微生物的利用學(xué)習(xí)教案

1、會計(jì)學(xué)1微生物的利用微生物的利用(lyng)第一頁，共18頁。一、尿素一、尿素(nio s)細(xì)菌細(xì)菌1 1、含脲酶，使尿素、含脲酶，使尿素(nio s)(nio s)分解成氨，即尿素分解成氨，即尿素(nio s)(nio s)可可以是氮源以是氮源2 2、在生態(tài)系統(tǒng)中屬于分解者、在生態(tài)系統(tǒng)中屬于分解者第2頁/共18頁第二頁，共18頁。培養(yǎng)基組分培養(yǎng)基組分含量含量牛肉膏牛肉膏5g5g蛋白胨蛋白胨10g10gNaClNaCl5g5g水水定容至定容至1000ml1000ml第3頁/共18頁第三頁，共18頁。培養(yǎng)基組分培養(yǎng)基組分含量含量葡萄糖葡萄糖0.025g0.025gNaClNaCl0.12g0.1

2、2gK K2 2HPOHPO4 40.12g0.12g尿素尿素2g2g瓊脂糖瓊脂糖0.5g0.5g酚紅酚紅0.25mg0.25mg蒸餾水蒸餾水定容至定容至25ml25ml固體固體(gt)培養(yǎng)基培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基各組分各組分(zfn)的作用的作用?二、尿素細(xì)菌的篩選與鑒定二、尿素細(xì)菌的篩選與鑒定第4頁/共18頁第四頁，共18頁。三、統(tǒng)計(jì)三、統(tǒng)計(jì)(tngj)1g土樣中尿素細(xì)菌的數(shù)土樣中尿素細(xì)菌的數(shù)目目u（一）稀釋（一）稀釋(xsh)涂布培養(yǎng)法涂布培養(yǎng)法 1、稀釋涂布培養(yǎng)法與平板、稀釋涂布培養(yǎng)法與平板(pngbn)劃線法都是分離菌種最常用劃線法都是分離菌種最常用的方法，稀釋涂布培養(yǎng)法還常用于

3、統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。的方法，稀釋涂布培養(yǎng)法還常用于統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。第5頁/共18頁第五頁，共18頁。優(yōu)點(diǎn)：單菌落更易分開3、利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行分離細(xì)菌細(xì)菌(xjn)的的分離分離第6頁/共18頁第六頁，共18頁。第7頁/共18頁第七頁，共18頁。 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行(jnxng)(jnxng)。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第，想一想，第2 2步應(yīng)如何進(jìn)行步應(yīng)如何進(jìn)行(jnxng)(jnxng)無菌操作？無菌操作？ 應(yīng)從操作應(yīng)從操作(cozu)(cozu)的各個(gè)細(xì)節(jié)保證的各個(gè)細(xì)節(jié)保

4、證“無菌無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。圍等等。第8頁/共18頁第八頁，共18頁。（二）顯微鏡計(jì)數(shù)法（二）顯微鏡計(jì)數(shù)法即用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)。取一定體積的（稀釋）即用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)。取一定體積的（稀釋）樣品樣品(yngpn)(yngpn)細(xì)胞懸液置于血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)室內(nèi)，用細(xì)胞懸液置于血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)室內(nèi)，用顯微鏡觀察計(jì)數(shù)，并計(jì)算樣品顯微鏡觀察計(jì)數(shù)，并計(jì)算樣品(yngpn)(yngpn)中的含菌數(shù)。中的含菌數(shù)。第9頁/共18頁第九頁，

5、共18頁。四、實(shí)驗(yàn)四、實(shí)驗(yàn)(shyn)操作操作步驟步驟第10頁/共18頁第十頁，共18頁。1、配制、配制(pizh)培養(yǎng)基（步驟）培養(yǎng)基（步驟）LB固體固體(gt)培養(yǎng)基（目培養(yǎng)基（目的）的）尿素固體培養(yǎng)基尿素固體培養(yǎng)基第11頁/共18頁第十一頁，共18頁。2、滅菌、滅菌(mi jn)（方法）方法）3、倒平板（需要、倒平板（需要(xyo)倒倒3個(gè)個(gè)LB平板，平板，9個(gè)尿素個(gè)尿素平板）平板）LB(對照對照)尿素尿素10-210-310-4每個(gè)稀釋度每個(gè)稀釋度 1 1個(gè)個(gè)LBLB對照平板對照平板 3 3個(gè)尿素平板個(gè)尿素平板( (平行重復(fù)組平行重復(fù)組) )第12頁/共18頁第十二頁，共18頁。u（二）制備（二）制備(zhbi)細(xì)菌懸液（細(xì)菌懸液（5mL）第13頁/共18頁第十三頁，共18頁。u（三）用涂布法分離（三）用涂布法分離(fnl)細(xì)菌細(xì)菌第14頁/共18頁第十四頁，共18頁。（三）用涂布法分離（三）用涂布法分離(fnl)細(xì)菌細(xì)菌第15頁/共18頁第十五頁，共18頁。（四）倒置培養(yǎng)，觀察（四）倒置培養(yǎng)，觀察(gunch)、記錄、記錄、計(jì)算計(jì)算1010-4-4 、 1010-3