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1、自動(dòng)血凝儀自動(dòng)血凝儀(automated coagulation analyzer)的檢測(cè)原理的檢測(cè)原理第三章第三章(一)凝固法(一)凝固法定量加取試劑、提供定量加取試劑、提供370.5的反應(yīng)溫度的反應(yīng)溫度血漿血漿血漿凝固(反應(yīng)終止)血漿凝固(反應(yīng)終止)試劑試劑反反應(yīng)應(yīng)槽槽用于測(cè)定血漿凝固時(shí)間用于測(cè)定血漿凝固時(shí)間散射比濁:散射比濁:散射光強(qiáng)度散射光強(qiáng)度透射比濁:透射比濁:吸光度大小吸光度大小1. 比濁法比濁法均增大均增大2. 電流法電流法( (鉤法鉤法) )3.磁珠法磁珠法( (粘度法粘度法) )(二)生物化學(xué)法:(二)生物化學(xué)法:(過(guò)量)(過(guò)量)產(chǎn)色物質(zhì)產(chǎn)色物質(zhì)-底物底物 + 酶酶 產(chǎn)色物質(zhì)
2、產(chǎn)色物質(zhì)(顯色)(顯色)水解水解1. 酶(活化凝血因子)的檢測(cè):酶(活化凝血因子)的檢測(cè): 用于測(cè)定凝血因子(酶原)、活化凝血因子用于測(cè)定凝血因子(酶原)、活化凝血因子(酶)及酶抑制物(酶)及酶抑制物(AT 、抗纖溶酶)的活性。、抗纖溶酶)的活性。 2. 酶原(凝血因子)的檢測(cè):酶原(凝血因子)的檢測(cè):3. 酶抑制物的檢測(cè):酶抑制物的檢測(cè): (過(guò)量)(過(guò)量)激活劑激活劑 + 酶原酶原 (過(guò)量)(過(guò)量)產(chǎn)色物質(zhì)產(chǎn)色物質(zhì)-底物底物 + 酶酶 產(chǎn)色物質(zhì)產(chǎn)色物質(zhì)(顯色)(顯色)水解水解 酶抑制物酶抑制物 +(過(guò)量、定量)(過(guò)量、定量)酶酶 (過(guò)量)(過(guò)量)產(chǎn)色物質(zhì)產(chǎn)色物質(zhì)-底物底物 +(剩余)(剩余)
3、酶酶產(chǎn)色物質(zhì)產(chǎn)色物質(zhì)(顯色)(顯色)水解水解(三)免疫學(xué)方法(三)免疫學(xué)方法1 1透射比濁法透射比濁法2 2散射比濁法散射比濁法3 3膠乳比濁法膠乳比濁法抗原抗原 + + 抗體抗體 抗原抗體復(fù)合物抗原抗體復(fù)合物 濁度增加濁度增加散射光、吸光度增加散射光、吸光度增加膠乳顆粒膠乳顆粒用于檢測(cè)凝血因子、酶抑制物的含量。用于檢測(cè)凝血因子、酶抑制物的含量。凝血功能檢測(cè)試驗(yàn)的檢測(cè)前質(zhì)量控制:凝血功能檢測(cè)試驗(yàn)的檢測(cè)前質(zhì)量控制:停用有影響的藥物一周以上停用有影響的藥物一周以上( (抗凝治療監(jiān)測(cè)者除外抗凝治療監(jiān)測(cè)者除外) )抗凝劑:抗凝劑:109mmol/L109mmol/L的枸櫞酸鈉;抗凝比:的枸櫞酸鈉;抗凝
4、比:1 19 9止血帶使用時(shí)間要短,采血應(yīng)順利,無(wú)凝血、溶血止血帶使用時(shí)間要短,采血應(yīng)順利,無(wú)凝血、溶血容器:真空采血管、塑料管、硅化玻璃管及注射器容器:真空采血管、塑料管、硅化玻璃管及注射器標(biāo)本儲(chǔ)存:標(biāo)本儲(chǔ)存:4 41010,2h2h;( (常溫、不超過(guò)常溫、不超過(guò)2h)2h)凝血功能檢測(cè)試驗(yàn)的檢測(cè)前質(zhì)量控制:凝血功能檢測(cè)試驗(yàn)的檢測(cè)前質(zhì)量控制:凝血彈性圖儀第四章凝血彈性圖(凝血彈性圖(Thrombelastography, TEG)(Thrombelastograph Coagulation Analyzer,TEG)一種能夠動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)整個(gè)凝血一種能夠動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)整個(gè)凝血過(guò)程的分析儀。主要用于對(duì)過(guò)
5、程的分析儀。主要用于對(duì)凝血和纖溶全過(guò)程及血小板凝血和纖溶全過(guò)程及血小板功能進(jìn)行全面檢測(cè)(功能進(jìn)行全面檢測(cè)(特別是特別是術(shù)中能簡(jiǎn)化凝血功能障礙的術(shù)中能簡(jiǎn)化凝血功能障礙的診斷)診斷),并指導(dǎo)成份輸血。,并指導(dǎo)成份輸血。19481948年由德國(guó)人年由德國(guó)人HarterHarter發(fā)明發(fā)明19801980年代,開(kāi)始廣泛用于臨床年代,開(kāi)始廣泛用于臨床指導(dǎo)術(shù)中輸血指導(dǎo)術(shù)中輸血取得取得了良好效果,現(xiàn)已成為當(dāng)今了良好效果,現(xiàn)已成為當(dāng)今圍術(shù)期監(jiān)測(cè)凝血功能圍術(shù)期監(jiān)測(cè)凝血功能的最重要指標(biāo)。的最重要指標(biāo)。1995-19961995-1996年,開(kāi)始在心臟外科使用。目前以年,開(kāi)始在心臟外科使用。目前以TEGTEG為主要
6、監(jiān)測(cè)手段的為主要監(jiān)測(cè)手段的體外循環(huán)術(shù)中凝血監(jiān)測(cè)體外循環(huán)術(shù)中凝血監(jiān)測(cè)方方案已經(jīng)在世界上案已經(jīng)在世界上4040多個(gè)國(guó)家使用。多個(gè)國(guó)家使用。20042004年,抗血小板藥物療效監(jiān)測(cè)的年,抗血小板藥物療效監(jiān)測(cè)的血小板圖試驗(yàn)血小板圖試驗(yàn)PlateletMappingPlateletMapping上市,為臨床帶來(lái)了快速、準(zhǔn)確上市,為臨床帶來(lái)了快速、準(zhǔn)確的的監(jiān)測(cè)血小板聚集功能監(jiān)測(cè)血小板聚集功能的技術(shù)。的技術(shù)。承載血標(biāo)本的測(cè)試杯以承載血標(biāo)本的測(cè)試杯以445的角度和的角度和每每10秒一周的速度均速轉(zhuǎn)動(dòng),一旦血栓秒一周的速度均速轉(zhuǎn)動(dòng),一旦血栓形成,置于血標(biāo)本檢測(cè)杯中的金屬探針形成,置于血標(biāo)本檢測(cè)杯中的金屬探針受到
7、標(biāo)本形成的切應(yīng)力作用,隨之出現(xiàn)受到標(biāo)本形成的切應(yīng)力作用,隨之出現(xiàn)左右旋動(dòng),金屬針在旋動(dòng)過(guò)程中由于切左右旋動(dòng),金屬針在旋動(dòng)過(guò)程中由于切割磁力線而產(chǎn)生電流,給電腦軟件處理割磁力線而產(chǎn)生電流,給電腦軟件處理后,便形成后,便形成TEG曲線。曲線。 (一)(一)R時(shí)間時(shí)間1、從檢測(cè)開(kāi)始到第一塊纖維蛋白凝塊形成之間的、從檢測(cè)開(kāi)始到第一塊纖維蛋白凝塊形成之間的一段潛伏期,是凝血因子依次激活的時(shí)間,反映一段潛伏期,是凝血因子依次激活的時(shí)間,反映凝血因子(凝血因子(Fg除外)除外)與與血小板血小板PF3的活性。的活性。2、R時(shí)間因使用時(shí)間因使用抗凝劑抗凝劑或或凝血因子、血小板異常凝血因子、血小板異常而延長(zhǎng),因血
8、液呈高凝狀態(tài)而縮短。而延長(zhǎng),因血液呈高凝狀態(tài)而縮短。(二)(二)K時(shí)間時(shí)間 (R+K正常為正常為1012min)1. 從從R時(shí)間終點(diǎn)至描記圖幅度達(dá)時(shí)間終點(diǎn)至描記圖幅度達(dá)20mm所需的時(shí)間;所需的時(shí)間;2. 主要與主要與Fg、其它凝血因子和、其它凝血因子和PF3活性活性有關(guān),抑制有關(guān),抑制它們活性的抗凝劑能延長(zhǎng)它們活性的抗凝劑能延長(zhǎng)K 。(三)(三)角度角度1. 從血凝塊形成點(diǎn)至描記圖最大曲線弧度作切線與從血凝塊形成點(diǎn)至描記圖最大曲線弧度作切線與水平線的夾角,正常為水平線的夾角,正常為50 60 。2. 角度與角度與K時(shí)間密切相關(guān),影響因素相同。時(shí)間密切相關(guān),影響因素相同。3. 角度不受極其低凝
9、狀態(tài)的影響,較角度不受極其低凝狀態(tài)的影響,較K時(shí)間更全面時(shí)間更全面(四)(四)A(A30)1、是任一時(shí)刻曲線兩點(diǎn)間的掃描寬度,是血凝塊、是任一時(shí)刻曲線兩點(diǎn)間的掃描寬度,是血凝塊強(qiáng)度或彈性函數(shù),強(qiáng)度或彈性函數(shù),A值用單位值用單位mm來(lái)計(jì)量;來(lái)計(jì)量;2、MA值在確定前與值在確定前與A值相等;值相等;3、MA值確定后值確定后A值測(cè)量血凝塊溶解的信息。值測(cè)量血凝塊溶解的信息。 (五)最大幅度(五)最大幅度MA1. 正常值為正常值為5060mm。2. MA反映了正在形成的血凝塊的最大強(qiáng)度或硬反映了正在形成的血凝塊的最大強(qiáng)度或硬度及血凝塊形成的穩(wěn)定性;度及血凝塊形成的穩(wěn)定性;3. 主要受主要受PLT及及F
10、g 、F活性的影響,活性的影響, PLT的作用要比的作用要比Fg大。大。(六)(六)TMA時(shí)間(時(shí)間(time to MA)1. 從凝血開(kāi)始至從凝血開(kāi)始至MA值確定所需用的時(shí)間值確定所需用的時(shí)間2. TMA包含血凝塊的形成速率,評(píng)估形成穩(wěn)定包含血凝塊的形成速率,評(píng)估形成穩(wěn)定血凝塊所需用的時(shí)間。血凝塊所需用的時(shí)間。 (七)(七)CL301. 測(cè)量在測(cè)量在MA值確定后值確定后30分鐘內(nèi)血凝塊溶解剩余分鐘內(nèi)血凝塊溶解剩余的百分比。的百分比。2. CL30=(A30/MA) 100%3. CL3085%意示處于高纖溶狀態(tài),即纖溶亢意示處于高纖溶狀態(tài),即纖溶亢進(jìn);應(yīng)使用抗纖溶藥來(lái)糾正。進(jìn);應(yīng)使用抗纖溶藥
11、來(lái)糾正。(八)(八)LY301. MA值后值后30分鐘血凝塊幅度減少的區(qū)域面積;分鐘血凝塊幅度減少的區(qū)域面積;2. LY307.5% 意示處于高纖溶狀態(tài),應(yīng)使用抗意示處于高纖溶狀態(tài),應(yīng)使用抗纖溶藥來(lái)糾正。纖溶藥來(lái)糾正。LY30上=85%LY30下=15%(九)(九)TTL1、TTL = Time to lysis 溶解時(shí)間溶解時(shí)間2、指從、指從MA確定后,曲線幅寬收窄至確定后,曲線幅寬收窄至2mm時(shí)所時(shí)所經(jīng)過(guò)的時(shí)間經(jīng)過(guò)的時(shí)間 高嶺土高嶺土高嶺土高嶺土 ACT其它凝血因子其它凝血因子+PF3凝血因子凝血因子+PF3+FgFb+F+PLTFb+F+PLT纖溶期纖溶期方法方法R(r)K(k)TMA(
12、m)MA(ma)EMX(m)minminminmm自然自然全血全血10165103545455580130全血全血復(fù)鈣復(fù)鈣48242535455580135血漿血漿復(fù)鈣復(fù)鈣481320305065105180正常正常TEG圖圖凝血因子缺乏與低凝血因子缺乏與低Fg的的TEG高凝狀態(tài)高凝狀態(tài)TEG纖溶亢進(jìn)纖溶亢進(jìn)TEGTEG檢測(cè)與常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的區(qū)別檢測(cè)與常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的區(qū)別 操作方便性操作方便性簡(jiǎn)單,易學(xué)。一個(gè)樣本,簡(jiǎn)單,易學(xué)。一個(gè)樣本,同種試劑,床邊可完成。同種試劑,床邊可完成。操作復(fù)雜,多種樣本,不同的操作復(fù)雜,多種樣本,不同的試劑,必須在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。試劑,必須在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。監(jiān)測(cè)范圍監(jiān)測(cè)范圍凝血和纖溶連續(xù)的全過(guò)程凝血和纖溶連續(xù)的全過(guò)程 凝血或纖溶過(guò)程中的一個(gè)點(diǎn)或凝血或纖溶過(guò)程中的一個(gè)點(diǎn)或部分時(shí)程部分時(shí)程 血樣形式血樣形式不須處理,全血、血漿、不須處理,全血、血漿、富血小板血漿等都可富血小板血漿等都可須處理血樣,以血漿或特定血須處理血樣,以血漿或特定血樣為主樣為主 結(jié)果結(jié)果定性伴定量的結(jié)果,電腦定性伴定量的結(jié)果,電腦可自動(dòng)生成多種結(jié)果??勺詣?dòng)生成多種結(jié)果。 多為定量結(jié)果,儀器自動(dòng)生成多為定量結(jié)果,儀器自動(dòng)生成部分結(jié)果,結(jié)果單一。部分結(jié)果,結(jié)果單一。 報(bào)告報(bào)告有初步診斷功能,提示醫(yī)有初步診斷功能,提示醫(yī)師治療方案師治療
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