(啟動(dòng)子)劉春保開題報(bào)告ppt20131103

1、C4、C5啟動(dòng)子的克隆及其表達(dá)啟動(dòng)子的克隆及其表達(dá)載體的構(gòu)建載體的構(gòu)建開題報(bào)告開題報(bào)告報(bào)告人 : 劉春保專業(yè)班級(jí): 農(nóng)學(xué)31001班指導(dǎo)老師: 鄒華文 副教授 陳茹梅 研究員報(bào)告時(shí)間：2013.11.03試驗(yàn)試驗(yàn)進(jìn)度與時(shí)間安排進(jìn)度與時(shí)間安排6題目來源題目來源1研究目的和意義研究目的和意義2國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢(shì)國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢(shì)3 4 研究?jī)?nèi)容研究?jī)?nèi)容、需要注意的問題及解決辦法需要注意的問題及解決辦法完成設(shè)計(jì)必須具備的工作條件完成設(shè)計(jì)必須具備的工作條件5 開題報(bào)告內(nèi)容開題報(bào)告內(nèi)容題目來源題目來源 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院轉(zhuǎn)基因玉米育種項(xiàng)目組研究的目的和意義 近年來，隨著分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，生物

2、近年來，隨著分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，生物技術(shù)的應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大，運(yùn)用基因工程育種技術(shù)的應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大，運(yùn)用基因工程育種便是其中重要的一項(xiàng)成果?；蚬こ逃N與傳便是其中重要的一項(xiàng)成果?；蚬こ逃N與傳統(tǒng)的有性雜交育種作用機(jī)理完全不同：在有性統(tǒng)的有性雜交育種作用機(jī)理完全不同：在有性繁殖領(lǐng)域，子代繼承的性狀很廣泛，即子代在繁殖領(lǐng)域，子代繼承的性狀很廣泛，即子代在繼承親代某一優(yōu)良性狀的同時(shí)可能也會(huì)繼承其繼承親代某一優(yōu)良性狀的同時(shí)可能也會(huì)繼承其不良的性狀，要得到某一優(yōu)良品種，就必須一不良的性狀，要得到某一優(yōu)良品種，就必須一代代進(jìn)行篩選?；蚬こ虖睦碚撋现v可以進(jìn)行代代進(jìn)行篩選?；蚬こ虖睦碚撋现v可以進(jìn)行基

3、因的定向改造，那個(gè)性狀不好就改造哪個(gè)性基因的定向改造，那個(gè)性狀不好就改造哪個(gè)性狀，而原有的良好性狀不受影響。狀，而原有的良好性狀不受影響。國(guó)內(nèi)外現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢(shì) 近年來，轉(zhuǎn)基因植物在全球的種植面積增長(zhǎng)迅近年來，轉(zhuǎn)基因植物在全球的種植面積增長(zhǎng)迅速，種植轉(zhuǎn)基因植物的國(guó)家至速，種植轉(zhuǎn)基因植物的國(guó)家至19991999年擴(kuò)大到年擴(kuò)大到1212個(gè)。個(gè)。全球轉(zhuǎn)基因植物的種植面積全球轉(zhuǎn)基因植物的種植面積19961996年僅為年僅為170170萬萬hm2hm2，19971997年為年為11001100萬萬hm2hm2，19981998年增長(zhǎng)到年增長(zhǎng)到27802780萬萬hm2hm2，19991999年又比年又比1

4、9981998年增長(zhǎng)年增長(zhǎng)44%44%，達(dá)到，達(dá)到39903990萬萬hm2hm2。19991999年全球轉(zhuǎn)基因植物種植面積中，美國(guó)就占年全球轉(zhuǎn)基因植物種植面積中，美國(guó)就占7272，達(dá)，達(dá)28702870萬萬hm2hm2；其次是阿根廷；其次是阿根廷670670萬萬hm2hm2；占；占1717；加；加拿大拿大400400萬萬hm2hm2，占，占1010；我國(guó)名列第；我國(guó)名列第4 4位，位，19991999年年種植面積達(dá)種植面積達(dá)3030萬萬hm2hm2，占，占1 1，其他國(guó)家的種植面積，其他國(guó)家的種植面積都小于都小于1 1。 實(shí)際上，轉(zhuǎn)基因技術(shù)應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)是大勢(shì)所趨，人類對(duì)實(shí)際上，轉(zhuǎn)基因技術(shù)應(yīng)

5、用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)是大勢(shì)所趨，人類對(duì)轉(zhuǎn)基因作物的接受只是一個(gè)時(shí)間問題而已，一些新的轉(zhuǎn)基轉(zhuǎn)基因作物的接受只是一個(gè)時(shí)間問題而已，一些新的轉(zhuǎn)基因玉米品種已經(jīng)出現(xiàn)或正在研究：因玉米品種已經(jīng)出現(xiàn)或正在研究： -低植酸玉米。由于傳統(tǒng)玉米存在不溶性植酸難以為動(dòng)低植酸玉米。由于傳統(tǒng)玉米存在不溶性植酸難以為動(dòng)物消化，而直接排除體外，這些排泄物有時(shí)會(huì)造成環(huán)境問物消化，而直接排除體外，這些排泄物有時(shí)會(huì)造成環(huán)境問題。如用低脂酸玉米制成的飼料喂養(yǎng)牲畜，它們的磷排除題。如用低脂酸玉米制成的飼料喂養(yǎng)牲畜，它們的磷排除量可減少一半，飼料中的鈣和蛋白質(zhì)也可更完全地被動(dòng)物量可減少一半，飼料中的鈣和蛋白質(zhì)也可更完全地被動(dòng)物吸收，從而可減

6、少造成污染問題的氮排泄物的數(shù)量。低植吸收，從而可減少造成污染問題的氮排泄物的數(shù)量。低植酸玉米在美國(guó)已經(jīng)商業(yè)化。酸玉米在美國(guó)已經(jīng)商業(yè)化。 -高植酸酶玉米。在飼料中添加植酸酶可使牲畜糞便中高植酸酶玉米。在飼料中添加植酸酶可使牲畜糞便中磷酸鹽含量少一半左右，進(jìn)而保護(hù)土壤。磷酸鹽含量少一半左右，進(jìn)而保護(hù)土壤。 研究?jī)?nèi)容研究?jī)?nèi)容、需要注意的問題及解決辦法需要注意的問題及解決辦法需要需要注意的問題及解決辦法注意的問題及解決辦法研究?jī)?nèi)容研究?jī)?nèi)容：將目的基因與表達(dá)載體分別用限制性內(nèi)切酶進(jìn)行雙切形成相同的粘性末端后將目的片段與表達(dá)載體連接。關(guān)鍵問題關(guān)鍵問題:在最后挑單克隆鑒定啟動(dòng)子是否構(gòu)建成功時(shí)會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性或微

7、型菌落。解決思路解決思路:對(duì)所挑取的單克隆進(jìn)行多種方式鑒定，如PCR鑒定、酶切鑒定或是瞬時(shí)轉(zhuǎn)化等。完成畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）所必須具備的工作條件 供試驗(yàn)材料供試驗(yàn)材料：玉米玉米B73B73、大腸桿菌、根癌農(nóng)桿菌、大腸桿菌、根癌農(nóng)桿菌EHA105EHA105和和pUM-3GpUM-3G質(zhì)粒、克隆載體質(zhì)粒、克隆載體pMD18-TpMD18-T、限、限制性內(nèi)切酶、制性內(nèi)切酶、TaqTaq酶、酶、T4T4連接酶連接酶 等。等。 試驗(yàn)工具：試驗(yàn)工具：微波爐微波爐 、電子天平、電子天平 、電熱恒溫水浴、電熱恒溫水浴鍋鍋 、PCRPCR儀儀 、電泳儀、電泳儀 、紫外凝膠成像儀等。、紫外凝膠成像儀等。 試驗(yàn)地點(diǎn)：試驗(yàn)地點(diǎn)：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所分析工具：分析工具：裝有裝有NTI等軟件的計(jì)算機(jī)等軟件的計(jì)算機(jī)。試驗(yàn)試驗(yàn)進(jìn)度與時(shí)間安排進(jìn)度與時(shí)間安排 2013.04.102013.05.06 2013.04.102013.05.06 查找文獻(xiàn)資料，查找文獻(xiàn)資料，確定試驗(yàn)方案以及試驗(yàn)預(yù)備工作確定試驗(yàn)方案以及試驗(yàn)預(yù)備工作2013.05.072013.07.15 2013.05.072013.07.15 試驗(yàn)階段試驗(yàn)階段