;不成熟的斷和染色體檢查等方法解決;不成熟的技術(shù)也只有通過(guò)實(shí)踐才能成熟。技術(shù)也只有通過(guò)實(shí)踐才能成熟。 中國(guó)政府的態(tài)度:中國(guó)政府的態(tài)度:(2)(2):兩種不同觀點(diǎn),多數(shù)人:兩種不同觀點(diǎn),多數(shù)人認(rèn)可認(rèn)可。 否定的理由:把試管嬰兒當(dāng)作人體零配件工廠,是對(duì)否定的理由:把試管嬰兒當(dāng)作人體零配件工廠,是對(duì)生命的不尊重;早期生命也有活下去的權(quán)利,拋棄或殺生命的不尊重;早期生命也有活下去的權(quán)利,拋棄或殺死多余胚胎,無(wú)異于死多余胚胎,無(wú)異于“謀殺謀殺”。 肯定的理由:解決了不育問(wèn)題;提供造血干細(xì)胞是救肯定的理由:解決了不育問(wèn)題;提供造血干細(xì)胞是救治患者最好、最快

39、捷的方法;提供臍帶血并不會(huì)對(duì)試管治患者最好、最快捷的方法;提供臍帶血并不會(huì)對(duì)試管嬰兒造成損傷。嬰兒造成損傷。(3)(3) 否定的理由:否定的理由:引起引起基因歧視,勢(shì)必造成遺傳性失業(yè)大基因歧視,勢(shì)必造成遺傳性失業(yè)大軍、造成個(gè)人婚姻困難、人際關(guān)系疏遠(yuǎn)等嚴(yán)重后果。軍、造成個(gè)人婚姻困難、人際關(guān)系疏遠(yuǎn)等嚴(yán)重后果。 肯定的理由:通過(guò)基因檢測(cè)可以及早采取預(yù)防措施,肯定的理由:通過(guò)基因檢測(cè)可以及早采取預(yù)防措施,適時(shí)進(jìn)行治療,達(dá)到挽救患者生命的目的;對(duì)于基因歧適時(shí)進(jìn)行治療,達(dá)到挽救患者生命的目的;對(duì)于基因歧視對(duì)象,通過(guò)正確的科學(xué)知識(shí)傳播、倫理道德教育和立視對(duì)象,通過(guò)正確的科學(xué)知識(shí)傳播、倫理道德教育和立法得以解決。法得以解決。3 3、禁止、禁止生物武器生物武器(1 1)生物武器的特點(diǎn)生物武器的特點(diǎn):致病力強(qiáng),傳染性大。致病力強(qiáng),傳染性大。有潛伏期。(有潛伏期。(潛伏期潛伏期的癥狀不明顯,難以及時(shí)發(fā)現(xiàn)的癥狀不明顯,難以及時(shí)發(fā)現(xiàn)。)污染面積大,危害時(shí)間長(zhǎng)。污染面積大,危害時(shí)間長(zhǎng)。傳染傳染途徑途徑(生物武器生物武器可通過(guò)多種途徑使人感染可通過(guò)多種途徑使人感染

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