第五章中藥制劑中各類化學(xué)成分分析

1、pyh 第五章第五章 中藥制劑中各類化學(xué)成分分析中藥制劑中各類化學(xué)成分分析江西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系pyh第一節(jié)第一節(jié) 含生物堿類成分的分析含生物堿類成分的分析生物堿（生物堿（alkaloid）的概念的概念： 是一類是一類含含氮的堿性天然有機(jī)物氮的堿性天然有機(jī)物，大，大多數(shù)具有復(fù)雜的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，氮原子在環(huán)多數(shù)具有復(fù)雜的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，氮原子在環(huán)內(nèi)，大多數(shù)具有光學(xué)活性，又特殊而顯內(nèi)，大多數(shù)具有光學(xué)活性，又特殊而顯著的生理活性。著的生理活性。 pyh 二、生物堿的性質(zhì)二、生物堿的性質(zhì)： 1、性狀：性狀： 多為無色晶體（少數(shù)為無定型多為無色晶體（少數(shù)為無定型粉末，還有為液體味苦辛辣，有旋光，粉末，還有為液體味苦辛辣

2、，有旋光，與生理活性有關(guān)與生理活性有關(guān) 麻黃堿麻黃堿 揮發(fā)性揮發(fā)性 咖啡因咖啡因 升華性升華性 2、溶解性溶解性：大多極性較小，游離狀態(tài)下：大多極性較小，游離狀態(tài)下幾乎不溶于水，溶于氯仿、乙醚、丙酮幾乎不溶于水，溶于氯仿、乙醚、丙酮等有機(jī)溶劑；成鹽后水溶性增加。等有機(jī)溶劑；成鹽后水溶性增加。pyh 注意注意：a)酚性生物堿可溶于有機(jī)溶劑，也可溶于酚性生物堿可溶于有機(jī)溶劑，也可溶于堿水；堿水；b)小檗堿鹽酸鹽難溶于水；小檗堿鹽酸鹽難溶于水；c)季胺生物堿一般來說水溶性大；季胺生物堿一般來說水溶性大；pyh一、定性鑒別一、定性鑒別 中藥制劑成分復(fù)雜，注意各成分之間中藥制劑成分復(fù)雜，注意各成分之間的

3、相互干擾，進(jìn)行化學(xué)鑒別反應(yīng)時，先制的相互干擾，進(jìn)行化學(xué)鑒別反應(yīng)時，先制備供試品溶液，再提取分離生物堿成分后備供試品溶液，再提取分離生物堿成分后進(jìn)行。進(jìn)行。1、沉淀反應(yīng)：沉淀反應(yīng)： 注意假陽性注意假陽性 通常在通常在酸性水溶液酸性水溶液中進(jìn)行，形成的沉淀的顏色和形態(tài)因生物堿種類不同而不同pyh 2、色譜鑒別色譜鑒別：薄層色譜：薄層色譜： 常用吸附劑：硅膠常用吸附劑：硅膠G 氧化鋁氧化鋁 展開劑：氯仿、苯展開劑：氯仿、苯 固定相為硅膠固定相為硅膠 ，流動相常加氨水或二，流動相常加氨水或二 乙胺乙胺方法：樣品方法：樣品 堿化堿化 氯仿提取氯仿提取 濃縮濃縮 點(diǎn)樣點(diǎn)樣 展開展開 顯色顯色注意：板層上要

4、有注意：板層上要有 對照品對照品、對照藥材、陰對照藥材、陰性對照性對照pyh 紙色譜法：不常用紙色譜法：不常用高效液相色譜法：高效液相色譜法： 定性鑒別參數(shù)：定性鑒別參數(shù)：tR 樣品需經(jīng)預(yù)處理，使用預(yù)柱樣品需經(jīng)預(yù)處理，使用預(yù)柱氣相色譜法：氣相色譜法： 適用于具有揮發(fā)性且過熱不分解的生物堿適用于具有揮發(fā)性且過熱不分解的生物堿pyh二、含量測定二、含量測定 方法較多，有方法較多，有酸堿滴定法、沉淀酸堿滴定法、沉淀法、酸性染料比色法、雷氏鹽比色法、酸性染料比色法、雷氏鹽比色法法，還有分光光度法、薄層掃描法、分光光度法、薄層掃描法、高效液相色譜法、氣相色譜法高效液相色譜法、氣相色譜法等 pyh（一）總

5、生物堿的含量測定（一）總生物堿的含量測定經(jīng)典化學(xué)方法：經(jīng)典化學(xué)方法：1、重量法重量法：直接重量法：具揮發(fā)性或或受熱易分解或加堿易水解的樣品不適用。 方法：樣品 （堿化堿化） 有機(jī)溶劑提取 干燥 稱重pyh 特點(diǎn)特點(diǎn)：取樣量大，提取時易乳化、費(fèi)時：取樣量大，提取時易乳化、費(fèi)時沉淀重量法：沉淀重量法： 方法：樣品方法：樣品 （堿化）（堿化） 有機(jī)溶劑提取有機(jī)溶劑提取 蒸干蒸干 加酸溶解加酸溶解 沉淀試劑沉淀試劑 沉淀沉淀 洗滌洗滌 干燥干燥 稱重稱重 計算計算 含量含量 = 沉淀重量化學(xué)因子沉淀重量化學(xué)因子 / 樣品重量樣品重量特點(diǎn)特點(diǎn)：取樣量少，操作繁瑣費(fèi)時：取樣量少，操作繁瑣費(fèi)時pyh 2、容

6、量法容量法： 常用方法有：水溶液常用方法有：水溶液酸堿滴定法酸堿滴定法、雙相、雙相滴定法、絡(luò)合滴定法、沉淀容量法滴定法、絡(luò)合滴定法、沉淀容量法酸堿滴定法酸堿滴定法 （總生物堿的測定）（總生物堿的測定） 生物堿分子中含有氮原子具有一定堿性生物堿分子中含有氮原子具有一定堿性1) 直接法：直接法： 用酸滴定（游離生物堿溶于水或水用酸滴定（游離生物堿溶于水或水乙醇液）乙醇液） pyh 用強(qiáng)堿滴定（生物堿鹽溶于水或乙醇，用強(qiáng)堿滴定（生物堿鹽溶于水或乙醇， 弱堿強(qiáng)酸鹽顯酸性）弱堿強(qiáng)酸鹽顯酸性）2）間接法：加定量過量的酸溶液間接法：加定量過量的酸溶液 堿堿標(biāo)準(zhǔn)溶液回滴定標(biāo)準(zhǔn)溶液回滴定 終點(diǎn)指示：酸堿指示劑或

7、電位計終點(diǎn)指示：酸堿指示劑或電位計 堿性較弱的生物堿可用非水滴定法。堿性較弱的生物堿可用非水滴定法。pyh 光譜法光譜法 利用物質(zhì)對光所具的吸收性能而測利用物質(zhì)對光所具的吸收性能而測定其含量的一種方法。定其含量的一種方法。1、可見分光光度法（比色法）可見分光光度法（比色法）： 生物堿自身有顏色生物堿自身有顏色 與氧化劑產(chǎn)生顏色與氧化劑產(chǎn)生顏色 與其他試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色與其他試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色 直接比色測定常用于藥味少、干擾小的直接比色測定常用于藥味少、干擾小的中藥制劑中總生物堿的測定中藥制劑中總生物堿的測定pyh 酸性染料比色法酸性染料比色法： 在一定在一定PH條件下條件下BHIn 定量被有機(jī)溶劑

8、提取，在一定波長定量被有機(jī)溶劑提取，在一定波長處進(jìn)行測定處進(jìn)行測定 注意注意：水相：水相PH 有機(jī)染料的選擇有機(jī)染料的選擇 有機(jī)溶劑的選擇有機(jī)溶劑的選擇 有機(jī)相中防止混入有機(jī)相中防止混入水分水分BH + In BHIn+-pyh 雷氏鹽比色法雷氏鹽比色法 方法：生物堿方法：生物堿+雷氏鹽雷氏鹽 沉淀沉淀 溶于丙溶于丙酮酮 520526nm處測吸收值處測吸收值pyh（二）單體生物堿的含量測定法（二）單體生物堿的含量測定法HPLC ：可采用正相、反相、離子對色譜可采用正相、反相、離子對色譜 常用反相高效液相色譜法（常用反相高效液相色譜法（RP-HPLC）固定相：固定相：C18、 C8 ( C8柱較

9、好，硅醇基少）柱較好，硅醇基少）流動相：加掃尾劑流動相：加掃尾劑 三乙胺三乙胺、離子對試劑、離子對試劑、 季銨鹽季銨鹽（溴化四甲基胺）（溴化四甲基胺） 電解質(zhì)緩沖溶液電解質(zhì)緩沖溶液pyh目的目的：掩蔽生物堿的堿性基團(tuán)與固定：掩蔽生物堿的堿性基團(tuán)與固定相表面的硅醇基作用，使生物堿易于相表面的硅醇基作用，使生物堿易于出峰，且峰形好。出峰，且峰形好。 固定相也可用原型硅膠（吸附色固定相也可用原型硅膠（吸附色譜法）、陽離子交換樹脂譜法）、陽離子交換樹脂pyh TLC （TLC-S、TLC-UV） 分析前需用化學(xué)方法提取和純化分析前需用化學(xué)方法提取和純化 固定相固定相用堿液（用堿液（0.1-0.5mol

10、/LNaOH或或堿性緩沖溶液）代替水制作硅膠板層堿性緩沖溶液）代替水制作硅膠板層 流動相流動相氯仿為基本溶劑，加適量二乙氯仿為基本溶劑，加適量二乙 胺胺 展開缸展開缸內(nèi)放含氨水的小容器內(nèi)放含氨水的小容器GC 適用于有揮發(fā)性，遇熱不分解的生適用于有揮發(fā)性，遇熱不分解的生物堿，如：麻黃堿、苦參堿、顛茄類生物堿，如：麻黃堿、苦參堿、顛茄類生物堿物堿pyh第二節(jié)第二節(jié) 黃酮類制劑的分析黃酮類制劑的分析黃酮類化合物黃酮類化合物：具有兩個芳環(huán)（：具有兩個芳環(huán)（A與與B）通過三碳鏈相互聯(lián)結(jié)而成的一系列化合通過三碳鏈相互聯(lián)結(jié)而成的一系列化合物物,都稱為黃酮類化合物（都稱為黃酮類化合物（flavonoids ）

11、pyhpyh 7 7pyh910 黃酮類化合物黃酮類化合物是中藥中的一類有效成分，是中藥中的一類有效成分，具有抗菌消炎、擴(kuò)張冠狀動脈、降低血壓具有抗菌消炎、擴(kuò)張冠狀動脈、降低血壓止咳祛痰，降低膽固醇、抗腫瘤等作用止咳祛痰，降低膽固醇、抗腫瘤等作用所以，在中藥制劑中常作為所以，在中藥制劑中常作為藥效學(xué)指標(biāo)性藥效學(xué)指標(biāo)性成分成分進(jìn)行分析研究進(jìn)行分析研究pyh理化性質(zhì)物理性狀物理性狀：多為結(jié)晶性固體，少數(shù)為無：多為結(jié)晶性固體，少數(shù)為無定形粉末定形粉末 旋光旋光：苷元：苷元 二氫黃酮、二氫黃酮醇、黃二氫黃酮、二氫黃酮醇、黃 烷、黃烷醇有旋光性；烷、黃烷醇有旋光性； 苷有糖的苷有糖的 結(jié)構(gòu)，均有旋光性，

12、左旋結(jié)構(gòu)，均有旋光性，左旋 黃酮顏色黃酮顏色：與含交叉共軛系統(tǒng)、助色基：與含交叉共軛系統(tǒng)、助色基 團(tuán)的種類、數(shù)量、位置有關(guān)團(tuán)的種類、數(shù)量、位置有關(guān)pyh 溶解性：溶解性： 游離的苷元難熔或不溶于水，一般溶游離的苷元難熔或不溶于水，一般溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙醚等有機(jī)于甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙醚等有機(jī) 溶劑及稀堿液中。溶劑及稀堿液中。pyh一、定性鑒別一、定性鑒別在中藥制劑中要鑒別黃酮類成分，一般需在中藥制劑中要鑒別黃酮類成分，一般需經(jīng)適當(dāng)?shù)奶崛》?。?jīng)適當(dāng)?shù)奶崛》?。（一）（一）化學(xué)顯色反應(yīng)：化學(xué)顯色反應(yīng)： 1、還原反應(yīng)還原反應(yīng)：鹽酸鎂粉反應(yīng)是鑒別鹽酸鎂粉反應(yīng)是鑒別中藥制劑中黃酮類成分最常用的

13、方法。中藥制劑中黃酮類成分最常用的方法。 黃酮類成分 花色苷元及其二聚物方法：樣品 提取 取510ml 橙色或紅色還原還原甲醇或乙醇甲醇或乙醇或乙酸乙酯或乙酸乙酯鹽酸鹽酸鎂粉鎂粉pyh 2、與金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)：、與金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)：常用試劑：三氯化鋁、硝酸鋁、二氯氧鋯常用試劑：三氯化鋁、硝酸鋁、二氯氧鋯的醇溶液的醇溶液（產(chǎn)生黃綠色熒光產(chǎn)生黃綠色熒光）pyh（二）薄層色譜法：（二）薄層色譜法： 是中藥制劑中黃酮成分最常用的定性分是中藥制劑中黃酮成分最常用的定性分析方法析方法硅膠薄層色譜法硅膠薄層色譜法：分離弱極性化合物較好：分離弱極性化合物較好 遵循正相色譜層析的規(guī)律遵循正相色譜層析

14、的規(guī)律 RCH3 RH ROCH3 R-O-糖糖 ROH常用溶劑有甲苯甲酸甲酯甲酸（5:4:1）; 甲苯氯仿丙酮(40:25:35); 苯甲醇（95:5）等pyh 聚酰胺薄層色譜聚酰胺薄層色譜：用于分離含游離酚：用于分離含游離酚羥基的黃酮苷與苷元較好羥基的黃酮苷與苷元較好 原理原理：黃酮類成分中含黃酮類成分中含酚羥基酚羥基，與聚酰，與聚酰胺分子中胺分子中酰胺基酰胺基形成形成氫鍵氫鍵，由于各種黃酮，由于各種黃酮類成分取代基的性質(zhì)、多少和位置的不同，類成分取代基的性質(zhì)、多少和位置的不同，與聚酰胺與聚酰胺形成氫鍵的能力有所差別形成氫鍵的能力有所差別而得到而得到分離。分離。 展開劑：極性較強(qiáng)如含醇、酸

15、、水展開劑：極性較強(qiáng)如含醇、酸、水 點(diǎn)樣量：較?。ㄝd樣量?。c(diǎn)樣量：較小（載樣量?。〩PLC法法pyh 二、黃酮類成分的定量分析：二、黃酮類成分的定量分析： 方法主要有比色法、方法主要有比色法、UV、TLC、HPLC等等（一）（一）總黃酮含量測定總黃酮含量測定 1.紫外紫外 2.比色法比色法原藥材原藥材中黃酮類化合物分析中黃酮類化合物分析自身顏色自身顏色中藥制劑中藥制劑中黃酮類化合物分析中黃酮類化合物分析與鋁鹽反與鋁鹽反應(yīng)（應(yīng)（以蘆丁作為對照品以蘆丁作為對照品）3.HPLC: 銀杏葉總黃酮醇苷銀杏葉總黃酮醇苷pyh 薄層色譜薄層色譜 是中藥制劑中單體黃酮類成分的有效辦法。是中藥制劑中單體黃酮類

16、成分的有效辦法。樣品樣品 有機(jī)溶劑提取有機(jī)溶劑提取 層析層析 TLCS或刮下色斑或刮下色斑 溶劑洗脫溶劑洗脫 比色或分光光度法比色或分光光度法測定測定 HPLC 多用反相多用反相HPLC , C18柱，流動相常用甲醇柱，流動相常用甲醇水乙酸、乙腈水水乙酸、乙腈水極譜法、極譜法、計算分光光度法計算分光光度法（苯基色原酮）苯基色原酮） (二二)單體黃酮成分含量測定單體黃酮成分含量測定pyh第三節(jié) 皂甙類制劑的分析特點(diǎn)特點(diǎn)：其水溶液易引起肥皂樣泡沫。具有其水溶液易引起肥皂樣泡沫。具有 溶血、遇膽固醇形成復(fù)合物等特征。溶血、遇膽固醇形成復(fù)合物等特征。 無明顯紫外吸收無明顯紫外吸收按皂甙元分類按皂甙元分

17、類：甾體皂甙、三萜皂甙甾體皂甙、三萜皂甙pyh一、皂甙類成分的定性分析一、皂甙類成分的定性分析薄層色譜薄層色譜 是皂甙各組分定性鑒別中最常用的方法是皂甙各組分定性鑒別中最常用的方法pyh 吸附劑：硅膠或氧化鋁吸附劑：硅膠或氧化鋁皂甙皂甙：極性較大，要求硅膠吸附性較：極性較大，要求硅膠吸附性較弱，展開劑極性較大，常用的溶劑弱，展開劑極性較大，常用的溶劑系統(tǒng)氯仿甲醇水（系統(tǒng)氯仿甲醇水（13：7：2，下層）下層）皂甙元皂甙元：極性較小，以硅膠為吸附劑，：極性較小，以硅膠為吸附劑，展開劑親脂性強(qiáng)，常用的溶劑系統(tǒng)展開劑親脂性強(qiáng)，常用的溶劑系統(tǒng)以苯、氯仿、己烷、異丙醚為主要以苯、氯仿、己烷、異丙醚為主要組

18、成組成顯色劑顯色劑：三氯醋酸、濃硫酸、氯磺酸醋三氯醋酸、濃硫酸、氯磺酸醋酸酸pyh二、定量分析二、定量分析可分為可分為：總皂甙測定總皂甙測定、皂甙元測定皂甙元測定和單體單體皂甙測定皂甙測定 甲醇等溶劑提取甲醇等溶劑提取 水飽和正丁醇提取水飽和正丁醇提取 或大孔樹脂處理或大孔樹脂處理 測定（比色法、重量法）測定（比色法、重量法）總皂甙溶于極性溶劑總皂甙溶于極性溶劑樣品樣品pyh 皂甙元皂甙元： 提取提取 HCl/H2SO4樣品樣品總皂甙總皂甙皂甙元皂甙元溶劑提取溶劑提取TLC 、HPLC 比色法測定比色法測定單體皂甙的測定單體皂甙的測定： TLC 、HPLCpyh （一）比色法（一）比色法（總皂

19、甙、總皂甙元總皂甙、總皂甙元）皂甙能與皂甙能與某些試劑某些試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色反應(yīng)產(chǎn)生顏色 比色比色濃硫酸、高氯酸、硫酸濃硫酸、高氯酸、硫酸-醋酐、香草醛醋酐、香草醛-硫酸硫酸（二）薄層色譜法（二）薄層色譜法（皂甙元、單體皂甙皂甙元、單體皂甙） 斑點(diǎn)面積法、薄層洗脫斑點(diǎn)面積法、薄層洗脫-比色法或比色法或薄層掃描薄層掃描（三）（三）HPLC 多用多用RP-HPLCpyh第四節(jié) 醌類成分的分析 中藥中醌類成分有中藥中醌類成分有蒽醌蒽醌、萘醌、菲醌、萘醌、菲醌、苯醌等類型苯醌等類型理化性質(zhì)：理化性質(zhì)：性狀：性狀： 醌類化合物在藥用方面有多種活性，帶助色醌類化合物在藥用方面有多種活性，帶助色團(tuán)，往往還呈現(xiàn)

20、黃色、紅色或紫色團(tuán)，往往還呈現(xiàn)黃色、紅色或紫色 游離醌具有升華性，苯醌、萘醌游離醌具有升華性，苯醌、萘醌 蒽醌結(jié)合成苷，難得好晶型蒽醌結(jié)合成苷，難得好晶型最常見最常見pyh 溶解性溶解性：游離醌類能溶于有機(jī)溶劑游離醌類能溶于有機(jī)溶劑，如：，如：乙醇、乙醚、苯等。微溶或難溶于水。乙醇、乙醚、苯等。微溶或難溶于水。 成苷后極性增大，可溶于熱水，易溶于成苷后極性增大，可溶于熱水，易溶于醇醇，在冷水中溶解度較小，難溶于苯、，在冷水中溶解度較小，難溶于苯、氯仿等有機(jī)溶劑。氯仿等有機(jī)溶劑。酸堿性酸堿性：含酚羥基，顯酸性，溶于堿，加含酚羥基，顯酸性，溶于堿，加酸又游離出來酸又游離出來 堿提取堿提取 、酸沉淀

21、、酸沉淀pyh一、定性分析（一）化學(xué)顯色法（一）化學(xué)顯色法 蒽醌類化合物的分子中多具有蒽醌類化合物的分子中多具有 酚羥基酚羥基， 具有一定的酸性，能溶于堿性水溶液，并具有一定的酸性，能溶于堿性水溶液，并 產(chǎn)生顏色變化。產(chǎn)生顏色變化。(Borntrager反應(yīng)反應(yīng)) pyh （二）升華法（二）升華法 游離醌類多具有升華性游離醌類多具有升華性 中藥制劑中這類成分量較大，可采中藥制劑中這類成分量較大，可采用升華法得到升華物，可見光下觀察用升華法得到升華物，可見光下觀察或加堿試液顯色定性或加堿試液顯色定性 如：牛黃解毒丸中大黃的鑒別如：牛黃解毒丸中大黃的鑒別pyh （三）薄層層析（三）薄層層析 是鑒別

22、含蒽醌類成分的中藥制劑的最是鑒別含蒽醌類成分的中藥制劑的最主要的定性方法。主要的定性方法。 吸附劑吸附劑：硅膠：硅膠 展開劑展開劑：大多含水或甲醇，增大展開劑極：大多含水或甲醇，增大展開劑極性以及蒽醌類成分的溶解度性以及蒽醌類成分的溶解度 顯色方法顯色方法：堿性試劑或醋酸鎂甲醇液，氨：堿性試劑或醋酸鎂甲醇液，氨氣熏及在紫外燈下（氣熏及在紫外燈下（365nm）觀察熒光。觀察熒光。 亦可在可見光下直接觀察色斑。亦可在可見光下直接觀察色斑。pyh二、含量測定 蒽醌類成分的定量分析比色法：比色法：樣品樣品分液漏斗中堿提分液漏斗中堿提比色比色極性小極性?。?,8二羥基蒽醌二羥基蒽醌為對照、為對照、醋酸鎂

23、甲醇溶液）醋酸鎂甲醇溶液）游離蒽醌的測定游離蒽醌的測定： 非極性溶劑非極性溶劑 索氏提取器索氏提取器pyh 結(jié)合蒽醌的測定：結(jié)合蒽醌的測定： 樣品樣品 HCl/H2SO4 水解水解 氯仿提取氯仿提取堿提堿提比色比色總蒽醌總蒽醌總蒽醌總蒽醌 游離蒽醌結(jié)合蒽醌游離蒽醌結(jié)合蒽醌注意：分析含蒽醌類成分的天然藥物時，注意：分析含蒽醌類成分的天然藥物時，往往規(guī)定要測定往往規(guī)定要測定總蒽醌類成分總蒽醌類成分、蒽醌甙元蒽醌甙元（游離蒽醌）和（游離蒽醌）和葡萄糖甙葡萄糖甙（結(jié)合蒽醌）（結(jié)合蒽醌）pyh蒽醌類單體成分的測定蒽醌類單體成分的測定薄層色譜法薄層色譜法主要用于分離測定單體蒽醌類化合物主要用于分離測定單體

24、蒽醌類化合物 吸附劑吸附劑：硅膠：硅膠 展開劑展開劑：大多含水或甲醇，增大展開劑：大多含水或甲醇，增大展開劑極性以及蒽醌類成分的溶解度極性以及蒽醌類成分的溶解度 顯色方法顯色方法：堿性試劑或醋酸鎂甲醇液：堿性試劑或醋酸鎂甲醇液測定測定：比色或分光光度法、：比色或分光光度法、TLCSpyh(三)高效液相色譜法主要用于分離單體蒽醌類化合物主要用于分離單體蒽醌類化合物分離效果，可避免拖尾現(xiàn)象。分離效果，可避免拖尾現(xiàn)象。pyh第五節(jié)第五節(jié) 含揮發(fā)性成分制劑的分析含揮發(fā)性成分制劑的分析 揮發(fā)性成分是指中藥中一類具有芳香揮發(fā)性成分是指中藥中一類具有芳香氣并易揮發(fā)的成分。氣并易揮發(fā)的成分。 揮發(fā)油（精油）是

25、存在于植物體中一揮發(fā)油（精油）是存在于植物體中一類可隨水蒸氣蒸餾得到的于水不混溶的油類可隨水蒸氣蒸餾得到的于水不混溶的油狀液體。具有較強(qiáng)的生物活性。狀液體。具有較強(qiáng)的生物活性。 按化合物結(jié)構(gòu)分：脂肪族化合物、芳按化合物結(jié)構(gòu)分：脂肪族化合物、芳香族化合物和萜類化合物香族化合物和萜類化合物pyh 一、定性分析化學(xué)反應(yīng)：化學(xué)反應(yīng)： 萜類多有雙鍵萜類多有雙鍵 氫鹵酸氫鹵酸 加成反應(yīng)加成反應(yīng) 內(nèi)酯類揮發(fā)油內(nèi)酯類揮發(fā)油 羥胺羥胺 羥肟酸羥肟酸 FeCl3 顯色顯色 揮發(fā)油含不飽和物揮發(fā)油含不飽和物 高錳酸鉀高錳酸鉀 褪色褪色薄層色譜法：薄層色譜法：固定相：硅膠、氧化鋁固定相：硅膠、氧化鋁展開劑：正己烷和石

26、油醚展開劑：正己烷和石油醚根據(jù)極性大小分離：根據(jù)極性大小分離：烴（萜）烴（萜） 醚醚 酯酯 醛、酮醛、酮 醇、酚醇、酚 酸酸pyh 氣相色譜法：（聯(lián)用）氣相色譜法：（聯(lián)用） 是目前揮發(fā)油成分微量分離和鑒定的較理想是目前揮發(fā)油成分微量分離和鑒定的較理想的方法的方法 需在兩種以上不同極性色譜柱上進(jìn)行比較，需在兩種以上不同極性色譜柱上進(jìn)行比較，Rt一致。一致。二、揮發(fā)油類成分的定量分析二、揮發(fā)油類成分的定量分析（一）氣相色譜法（單體，可用（一）氣相色譜法（單體，可用HPLC） 填充柱、毛細(xì)管柱填充柱、毛細(xì)管柱 硅烷化白色擔(dān)體硅烷化白色擔(dān)體 固定相：非極性飽和烴，角鯊?fù)?、硅固定相：非極性飽和烴，角鯊?fù)?/p>

27、、硅烷酮、甲基硅油等；極性固定相，聚酯類、聚乙二醇類烷酮、甲基硅油等；極性固定相，聚酯類、聚乙二醇類 檢測器：檢測器：FID 測定方法：歸一化法測定方法：歸一化法pyh總量總量 燒瓶燒瓶揮發(fā)油揮發(fā)油測定器測定器回流回流冷凝管冷凝管pyh 測定法測定法 甲法：甲法：本法適用于測定相對密度本法適用于測定相對密度在在1.01.0以下的揮發(fā)油以下的揮發(fā)油。取供試品適量。取供試品適量( (約相約相 當(dāng)于含揮發(fā)油當(dāng)于含揮發(fā)油0.50.51.01.0ml)ml)，稱定重量稱定重量( (準(zhǔn)準(zhǔn)確至確至0.010.01g), g), 置燒瓶中，加水置燒瓶中，加水300300500500mlml（或或 適量）與玻璃

28、珠數(shù)粒，振搖適量）與玻璃珠數(shù)粒，振搖混合后，連接揮發(fā)油測定器與回流冷凝混合后，連接揮發(fā)油測定器與回流冷凝管。自冷凝管上端加管。自冷凝管上端加 水使充滿揮發(fā)油測水使充滿揮發(fā)油測定器的刻度部分，并溢流入燒瓶時為止。定器的刻度部分，并溢流入燒瓶時為止。pyh 置電熱套中或用其他適宜方置電熱套中或用其他適宜方 法緩緩加熱法緩緩加熱至沸，并保持微沸約至沸，并保持微沸約5 5小時小時, ,至測定器中油至測定器中油量不再增加，停止加熱量不再增加，停止加熱, ,放置片刻放置片刻, , 開啟測開啟測定器下端的活塞，將水緩緩放出，至油定器下端的活塞，將水緩緩放出，至油層上端到達(dá)刻度層上端到達(dá)刻度0 0線上面線上面

29、5 5mmmm處為止。放處為止。放置置 1 1小時以上，再開啟活塞使油層下降至小時以上，再開啟活塞使油層下降至其上端恰與刻度其上端恰與刻度0 0線平齊，讀取揮發(fā)油量，線平齊，讀取揮發(fā)油量，并計算并計算 供試品中揮發(fā)油的含量（供試品中揮發(fā)油的含量（%）。）。pyh 乙法：乙法：本法適用于測定相對密度在本法適用于測定相對密度在1.01.0以以上的揮發(fā)油上的揮發(fā)油。取水約。取水約300300mlml與玻璃珠數(shù)粒，與玻璃珠數(shù)粒， 置燒瓶中，連接揮發(fā)油測定器。自測定置燒瓶中，連接揮發(fā)油測定器。自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢流入器上端加水使充滿刻度部分，并溢流入燒瓶時為燒瓶時為 止，再用移液管加入二

30、甲苯止，再用移液管加入二甲苯1 1mlml，然后連接回流冷凝管。將燒瓶內(nèi)容物加然后連接回流冷凝管。將燒瓶內(nèi)容物加熱至沸騰熱至沸騰, ,并繼并繼 續(xù)蒸餾，其速度以保持續(xù)蒸餾，其速度以保持pyh 冷凝管的中部呈冷卻狀態(tài)為度。冷凝管的中部呈冷卻狀態(tài)為度。3030分鐘后，分鐘后，停止加熱，放置停止加熱，放置1515分分 鐘以上，讀取二甲鐘以上，讀取二甲苯的容積。然后照甲法自苯的容積。然后照甲法自“取供試品適取供試品適量量”起，依法測定，自油層量起，依法測定，自油層量 中減去二中減去二甲苯量，即為揮發(fā)油量，再計算供試品甲苯量，即為揮發(fā)油量，再計算供試品中含揮發(fā)油的含量（中含揮發(fā)油的含量（%）。）。 py

31、h第一節(jié)第一節(jié) 含動物藥中藥制劑的分析含動物藥中藥制劑的分析常用的幾種動物藥常用的幾種動物藥牛牛黃黃麝麝香香蛇蛇膽膽蟾蟾酥酥熊熊膽膽pyh一、牛黃及其制劑的分析一、牛黃及其制劑的分析牛黃的主要成分牛黃的主要成分 膽酸膽酸 膽紅素膽紅素 去氧膽酸去氧膽酸 膽固醇膽固醇 牛黃酸牛黃酸 氨基酸氨基酸 無機(jī)鹽等無機(jī)鹽等人工牛黃的主要成分人工牛黃的主要成分 膽酸膽酸 膽紅素膽紅素 豬去氧膽酸豬去氧膽酸 膽固醇膽固醇 無機(jī)鹽等無機(jī)鹽等 pyh（一）膽汁酸的化學(xué)反應(yīng)（一）膽汁酸的化學(xué)反應(yīng)1、pettenkofer 反應(yīng)反應(yīng) 蔗糖蔗糖+濃硫酸濃硫酸 羥甲基糠醛羥甲基糠醛 1糠醛糠醛 膽汁酸膽汁酸 紅色紅色2膽

32、汁酸膽汁酸紫色紫色膽汁膽汁1ml藍(lán)色藍(lán)色膽酸定量反應(yīng)膽酸定量反應(yīng)pyh 3、Hammarsten 反應(yīng)反應(yīng) 膽酸膽酸+20鉻酸溶液鉻酸溶液 呈現(xiàn)不同的顏色呈現(xiàn)不同的顏色 （可用于（可用于區(qū)別膽酸同系物區(qū)別膽酸同系物）（二）膽紅素的化學(xué)反應(yīng)（二）膽紅素的化學(xué)反應(yīng) 1、Gmeli 反應(yīng)反應(yīng) 膽紅素膽紅素 濃硝酸濃硝酸 顯色顯色 2、膽紅素、膽紅素+對氨基苯磺酸重氮鹽對氨基苯磺酸重氮鹽 顯色顯色 （可用（可用比色法測定含量比色法測定含量 4532nm）pyh人工牛黃的定性鑒別（1）化學(xué)反應(yīng)：）化學(xué)反應(yīng)： 硫酸硫酸 /過氧化氫過氧化氫 污綠色污綠色(膽紅素膽紅素) 硫酸硫酸/新制糠醛新制糠醛 藍(lán)紫色（

33、膽酸）藍(lán)紫色（膽酸） （2）可見分光光度法）可見分光光度法 max4532nm (膽紅素膽紅素) (3) IR (4) TLC 膽酸膽酸 硅膠硅膠G 10硫酸乙醇液顯色硫酸乙醇液顯色 膽紅素膽紅素 硅膠硅膠G 自然光下黃色斑點(diǎn)自然光下黃色斑點(diǎn) 去氧膽酸去氧膽酸 硅膠硅膠G（紫外燈下看熒光）（紫外燈下看熒光）pyh人工牛黃的含量測定人工牛黃的含量測定膽酸的含量測定膽酸的含量測定 無共軛結(jié)構(gòu)無共軛結(jié)構(gòu) HPLC 蒸發(fā)光散射檢測器蒸發(fā)光散射檢測器pyh二、麝香二、麝香 化學(xué)成分復(fù)雜，主要成分化學(xué)成分復(fù)雜，主要成分麝香酮，一般麝香酮，一般含量為含量為24，其他成分有：，其他成分有：雄甾烷雄甾烷， 膽固

34、醇脂、膽固醇脂、肽類肽類、 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 氨基酸及麝香吡啶氨基酸及麝香吡啶pyh 定性鑒別：定性鑒別： 1、TLC 2、GC法法含量測定含量測定：GC法法 麝香酮麝香酮 含量不得少于含量不得少于2pyh三、熊膽及其制劑的分析三、熊膽及其制劑的分析成分成分：熊膽中膽汁酸的成分為熊膽中膽汁酸的成分為 ?；切苋パ跄懰崤；切苋パ跄懰嵝苋パ跄懰嵝苋パ跄懰釅A水解堿水解pyh 定性鑒別：定性鑒別：光譜鑒別：光譜鑒別：2732nm 有吸收有吸收 TLC膽酸膽酸豬去氧膽酸豬去氧膽酸鵝去氧膽酸鵝去氧膽酸去氧去氧熊去氧膽酸熊去氧膽酸對照溶液對照溶液供試溶液供試溶液示意圖示意圖石膽酸石膽酸pyh 結(jié)合膽汁酸的含量測定

35、結(jié)合膽汁酸的含量測定 HPLC 蒸發(fā)光散射檢測器蒸發(fā)光散射檢測器pyh四、蛇膽及其制劑的分析四、蛇膽及其制劑的分析主要成分：主要成分： 膽酸含量膽酸含量蛇膽汁的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)蛇膽汁的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 膽汁比重膽汁比重 總固體含量總固體含量pyh 定性鑒別：定性鑒別：TLC含量測定：含量測定： HPLCpyh五、蟾酥五、蟾酥主要成分主要成分： 蟾蜍甾二烯蟾蜍甾二烯 強(qiáng)心甾烯強(qiáng)心甾烯蟾毒類蟾毒類 吲哚堿類吲哚堿類生理活性強(qiáng)，毒性大，質(zhì)量要嚴(yán)格控制生理活性強(qiáng)，毒性大，質(zhì)量要嚴(yán)格控制pyh 定性鑒別：定性鑒別：薄層色譜（鄰苯二醛顯色劑）薄層色譜（鄰苯二醛顯色劑）定量分析定量分析HPLC 蟾毒內(nèi)酯蟾毒內(nèi)酯斑蝥斑蝥 G

36、C 斑蝥素斑蝥素鹿茸鹿茸 HPLC 嘌呤、尿苷嘌呤、尿苷羚羊角羚羊角 凱氏定氮凱氏定氮 pyh含礦物藥中藥制劑的分析一、概述: 礦物藥主要包括： 天然礦物、生物化石、人類加工品及 純粹化學(xué)制品，主要是無機(jī)化合物。含礦物藥中藥制劑的分析含礦物藥中藥制劑的分析2010版版中國藥典中國藥典中有中有24個中藥制劑測個中藥制劑測定了礦物藥的含量其中定了礦物藥的含量其中滴定分析法滴定分析法 20種種，其他方法還有其他方法還有重量分析法、紫外光譜法和重量分析法、紫外光譜法和原子吸收光譜法等。原子吸收光譜法等。 pyh(一) 礦物藥的分類：1. 含砷的礦物藥：如雄黃、雌黃、信石、砒霜等。2. 含汞的礦物藥：如

37、朱砂、靈砂、輕粉、紅粉等。3. 含鉛的礦物藥：如紅丹、鉛粉、密陀僧、鉛霜等。4. 含銅的礦物藥：如膽礬、銅綠、綠鹽、扁青、空青等。5. 含鐵的礦物藥：如赭石、磁石、禹余糧、皂礬、黃礬等。6. 含鈣的礦物藥：如石膏、鐘乳石、花蕊石、紫石英等。7. 含硅的礦物藥：如滑石、白石英、陽起石、云母石等。8. 含硫的礦物藥：如芒硝、樸硝、玄明粉、硫黃等。9. 含氯的礦物藥：如大青鹽、秋石、紫腦砂、白腦砂等。10. 其他礦物藥：白礬、爐甘石、硼砂、硝石、琥珀等。 含礦物藥中藥制劑的分析含礦物藥中藥制劑的分析pyh(二) 礦物藥的分析方法：1. 試樣的分解方法 溶解法（濕法）、熔融法（干法）含礦物藥中藥制劑的

38、分析含礦物藥中藥制劑的分析礦物藥分析的基本程序礦物藥分析的基本程序 取樣取樣試樣的分解試樣的分解定性定性定量定量分析結(jié)果。分析結(jié)果。2定性鑒別定性鑒別a離子反應(yīng)離子反應(yīng) b火焰反應(yīng)火焰反應(yīng) c沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng) d氣體鑒別氣體鑒別 e顯微鑒別顯微鑒別 f熱分析法熱分析法 pyha. 化學(xué)分析法常用配位滴定、酸堿滴定、氧化還原滴定 和重量分析法b. 可見分光光度法如高價汞與雙硫腙作用生成橙色化合物；鎘與雙硫腙生成玫瑰紅配合物等 。 c. 原子吸收分光光度法可測定幾乎全部金屬元素 d.電感耦合等離子光譜法（ICP )可應(yīng)用于礦物藥及其制劑中各種微量元素的分析 2.含量測定方法：含量測定方法：含礦物藥

39、中藥制劑的分析含礦物藥中藥制劑的分析pyh二、含砷礦物藥及其制劑分析： 雄黃（As2S2）、雌黃（As2S3）、砒石（As2O3）、 砒霜等。 含礦物藥中藥制劑的分析含礦物藥中藥制劑的分析pyh雄黃(As2S2)的測定 （一）定性鑒別（一）定性鑒別（1）檢驗(yàn)硫 224233322NOClSOH2KAsO2HNO3KClO2SAsHCl2BaSOBaClSOH4242232222SO4OAs2O7SAs2OHSAsSH3AsOH232H233含礦物藥中藥制劑的分析含礦物藥中藥制劑的分析 （2）檢驗(yàn)砷 pyh硫酸分解硫酸分解-直接碘量法直接碘量法 取樣品粉末，加過氧化鈉取樣品粉末，加過氧化鈉-碳酸

40、鈉混合溶劑（碳酸鈉混合溶劑（2:1），攪），攪勻，勻，600 C650 C熔融熔融5分鐘，冷后用水浸出，加少量分鐘，冷后用水浸出，加少量過氧化鈉，煮沸除盡過氧化氫，冷后加酚酞指示劑，用過氧化鈉，煮沸除盡過氧化氫，冷后加酚酞指示劑，用硫酸中和至溶液無色，稍過量，加碘化鉀，加熱煮沸，硫酸中和至溶液無色，稍過量，加碘化鉀，加熱煮沸，至溶液呈淺黃色，冷卻，加入至溶液呈淺黃色，冷卻，加入20%酒石酸鉀溶液，加淀酒石酸鉀溶液，加淀粉指示劑，滴加粉指示劑，滴加0.1mol/L硫代硫酸鈉溶液至藍(lán)色消失，硫代硫酸鈉溶液至藍(lán)色消失，用氨水調(diào)至酚酞變紅色，滴加用氨水調(diào)至酚酞變紅色，滴加1:1硫酸至紅色消失。冷卻，硫

41、酸至紅色消失。冷卻，加入碳酸氫鈉飽和溶液，用加入碳酸氫鈉飽和溶液，用0.1mol/L碘液調(diào)至藍(lán)色。碘液調(diào)至藍(lán)色。含礦物藥中藥制劑的分析含礦物藥中藥制劑的分析（二）含量測定（二）含量測定 1.碘量法碘量法（1）直接碘量法）直接碘量法pyh堿熔分解堿熔分解-直接碘量法直接碘量法 硫酸與過氧化氫分解硫酸與過氧化氫分解-間接碘量法：取樣品粉末，間接碘量法：取樣品粉末，加硫酸，加熱，在振搖下緩緩滴加加硫酸，加熱，在振搖下緩緩滴加30%過氧化氫過氧化氫溶液至澄明，繼續(xù)加熱溶液至澄明，繼續(xù)加熱3 5分鐘以除盡剩余的過分鐘以除盡剩余的過氧化氫，放冷，加水，分三次加入適量氧化氫，放冷，加水，分三次加入適量Na2

42、CO3，待氣泡冒盡后，立即加入待氣泡冒盡后，立即加入KI，混勻，在暗處放置，混勻，在暗處放置10分鐘，加水稀釋，用分鐘，加水稀釋，用0.1mol/L硫代硫酸鈉溶液硫代硫酸鈉溶液滴定至呈淺黃色，加淀粉指示劑滴定至呈淺黃色，加淀粉指示劑2mL，繼續(xù)滴定，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失。至藍(lán)色消失。含礦物藥中藥制劑的分析含礦物藥中藥制劑的分析pyh2.分光光度法 取樣品適量，精密稱定，加稀鹽酸適量，攪拌取樣品適量，精密稱定，加稀鹽酸適量，攪拌30分分鐘，濾過，殘渣用稀鹽酸洗滌兩次，合并濾液，用鐘，濾過，殘渣用稀鹽酸洗滌兩次，合并濾液，用稀鹽酸定容于容量瓶中，精密量取此液一定體積至稀鹽酸定容于容量瓶中，精密量取此

43、液一定體積至砷化氫發(fā)生器的三角瓶中，加硫酸，加水稀釋，加砷化氫發(fā)生器的三角瓶中，加硫酸，加水稀釋，加入一定量的碘化鉀和氯化亞錫溶液，放置入一定量的碘化鉀和氯化亞錫溶液，放置15分鐘，分鐘，加入鋅粒，立即接上導(dǎo)管通入盛有二乙基二硫代氨加入鋅粒，立即接上導(dǎo)管通入盛有二乙基二硫代氨基甲酸銀基甲酸銀-三乙胺三乙胺-氯仿吸收液的吸收管中，反應(yīng)氯仿吸收液的吸收管中，反應(yīng)40分分鐘后，取下吸收管，用氯仿補(bǔ)足吸收液至一定體積，鐘后，取下吸收管，用氯仿補(bǔ)足吸收液至一定體積，在分光光度計上于在分光光度計上于510nm波長處測吸收度，同時繪制波長處測吸收度，同時繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算含量。標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算含量。 含礦物藥

44、中藥制劑的分析含礦物藥中藥制劑的分析pyh例例1 克痢痧膠囊雄黃的含量測定克痢痧膠囊雄黃的含量測定碘量法碘量法處方組成處方組成 ：白芷：白芷 蒼術(shù)蒼術(shù) 石菖蒲石菖蒲 細(xì)辛細(xì)辛 蓽茇蓽茇 鵝不食鵝不食草草 豬牙皂豬牙皂 雄黃雄黃 丁香丁香 硝石硝石 枯礬枯礬 冰片冰片測定方法：取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，研細(xì)，取測定方法：取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，研細(xì)，取約約2.8g，精密稱定，置，精密稱定，置250ml凱氏燒瓶中，加硫酸鉀凱氏燒瓶中，加硫酸鉀2g、硫酸銨、硫酸銨3g與硫酸與硫酸12ml，置電熱套中加熱至溶液呈，置電熱套中加熱至溶液呈乳白色，放冷，用水乳白色，放冷，用水50ml分分4次轉(zhuǎn)移至次

45、轉(zhuǎn)移至250ml錐形瓶錐形瓶中，加熱微沸中，加熱微沸5分鐘，放冷，加酚酞指示液分鐘，放冷，加酚酞指示液2滴，用氫滴，用氫氧化鈉溶液（氧化鈉溶液（40 :100）中和至溶液顯微紅色，放冷，）中和至溶液顯微紅色，放冷，用用0.25mol/L硫酸溶液中和至褪色，加碳酸氫鈉硫酸溶液中和至褪色，加碳酸氫鈉5g，搖勻后，用碘滴定液（搖勻后，用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至近終點(diǎn)）滴定，至近終點(diǎn)時，加淀粉指示液時，加淀粉指示液2ml，滴定至溶液顯紫藍(lán)色。，滴定至溶液顯紫藍(lán)色。每每1ml碘滴定液（碘滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于）相當(dāng)于5.348mg的二硫的二硫化二砷（化二砷（As2S2） 含礦物

46、藥中藥制劑的分析含礦物藥中藥制劑的分析pyh三、含汞礦物藥及其制劑分析： 水銀（Hg）、朱砂（HgS）、升藥（HgO）、 輕粉（Hg2Cl2）等。含礦物藥中藥制劑的分析含礦物藥中藥制劑的分析pyh（一）定性鑒別（一）定性鑒別1亞汞鹽亞汞鹽（1）取供試品溶液，加氨試液或氫氧化鈉試液，即變黑色。）取供試品溶液，加氨試液或氫氧化鈉試液，即變黑色。（2）取供試品溶液，加碘化鉀試液，振搖，即生成黃綠色沉）取供試品溶液，加碘化鉀試液，振搖，即生成黃綠色沉淀，瞬即變?yōu)榛揖G色，并逐漸變?yōu)榛液谏５?，瞬即變?yōu)榛揖G色，并逐漸變?yōu)榛液谏?汞鹽汞鹽（1）Hg2+2OH- HgO （黃色沉淀 ） +H2O（2）Hg2+ 2I- HgI2 HgI2+2I- 24HgI3.取不含過量硝酸的供試品溶液，涂于光亮的銅箔表取不含過量硝酸的供試品溶液，涂于光亮的銅箔表面，擦拭后可見一層光亮似銀的沉積物。面，擦拭后可見一層光亮似銀的沉積物。含礦物藥中藥制劑的分析含礦物藥中藥制劑的分析pyh（二）含量測定（二）含量測定1硫氰酸鹽法 滴定反應(yīng)如下：Hg2+ 2SCN- Hg(SCN)2終點(diǎn)時 ：Fe3+ + SCN- FeSCN2+2.分光度法 高價汞與雙硫腙作用生成橙色配合，溶于四氯化碳溶液 ，波長，波長492nm），測定吸光度），測定