美國注射劑協(xié)會(PDA)技術(shù)報告NO[1]1：環(huán)境監(jiān)控計劃的基本原理介紹

1、環(huán)境潔凈級別分類環(huán)境潔凈級別分類環(huán)境監(jiān)測體系環(huán)境監(jiān)測體系系統(tǒng)性的監(jiān)測系統(tǒng)性的監(jiān)測潔凈級別懸浮粒子最大允許數(shù)/米3At rest 靜態(tài)In operation 動態(tài) 0.5m 5.0m 0.5m 5.0mA3 520203 52020B3 52029352 0002 900C352 0002 9003 520 00029 000D3520 00029 000不作規(guī)定Not defined級別b浮游菌CFU/m3沉降碟（）CFU/4小時c接觸碟（）CFU/碟5指手套CFU/手套A 1 111B10555C1005025D20010050微生物控制標準微生物控制標準清潔和消毒清潔和消毒取樣位置的選擇

2、取樣位置的選擇取樣頻率取樣頻率警戒和糾偏限度警戒和糾偏限度環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)管理環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)管理細菌鑒定細菌鑒定偏差調(diào)查偏差調(diào)查/CAPA1，清潔和消毒，清潔和消毒執(zhí)行清潔和消毒程序是整個工廠管理的重要組成。要用執(zhí)行清潔和消毒程序是整個工廠管理的重要組成。要用環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)來評價這些程序的有效性環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)來評價這些程序的有效性影響消毒消毒的因素：消毒劑類型，左右時間，待影響消毒消毒的因素：消毒劑類型，左右時間，待消毒表面消毒表面消毒劑效率測試消毒劑效率測試殘留去除殘留去除 空氣懸浮粒子監(jiān)測空氣懸浮粒子監(jiān)測確定采樣點位置確定采樣點位置 按公式（按公式（B.1）求出最少的采樣點數(shù)目：）求出最少的采樣點數(shù)

3、目： NL 式中式中 NL 最少采樣點數(shù)（四舍五入為整數(shù)）。最少采樣點數(shù)（四舍五入為整數(shù)）。 A 潔凈室或潔凈區(qū)的面積，以潔凈室或潔凈區(qū)的面積，以計。計。 注注: 在水平單向?qū)恿鲿r，面積在水平單向?qū)恿鲿r，面積A可以看作是與可以看作是與氣流方向呈垂直流動的空氣的截面積。氣流方向呈垂直流動的空氣的截面積。 空氣懸浮粒子監(jiān)測空氣懸浮粒子監(jiān)測每個采樣點的每次采樣量每個采樣點的每次采樣量VS用下式確定：用下式確定： 20 VS 1000 Cnm VS 每個采樣點每次最少采樣量，用升表示每個采樣點每次最少采樣量，用升表示 Cnm 為相關(guān)等級規(guī)定最大被考慮粒徑之等級限值為相關(guān)等級規(guī)定最大被考慮粒徑之等級限值

4、（pc/m3 空氣）?？諝猓?20 粒子濃度處于該等級限值時，可被檢測到粒子數(shù)粒子濃度處于該等級限值時，可被檢測到粒子數(shù)連續(xù)監(jiān)測系統(tǒng)連續(xù)監(jiān)測系統(tǒng) 空氣浮游菌監(jiān)測空氣浮游菌監(jiān)測 浮游菌監(jiān)測（主動法）浮游菌監(jiān)測（主動法） 撞擊式，離心式和膜過濾（明膠）取樣儀撞擊式，離心式和膜過濾（明膠）取樣儀 應(yīng)取一定體積的空氣（取樣體積應(yīng)有代表性）應(yīng)取一定體積的空氣（取樣體積應(yīng)有代表性） 儀器應(yīng)經(jīng)過校驗儀器應(yīng)經(jīng)過校驗 沉降菌監(jiān)測（被動法）沉降菌監(jiān)測（被動法） 沉降碟在空氣中的暴露時間沉降碟在空氣中的暴露時間4小時小時 監(jiān)控整個灌裝過程監(jiān)控整個灌裝過程 只能給出定性和半定量的數(shù)據(jù)只能給出定性和半定量的數(shù)據(jù) 應(yīng)結(jié)

5、合空氣浮游菌的數(shù)據(jù)，對沉降碟的結(jié)果進行評價應(yīng)結(jié)合空氣浮游菌的數(shù)據(jù)，對沉降碟的結(jié)果進行評價 環(huán)境表面監(jiān)測環(huán)境表面監(jiān)測 應(yīng)當(dāng)對接觸產(chǎn)品的表面、地面、墻以及設(shè)備定期進行監(jiān)測應(yīng)當(dāng)對接觸產(chǎn)品的表面、地面、墻以及設(shè)備定期進行監(jiān)測 接觸碟接觸碟 用于平整表面用于平整表面 取樣面積取樣面積25cm2 培養(yǎng)基要凸起，高于碟子邊緣培養(yǎng)基要凸起，高于碟子邊緣 培養(yǎng)基中含有中和劑培養(yǎng)基中含有中和劑 表面擦試法表面擦試法-用于非規(guī)則表面用于非規(guī)則表面 擦拭面積大約為擦拭面積大約為25cm2 定性或定量定性或定量 表面樣應(yīng)在無菌操作結(jié)束時取表面樣應(yīng)在無菌操作結(jié)束時取（以最大限度地降低無菌制造過程中關(guān)鍵表面污染的風(fēng)險）（以

6、最大限度地降低無菌制造過程中關(guān)鍵表面污染的風(fēng)險） 擦拭法和接觸碟法均可使用擦拭法和接觸碟法均可使用2，取樣位置的選擇：，取樣位置的選擇：哪些部位的微生物污染最可能對產(chǎn)品質(zhì)量造成不良影響？哪些部位的微生物污染最可能對產(chǎn)品質(zhì)量造成不良影響？在生產(chǎn)過程中，什么地點最容易長菌？在生產(chǎn)過程中，什么地點最容易長菌？取樣點的選擇需要統(tǒng)計學(xué)設(shè)計或根據(jù)網(wǎng)格法來確定？取樣點的選擇需要統(tǒng)計學(xué)設(shè)計或根據(jù)網(wǎng)格法來確定？ 在在常規(guī)監(jiān)測中，有一些點需要周轉(zhuǎn)取樣嗎？常規(guī)監(jiān)測中，有一些點需要周轉(zhuǎn)取樣嗎？哪些地方是清潔、消毒或滅菌時最難覆蓋哪些地方是清潔、消毒或滅菌時最難覆蓋/接觸或最難湊接觸或最難湊效的部位？效的部位？什么活動

7、會導(dǎo)致污染的擴散？什么活動會導(dǎo)致污染的擴散？在某一部位的取樣操作，足以導(dǎo)致測試數(shù)據(jù)的差錯或污染在某一部位的取樣操作，足以導(dǎo)致測試數(shù)據(jù)的差錯或污染產(chǎn)品？取樣只應(yīng)在生產(chǎn)結(jié)尾換班時進行嗎？產(chǎn)品？取樣只應(yīng)在生產(chǎn)結(jié)尾換班時進行嗎？2，取樣位置的選擇：，取樣位置的選擇：系統(tǒng)取樣點環(huán)境空氣（灌裝線）接近敞開和/或者已灌裝的容器潔凈室空氣最接近工作區(qū)域水使用點表面（廠房）地面、門把手、墻、簾子表面（設(shè)備）灌裝線、 控制面板、供膠塞的料斗壓縮空氣離開壓縮機最遠點無菌檢查系統(tǒng)最接近真空源的接口灌裝線操作人員至少要檢手指印 單向流（例如，單向流罩）靠近活動最多的區(qū)域取樣點舉例取樣點舉例2，取樣位置的選擇：無菌灌裝線

8、，取樣位置的選擇：無菌灌裝線 應(yīng)以微生物污染的風(fēng)險為基礎(chǔ)來考慮應(yīng)以微生物污染的風(fēng)險為基礎(chǔ)來考慮 取樣點應(yīng)在產(chǎn)品或組件暴露的區(qū)域周圍取樣，如：取樣點應(yīng)在產(chǎn)品或組件暴露的區(qū)域周圍取樣，如： 在灌裝針頭處在灌裝針頭處 將產(chǎn)品裝載入凍干腔室處將產(chǎn)品裝載入凍干腔室處 膠塞供料桶膠塞供料桶 無菌部件進行連接操作的部位無菌部件進行連接操作的部位 不影響生產(chǎn)過程的操作人員頻繁活動處不影響生產(chǎn)過程的操作人員頻繁活動處靠近產(chǎn)品，但不接觸產(chǎn)品的位置靠近產(chǎn)品，但不接觸產(chǎn)品的位置3，取樣頻率，取樣頻率批生產(chǎn)動態(tài)監(jiān)測批生產(chǎn)動態(tài)監(jiān)測日常監(jiān)測日常監(jiān)測輪轉(zhuǎn)監(jiān)測輪轉(zhuǎn)監(jiān)測選擇取樣頻率的關(guān)鍵點是盡可能鑒別出系統(tǒng)潛在選擇取樣頻率的關(guān)鍵

9、點是盡可能鑒別出系統(tǒng)潛在的缺陷。的缺陷。3，取樣頻率，取樣頻率: USP 1116潔凈區(qū)潔凈區(qū)取樣頻率取樣頻率100100級或更高級別級或更高級別每班一次每班一次100100級區(qū)毗連的支持性區(qū)域級區(qū)毗連的支持性區(qū)域( (如：如：10,00010,000級級) )每班一次每班一次其它支持性區(qū)域其它支持性區(qū)域(100,000(100,000級級) )每周二次每周二次可能與產(chǎn)品可能與產(chǎn)品/ /容器相接觸的區(qū)域容器相接觸的區(qū)域每周二次每周二次無菌生產(chǎn)區(qū)的其它支持性區(qū)域（不與產(chǎn)無菌生產(chǎn)區(qū)的其它支持性區(qū)域（不與產(chǎn)品相接觸，通常為品相接觸，通常為100,000100,000級或更低）級或更低）每周一次每周一

10、次4，警戒和糾偏限度，警戒和糾偏限度糾偏限度：糾偏限度： 相關(guān)相關(guān)GMP和藥典的法規(guī)要求，和藥典的法規(guī)要求， 連續(xù)三次超過下列警戒限度視為超過一次糾偏限度連續(xù)三次超過下列警戒限度視為超過一次糾偏限度警戒限度：警戒限度： 根據(jù)驗證數(shù)據(jù)根據(jù)驗證數(shù)據(jù) 歷史的運行監(jiān)測結(jié)果基于統(tǒng)計學(xué)制定的歷史的運行監(jiān)測結(jié)果基于統(tǒng)計學(xué)制定的5，數(shù)據(jù)管理，數(shù)據(jù)管理監(jiān)測日期監(jiān)測日期取樣地點取樣地點取樣方法取樣方法微生物菌落數(shù)或微粒數(shù)，微生物菌落數(shù)或微粒數(shù)，鑒別結(jié)果鑒別結(jié)果產(chǎn)品批號產(chǎn)品批號目前的糾偏限度目前的糾偏限度5，數(shù)據(jù)管理：趨勢分析，數(shù)據(jù)管理：趨勢分析分析的目標分析的目標用警戒用警戒/糾偏值來確定糾偏值來確定“糾偏措施糾

11、偏措施”確定現(xiàn)行的警戒確定現(xiàn)行的警戒/糾偏限度糾偏限度標準是否恰當(dāng)標準是否恰當(dāng)用定期報告來更新管理。用定期報告來更新管理。年度報告中包括數(shù)據(jù)的總結(jié)和對糾偏限度的回顧年度報告中包括數(shù)據(jù)的總結(jié)和對糾偏限度的回顧6，細菌鑒定，細菌鑒定BioMerieux Vitek, Inc. (Vitek)Biolog PE Applied BiosystemsQualicon, a DuPont SubsidiaryAPI革蘭氏染色革蘭氏染色7，偏差調(diào)查，偏差調(diào)查/CAPA:壓縮氣體系統(tǒng)壓縮氣體系統(tǒng) 立即重復(fù)測試立即重復(fù)測試 測試該過濾器的完整性測試該過濾器的完整性 檢查并在必要時（如復(fù)測證實超標時）更檢查并在

12、必要時（如復(fù)測證實超標時）更換過濾器。換過濾器。 評估偏差對已處理組件和評估偏差對已處理組件和/或產(chǎn)品的影響或產(chǎn)品的影響 7，偏差調(diào)查，偏差調(diào)查/CAPA: HVAC系統(tǒng)系統(tǒng) 回顧檢查人員活動的水平回顧檢查人員活動的水平 回顧檢查回顧檢查/進行氣流方式進行氣流方式/煙霧試驗煙霧試驗 回顧無菌操作人員的技術(shù)回顧無菌操作人員的技術(shù) 回顧生產(chǎn)區(qū)內(nèi)更衣要求回顧生產(chǎn)區(qū)內(nèi)更衣要求 對氣體過濾器進行泄漏檢查并測試二側(cè)的減差對氣體過濾器進行泄漏檢查并測試二側(cè)的減差 回顧車間的清潔回顧車間的清潔/消毒程序，消毒間隔時間和消毒效率消毒程序，消毒間隔時間和消毒效率 檢查區(qū)域壓差，尤其是上一次消毒后的壓差檢查區(qū)域壓差

13、，尤其是上一次消毒后的壓差 對機械設(shè)備潛在的污染源進行評估對機械設(shè)備潛在的污染源進行評估 檢查、評估房間的完整性（例如油漆剝落，天花板、墻和地面上檢查、評估房間的完整性（例如油漆剝落，天花板、墻和地面上的裂縫，）的裂縫，） 回顧審核產(chǎn)品的風(fēng)險回顧審核產(chǎn)品的風(fēng)險 7，偏差調(diào)查，偏差調(diào)查/CAPA：水系統(tǒng)：水系統(tǒng) 檢查水系統(tǒng)的內(nèi)毒素和化學(xué)項目數(shù)據(jù)檢查水系統(tǒng)的內(nèi)毒素和化學(xué)項目數(shù)據(jù) 檢查水系統(tǒng)其它樣品或取樣點的生物負荷，將出水檢查水系統(tǒng)其它樣品或取樣點的生物負荷，將出水點與系統(tǒng)的污染水平對比點與系統(tǒng)的污染水平對比 回顧檢查消毒程序的有效性及和程序的執(zhí)行周期回顧檢查消毒程序的有效性及和程序的執(zhí)行周期 回

14、顧檢查系統(tǒng)預(yù)防性維護記錄回顧檢查系統(tǒng)預(yù)防性維護記錄 檢查樣品的收集和使用規(guī)程檢查樣品的收集和使用規(guī)程 檢查系統(tǒng)是否有盲管，傾斜度？取樣點和取樣口位檢查系統(tǒng)是否有盲管，傾斜度？取樣點和取樣口位置是否適當(dāng)置是否適當(dāng) 評估所述系統(tǒng)對已處理組件及評估所述系統(tǒng)對已處理組件及/或產(chǎn)品的影響或產(chǎn)品的影響 7，偏差調(diào)查，偏差調(diào)查/CAPA：人員：人員 評估人員對產(chǎn)品可能的影響評估人員對產(chǎn)品可能的影響/污染污染 回顧審查無菌檢查的數(shù)據(jù)回顧審查無菌檢查的數(shù)據(jù) 回顧檢查其他區(qū)域環(huán)境監(jiān)測的數(shù)據(jù)回顧檢查其他區(qū)域環(huán)境監(jiān)測的數(shù)據(jù) 回顧檢查有于手套的消毒劑的配制及其有效期回顧檢查有于手套的消毒劑的配制及其有效期 鑒定所有獨特

15、形態(tài)的分離菌（人與環(huán)境對比）鑒定所有獨特形態(tài)的分離菌（人與環(huán)境對比） 對操作人員的培訓(xùn)情況進行評估對操作人員的培訓(xùn)情況進行評估 面試操作人員，看潛在的風(fēng)險面試操作人員，看潛在的風(fēng)險 對操作人員再培訓(xùn)，重新確認資質(zhì)（考核）對操作人員再培訓(xùn)，重新確認資質(zhì)（考核） 水系統(tǒng)監(jiān)測水系統(tǒng)監(jiān)測 壓縮空氣監(jiān)測壓縮空氣監(jiān)測 生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)測生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)測 人員監(jiān)測人員監(jiān)測 產(chǎn)品和組件的微生物負荷監(jiān)測產(chǎn)品和組件的微生物負荷監(jiān)測 無菌檢查環(huán)境監(jiān)測無菌檢查環(huán)境監(jiān)測人員監(jiān)控及資質(zhì)確認人員監(jiān)控及資質(zhì)確認取樣方法：取樣方法：接觸碟法：操作服接觸碟法：操作服手指印法手指印法棉簽擦拭取樣：手套棉簽擦拭取樣：手套人員監(jiān)控及資質(zhì)確認人員

16、監(jiān)控及資質(zhì)確認取樣方法：取樣方法：接觸碟法：操作服接觸碟法：操作服手指印法手指印法棉簽擦拭取樣：手套棉簽擦拭取樣：手套 取樣位置：取樣位置： 雙手手指印雙手手指印 頭部、頭部、 口罩口罩 肩部肩部 前臂前臂 手腕手腕 腿部腿部/靴子靴子 眼罩眼罩接觸碟法接觸碟法27基于無菌操作的污染風(fēng)險級別進行監(jiān)控基于無菌操作的污染風(fēng)險級別進行監(jiān)控針對不同無菌操作人員采用不同的取樣頻率、不同的針對不同無菌操作人員采用不同的取樣頻率、不同的取樣數(shù)量，取樣數(shù)量， 裝機人員（裝機人員（A級區(qū)操作人員）級區(qū)操作人員） 無菌膠塞等物料添加人員無菌膠塞等物料添加人員 B級區(qū)工作人員級區(qū)工作人員 維修人員維修人員/QA人員

17、人員/環(huán)境監(jiān)測人員環(huán)境監(jiān)測人員接觸碟法接觸碟法28 取樣時機：取樣時機： 工作結(jié)束，離開級區(qū)前取樣工作結(jié)束，離開級區(qū)前取樣 處理異常情況后（取樣后重新更衣或更換手套）處理異常情況后（取樣后重新更衣或更換手套）不得在剛剛消毒過后不得在剛剛消毒過后29 微生物負荷監(jiān)測微生物負荷監(jiān)測 應(yīng)有滅菌前、中間控制及原料測試生物負荷的規(guī)程應(yīng)有滅菌前、中間控制及原料測試生物負荷的規(guī)程 應(yīng)對低濃度微生物的恢復(fù)應(yīng)對低濃度微生物的恢復(fù)/回收方法進行驗證回收方法進行驗證 如有證據(jù)表明環(huán)境中存在厭氧菌，則應(yīng)考慮采用厭如有證據(jù)表明環(huán)境中存在厭氧菌，則應(yīng)考慮采用厭氧培養(yǎng)基氧培養(yǎng)基 應(yīng)有生物負荷的目標值、警戒限度，并有超過這些應(yīng)有生物負荷的目標值、警戒限度，并有超過這些指標應(yīng)取措施的文件指標應(yīng)取措施的文件工藝工藝生產(chǎn)活動擬考慮的監(jiān)測生產(chǎn)活動擬考慮的監(jiān)測監(jiān)測地點監(jiān)測地點發(fā)酵/主要捕獲 將菌種接種至擴增罐培養(yǎng) 接種至發(fā)酵罐 收集物的均質(zhì) 產(chǎn)品收集 轉(zhuǎn)移管連接點線 靠近密封圈及發(fā)酵罐的位置 靠近均質(zhì)器的活塞 接近離心機 無菌方式補料/取樣口純化 工藝罐、層析柱加料 收集各個組分 將收集的組分合并 在產(chǎn)品暴露環(huán)境靠近生產(chǎn)活動的空氣和表面 單向流工作臺 靠近組分收集器 層析柱加料口或超濾口處配制 配制容器 在配制時投料 除菌過濾 配制容器的開口處