第三章-藥物的雜質(zhì)檢查

1、第三章 藥物的雜質(zhì)檢查藥物分析教研室藥物分析教研室劉巍劉巍第一節(jié)、藥物的雜質(zhì)和限量第一節(jié)、藥物的雜質(zhì)和限量第三節(jié)、藥物中一般雜質(zhì)的檢查第三節(jié)、藥物中一般雜質(zhì)的檢查第二節(jié)、第二節(jié)、雜質(zhì)雜質(zhì)的檢查方法的檢查方法第四節(jié)、特殊雜質(zhì)的檢查和鑒定方法第四節(jié)、特殊雜質(zhì)的檢查和鑒定方法主要內(nèi)容主要內(nèi)容 藥物的純度藥物的純度是是指藥物純凈的程度。是反映藥品質(zhì)指藥物純凈的程度。是反映藥品質(zhì)量的一項重要指標。量的一項重要指標。 雜質(zhì)超標可使藥物的雜質(zhì)超標可使藥物的外觀性狀、物理化學常數(shù)發(fā)外觀性狀、物理化學常數(shù)發(fā)生變化生變化，甚至影響，甚至影響藥物的穩(wěn)定性、使活性降低、毒副藥物的穩(wěn)定性、使活性降低、毒副作用增加作用增

2、加一、藥物的雜質(zhì)與純度一、藥物的雜質(zhì)與純度：第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量 影響藥物純度的物質(zhì)統(tǒng)稱為影響藥物純度的物質(zhì)統(tǒng)稱為雜質(zhì)雜質(zhì)，是指藥物中，是指藥物中存在的存在的無治療作用無治療作用或或影響藥物的穩(wěn)定性和療效影響藥物的穩(wěn)定性和療效，甚至甚至對人體健康有害對人體健康有害的微量物質(zhì)。的微量物質(zhì)。 為保證藥品質(zhì)量，確保用藥安全、有效，必須為保證藥品質(zhì)量，確保用藥安全、有效，必須檢查雜質(zhì)，控制藥物純度。檢查雜質(zhì)，控制藥物純度。注意：藥物純度與試劑純度共同點均規(guī)定所含雜質(zhì)的種類和限量不同點藥物純度從用藥安全、有效和對藥物穩(wěn)定性等方面考慮 試劑純度是從雜質(zhì)可能引起的化學變化對使用的影響以及試劑的使用范圍和

3、使用目的加以規(guī)定,它不考慮雜質(zhì)對生物體的生理作用及毒副作用.化學試劑不能代替藥品！例. 臨床所用藥物的純度與化學品及試劑純度的主要區(qū)別是（ ）A. 所含雜質(zhì)的生理效應不同B. 所含有效成分的量不同 C. 所含雜質(zhì)的絕對量不同D. 化學性質(zhì)及化學反應速度不同E. 所含有效成分的生理效應不同A A了解藥物中雜質(zhì)的來源與種類了解藥物中雜質(zhì)的來源與種類 有針對性地制訂雜質(zhì)檢查項目的有針對性地制訂雜質(zhì)檢查項目的方法方法和和限度限度了解藥物中可能存在的雜質(zhì)了解藥物中可能存在的雜質(zhì) 決定雜質(zhì)檢查的決定雜質(zhì)檢查的項目項目二、雜質(zhì)的來源與種類二、雜質(zhì)的來源與種類二、藥物雜質(zhì)的來源二、藥物雜質(zhì)的來源雜質(zhì)的來源生產(chǎn)

4、過程儲藏過程1.合成過程中，原料不純或反應不完全，中間體、副產(chǎn)物在精制中未除盡2.制劑過程3.試劑、溶劑、還原劑殘留4.異構(gòu)體、多晶體5.使用的金屬器皿、裝置、工具引入的金屬雜質(zhì)在溫度、濕度、日光、空氣等外界條件影響下，或因微生物的作用，引起藥物發(fā)生水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等變化生產(chǎn)過程中引入雜質(zhì)例子生產(chǎn)過程中引入雜質(zhì)例子1: 雙氯非那胺雙氯非那胺ClClClClSO2ClSO2NH2ClClSO2ClSO2ClClClSO2NH2SO2NH2氯磺化ClSO3H胺化NH4OH胺化NH4OH（反應不完全引入鄰二氯苯）（分解產(chǎn)生氯化銨）（未洗凈引入氯化物）阿司匹林及雙水

5、楊酯的合成路線：阿司匹林及雙水楊酯的合成路線：生產(chǎn)過程中引入雜質(zhì)例子生產(chǎn)過程中引入雜質(zhì)例子2：（第六章）：（第六章）ONaCO2ONaCOOHH+OHCOOHOHCOOH+(CH3CO)2OHOHOOC+OCOCH3COOH+CH3COOHCOOHOOOH+ H2O (1)(1)保管不善或貯存時間過長保管不善或貯存時間過長 (2) (2)包裝不當包裝不當2. 2. 貯藏過程中引入貯藏過程中引入藥品外界條件溫度、濕度、日光、空氣、微生物等水解、氧化、分解、聚合、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)化、潮解、發(fā)霉。產(chǎn)生雜質(zhì)水解：具有酯鍵、酰胺鍵、苷鍵結(jié)構(gòu)的藥物容易發(fā)生水解，酸、堿催化下及加熱下水解更甚氧化：具有酚羥基、

6、巰基、亞硝基、醛基、不飽和鍵結(jié)構(gòu)的藥物，容易在空氣中氧化水解和氧化水解和氧化是藥物貯存過程常見的雜質(zhì)來源是藥物貯存過程常見的雜質(zhì)來源OCOCH3COOHOOHOOHHOHOHNHCH2N(C2H5)2OHCl H2OHNH3CH3COOCCH3COOCH3NO2NNClHNO貯藏過程中引入的雜質(zhì)例子貯藏過程中引入的雜質(zhì)例子1:抗甲狀腺藥卡比馬唑抗甲狀腺藥卡比馬唑CHOC2H5ClCH2OC2H5CHOC2H5CH2OC2H5H3CHNNNCH3SHNNCH3SCOOC2H5NNSCOOC2H5CH3胺化CH3NH2，CH3OH環(huán)合KSCN縮合ClCOOC2H5,C5H5N重排（甲巰咪唑）貯藏過

7、程中引入的雜質(zhì)例子貯藏過程中引入的雜質(zhì)例子2：（第八章）：（第八章） 貯藏過程中水解鹽酸普魯卡因注射劑 進一步脫羧轉(zhuǎn)化對氨基苯甲酸 苯胺 引起毒性反應NH2COOCH2CH2N(C2H5)2水解NH2COOH脫羧NH2OOO三、藥物雜質(zhì)的分類三、藥物雜質(zhì)的分類按來源分類按來源分類一般雜質(zhì)一般雜質(zhì)特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)（有關(guān)物質(zhì)）（有關(guān)物質(zhì)）可用于考核生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)可用于考核生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)控制是否正?？刂剖欠裾Ｖ甘拘噪s指示性雜質(zhì)質(zhì)如：如：水分、水分、 Cl Cl- - 、SOSO4 42-2-等等特定藥物特定藥物在生產(chǎn)和貯藏過程在生產(chǎn)和貯藏過程中引入的雜質(zhì)，隨藥物的不中引入的雜質(zhì)，隨藥物的不同而不同

8、同而不同按毒性分類按毒性分類有毒雜質(zhì)有毒雜質(zhì)信號雜質(zhì)信號雜質(zhì)重金屬、砷鹽等重金屬、砷鹽等一般無毒，含量多少可反映一般無毒，含量多少可反映出藥物的純度情況出藥物的純度情況按化學類別按化學類別和特性分類和特性分類有機雜質(zhì)有機雜質(zhì)無機雜質(zhì)無機雜質(zhì)殘留溶劑殘留溶劑影響藥品的穩(wěn)定性，影響藥品的穩(wěn)定性，并反映生產(chǎn)工藝本并反映生產(chǎn)工藝本身的情況身的情況特定雜質(zhì)非特定雜質(zhì)四、四、雜質(zhì)的限量雜質(zhì)的限量1.1.雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量 在不影響藥物療效、穩(wěn)定性及不發(fā)生毒性的前在不影響藥物療效、穩(wěn)定性及不發(fā)生毒性的前提下，藥物中所含雜質(zhì)的提下，藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量最大允許量。雜質(zhì)量雜質(zhì)量 雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量 雜質(zhì)量雜質(zhì)

9、量藥品合格藥品合格藥品不合格藥品不合格百分之幾表示（百分之幾表示（% %）百萬分之幾表示（百萬分之幾表示（ppmppm）限量表示方法：限量表示方法：雜質(zhì)限量控制方法雜質(zhì)限量控制方法定量測定定量測定限量檢查法限量檢查法比較法比較法靈敏度法靈敏度法標準對照法標準對照法雜質(zhì)的限量檢測方法：雜質(zhì)的限量檢測方法：靈敏度法：靈敏度法： 在供試品溶液中加入試劑，在試驗條件下反應，不得出在供試品溶液中加入試劑，在試驗條件下反應，不得出現(xiàn)現(xiàn)正（負）反應正（負）反應。 既以檢測條件下反應靈敏度控制雜質(zhì)限既以檢測條件下反應靈敏度控制雜質(zhì)限量。量。不得發(fā)生渾濁取本品水浴試液氨試液調(diào)至微堿性加水至5min1mlCaCl

10、5ml25g. 0如：乳酸中雜酸的檢查如：乳酸中雜酸的檢查葡萄糖酸度檢查（實驗二）：葡萄糖酸度檢查（實驗二）：取本品取本品2.0g2.0g，加新沸過的，加新沸過的冷水冷水20ml20ml溶解后，加酚酞指示劑液溶解后，加酚酞指示劑液3 3滴與氫氧化鈉滴定滴與氫氧化鈉滴定液（液（0.02mol/ml0.02mol/ml）0.2ml0.2ml，應顯粉紅色。，應顯粉紅色。 例：腎上腺素中腎上例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查腺酮的檢查 供試品液供試品液(2.0mg/ml)鹽酸溶液鹽酸溶液樣品樣品 (0.05mol/L)A A310nm310nm規(guī)定：規(guī)定：A A310nm310nm0.050.05比較法：比

11、較法： 取一定量供試品，在規(guī)定條件下測定待檢取一定量供試品，在規(guī)定條件下測定待檢雜質(zhì)雜質(zhì)的參數(shù)（如吸光度），的參數(shù)（如吸光度）， 與規(guī)定限量比較，判斷供試與規(guī)定限量比較，判斷供試品中雜質(zhì)限量。品中雜質(zhì)限量。葡萄糖注射液中葡萄糖注射液中5- 5-羥甲基糠醛的檢測（實驗二）：羥甲基糠醛的檢測（實驗二）：精密稱取本品適量（約相當于葡萄糖精密稱取本品適量（約相當于葡萄糖1.0g1.0g），置于），置于100ml100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，照分光光度容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法在法在284nm284nm波長處測定，吸光度不得大于波長處測定，吸光度不得大于0.320.32操作

12、操作: :平行試驗平行試驗比較兩比色管的比較兩比色管的顏色或濁度顏色或濁度，判斷雜質(zhì)限量，判斷雜質(zhì)限量是否符合規(guī)定。是否符合規(guī)定。管管2（對照管）（對照管）管管1（樣品管）（樣品管）標準對照標準對照法：最常用法：最常用 取限度量的待檢雜質(zhì)對照品配成的對照溶液，取限度量的待檢雜質(zhì)對照品配成的對照溶液，與一定量供試品配成的供試品容液在相同條件下處與一定量供試品配成的供試品容液在相同條件下處理，比較反應結(jié)果，判斷供試液中所含雜質(zhì)限度是理，比較反應結(jié)果，判斷供試液中所含雜質(zhì)限度是否符合規(guī)定。否符合規(guī)定。%100供試品量允許雜質(zhì)存在的最大量雜質(zhì)限量%100SCVL或：或：2.2.限量計算公式限量計算公式

13、（標準對照法）（標準對照法）L：雜質(zhì)限量S：供試品量C：標準溶液的濃度V：標準溶液的體積示例示例3-13-1：茶苯海明中氯化物的檢查：茶苯海明中氯化物的檢查（求雜質(zhì)限量）（求雜質(zhì)限量）管管2 2（對照管對照管）：）：取標準取標準NaClNaCl溶液（溶液（1010 g Cl/mlg Cl/ml）1.5ml1.5ml按相同步驟制備成對照液按相同步驟制備成對照液管管1 1（樣品管樣品管）：）：取本品取本品0.30g0.30g，加水，加水50ml50ml、氨試、氨試液液3ml3ml、10%10%硝酸銨溶液硝酸銨溶液6ml6ml，水浴加熱，水浴加熱5min5min，加，加硝酸銀試液硝酸銀試液25ml2

14、5ml，水浴，水浴15min15min，放冷后定容至，放冷后定容至200ml200ml，取濾液，取濾液25ml25ml置于置于50ml50ml納氏比色管中，加納氏比色管中，加稀硝酸稀硝酸10ml10ml，加水至，加水至50ml50ml，暗處放置，暗處放置5min5min%100SCVL%04. 0%1002002530. 05 . 110106C=10 g/mlV=1.5 mlS=?示例示例3-23-2：谷氨酸鈉中重金屬的檢查：谷氨酸鈉中重金屬的檢查（求取樣量）（求取樣量）管管2 2（對照管對照管）：）：取標準鉛溶液（取標準鉛溶液（1010 g Pb/mlg Pb/ml）體積為體積為V V m

15、lml，平行操作后比較顏色，平行操作后比較顏色管管1 1（樣品管樣品管）：）：取本品取本品1.0g1.0g，加水，加水23ml23ml溶解后，溶解后，加醋酸鹽加醋酸鹽bufferbuffer（pH3.5pH3.5）2ml2ml，依法檢查，與對，依法檢查，與對照管比色，顏色不得更深照管比色，顏色不得更深%100CLSV已知：重金屬限量為已知：重金屬限量為10ppm10ppmml0 . 110100 . 1101066示例示例3-33-3：腎上腺素中酮體的檢查：腎上腺素中酮體的檢查 取本品取本品0.2g0.2g，加鹽酸溶液（，加鹽酸溶液（9200092000）定容至）定容至100ml100ml，在

16、在310nm310nm處測定處測定 A A 0.050.05，求酮體限量，求酮體限量V樣品=100 mlC酮體=?S樣品=0.2 g%06. 01021015. 1%100ml/g1021002 . 0ml/g1015. 110043505. 0100)1,ml/g:%1 (100100113636%11%11%11樣品酮體樣品酮體CCLCEAEACcmlEEEEEclAcmcmcm一般雜質(zhì)檢查規(guī)則一般雜質(zhì)檢查規(guī)則 藥品檢驗操作標準藥品檢驗操作標準規(guī)定：規(guī)定： 1. 1. 遵循遵循平行操作原則平行操作原則 (1) (1)儀器的配對儀器的配對性：如性：如納氏比色管應配對，刻納氏比色管應配對，刻度

17、線高低相差不超過度線高低相差不超過2mm2mm (2) (2)對照品與供試品的同步操作對照品與供試品的同步操作 2. 2. 正確的取樣及供試品的稱量范圍正確的取樣及供試品的稱量范圍 3. 3. 正確的比色、比濁方法正確的比色、比濁方法 黑色的背景上黑色的背景上自上而下觀察自上而下觀察比濁法比濁法比色法比色法白色白色的背景上的背景上自上而下觀察自上而下觀察第二節(jié) 雜質(zhì)的檢查方法一、雜質(zhì)的研究規(guī)范一、雜質(zhì)的研究規(guī)范（一）有機雜質(zhì)在藥品質(zhì)量標準中的項目名稱（一）有機雜質(zhì)在藥品質(zhì)量標準中的項目名稱1.1.以雜質(zhì)的化學名稱作為項目名稱以雜質(zhì)的化學名稱作為項目名稱2.2.以某類雜質(zhì)的總稱作為項目的名稱以某

18、類雜質(zhì)的總稱作為項目的名稱3.3.以檢測方法作為項目名稱以檢測方法作為項目名稱（二）雜質(zhì)檢查項目的確定（二）雜質(zhì)檢查項目的確定（三）雜質(zhì)限度的確定（三）雜質(zhì)限度的確定（四）雜質(zhì)檢查方法的選擇與驗證（四）雜質(zhì)檢查方法的選擇與驗證雜質(zhì)的檢查方法雜質(zhì)的檢查方法 要求：專屬、靈敏要求：專屬、靈敏常用方法：常用方法： 化學分析法化學分析法 色譜分析法色譜分析法 光譜分析法光譜分析法 其它分析其它分析法法二、雜質(zhì)的常用檢查方法二、雜質(zhì)的常用檢查方法（一）化學方法：（一）化學方法：顏色、沉淀、氣體顏色、沉淀、氣體1. 顯色反應檢查法：顯色反應檢查法：目視比色法目視比色法ClOHOOH+ClOOOFe/3Fe

19、Cl3+O2NNH2CONHClOHClNO2+ NaNO2 + 2HClO2NN2+Cl-二鹽酸萘基乙二胺顯顯色色氯氯硝硝柳柳胺胺ClCl5-氯水楊酸2-氯-4硝基苯胺O2NClNH2+ NaNO2 + 2HClO2NClN2Cl+ NaCl + 2H2O+NHCH2NH2NNNHCH2CH2NH2ClO2N二鹽酸萘基乙二胺雜質(zhì)：2-氯-4硝基苯胺5- 5-氯水楊酸檢查（靈敏度法）：氯水楊酸檢查（靈敏度法）： 取本品0.50g，加水10ml，煮沸2min，放冷，濾過，濾液加三氯化鐵試液數(shù)滴，不得顯紅色或紫色2- 2-氯氯-4 -4硝基苯胺檢查（標準對照法）：硝基苯胺檢查（標準對照法）： 取本

20、品0.10g，加甲醇20ml，煮沸2min，放冷，加鹽酸溶液（9 100 ）使成50ml，濾過，取濾液10ml，加亞硝酸鈉試液5滴，放置10min，加2%氨基磺酸銨溶液1ml，振搖，再放置10min，加0.5%二鹽酸萘基乙二胺溶液1ml，如顯色，與2-氯-4-硝基苯胺10 g，加甲醇4ml和鹽酸溶液（9 100 ）使成10ml溶液，用同一方法處理后的顏色比較，不得更深（0.05%）2. 沉淀反應檢查法：沉淀反應檢查法：例：鹽酸肼屈嗪中游離肼的檢查例：鹽酸肼屈嗪中游離肼的檢查H2NNH2 +CHOOHCHOHHNN+ H2O 方法：取本品0.10g，加水5ml與水楊醛的乙醇溶液（1 20）0.1

21、ml，1min內(nèi)不得出現(xiàn)沉淀CHOCNH2NNH2 H2ONNNHNH2HCl3. 生成氣體的檢查法：生成氣體的檢查法：例：古蔡（例：古蔡（Gutzeit）氏法檢查砷鹽）氏法檢查砷鹽 原理：微量砷鹽與新生態(tài)氫（Zn + 酸）生成具有揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色砷斑，與標準砷溶液生成的標準砷斑比較（黑色）（棕色）（黃色）3233233323322-33323HgAs3HBrAsH)HgBr(AsHgBr)(3AsHAsHHgBr)(2AsAs(HgBr)3HBrHgBr3AsHAsHOH33Zn9HZn3AsOAsH3Zn3HZn3As4. 滴定法：滴定法：定量測定雜質(zhì)含量定量測定

22、雜質(zhì)含量例例3-7：硫酸亞鐵中高鐵鹽的檢查：硫酸亞鐵中高鐵鹽的檢查642322222H3OSNa2NaIOS2NaI2KI2FeKI22Fe碘的顯色薄層色譜法薄層色譜法(TLC)高效液相色譜法高效液相色譜法(HPLC)氣相色譜法氣相色譜法(GC)毛細管電泳法（毛細管電泳法（CE）藥物藥物中中有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)的檢查的檢查首選色譜法首選色譜法（二）色譜方法（二）色譜方法 根據(jù)藥物與雜質(zhì)對吸附劑的吸附或?qū)φ归_劑的根據(jù)藥物與雜質(zhì)對吸附劑的吸附或?qū)φ归_劑的解析能力不同解析能力不同(R(Rf f值的差異值的差異), ), 加以分離和檢查。加以分離和檢查。1.1.薄層色譜法薄層色譜法(TLC)(TLC)靈敏

23、、簡便、快速靈敏、簡便、快速不需特殊的設(shè)備、費用低不需特殊的設(shè)備、費用低分離分離和鑒別同步和鑒別同步進行進行TLCTLC法特點：法特點：供 對LL0Rf=L/L0薄層色譜法薄層色譜法在雜質(zhì)檢查中的應用在雜質(zhì)檢查中的應用 1) 1) 雜質(zhì)對照品法雜質(zhì)對照品法 適用于雜質(zhì)已知并有雜質(zhì)對適用于雜質(zhì)已知并有雜質(zhì)對照品的情況。照品的情況。 方法：方法：根據(jù)雜質(zhì)限量根據(jù)雜質(zhì)限量, , 取供取供試品溶液和一定濃度的雜質(zhì)對試品溶液和一定濃度的雜質(zhì)對照品溶液照品溶液, ,分別點于同一薄層板分別點于同一薄層板上展開上展開, ,定位后進行檢查。定位后進行檢查。供 對供 對示例示例3-83-8：枸櫞酸乙胺嗪中：枸櫞酸

24、乙胺嗪中N-N-甲基哌嗪的檢查甲基哌嗪的檢查10 l 對照品溶液（50 g/ml）10 l 供試品溶液（50 mg/ml）展開劑：三氯甲烷-甲醇-氨溶液（13:5:1）供試品溶液如顯相應供試品溶液如顯相應雜質(zhì)點，其顏色與對雜質(zhì)點，其顏色與對照品溶液主斑點比較，照品溶液主斑點比較，不得更深（不得更深（0.1%）%1.0/5010/5010%100mlmglmlglSCVL示例示例3-103-10：鹽酸阿米洛利中有關(guān)物質(zhì)檢查：鹽酸阿米洛利中有關(guān)物質(zhì)檢查 雜質(zhì)對照品通常用來控制供試雜質(zhì)對照品通常用來控制供試品中與之相同的雜質(zhì)，但品中與之相同的雜質(zhì)，但有時也有時也用來控制有關(guān)物質(zhì)用來控制有關(guān)物質(zhì)供 對

25、1 對210 g/ml4 g/mlABCDA斑點與斑點與C斑點對比斑點對比，熒光強度不，熒光強度不得更強；得更強；B斑點與斑點與D斑點對比斑點對比，熒光強度不，熒光強度不得更強得更強%5.0/2105/10105%100mlmglmlglSCVLA%2.0/2105/4105mlmglmlglLB2mg/ml 適用于雜質(zhì)的適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不能確定或無雜質(zhì)對照品結(jié)構(gòu)不能確定或無雜質(zhì)對照品的的情況。情況。2)2)供試品溶液自身稀釋對照法供試品溶液自身稀釋對照法 將一定濃度供試品溶液進行稀釋并將一定濃度供試品溶液進行稀釋并作為對照溶液，然后與供試品溶液在作為對照溶液，然后與供試品溶液在同一板上展開比

26、較同一板上展開比較注意：注意：僅限于雜質(zhì)斑點的顏色與主成僅限于雜質(zhì)斑點的顏色與主成分斑點顏色相同或者相近的情況分斑點顏色相同或者相近的情況供 對供 對示例示例3-113-11：吡羅昔康中有關(guān)物質(zhì)檢查：吡羅昔康中有關(guān)物質(zhì)檢查取本品，加三氯甲烷制取本品，加三氯甲烷制成每成每1ml中含中含20mg溶液溶液稀釋供試品稀釋供試品，加三氯甲，加三氯甲烷制成每烷制成每1ml中含中含0.2mg溶液溶液ABCDA、B、C斑點與斑點與D斑點斑點對比對比，熒光強度不得更，熒光強度不得更強強%1202.0L3)3)雜質(zhì)對照品與供試品溶液自身稀釋對照并用法雜質(zhì)對照品與供試品溶液自身稀釋對照并用法供 對1 對23-甲基黃

27、酮甲基黃酮-8羧酸羧酸ABCD示例示例3-133-13：鹽酸黃酮哌酯中有關(guān)物質(zhì)檢查：鹽酸黃酮哌酯中有關(guān)物質(zhì)檢查供試品溶液稀釋液供試品溶液稀釋液A斑點與斑點與C斑點（斑點（3-甲基黃酮甲基黃酮-8羧羧酸）對比酸）對比，顏色不得更深；，顏色不得更深；B斑點與斑點與D斑點對比斑點對比，顏色不得更，顏色不得更深深 無合適雜質(zhì)對照品，或供試品顯示的雜質(zhì)斑無合適雜質(zhì)對照品，或供試品顯示的雜質(zhì)斑點顏色與主成分斑點顏色有差異時，采用點顏色與主成分斑點顏色有差異時，采用與供試與供試品相同藥物作為對照作為品相同藥物作為對照作為對照品對照品。4)4)對照藥物法對照藥物法供 對供 對 供 對符合雜質(zhì)符合雜質(zhì)限量要求限

28、量要求的對照品的對照品供1 供2 對示例示例3-143-14：馬來酸麥角新堿馬來酸麥角新堿符合雜質(zhì)限量要求的符合雜質(zhì)限量要求的馬來馬來酸麥角新堿酸麥角新堿對照品對照品5mg/ml5mg/ml5mg/ml5mg/ml0.2mg/ml0.2mg/ml不得顯示雜質(zhì)斑點不得顯示雜質(zhì)斑點TLCTLC在在雜質(zhì)檢查中的雜質(zhì)檢查中的應用應用雜質(zhì)對雜質(zhì)對照品法照品法自身稀自身稀釋對照釋對照二者并二者并用用對照藥對照藥物法物法已知雜質(zhì)并已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)能制備雜質(zhì)對照品對照品無雜質(zhì)對照無雜質(zhì)對照品且雜質(zhì)斑品且雜質(zhì)斑點與主成分點與主成分斑點相近斑點相近多個雜質(zhì)點，多個雜質(zhì)點，有的有對照有的有對照品，有的沒品，有的

29、沒有對照品有對照品無雜質(zhì)對照無雜質(zhì)對照品，雜質(zhì)斑品，雜質(zhì)斑點與主成分點與主成分斑點有差異斑點有差異2.高效液相色譜法高效液相色譜法(HPLC)分離效能高分離效能高專屬性強專屬性強靈敏度高靈敏度高分離分析同時進行分離分析同時進行特點特點: :HPLC檢測雜質(zhì)的方法：檢測雜質(zhì)的方法：外標法：外標法：也叫雜質(zhì)對照品法，要求進樣精確也叫雜質(zhì)對照品法，要求進樣精確加校正因子的主成分自身對照法：加校正因子的主成分自身對照法：雜質(zhì)已知，以雜質(zhì)已知，以主成分為對照（稀釋的供試品溶液），用校正因主成分為對照（稀釋的供試品溶液），用校正因子校正雜質(zhì)峰的實測子校正雜質(zhì)峰的實測面積面積不加校正因子的主成分自身對照法：

30、不加校正因子的主成分自身對照法：無雜質(zhì)對照無雜質(zhì)對照品時適用品時適用面積歸一化法：面積歸一化法：只用于結(jié)構(gòu)相似，含量較高且限只用于結(jié)構(gòu)相似，含量較高且限度范圍較寬的雜質(zhì)，粗略定量，不用于微量雜質(zhì)度范圍較寬的雜質(zhì)，粗略定量，不用于微量雜質(zhì)的的檢查檢查外標法外標法供試品：供試品：雜質(zhì)雜質(zhì)主成分主成分對照品：對照品：SASASSAA雜質(zhì)限量：雜質(zhì)限量：示例示例3-153-15：卡托普利中二硫化物的檢查：卡托普利中二硫化物的檢查供試品溶液：供試品溶液：0.5mg/ml0.5mg/ml對照品溶液：卡托普利二硫化物對照品濃度對照品溶液：卡托普利二硫化物對照品濃度5 5 g/mlg/ml色譜柱：色譜柱：OD

31、SODS柱柱流動相：流動相：0.01M0.01M硫酸二氫鈉硫酸二氫鈉- -甲醇甲醇- -乙腈（乙腈（70:25:570:25:5）檢測波長：檢測波長：215nm215nm 按峰面積計算，原料藥中二硫化物含量不得超過按峰面積計算，原料藥中二硫化物含量不得超過1.0%1.0%，片劑中不得超過片劑中不得超過標示量標示量的的3.0%3.0%不加校正因子的主成分自身對照法：不加校正因子的主成分自身對照法：供試品：供試品：雜質(zhì)雜質(zhì)主成分主成分SA對照品：對照品：RARA稀釋稀釋RSAkA雜質(zhì)限量：雜質(zhì)限量：注意：注意：雜質(zhì)與主成分響雜質(zhì)與主成分響應因子相近（應因子相近（0.91.10.91.1）示例示例3

32、-183-18：利巴韋林中有關(guān)物質(zhì)檢查：利巴韋林中有關(guān)物質(zhì)檢查供試品溶液：供試品溶液：0.4mg/ml0.4mg/ml對照品溶液：供試品溶液稀釋至對照品溶液：供試品溶液稀釋至4 4 g/mlg/ml色譜柱：色譜柱：SCXSCX（離子交換柱）（離子交換柱）流動相：稀硫酸溶液（流動相：稀硫酸溶液（pH2.5 pH2.5 0.1 0.1）檢測波長：檢測波長：207nm207nm 供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個峰面積不得大供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個峰面積不得大于對照液主峰面積的于對照液主峰面積的0.250.25倍（倍（0.25%0.25%），各雜質(zhì)峰面積之），各雜質(zhì)峰面積之和不得大于對照液

33、主峰面積（和不得大于對照液主峰面積（1%1%）對照品主成分供試品雜質(zhì)對照品主成分供試品雜質(zhì)供試品主成分供試品雜質(zhì)AACCCCL100100%25. 0100125. 0%110011加校正因子的主成分自身對照法：加校正因子的主成分自身對照法：SARACR=CSS（藥物對照品）的相應因子（藥物對照品）的相應因子為為R（雜質(zhì)對照品）的一半（雜質(zhì)對照品）的一半 AR=AS/2RRSSSRSRCACAAACC/22雜質(zhì)與主成分響應因子相差較遠時雜質(zhì)與主成分響應因子相差較遠時S：藥物對照品R：雜質(zhì)對照品X：未知雜質(zhì)S：另一已知藥物RRSSCACAf/SSXXSXSXCAACCCAA/不加校正因子時：不加

34、校正因子時：fCAACSSXX/加校正因子時：加校正因子時：SARASARARRSSCACAf/f 的測定：的測定：供試品供試品XA稀釋稀釋對照液對照液SAfCAACSSXX/雜質(zhì)定量：雜質(zhì)定量：SXAkfA雜質(zhì)限量：雜質(zhì)限量：雜質(zhì)的校正因子直接載入各雜質(zhì)的校正因子直接載入各品種質(zhì)量標準中品種質(zhì)量標準中示例示例3-163-16：紅霉素：紅霉素A A有關(guān)雜質(zhì)檢查有關(guān)雜質(zhì)檢查供試品溶液：供試品溶液：4mg/ml4mg/ml對照品溶液：供試品溶液稀釋至對照品溶液：供試品溶液稀釋至0.2mg/ml0.2mg/ml色譜柱：色譜柱：ODSODS流動相：磷酸緩沖溶液流動相：磷酸緩沖溶液- -乙腈（乙腈（40

35、:6040:60）檢測波長：檢測波長：215nm215nm 紅霉素紅霉素B B和紅霉素和紅霉素C C按校正后的峰面積計算（分別乘按校正后的峰面積計算（分別乘以校正因子以校正因子0.70.7、1.01.0），均不得大于對照溶液主峰面積），均不得大于對照溶液主峰面積（5%5%）A對照液紅霉素B供試液紅霉素7.0AAA對照液紅霉素C供試液紅霉素0.1AAABC面積歸一化法：面積歸一化法：主成分主成分1A2A3A4A5A限量543211AAAAAA溶劑峰溶劑峰 供試品中結(jié)構(gòu)相似、相對含量較高且限度范圍供試品中結(jié)構(gòu)相似、相對含量較高且限度范圍較寬的雜質(zhì)含量的粗略參考。結(jié)構(gòu)相差較大時可較寬的雜質(zhì)含量的粗略

36、參考。結(jié)構(gòu)相差較大時可能會有較大的定量誤差。能會有較大的定量誤差。HPLCHPLC在在雜質(zhì)檢查中的雜質(zhì)檢查中的應用應用外標法外標法加校正因加校正因子主成分子主成分自身對照自身對照法法不加校正不加校正因子主成因子主成分自身對分自身對照法照法面積歸一面積歸一化化有雜質(zhì)對照品，有雜質(zhì)對照品，且進樣量能夠且進樣量能夠精確控制精確控制沒有對照品的沒有對照品的已知雜質(zhì)控制，已知雜質(zhì)控制，雜質(zhì)的雜質(zhì)的校正因校正因子子和相對保留和相對保留時間載入質(zhì)量時間載入質(zhì)量標準中標準中沒有雜質(zhì)對照沒有雜質(zhì)對照品，且雜質(zhì)與品，且雜質(zhì)與主成分響應因主成分響應因子相近子相近供試品中結(jié)構(gòu)供試品中結(jié)構(gòu)相似、相對含相似、相對含量較高

37、且限度量較高且限度范圍較寬的雜范圍較寬的雜質(zhì)含量的粗略質(zhì)含量的粗略參考參考3. 氣相色譜法氣相色譜法(GC)檢查方法檢查方法: : 除與除與HPLCHPLC相同的方法外，還有相同的方法外，還有標準溶液加入法。標準溶液加入法。 用于藥物中用于藥物中揮發(fā)性雜質(zhì)揮發(fā)性雜質(zhì)的檢查的檢查, , 如藥物中殘如藥物中殘留溶劑、農(nóng)藥殘留量等。留溶劑、農(nóng)藥殘留量等。標準溶液加入法：標準溶液加入法：消除基體干擾消除基體干擾供試品供試品XAisA定量加入雜質(zhì)定量加入雜質(zhì)XXXXisCCCAA雜質(zhì)定量：雜質(zhì)定量：4. 毛細管電泳法毛細管電泳法(CE)外標法外標法加校正因加校正因子主成分子主成分自身對照自身對照法法不加

38、校正不加校正因子主成因子主成分自身對分自身對照法照法面積歸面積歸一化一化 例例3-21: 3-21: 地蒽酚中二羥基蒽醌的檢查地蒽酚中二羥基蒽醌的檢查（三）光譜分析（三）光譜分析法法1. 1. 紫外分光光度法紫外分光光度法OOHOH地蒽酚地蒽酚二羥基蒽醌二羥基蒽醌OOHOHO0.001%0.001%地蒽酚地蒽酚0.0009%0.0009%二羥基蒽醌二羥基蒽醌432nmA0.12兩性霉素兩性霉素A A和兩性霉素和兩性霉素B B的的UV-VISUV-VIS圖譜圖譜 例例3-21: 3-21: 兩性霉素兩性霉素B B中兩性中兩性霉素霉素A A的檢查的檢查 取本品，加少量取本品，加少量DMSODMSO

39、溶解后，加甲醇定量稀釋溶解后，加甲醇定量稀釋為為100100 g/mlg/ml的溶液，于的溶液，于305nm305nm波長處測定吸光度，波長處測定吸光度，不得超過不得超過0.400.40兩性霉兩性霉素素A兩性霉兩性霉素素B305nm2. 2. 紅外分光光度法紅外分光光度法用于藥物中無效或低晶型的檢查，如甲苯達唑用于藥物中無效或低晶型的檢查，如甲苯達唑3. 3.原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法（四）其它方法（四）其它方法1.1.熱分析熱分析法（法（Thermal analysisThermal analysis） 測定物質(zhì)的物理化學性質(zhì)與溫度關(guān)系的儀器分析方法熱重分析法熱重分析法(Therm

40、ogravimetric Analysis,TGA)差熱分析法差熱分析法(Differential Thermal Analysis,DTA)差示掃描量熱法差示掃描量熱法 (Differential Scanning Calorimetry,DSC)1 1）熱重分析）熱重分析法法 ( (TGA) )T TW W供試品TGA熱重曲線W 應用應用熱天平在程序控溫熱天平在程序控溫的條件下測量物質(zhì)的質(zhì)的條件下測量物質(zhì)的質(zhì)量隨溫度變化的熱分析技術(shù)量隨溫度變化的熱分析技術(shù), ,可計算出樣品在相應可計算出樣品在相應溫度范圍內(nèi)減失質(zhì)量的百分率溫度范圍內(nèi)減失質(zhì)量的百分率. . 升華、氣化、分解升華、氣化、分解出

41、氣體、失去水等出氣體、失去水等G1G2G310008006004002000WT1T2T3398838635478134226T()草酸鈣(CaC2O4H2O)的熱重曲線在溫度T1時 CaC2O4H2O CaC2O4+H2O在溫度T2時 CaC2O4 CaCO3+CO在溫度T3時 CaCO3 CaO+CO2特 點分析樣品用量少分析樣品用量少, ,適用于適用于貴重藥材或在空氣中容易氧化藥物干燥失貴重藥材或在空氣中容易氧化藥物干燥失重重測定測定測定速度快測定速度快 可用可用于判斷結(jié)晶水或吸附水于判斷結(jié)晶水或吸附水, ,并推斷結(jié)晶水含量并推斷結(jié)晶水含量. .2 2）差熱分析）差熱分析法法 ( (DT

42、A) )在程序控制溫度在程序控制溫度下，測量供試品下，測量供試品和惰性參比物和惰性參比物( (常常用石英砂、煅制用石英砂、煅制MgO)MgO)之間的之間的溫度溫度差差與與溫度溫度( (或時間或時間) ) 關(guān)系的熱分析技關(guān)系的熱分析技術(shù)術(shù)TT供試品發(fā)生吸熱反應溫度低于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生吸熱峰參比物質(zhì)供試品發(fā)生放熱反應溫度高于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生放熱峰草酸鈣(CaC2O4H2O)TG和DTA曲線DTA用途：熔點測定熔程T T=0定性和純度檢定根據(jù)峰的數(shù)目、形狀、位置對供試品進行純度判別T供試品對照品3 3）差示掃描量熱法）差示掃描量熱法 ( (DSC) ) 測量保持供試品和惰性參比物的溫度相同, 系統(tǒng)所

43、需輸給供試品或參比物的能量差隨溫度(或時間)變化的熱分析技術(shù).樣品參比加熱爐至信號放大器加熱器導線爐溫控制器T供試品發(fā)生吸熱反應溫度低于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生吸熱峰參比物質(zhì)供試品發(fā)生放熱反應溫度高于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生放熱峰DSC峰的正負與峰的正負與DTA峰正負物理意義正好相反峰正負物理意義正好相反用于待測物質(zhì)的鑒別、晶型鑒別、純度檢查以及熔點和水分等的測定，更適合于測量物質(zhì)在物理變化或化學變化中焓的變化。不純物質(zhì)的DSC圖t(min)T不同純度苯甲酸的DSC曲線溫度97.2%98.6%標準品低共熔雜質(zhì)用于待測物質(zhì)的鑒別、晶型鑒別、純度檢查以及熔點和水分用于待測物質(zhì)的鑒別、晶型鑒別、純度檢查以及熔點和水

44、分等的測定，更適合于測量物質(zhì)在物理變化或化學變化中焓的等的測定，更適合于測量物質(zhì)在物理變化或化學變化中焓的變化。變化。T對乙酰氨基酚阿司匹林熔點測定、藥品真?zhèn)舞b別熔點測定、藥品真?zhèn)舞b別多晶型及其轉(zhuǎn)變表征多晶型及其轉(zhuǎn)變表征應用熱分析法檢查藥物純度的條件樣品純度在98.0%以上雜質(zhì)不與主成分反應雜質(zhì)不與主成分形成共晶或固熔體雜質(zhì)與熔融試樣有化學相似性藥物在熔融過程中化學性質(zhì)穩(wěn)定藥物如存在多晶現(xiàn)象則必須全部轉(zhuǎn)變成某一晶型甲磺酸二氫麥角毒堿的DSC-TGA曲線50100150200DSCTGA失溶劑失水分解2.酸堿度檢查法：酸堿度檢查法：（1）酸堿滴定法（2）指示液法（3）pH測定法3.物理性狀檢查法

45、：物理性狀檢查法：臭味與揮發(fā)性的差異（殘渣）顏色的差異（溶液顏色檢查）溶解行為的差異（澄清度檢查）旋光性的差異 旋光度）旋光管長度（）溶液濃度（:100/:100dmImlgccI 第三節(jié) 藥物中一般雜質(zhì)的檢查按來源分類按來源分類一般雜質(zhì)一般雜質(zhì)（信號雜質(zhì)）（信號雜質(zhì)）特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)（有關(guān)物質(zhì)）（有關(guān)物質(zhì)）氯化物氯化物硫酸鹽硫酸鹽鐵鹽鐵鹽重金屬重金屬砷鹽砷鹽干燥失重干燥失重水分水分熾灼殘渣熾灼殘渣易碳化物易碳化物殘留溶劑殘留溶劑溶液顏色溶液顏色澄清度澄清度一、氯化物檢查法一、氯化物檢查法)(AgClAgNOCl3HNO3白色混濁藥物：藥物：對照：對照：)(AgClAgNO),(NaCl3HN

46、O3白色混濁 Vc比濁法原理比濁法原理： 是利用氯化物在是利用氯化物在硝酸硝酸酸性溶液中與酸性溶液中與硝酸銀硝酸銀試液試液作用作用, ,生成氯化銀的白色渾濁液，與一定量生成氯化銀的白色渾濁液，與一定量標準氯標準氯化鈉溶液化鈉溶液在相同條件下生成的氯化銀混濁液比較，在相同條件下生成的氯化銀混濁液比較，以判斷供試品中氯化物是否超過限量以判斷供試品中氯化物是否超過限量。供供試試品品稀稀HNO310mlH2OAgNO31ml標標準準溶溶液液稀稀HNO310mlH2OAgNO31ml 暗處放置暗處放置5min5min( (避免避免AgClAgCl分解分解) )例：葡萄糖中氯化物檢查例：葡萄糖中氯化物檢查

47、0.6g樣品加樣品加水至水至25ml6ml（10 g Cl/ml）40ml40mlH2OH2O50ml50ml限度：限度：0.010%010.06.010106%1006SCVLA注意注意事項及討論事項及討論 為了保證樣品管與對照管的反應條件一致為了保證樣品管與對照管的反應條件一致, ,要求樣品管與要求樣品管與對照管要平行操作。對照管要平行操作。平行試驗平行試驗加稀硝酸的目的加稀硝酸的目的 避免弱酸銀鹽如碳酸銀、氧化銀、磷酸銀沉淀的產(chǎn)生；避免弱酸銀鹽如碳酸銀、氧化銀、磷酸銀沉淀的產(chǎn)生；加速加速氯化銀混濁的生成，產(chǎn)生較好的乳氯化銀混濁的生成，產(chǎn)生較好的乳濁。濁。 50ml50ml供試液含稀硝酸供

48、試液含稀硝酸10ml10ml為宜。過多會增大氯化銀的溶為宜。過多會增大氯化銀的溶解度，使?jié)岫冉档?。解度，使?jié)岫冉档?。氯化物氯化物的最適檢測濃度的最適檢測濃度范圍范圍 50ml 50ml供試液中含供試液中含0.050.05- -0.08mg0.08mg的的ClCl- -，相當于標準氯化鈉溶，相當于標準氯化鈉溶液液(10(10 gClgCl- -/ml)/ml)5.0-8.0ml5.0-8.0ml時，所顯渾濁梯度明顯。時，所顯渾濁梯度明顯。 根據(jù)限量取用適宜的供試品量，使氯化物的濃度在適宜的根據(jù)限量取用適宜的供試品量，使氯化物的濃度在適宜的范圍內(nèi)。范圍內(nèi)。 稀釋到稀釋到40ml40ml后再加硝酸銀

49、試液的目的后再加硝酸銀試液的目的 使產(chǎn)生的使產(chǎn)生的AgClAgCl渾濁均勻。渾濁均勻。硝酸銀加得過早，由于氯化物濃硝酸銀加得過早，由于氯化物濃度過大而產(chǎn)生度過大而產(chǎn)生AgClAgCl沉淀而影響比濁。沉淀而影響比濁。供試品溶液不澄清處理方法供試品溶液不澄清處理方法 供試品溶解后溶液不澄清，應過濾，過濾時的濾紙要先用供試品溶解后溶液不澄清，應過濾，過濾時的濾紙要先用含硝酸的水溶液含硝酸的水溶液(1100)(1100)洗滌，除去濾紙中含有的氯化物。洗滌，除去濾紙中含有的氯化物。 供試品溶液有色時的處理方法供試品溶液有色時的處理方法 向供試品溶液中加入某種試劑向供試品溶液中加入某種試劑, ,使溶液顏色

50、褪去后再依法使溶液顏色褪去后再依法檢查。檢查。a. a. 外消色法外消色法例例：高錳酸鉀中氯化物的檢查：高錳酸鉀中氯化物的檢查 因溶液呈紫色，加入適量乙醇，使因溶液呈紫色，加入適量乙醇，使還原褪色后還原褪色后再檢查。再檢查。 b.b.內(nèi)消色法內(nèi)消色法 如枸櫞酸鐵如枸櫞酸鐵銨（銨（棕黃色棕黃色）中）中氯化物的檢查：氯化物的檢查： 作樣品管第二份作對照管液標準濾液過濾第一份，分成二等份一定量的供試液 AgNO NaClAgNO HNO333供供試試品品稀稀AgNO31mlH2O標標準準溶溶液液稀稀AgNO31ml過濾過濾規(guī)定量規(guī)定量NaClVmlH2O50ml50mlVml二、硫酸鹽檢查法二、硫酸

51、鹽檢查法)(BaSOBaClSO4HCl224白色 2ml40、稀鹽酸加水至樣品ml樣品管樣品管比較渾濁程度放置氯化鋇min105ml%25同上一定量標準液)(對照管對照管用水稀釋至用水稀釋至50mL濃度濃度：100 gSO42/ml注意注意事項及討論事項及討論 為了保證樣品管與對照管的反應條件一致為了保證樣品管與對照管的反應條件一致, ,要求樣品管與要求樣品管與對照管要平行操作。對照管要平行操作。平行試驗平行試驗加鹽酸的目的加鹽酸的目的 可防止可防止BaCOBaCO3 3或磷酸鋇等弱酸形成鋇鹽沉淀；或磷酸鋇等弱酸形成鋇鹽沉淀； 酸度過大可使硫酸鋇溶解，降低檢查靈敏度。酸度過大可使硫酸鋇溶解，

52、降低檢查靈敏度。 50ml 50ml溶液含稀鹽酸溶液含稀鹽酸2ml2ml為宜。為宜。不溶性藥物的處理不溶性藥物的處理 加入適量的有機溶劑將藥物溶解后中依法檢查加入適量的有機溶劑將藥物溶解后中依法檢查供試品溶液有色時的處理方法供試品溶液有色時的處理方法作樣品管加水至與對照液同體積）氯化鋇（濾液作對照管加標準硫酸鉀濾液過濾）氯化鋇（濾液過濾加水加鹽酸取本品5ml25%25ml0ml. 45ml25%25ml 100ml6ml0g. 2三、鐵鹽檢查法三、鐵鹽檢查法1.硫氰酸鐵法 (Ch.P 和USP采用) 36HCl3SCNFeSCN6Fe供試品顯色，立即與同法制成的對照溶液比較加水溶解25ml稀H

53、Cl 4ml過硫酸銨 50mg加水稀釋35ml30%硫氰酸銨溶液3ml加水至50ml注意注意事項及討論事項及討論 為了保證樣品管與對照管的反應條件一致為了保證樣品管與對照管的反應條件一致, ,要求樣品管與要求樣品管與對照管要平行操作。對照管要平行操作。平行試驗平行試驗硫酸鐵銨硫酸鐵銨最適檢測濃度范圍最適檢測濃度范圍 50ml 50ml供試液中供試液中含含1010- -5050g g的的FeFe3+3+，所顯色澤梯度明顯，所顯色澤梯度明顯，易于區(qū)別（吸光度易于區(qū)別（吸光度A A與濃度與濃度c c線性關(guān)系良好）。線性關(guān)系良好）。 根據(jù)限量取用適宜的供試品量，根據(jù)限量取用適宜的供試品量，使使FeFe

54、3+3+的的濃度在適宜濃度在適宜的范圍內(nèi)。的范圍內(nèi)。 防止防止FeFe3 3+ +水解水解HCl的作用的作用過硫酸銨的作用過硫酸銨的作用 將供試品中的二價鐵氧化為將供試品中的二價鐵氧化為FeFe3 3+ +，同時防止光照條件，同時防止光照條件下硫氰酸鐵還原火分解褪色下硫氰酸鐵還原火分解褪色不溶解或?qū)z查有干擾的藥物不溶解或?qū)z查有干擾的藥物 經(jīng)熾灼破壞后將鐵鹽轉(zhuǎn)變?yōu)槿趸F后檢查殘渣經(jīng)熾灼破壞后將鐵鹽轉(zhuǎn)變?yōu)槿趸F后檢查殘渣2.巰基醋酸法 (BP采用)OH2COOSCHFeCOOHSCHFeHCOOHSCHFeCOOHHSCH2FeH2COOHSCHFe2COOHHSCH2Fe22222O

55、H222222222223紅色四、重金屬檢查法（四、重金屬檢查法（PbPb） 重金屬是指在實驗條件下能重金屬是指在實驗條件下能與與S S2-2-作用呈色作用呈色的金的金屬。屬。 如：如：AgAg、PbPb、HgHg、CuCu、CdCd、BiBi、SbSb、SnSn、AsAs、NiNi、CoCo、ZnZn等。等。 重金屬的存在影響藥物的重金屬的存在影響藥物的穩(wěn)定性穩(wěn)定性及及安全性安全性。 生產(chǎn)過程中遇到鉛生產(chǎn)過程中遇到鉛(Pb)(Pb)最多，又易在體內(nèi)積蓄最多，又易在體內(nèi)積蓄中毒中毒, ,故檢查時以鉛為代表，故檢查時以鉛為代表，以鉛的限量表示重金以鉛的限量表示重金屬限度屬限度。 第一法第四法重金

56、屬含量低的藥物(25g)第三法使用范圍硫化鈉法溶于堿性水溶液而難于溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物方法硫代乙酰胺法溶于水、稀酸、乙醇的藥物熾灼后的硫代乙酰胺法含芳環(huán)、雜環(huán)以及難溶于水、稀酸、乙醇的藥物第二法第一法 硫代乙酰胺法SHCONHCH5 . 3pHOHCSNHCH223223 H2PbSHSHPb22條件： 介質(zhì)：醋酸鹽緩沖液 (pH 3.5) 2ml 試劑：硫代乙酰胺(CH3CSNH2) 2ml 雜質(zhì)對照液：PbNO3 (10g/ml) 25ml納氏比色管黃色至棕黑色混懸液適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物甲甲乙乙丙丙對照品溶液對照品溶液供試品溶液供試品溶液供試品供試品+對照品對照品 當

57、丙管中顯出的顏當丙管中顯出的顏色不淺于甲管時，乙色不淺于甲管時，乙管中顯出的顏色與甲管中顯出的顏色與甲管比，不得更深；管比，不得更深； 當丙管中顯出的顏當丙管中顯出的顏色淺于甲管時，應取色淺于甲管時，應取樣按第二法重新檢測樣按第二法重新檢測例：采用硫代乙酰胺法檢查重金屬時，供試品如有微量例：采用硫代乙酰胺法檢查重金屬時，供試品如有微量高鐵鹽存在，需加入的是（高鐵鹽存在，需加入的是（ ） A碘試液碘試液 B重鉻酸鉀溶液重鉻酸鉀溶液 C高錳酸鉀溶液高錳酸鉀溶液 D維生素維生素C E過硫酸銨過硫酸銨D例：例：采用硫代乙酰胺法檢查重金屬時，供試品如有色需在采用硫代乙酰胺法檢查重金屬時，供試品如有色需在

58、加硫代乙酰胺前在對照溶液管中加入的是加硫代乙酰胺前在對照溶液管中加入的是（ ） A過氧化氫溶液過氧化氫溶液 B稀焦糖溶液稀焦糖溶液 C鹽酸羥胺溶液鹽酸羥胺溶液 D抗壞血酸抗壞血酸 E過硫酸銨過硫酸銨B第二法 熾灼后的硫代乙酰胺法 緩緩熾灼 放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供試品 炭化 加熱 HNO3 500-600H2SO4 除盡 放冷 完全灰化 蒸干HCl 2ml 水15ml 中性 按第一法檢查 蒸干 氨試液注意：溫控；除盡氧化氮溫控；除盡氧化氮 適用于含有芳環(huán)、雜環(huán)、難溶于水、稀酸及乙醇藥物第三法 硫化鈉法PbSSNaPbNaOH22適用于溶于堿液，難溶于稀酸或酸中沉淀的藥物 取供試品

59、適量，加取供試品適量，加NaOH試液試液5ml和水和水20ml溶解后，置于納氏比色管中，加硫化鈉試液溶解后，置于納氏比色管中，加硫化鈉試液5滴，滴，搖勻，與一定量的標準鉛溶液同法處理后的搖勻，與一定量的標準鉛溶液同法處理后的 顏色顏色比較。比較。五、砷鹽五、砷鹽檢查法檢查法古蔡氏古蔡氏法法白田道夫法白田道夫法Ag-DDCAg-DDC法法（二乙基二硫代氨基甲酸銀法）（二乙基二硫代氨基甲酸銀法） 也可用作微量砷鹽的含量測定也可用作微量砷鹽的含量測定次磷酸法次磷酸法( (奇列氏法奇列氏法) )（BPBP）3233233323322-33323HgAs3HBrAsH)HgBr(AsHgBr)(3AsH

60、AsHHgBr)(2AsAs(HgBr)3HBrHgBr3AsHAsHOH33Zn9HZn3AsOAsH3Zn3HZn3As古蔡氏法（古蔡氏法（Gutzeit）（1 1）原理）原理 金屬鋅與酸作用產(chǎn)生的新生態(tài)氫與藥物中微量金屬鋅與酸作用產(chǎn)生的新生態(tài)氫與藥物中微量砷鹽反應生成具揮發(fā)性的砷鹽反應生成具揮發(fā)性的砷化氫砷化氫, ,遇遇溴化汞試紙溴化汞試紙產(chǎn)產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑生黃色至棕色的砷斑, ,與同條件下一定量標準砷溶與同條件下一定量標準砷溶液所生成的砷斑比較液所生成的砷斑比較, ,判斷砷鹽的含量。判斷砷鹽的含量。黃色黃色棕色棕色黑色黑色8cm有孔玻璃旋塞導氣管AsH3發(fā)生瓶溴化汞試紙醋酸鉛棉花(