實驗九 酶的特性ppt課件

1、實驗九：酶的特性實驗九：酶的特性實驗目的：加深對酶的性質(zhì)的認識。實驗內(nèi)容：溫度對酶活力的影響pH對酶活力的影響酶的激活及抑制劑酶的專一性溫度對酶活力的影響溫度對酶活力的影響一、原理：一、原理： 酶的催化作用受溫度的影響，在最適溫酶的催化作用受溫度的影響，在最適溫度下，酶的反應速度最高。大多數(shù)動物酶的度下，酶的反應速度最高。大多數(shù)動物酶的最適溫度為最適溫度為3740，植物酶的最適溫度為，植物酶的最適溫度為5060 。 酶對溫度的穩(wěn)定性與其存在形式有關。酶對溫度的穩(wěn)定性與其存在形式有關。由些酶的干燥制劑，雖加熱到由些酶的干燥制劑，雖加熱到100，其活，其活性并無明顯改變，但在性并無明顯改變，但在1

2、00的溶液中卻很的溶液中卻很快地完全失去活性?？斓赝耆セ钚?。 低溫能降低或抑制酶的活性，但不能使低溫能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。酶失活。二、器材：二、器材：試管及試管架試管及試管架恒溫水浴恒溫水浴冰浴冰浴沸水浴沸水浴三、試劑和材料：三、試劑和材料：含含0.2淀粉的淀粉的0.3NaCl溶液溶液150ml，需新鮮，需新鮮配制配制 稀釋稀釋200倍的唾液倍的唾液50ml：用蒸餾水漱口，以清：用蒸餾水漱口，以清除事物殘渣，再含一口蒸餾水，半分鐘后使除事物殘渣，再含一口蒸餾水，半分鐘后使其流入量筒并稀釋其流入量筒并稀釋200倍，混勻備用。倍，混勻備用。KI碘溶液碘溶液50ml：將：將KI2

3、0g及碘及碘10g溶于溶于100ml水中。使用前稀釋水中。使用前稀釋10倍。倍。四、操作方法：四、操作方法： 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈藍色。糊精按淀粉和可溶性淀粉遇碘呈藍色。糊精按其分子的大小，遇碘可呈藍色、紫色、暗其分子的大小，遇碘可呈藍色、紫色、暗褐色或紅色。最簡單的糊精遇碘不呈顏色，褐色或紅色。最簡單的糊精遇碘不呈顏色，麥芽糖遇碘也不呈色。在不同溫度下，淀麥芽糖遇碘也不呈色。在不同溫度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈現(xiàn)的顏色來判斷。合物遇碘呈現(xiàn)的顏色來判斷。取三支試管，編號后按下表加入試劑：取三支試管，編號后按下表加入試劑：管號管號1

4、23淀粉溶液（淀粉溶液（ml）1.51.51.5稀釋唾液（稀釋唾液（ml）11煮沸過的稀釋煮沸過的稀釋唾液（唾液（ml）1 搖勻后，將搖勻后，將1號、號、3號兩試管放入號兩試管放入37 恒恒溫水浴中，溫水浴中，2號試管放入冰中，號試管放入冰中，10min后去后去處，（將處，（將2號管內(nèi)液體分為兩半用號管內(nèi)液體分為兩半用KI碘碘溶液來檢驗溶液來檢驗1、2、3管內(nèi)淀粉被唾液淀粉酶管內(nèi)淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。記錄并解釋結(jié)果，將水解的程度。記錄并解釋結(jié)果，將2號管剩號管剩下的一半溶液放入下的一半溶液放入37水浴中繼續(xù)保溫水浴中繼續(xù)保溫10min后，再用碘液實驗，結(jié)果如何？后，再用碘液實驗，結(jié)果如何

5、？pH對酶活性的影響對酶活性的影響一、原理一、原理 酶的活力受環(huán)境酶的活力受環(huán)境pH的影響極為顯著。不同酶的最適的影響極為顯著。不同酶的最適pH值不值不同。本實驗觀察同。本實驗觀察pH對唾液淀粉酶活性的影響，唾液淀粉酶的最適對唾液淀粉酶活性的影響，唾液淀粉酶的最適pH約為約為6.8。二、器材二、器材試管及試管架試管及試管架吸管吸管滴管滴管50ml錐形瓶錐形瓶恒溫水浴恒溫水浴三、試劑和材料三、試劑和材料新配制的溶于新配制的溶于0.3NaCl的的0.5淀粉溶液淀粉溶液 250ml稀釋稀釋200倍的新鮮唾液倍的新鮮唾液 100ml0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液磷酸氫二鈉溶液 600ml0.1mol/

6、L檸檬酸溶液檸檬酸溶液 400mlKI碘溶液碘溶液 50mlpH試紙：試紙： pH=5、 pH=5.8、 pH=6.8、 pH=8四種四種四、操作方法：四、操作方法： 取四個標有號碼的取四個標有號碼的50ml錐形瓶。用吸管按下表錐形瓶。用吸管按下表添加添加0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液和磷酸氫二鈉溶液和0.1檸檬酸溶液以制檸檬酸溶液以制備備pH5.08.0的四種緩沖液。的四種緩沖液。 從四個錐形瓶中各取緩沖液從四個錐形瓶中各取緩沖液3ml，分別注入，分別注入4支帶有號碼的試管中，隨后于每個試管中添加支帶有號碼的試管中，隨后于每個試管中添加0.5淀粉溶液淀粉溶液2ml和稀釋和稀釋200倍的唾液倍

7、的唾液2ml。向各試管中加。向各試管中加入稀釋唾液的時間間隔各為入稀釋唾液的時間間隔各為1min。將各試管內(nèi)容物。將各試管內(nèi)容物混勻，并依次置于混勻，并依次置于37 恒溫水浴中保溫。恒溫水浴中保溫。 第四管加入唾液第四管加入唾液2min后，每隔后，每隔1min由第由第3管取出管取出一滴混和液，置于白瓷板上，加一滴混和液，置于白瓷板上，加1小滴小滴KI碘溶液，碘溶液，檢驗淀粉的水解程度。待混和液變?yōu)樽攸S色時，向檢驗淀粉的水解程度。待混和液變?yōu)樽攸S色時，向所有試管依次添加所有試管依次添加12滴滴KI碘溶液。添加碘溶液。添加KI碘碘溶液的時間間隔從第一管起，亦均為溶液的時間間隔從第一管起，亦均為1m

8、in。 觀察各試管內(nèi)容物呈現(xiàn)的顏色，分析觀察各試管內(nèi)容物呈現(xiàn)的顏色，分析pH對唾對唾液淀粉酶活性的影響。液淀粉酶活性的影響。錐形瓶錐形瓶號碼號碼0.2mol/L磷酸氫二磷酸氫二鈉（鈉（ml）0.1 mol/L檸檸檬酸（檬酸（ml）pH15.154.855.026.053.955.837.722.286.849.720.288.0唾液淀粉酶的活化和抑制唾液淀粉酶的活化和抑制一、原理一、原理 酶的活性受活化劑或抑制劑的影響。氯離子為唾液淀酶的活性受活化劑或抑制劑的影響。氯離子為唾液淀粉酶的活化劑，銅離子為其抑制劑。粉酶的活化劑，銅離子為其抑制劑。二、器材：二、器材：恒溫水浴恒溫水浴試管及試管架試管

9、及試管架三、試劑和材料：三、試劑和材料：0.1的淀粉溶液的淀粉溶液 150ml稀釋稀釋200倍的新鮮唾液倍的新鮮唾液 150ml1NaCl溶液溶液 50ml1硫酸銅溶液硫酸銅溶液 50ml1硫酸鈉溶液硫酸鈉溶液 50mlKI碘溶液碘溶液 100ml 四、操作方法：四、操作方法：管號管號12340.1的淀粉溶液（的淀粉溶液（ml）1.51.51.51.5稀釋唾液（稀釋唾液（ml）0.50.50.50.51硫酸銅溶液（硫酸銅溶液（ml）0.51NaCl溶液（溶液（ml）0.51硫酸鈉溶液（硫酸鈉溶液（ml）0.5蒸餾水（蒸餾水（ml）0.537 恒溫水浴、保溫恒溫水浴、保溫10minKI碘溶液（滴

10、）碘溶液（滴）23232323現(xiàn)象現(xiàn)象注：保溫時間可根據(jù)各人唾液淀粉酶活力調(diào)整解釋說明，說明本實驗第3管的意義酶的專一性酶的專一性一、原理一、原理 酶具有高度的專一性。本實驗以唾液酶具有高度的專一性。本實驗以唾液淀粉酶和蔗糖酶的作用為例，來說明酶的淀粉酶和蔗糖酶的作用為例，來說明酶的專一性。專一性。 淀粉和蔗糖無還原性，唾液淀粉酶水淀粉和蔗糖無還原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成由還原性的麥芽糖，但不能催解淀粉生成由還原性的麥芽糖，但不能催化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解產(chǎn)化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解產(chǎn)生還原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉生還原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉的水解。用的水解。

11、用Benedict試劑檢查糖的還原性。試劑檢查糖的還原性。二、器材：二、器材：恒溫水浴恒溫水浴沸水浴沸水浴試管及試管架試管及試管架三、試劑和材料：三、試劑和材料：2蔗糖溶液蔗糖溶液 150ml溶于溶于0.3NaCl的的1淀粉溶液需新鮮配制）淀粉溶液需新鮮配制） 150ml稀釋稀釋200倍的新鮮唾液倍的新鮮唾液 100ml蔗糖酶溶液蔗糖酶溶液 100ml 將啤酒廠的鮮酵母用水洗滌將啤酒廠的鮮酵母用水洗滌23次離次離心），然后放在濾紙上自然干燥。取干酵母心），然后放在濾紙上自然干燥。取干酵母100g，置于乳缽內(nèi)，添加適量蒸餾水及少量細，置于乳缽內(nèi)，添加適量蒸餾水及少量細沙，用力研磨，提取約沙，用力

12、研磨，提取約1h，再加蒸餾水使總體，再加蒸餾水使總體積約為原體積的積約為原體積的10倍。離心，將上清液保存于倍。離心，將上清液保存于冰箱中備用。冰箱中備用。Benedict氏試劑氏試劑 200ml 無水硫酸銅無水硫酸銅1.74g溶于溶于100ml熱水中，冷卻熱水中，冷卻后稀釋至后稀釋至150ml。取檸檬酸鈉。取檸檬酸鈉173g，無水碳酸鈉，無水碳酸鈉100g和和600ml水共熱，溶解后冷卻并加水至水共熱，溶解后冷卻并加水至850ml。再將冷卻的。再將冷卻的150ml硫酸銅溶液傾入。本硫酸銅溶液傾入。本試劑可長久保存。試劑可長久保存。四、操作方法：四、操作方法：淀粉酶的專一性：淀粉酶的專一性：管號管號1234561淀粉溶液（滴）淀粉溶液（滴）4442蔗糖溶液（滴）蔗糖溶液（滴）444稀釋唾液（稀釋唾液（ml）11煮沸過的稀釋唾液煮沸過的稀釋唾液（ml）11蒸餾水（蒸餾水（ml）1137 恒溫水浴恒溫水浴15minBenedict試劑（試劑（ml）111111沸水浴沸水浴23min現(xiàn)象現(xiàn)象 解釋實驗結(jié)果提示：唾液除含淀粉酶外還含有少量麥芽糖酶）解釋實驗結(jié)果提示：唾液