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文檔簡介

1、選修一一輪復習植物的組織培養(yǎng)一、植物組織培養(yǎng)的基本過程一、植物組織培養(yǎng)的基本過程 離體器官、 組織或細胞 脫分化 愈傷組織 再分化 根、芽 植物體 二、影響植物組織培養(yǎng)的因素二、影響植物組織培養(yǎng)的因素1、外植體的選取、外植體的選取 不同植物的組織培養(yǎng)難度不同不同植物的組織培養(yǎng)難度不同 同一種植物材料材料的年同一種植物材料材料的年齡保存時間齡保存時間也會影響結果也會影響結果2、培養(yǎng)基的配制、培養(yǎng)基的配制(MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基) A大量元素:大量元素:N、P、K、Ca、Mg、S B微量元素微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co C有機物:有機物:甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等甘氨酸、

2、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等 D 植物激素植物激素 3、不同植物激素使用順序和使用量、不同植物激素使用順序和使用量 主要由主要由生長素生長素和和細胞分裂素細胞分裂素控制,在生控制,在生長素存在時,細胞分裂素作用加強。長素存在時,細胞分裂素作用加強。使用順序使用順序實驗結果實驗結果先生長素,后用細胞分先生長素,后用細胞分裂素裂素有利于細胞分裂,但不有利于細胞分裂,但不分化分化先細胞分裂素,后用生先細胞分裂素,后用生長素長素細胞既分裂又分化細胞既分裂又分化同時使用同時使用分化頻率提高分化頻率提高4、pH、溫度、光照、溫度、光照菊花:菊花: pH=5.8 溫度控制在溫度控制在1822 每日光照每日光照

3、12h5、消毒、滅菌消毒、滅菌制備制備MS固體固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基外植體消毒外植體消毒 接種接種 培培 養(yǎng)養(yǎng)栽栽 培培三、實驗操作三、實驗操作 移移 栽栽沖洗沖洗酒精酒精無菌水沖洗無菌水沖洗氯化汞氯化汞無菌無菌水沖洗至少三次之上水沖洗至少三次之上制備制備MS固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基1 1、配制各種母液、配制各種母液2 2、配制培養(yǎng)基、配制培養(yǎng)基3 3、滅菌、滅菌外植體消毒外植體消毒旺旺盛盛嫩嫩枝枝(流流水水)沖洗沖洗刷洗,沖刷洗,沖洗洗20分鐘左分鐘左右右(無菌吸水無菌吸水紙紙)吸干表面水吸干表面水分分(70的酒精的酒精)搖動搖動2-3次次6-7秒秒(無菌水無菌水)清清洗洗(無菌吸水無菌吸水紙紙)吸干

4、表面水吸干表面水分分(氯化汞氯化汞)溶液溶液浸泡浸泡12分分鐘鐘(無菌水無菌水)清洗清洗3次次 1、前期準備 2、接種操作(接種過程中插入外植體時形態(tài)學上端朝上)(接種過程中插入外植體時形態(tài)學上端朝上) 3、培養(yǎng)過程應該放在無菌箱中進行,并定期進行消毒,保持適宜的溫度和光照。 4、移栽前應先打開培養(yǎng)瓶的封口膜,讓其在培養(yǎng)間生長幾日,然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。接種、培養(yǎng)、移栽和栽培接種、培養(yǎng)、移栽和栽培 (二)產生花粉植株的兩種途徑(二)產生花粉植株的兩種途徑 有哪兩種途徑?原因是什么?有哪兩種途徑?原因是什么?花藥中花藥中的花粉的花粉花藥中花藥中的花粉的花粉胚狀體胚狀體愈傷組愈傷組織織叢芽叢芽

5、叢芽叢芽生根生根移栽移栽花藥培養(yǎng)產生花粉植株的兩種途徑花藥培養(yǎng)產生花粉植株的兩種途徑1 1影響花粉植株能否成功及成功率高低的影響花粉植株能否成功及成功率高低的主要因素主要因素: : 和和 等。等。 閱讀“影響花藥培養(yǎng)的因素”,回答下列問題:2材料的選擇:從花藥來看,應當選擇(初花期、盛花期、晚花期)的花藥;從花粉來看,應當選擇(四分體期、單核期、雙核期、萌發(fā)期)的花粉;從花蕾來看,應當選擇(完全未開放、略微開放、完全盛開)的花蕾。材料的選擇材料的選擇 培養(yǎng)基的組成培養(yǎng)基的組成實驗操作實驗操作材料的材料的選取選取材料的材料的消毒消毒接種和接種和培養(yǎng)培養(yǎng)(一)材料的選?。ㄒ唬┎牧系倪x取 選擇花藥時

6、,一般通過選擇花藥時,一般通過鏡檢鏡檢來確定其來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。 最常用的方法有最常用的方法有醋酸洋紅法醋酸洋紅法。但是,某些。但是,某些植物的花粉細胞核不易著色,需采用植物的花粉細胞核不易著色,需采用焙花焙花青青-鉻礬法鉻礬法,這種方法能將花粉細胞核染成,這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色藍黑色。材料的消毒材料的消毒花花蕾蕾(70酒酒精)精)大約大約30s無菌無菌水清水清洗洗無菌吸無菌吸水紙吸水紙吸干水分干水分0.1氯氯化汞溶化汞溶液液24min無菌無菌水沖水沖洗洗接種和培養(yǎng)接種和培養(yǎng) 剝取花藥剝取花藥剝取花藥剝取花藥接種花藥接種花藥培養(yǎng)培養(yǎng)分化培養(yǎng)基培養(yǎng)分化培養(yǎng)基培養(yǎng)鑒定和篩選鑒定和篩選不要損傷花藥不要損傷花藥要徹底除去花絲要徹底除去花絲每個培養(yǎng)瓶接種

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