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文檔簡介
1、非如上述的各種反應(yīng)檢樣前增菌選擇性增菌BSXLD(或HE ,顯色培養(yǎng)基)挑取可疑菌落選擇性平板篩選生物化學(xué)篩選非沙門氏菌H2S+靛基質(zhì)-尿素-KCN-賴氨酸+H2S+靛基質(zhì)+尿素-KCN-賴氨酸+H2S-靛基質(zhì)-尿素-KCN-賴氨酸+/-甘露醇+ 、山梨醇+ONPG -沙門氏菌血清學(xué)試驗報告生化鑒定試劑盒或全自動生化鑒定系統(tǒng)前增菌法 25g+BP225mlBPW1ml+TTB10ml421 ,18h24h1ml+SC10ml36 1 ,18h24hTSI,靛基質(zhì),尿素(pH7.2), KCN,賴氨酸,營養(yǎng)瓊脂血清學(xué)鑒定BSXLDDHLHESSSC TTBMM亞硒酸鹽抑菌胱氨酸促生長四硫酸鈉和煌
2、綠抑菌氯化鎂和孔雀綠抑菌適合傷寒沙門菌和甲型副傷寒沙門菌生長,37度適合其他沙門菌生長,42度,1824hr為防漏檢宜SC+TTB/MM指示系統(tǒng)指示效果及可疑菌落特點BS葡萄糖+H2S黑色有金屬光澤、棕褐或灰色,周圍培養(yǎng)基黑或棕色,或不產(chǎn)硫化氫而呈灰綠色DHL 乳糖+ H2S乳糖(+):粉紅色,(-):無色半透明無色半透明,產(chǎn)硫化氫者中心黑色SS乳糖+ H2SHE乳糖+ H2S乳糖(+):黃色,(-):藍色藍綠色或藍色,產(chǎn)硫化氫者中心黑色WS乳糖+ H2S原理:三糖利用培養(yǎng)基:干粉或生化管接種方法:穿刺劃線結(jié)果:產(chǎn)酸堿,產(chǎn)氣,硫化氫注意:高層斜面葡萄糖乳糖蔗糖說 明+分解糖類產(chǎn)酸pH指示劑變黃
3、斜面底層均產(chǎn)酸變黃記為A/A模式+-斜面因葡糖含量少故分解完后利用蛋白胨產(chǎn)堿且大于酸量故由黃而深紅,記為K,底層無氧故緩慢分解葡糖而產(chǎn)酸變黃記為A,K/A模式+-由于乳糖或蔗糖量大故斜面和底層均產(chǎn)酸變黃,亦為A/A模式+-+若分解硫化氫則產(chǎn)生黑色若分解硫化氫則產(chǎn)生黑色FeS沉淀,沉淀,若分解糖類產(chǎn)氣則可見氣泡或裂縫若分解糖類產(chǎn)氣則可見氣泡或裂縫只有斜面和底層均產(chǎn)酸,且賴氨酸只有斜面和底層均產(chǎn)酸,且賴氨酸脫羧酶陰性者才可排除為沙門菌的可脫羧酶陰性者才可排除為沙門菌的可能性能性其余情況既可能是也可能不是沙門其余情況既可能是也可能不是沙門氏菌屬的細菌氏菌屬的細菌目的:迅速及遲緩分解乳糖的細菌陽性,而
4、不發(fā)酵乳糖的沙門氏菌為陰性。原理:細菌迅速分解乳糖是有-半乳糖苷滲透酶和-半乳糖苷酶,ONPG分子與乳糖相似所有乳糖快速發(fā)酵和遲緩發(fā)酵的細菌均可快速水解鄰硝基酚-D-半乳糖苷結(jié)果:呈現(xiàn)黃色為陽性反應(yīng), 通常20-30min內(nèi)顯色注意:為提高陽性反應(yīng)速度,需大量接種培養(yǎng)物。過酸出現(xiàn)假陰性,過堿則出現(xiàn)假陽性。7. 將反應(yīng)結(jié)果輸將反應(yīng)結(jié)果輸入數(shù)據(jù)庫軟件中入數(shù)據(jù)庫軟件中得到生化譜代碼得到生化譜代碼8.軟件自動查詢報軟件自動查詢報告最符合的菌名告最符合的菌名6. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)色卡判讀反應(yīng)結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)色卡判讀反應(yīng)結(jié)果抗體攻擊抗原(居中者)H抗原菌體抗原(O抗原)表面抗原(Vi抗原)A-F多價血清凝集O4O3,
5、10O7O8O9O2O11O19O34O15O10B群?C1/C4群?C3群?E3群?E2群?E1群?E4群?D群?A群?F群?A-F多價血清不凝集采用9種多價血清逐一排查O多價1O多價2O多價3O多價4O多價5O多價6O多價7O多價8O多價9AF群包括6,14群13,16,17,18,21群28,30,35,38,39群40,41,42,43群44,45,47,48群50,51,52,53群55,56,57,58群59,60,61,62群63、65,66,67O群ABBC1C2D不產(chǎn)氣D產(chǎn)氣E1E4E4第一相a g,f,s i,b,dk,v,r,cb,d,rdg,m,p,qh,vg,s,tI第二相/25,Z152,5/6,w,x/樣品新鮮樣品25hg+225mLTTB和SC421,24h37,24h2h冷凍樣品25g+225mLBP37,24h2h10mL+100mLTTB和SC4224h(37,24
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