基因工程原理習(xí)題與答案

1、基因工程原理習(xí)題集r DNA分予克隆技術(shù)：克隆.抬含有爪一的DNAig組休的無(wú)性繁殖系.或指將DNA重組體引入宿主細(xì)胞建立無(wú)性繁殖系的過(guò)程。DNA分子克隆技術(shù)也稱基W克隆技術(shù)是在休外將DNA分子片段與載體DNA片段連接，轉(zhuǎn)入細(xì)胞獲得大S拷貝的過(guò)程。其基木步驟包括：制備目的基W-將目的基因與載體用限制性內(nèi)切酶切割和連接制成DNA重組一尋入宿主細(xì)胞一篩選、鑒定一擴(kuò)増和表達(dá)。載體在細(xì)胞內(nèi)自我 復(fù)制并帶動(dòng)重組的分子片段共同增殖，從而產(chǎn)生大S的DNA分子片段。主要目的是獲得某一基W或DNA 片段的大量拷貝，有了這些與親木分子完全相同的分子克隆就可以深入分析基W的結(jié)構(gòu)與功能.隨著引 入的DNA片段不同.有

2、兩種DNA庫(kù)，一種是基因組文庫(kù).另一種McDNA庫(kù)。2、分子雜交：兩條不同來(lái)源的DNA （或RNA鏈或DNA與R2A Z間彳#在互補(bǔ)順序時(shí)在一宦條件下可以發(fā)生互補(bǔ)配對(duì)形成雙螺旋分子這種分子稱為雜交分子。形成雜交分子的過(guò)程稱為分予雜交。3、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性：從不同個(gè)體制備的DNA.使用同一種限制性內(nèi)切酶酶切切得的片段長(zhǎng)度伶不相同。酶切片段的長(zhǎng)度可以作為物理圖譜或看連接圖譜中的標(biāo)記子。通常是在韻切位點(diǎn)處發(fā)生突變 而引發(fā)的。4、報(bào)告基W：-種編碼可被檢測(cè)的責(zé)白質(zhì)或酶的基因，也就是說(shuō)，是一個(gè)表達(dá)產(chǎn)物非常容易被鑒宦的基5、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）： 種休外擴(kuò)增DNA的方法。PCR使用一種耐熱的多聚酶

3、.以及兩個(gè)瞅鏈 引物。以過(guò)為溫變性將模板DNA分離成兩條鏈。低溫退火使得引物和一條模板鏈結(jié)合.然后是中溫延 伸，反應(yīng)液的游離核昔酸緊接著引物從5/端到3/端合成一條互補(bǔ)的新鏈。而新合成的DNA又可以繼續(xù)進(jìn) 行上述循環(huán)因此DNA的數(shù)目不斷倍増。6、核酸的凝膠電泳：將某種分子放到特定的電場(chǎng)中.它就會(huì)以一定的速度向適肖的電極移動(dòng)。某物質(zhì)在電場(chǎng)作用下的遷移速度叫做電泳的遷移率，它與電場(chǎng)強(qiáng)度成正比，與該分子所攜帶的凈電荷數(shù)成正比, 而與分子的摩擦系數(shù)成反比（分子大小、極性、介質(zhì)的粘度系數(shù)等）。在生理?xiàng)l件下.核嚴(yán)分子中的磷酸基 團(tuán)是離子化的所以，DNA和RNA實(shí)際上呈多聚陰離子狀態(tài)。將DNA、RNA放到電

4、場(chǎng)中，它就會(huì)由負(fù) 極向正極移動(dòng)。在凝膠電泳中，一般加入溟化乙錠進(jìn)行染色此時(shí)，核酸分子在紫外光下發(fā)出熒光，肉眼 能看到約50ngDNA所形成的條帶。7、細(xì)菌轉(zhuǎn)化：所謂細(xì)甬轉(zhuǎn)化，是抬一種細(xì)菌菌株由于捕獲了來(lái)自另一種細(xì)菌菌株的DNA.而導(dǎo)致遺傳特性發(fā)生改變的過(guò)程。這種提供轉(zhuǎn)化DNA的菌株叫做供休爾株.而接受轉(zhuǎn)化DNA的菌株則叫做受休歯 株。大腸桿歯是使用最廣泛的實(shí)驗(yàn)菌株。8、反義核酸：抬與耙DNA或RNA堿基互補(bǔ)，并能與之結(jié)合的一段DNA或RNA ：9、RNA interference：是一種進(jìn)化上保守的抵御轉(zhuǎn)基W或外來(lái)病侵犯的防御機(jī)制。將與祀基W的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA存在同源互補(bǔ)序列的雙鏈RNA導(dǎo)入細(xì)

5、胞后,能特界性地降解該mRNA .從而產(chǎn)生相應(yīng)的功 能表型缺失，這一過(guò)程屬于轉(zhuǎn)錄后基W沉默機(jī)制范疇。10、SpL入噬菌體休垂組克隆的一種篩選方法其篩選方法是Spir X不能感染E.co(ip2)： Spi-：A (red- gam-)能感染Ecoli(p2).形成小噬Dl/host rccA+/chu A包裝時(shí)若gam，需recA產(chǎn)物的作用才可形成噬斑(但為小噬斑).所以對(duì)宿主菌有要求(recAT但rccA*可引起其它重組：載體改為wJ/ga耐可在recA受體中増殖。11、DNA文庫(kù)：將某種生物的基W組DNA切割成一定大小的片段并與合適的載體重組后導(dǎo)入宿主細(xì)胞進(jìn)行克隆。這些存在于所有重組體內(nèi)的

6、基W組DNA片段的集合即基W組文庫(kù)，它包含了該生物 的僑有基W。12、cDNA： cDNA是抬以ruRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄醉的作用下形成的互補(bǔ)DNA：13、cDNA文庫(kù)：以細(xì)胞的全部ruRNA逆轉(zhuǎn)錄合成的cDNA組成的重組克隆群體稱為cDNA文庫(kù)。14、DNA探針：是帶有標(biāo)記的一段已知序列DNA.用以檢測(cè)未知序列、篩選目的基W等方面廣泛應(yīng)用。15、轉(zhuǎn)尋(作用)：借助于病毒載體遺傳信息從一個(gè)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到另一個(gè)細(xì)胞。16、染色體步移：通過(guò)相互重疊的基因組克隆之間進(jìn)行一連串雜交從而實(shí)現(xiàn)染色體上基因的定位。17、斑點(diǎn)雜交：將被檢標(biāo)木點(diǎn)到膜上.烘烤固定后與探針進(jìn)行雜交。這種方法耗時(shí)短，可做半定fi分析，一

7、張膜上可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品。18、a-complementotion：質(zhì)粒載體重組克隆的篩選方法.LacZ基W上缺失近操縱基W區(qū)段的突變體與帶有完整的近操縱基W區(qū)段的P 半乳糖昔酶陰性的突變體之間實(shí)現(xiàn)互補(bǔ).LocZAMlS :放在F質(zhì)粒上, 隨宿主傳代：Leer :放在載體上，作為篩選標(biāo)記。19、菌落嫌位雜交：將細(xì)胞從培養(yǎng)平板轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜上.然后將濾膜上的菌落裂解以釋放出DNA。將DNA烘干固定于膜上與32P標(biāo)記的探針雜交.放射自械影檢測(cè)菌落雜交信號(hào).并與平&上的菌 2落對(duì)位。20、核酸原位雜交：標(biāo)記探針與細(xì)胞或組織切片中的核酸進(jìn)行雜交的方法。21、限制性內(nèi)切酶：識(shí)別DNA的特界序列，并

8、在識(shí)別點(diǎn)或周鬧切割雙鏈ONA的一類核酸內(nèi)切酶。22、切位點(diǎn)：DNA上一段基的特定序列限制性內(nèi)切酶能夠識(shí)別出這個(gè)序列并在此將DNA酶切成兩段。23、DNA連接酚：催化DNA中相鄰的5/磷酸基與3,起基間形成磷酸一商鍵使DNA切口封合，連接DNA片段。24、持家基W：是指對(duì)所有類型組織細(xì)胞在任何時(shí)候都需要其表達(dá)的基因，通常都是維持細(xì)胞基木生存僑必須的基W，其表達(dá)常保持在固定的水平-又稱為組成性表達(dá)基W。25、奢侈基W：只在某特定的細(xì)胞類空中表達(dá)或者說(shuō)只在發(fā)育階段的某些時(shí)期表達(dá)的基W叫做奢侈基26、Tm值.是反映DNA的熱穩(wěn)定性的一個(gè)參數(shù)稱為ONA的熔解溫度系指一半的雙鏈DNA解 離成為敢鏈時(shí)的溫度

9、。27、分子標(biāo)記：廣義的分子標(biāo)記是抬可遺傳的并可檢測(cè)的ONA序列或貴白質(zhì)。資白質(zhì)標(biāo)記包括種子貯藏貴白和同I：韻（抬由一個(gè)以上基W位點(diǎn)編碼的酶的不同分子形式及等位酶（指由同一基W位點(diǎn)的不 同等位基W編碼的侮的不同分子形式九狹義的分子標(biāo)記是指能夠川來(lái)作為指紋鑒定或區(qū)分個(gè)體特點(diǎn)的ONA片段。2&基W工程：拆在體外將核酸分子插入病毒.質(zhì)粒或其他載體分子中，構(gòu)成遺傳物質(zhì)的重新組合,使之進(jìn)入原托沒(méi)有這類分子的奇主細(xì)胞內(nèi)并進(jìn)行持續(xù)穩(wěn)定的繁殖和表達(dá)的過(guò)程。29、載體：是攜帶外源DNA進(jìn)入宿主細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增和表達(dá)的DNA.它們一般是通過(guò)改適質(zhì)粒、噬歯體或摘毒等構(gòu)建的。30、衛(wèi)星DNA：又稱短串聯(lián)重復(fù).26個(gè)核昔酸

10、組成的重復(fù)敢位串聯(lián)重復(fù)（1060次）兩側(cè)為特界的敢拷貝序列人類基W組中每lOkbDNA序列至少有一個(gè)STR序列。31、鄉(xiāng)克隆位點(diǎn)：DNA中含有兩個(gè)以上密集的、能被多種限制性內(nèi)切酶識(shí)別和切割的位點(diǎn)區(qū).32、定位克?。阂卜Q為圖位克隆，是在獲取基W在染色體上的位a信息后，采用?實(shí)驗(yàn)方法對(duì)基1*1進(jìn)行克隆和定位。定位克隆包枯定位和克隆兩個(gè)過(guò)程，定位是通過(guò)連鎖分析找出與目的基W緊密連鎖的遺 傳標(biāo)記在染色休上的位置，克隆是從定位的架色體區(qū)段內(nèi)分離克隆所要的基w并進(jìn)一步研允其功能。也可以回答為通過(guò)遺傳標(biāo)記“尢獲得某一表型基W在染色體上的定位.再在候選區(qū)域內(nèi)選擇已知 基W.進(jìn)行夬變的篩選并獲得cDNA及全基W

11、的過(guò)程。33、基W芯片：基W芯片又稱為DNA微陣列，以基W樣列為分析對(duì)盤的微陣列.是通過(guò)縮微技術(shù).根據(jù)分子間特片性地相互作用的原理將生命科學(xué)領(lǐng)域中不連續(xù)的分析過(guò)程集成于硅芯片或玻璃芯片表面 的微型生物化學(xué)分析系統(tǒng)，以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞.S白質(zhì)、基因及他生物組分的準(zhǔn)確、快速.大信息量的檢測(cè)。34、RT-PCR：是以RNA為起始材料經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)產(chǎn)生cDNA,再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)増.從而獲取目的基W或檢測(cè)基因表達(dá)。主要用于分析基W的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物.丸隆cDNA及合成cDNA探針，改造cDNA序列等。35、錨定PCR：用于在休外擴(kuò)增未知序列的ONA片段的方法，一股的PCR必須預(yù)先知道欲擴(kuò)增DNA片段兩側(cè)的

12、序列，但人們經(jīng)常需耍分析一端序列未知的基W片段.可利用錨定PCR。該法的基木原理是在 基W未知序列端添加同聚物尾，人為賦予未知基W末端序列信息再用人工合成的與多聚尾互補(bǔ)的引物作 為錨定引物，在與基因另一側(cè)配對(duì)的特界引物參與下.擴(kuò)増帯有同聚物尾的序列。錨定引物PCR對(duì)分析未 知序列基因有特殊用途。36、反向PCR：常規(guī)PCR可擴(kuò)増位于兩個(gè)引物之間的DNA片段.但不能擴(kuò)增引物外側(cè)的DNA序列.反向PCR則可擴(kuò)増引物外側(cè)的DNA片段，對(duì)已知DNA片段兩側(cè)的未知序列進(jìn)行擴(kuò)增和研究。其原理為: 先用一種在目標(biāo)DNA區(qū)段上沒(méi)有識(shí)別位點(diǎn)的限制性內(nèi)切醉從跑離目標(biāo)DNA-定距離的兩側(cè)位S切割DNA分子，然后將這

13、些片斷進(jìn)行分子內(nèi)連接形成環(huán)根據(jù)已知的目標(biāo)DNA序列按照向外延伸的要求設(shè)計(jì)一對(duì)向外引物保證被擴(kuò)増的是目標(biāo)DNA區(qū)段兩側(cè)的未知序列。37、多重PCR：在同一反應(yīng)中采用多對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增幾個(gè)不同DNA片段如果基W某一區(qū)段缺失,則相應(yīng)的電泳圖譜上此區(qū)段PCR擴(kuò)増產(chǎn)物消失，從而發(fā)現(xiàn)基W異常。多重PCR具有靈敬、快速的特點(diǎn).特 別適用于檢測(cè)爪拷貝基因缺失、重排.插入等片常改變其結(jié)southern blotting -樣可瓠38、質(zhì)粒：是染色休外能夠進(jìn)行自主復(fù)制的遺傳爪位.包括真核生物的細(xì)胞器和細(xì)菌細(xì)胞中染色體以外的脫氧核糖核酸（bNA分子?，F(xiàn)在習(xí)慣上用來(lái)專指細(xì)馭 酵母蘭和放線菌等生物中染色休以外的DNA 分

14、子。在基W工程中質(zhì)粒常被用做載休。39、粘粒載體：也仙柯斯質(zhì)粒，是一類人工構(gòu)建的含有入DNA的cos序列和復(fù)制子的特殊特殊類型40、穿梭質(zhì)粒載休：是人工構(gòu)建的一類具有兩種不同復(fù)制起點(diǎn)和選擇記號(hào)，W而可以在兩種不同寄主細(xì)胞中存活和復(fù)制的質(zhì)粒載休C41、基W夾變：基因突變是指由于DNABfi基對(duì)的置換、増?zhí)砘蛉笔Ф鸬幕蚪Y(jié)構(gòu)的變化.亦稱點(diǎn)突變。42、逆轉(zhuǎn)錄酶：在休內(nèi)、外均能轉(zhuǎn)錄摘毒性RNA成為DNA,稱為依賴RNA多聚醉即為逆轉(zhuǎn)錄醉。分布在病毒的類核內(nèi)。逆轉(zhuǎn)酶與三種功能有關(guān): 使RNA DNA雜合雙鏈形成: 切除雜合雙鏈中的RNA鏈:進(jìn)而再生成DNA DNA的雙鏈。43、扌II除雜交：就是用一

15、般細(xì)胞的mRNA與特殊細(xì)胞的cDNA朵交先扣除一般共有的cDNA.再將剩下的特異的cDNA進(jìn)行克隆.用此方法已成功克隆出控制動(dòng)物胚胎發(fā)育和組織分化的基We44、測(cè)序酶 為修飾的T7 ONA polymerase, 99%3i5外切活性被除去（Versionl.Oh完全除去（V 2.0）；用于測(cè)序反應(yīng)（測(cè)序悔）。45、yAC載體酵母人工染色體載體：含酵母染色體復(fù)制起點(diǎn)Xi,自主復(fù)制序列AR5：著線粒（CEN）：兩個(gè)端粒TEL）o用于克隆501SC DNA L DNA. B、SC DMA LDNAOCDNA：C. LC)NAOCDNAa5CDNA：D、SCDNAOCDNALDNA：3、下列關(guān)于基W

16、克隆操作方法的敘述哪一個(gè)是不正確的。A. 選擇合適的限制酶.使其在特定的位點(diǎn)切開(kāi)DNA分子。B、選擇能夠進(jìn)行自我復(fù)制的小分于DNA作為救休DNAC、基W克隆就是分子雜交D.制備所需要的DNA片段，用DNA連接酶使其和載體DNA連接成重組ONA。4、酵母雙朵交休系被用來(lái)研尤A、哺乳動(dòng)物功能基W的表塑分析 B.酵細(xì)胞的功能基WC、貴白質(zhì)的相互作用D、基W的表達(dá)調(diào)控5、有關(guān)反轉(zhuǎn)錄的正確敘述是.A、反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)不需嬰引物B、反轉(zhuǎn)錄后的產(chǎn)物是cDNAC、反轉(zhuǎn)錄的模板可以是RNA,也可以是DNA0、合成鏈的方向是3/5/ 6、關(guān)于禽類RNA病逆轉(zhuǎn)錄有關(guān)活性的描述,正確的選擇是A、DNA聚介酶活性孑一5,的外

17、切酶活性QNA旋轉(zhuǎn)酶活性B. DNA聚合酶活性.5/-3/的外切酶活性QNA旋轉(zhuǎn)酹活性C、DNA聚介酶活性QNA內(nèi)切酶活性QNA旋轉(zhuǎn)酶活性 7、川于分子生物學(xué)和基W工程研處的載體必須具備兩個(gè)條件.A、含有復(fù)制廉點(diǎn)，抗選擇基因B、含有復(fù)制原點(diǎn)，合適的酶切位點(diǎn)C、抗性基W,合適的酶切位點(diǎn)8、關(guān)于核酸電泳的敘述錯(cuò)謀的是2A、泳動(dòng)速率與分子構(gòu)彖有關(guān)B.聚丙烯酰胺凝膠電泳的分辨率最商C、分子泳動(dòng)的方向與凈電荷有關(guān)D、泳動(dòng)速率與分子大小有關(guān) 9、mRNA的序列是5/ACU6A6CU3人那么通過(guò)反轉(zhuǎn)錄合成的cDNA的序列應(yīng)該是匚A. 5/T6ACTCGA3 B、5A6CTCA6T3 C、5A6CUCA6U3

18、 0、5/ACT6A6CT3 10、PCR實(shí)驗(yàn)的特界性主要取決于.A、DNA聚介酶的種類B、反應(yīng)休系中模板DNA的fiC、引物序列的結(jié)構(gòu)和長(zhǎng)度 D.四種dNTP的濃度 11、下列關(guān)于限制性核嚴(yán)內(nèi)切酶的敘述哪一個(gè)是不正確的？A、限制性內(nèi)切酶存在于許多種細(xì)菌中B、限制醉的功能是識(shí)別和降解外來(lái)的DNAC、限制酶是識(shí)別和降解DNA的酶的總稱D、限制酶能識(shí)別DNA分子上特定的核昔酸序列并在特定的位點(diǎn)切割DNA 12、卜列關(guān)于cDNA文庫(kù)與基W組文庫(kù)的敘述中.哪一項(xiàng)是不正確的？A、cDNA文庫(kù)代表r mRNA來(lái)源B. 從不同類型細(xì)胞制備的cDNA文庫(kù)可用于分離差異表達(dá)的基WC、cDNA文庫(kù)代表的所有的ON

19、A,適合于研允基W結(jié)構(gòu)和調(diào)節(jié)D、基W組文庫(kù)在理論上均等的代表了所有基因序列 13、卜列關(guān)于DNA連接酶的敘述哪一個(gè)是不正確的？A .催化ONA鏈中相鄰的3OH末端和5-磷酸基之間形成磷酸一陽(yáng)鍵。8、在DNA的休外重組中，用于具有粘性末端bNA分子之間的連接。C、在DNA的體外重組中用于平末端DNA分子之間的連接。D、催化DNA鏈中的5OH末端和3-磷隈基之間形成磷酸一鍵。14、下列關(guān)于DNA克隆載體的敘述哪一個(gè)是不正確的？A、應(yīng)是宿主細(xì)胞木來(lái)就具有的或是宿主細(xì)胞完全可接受的DNA分子B、戦體DNA都應(yīng)具有兩個(gè)或兩個(gè)以上的抗生素抗性C、它不僅能在宿主細(xì)胞內(nèi)獨(dú)立地進(jìn)行復(fù)制，而且也能復(fù)制它所連接的D

20、NA分子D載體bNA經(jīng)與外源DNA連接后，仍不失自我復(fù)制能力 15、下列關(guān)于克隆載體質(zhì)粒的敘述哪一個(gè)是錯(cuò)渓的？A、質(zhì)粒是細(xì)菌染色體外的遺傳因子.一股為雙鏈環(huán)狀的ONA分予B、質(zhì)粒在細(xì)胞內(nèi)能自主地進(jìn)行復(fù)制C、質(zhì)粒上都有產(chǎn)生大腸桿菌素的基W 0、通過(guò)火轉(zhuǎn)化”，質(zhì)粒進(jìn)入細(xì)胞后，能使受體菌獲得新的遺傳特性16、下列關(guān)于質(zhì)粒pBR322DNA的敘述哪一個(gè)是錯(cuò)誤的？A、它的分子fi較小，易于進(jìn)入細(xì)胞8、含有抗四環(huán)素(仏杓和抗氨節(jié)青霉素(AmpR)的基WC、若用EcoRI切割該質(zhì)粒，不破壞它的兩個(gè)抗生素抗性基W0、用BamHI限制酶切割pBR322質(zhì)料.將破壞它的抗氮節(jié)青霉素基W17、下列關(guān)于克隆載體細(xì)蘭人

21、工染色體BAC的敘述哪一個(gè)是錯(cuò)誤的?A.能插入幾百kb長(zhǎng)的DNA片段B、它含有抗四環(huán)素的選擇性標(biāo)記。C、它含有抗氯霉素的選擇性標(biāo)記(Cm。0、具有一個(gè)穩(wěn)定的復(fù)制原點(diǎn).可獨(dú)立地進(jìn)行復(fù)制18、下列關(guān)于克降載體入噬菌體的敘述哪一個(gè)是錯(cuò)誤的?A、X噬菌體侵染大腸桿菌可以在宿主細(xì)胞內(nèi)増殖。A噬菌體基W組中1 3的DNA是非必須的，可以用外來(lái)的DNA替換之C、允許插入X噬蘭休的DNA片段的長(zhǎng)度不限A噬歯休侵染大腸桿菌可通過(guò)溶源途徑使它的DNA整合到宿主基W組上19、下列關(guān)于PCR的敘述哪一個(gè)是不正確的？A、是Mullis于1984年發(fā)明的一種體外擴(kuò)增DNA的技術(shù)。8、根據(jù)DNA復(fù)制的基木原則，反應(yīng)休系中需

22、加入RNA聚合旃以合成引物。C、在PCR反應(yīng)體系中需要特定的引物.dNTP、鎂離子等。CX需要模板DNA.即擴(kuò)增的DNA片段。20下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述哪一個(gè)是不正確的?A、基因工程技術(shù)也稱“DNA重組技術(shù)”.“基因克隆”或“基因操作技術(shù)B、基因丄程技術(shù)俗稱遺傳工程”。a基W工程技術(shù)需要限制性內(nèi)切酶、DNA連接韻等0、基因工程技術(shù)實(shí)驗(yàn)發(fā)生于1965年。21、下列關(guān)于農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的敘述哪一個(gè)是錯(cuò)誤的？A、它存在于根癌農(nóng)桿粛細(xì)胞內(nèi)。8、該質(zhì)粒上的T-DNA片段能夠被整合進(jìn)植物細(xì)胞染色休。C、它的T-DNA片段上含有參與植物生長(zhǎng)激素和冠癟合成的基因。tx它存在于所有的上壤農(nóng)桿爾細(xì)胞內(nèi)。三、填空

23、K大部分真核基因都是由蛋白質(zhì)編碼序列和非責(zé)白質(zhì)編碼序列兩部分組成其中編碼序列稱為.非編碼序列稱為.,在一個(gè)結(jié)構(gòu)基因中.由于編碼貴白質(zhì)的部分常被非編碼序列隔開(kāi).所以真核基W也被稱為.2、在入噬菌體基因組中，目前發(fā)現(xiàn)的基因有60多個(gè).其中一半左右參與r噬菌體生命周期的訓(xùn)控.這類基W稱為.,另外一部分基因稱為.3、一種細(xì)菌爾株由于捕獲了來(lái)自另一種細(xì)菌iW株的DNA而尋致性特征發(fā)生遺傳改變的過(guò)程叫做提供DNA的粛株叫接受DNA的歯株叫4、PCR反應(yīng)生要有.三個(gè)步驟5、為r防止DNA的自身環(huán)化可用脫去雙鏈DNA6、基因丄程中常川的栽休有.7、yAC栽休容載能力是 BAC載體的容載能力是8、卅于電泳分離D

24、NA或RNA的凝膠有.其中.可區(qū)分Ibp的DNA：9、DNA探針標(biāo)記的方法有.10、EcoR 1識(shí)別和切割位點(diǎn)是 BamH 1識(shí)別和切割位點(diǎn)是 Sau3A i識(shí)別和切割位點(diǎn)是11、反轉(zhuǎn)錄酶除具有催化DNA的合成外.還具有.的作用，可將DNA-RNA雜種雙鏈中的.水解掉。12、質(zhì)粒載體容載能力是 X噬蘭體敘休的容裁能力是.,0C DNA泳動(dòng)速度-LbNA泳動(dòng)速度.13、不同構(gòu)型的DNA在瓊脂糖凝膠電泳中的遷移率也不同.SCDNA的泳動(dòng)速J叟，而來(lái)自噬菌體14、噬歯粒是由質(zhì)粒和噬歯休DNA共同構(gòu)成的.其中來(lái)自質(zhì)粒的主要結(jié)構(gòu)是的主要結(jié)構(gòu)是四、判斷題h所謂引物就是同DNA互補(bǔ)的一小段RNA分子。2、核

25、酸分子在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)蛋白質(zhì)向負(fù)極移動(dòng)。3、哺乳動(dòng)物某一類型細(xì)胞中，只有大約10%的mRNA是該類型所特有的,這類基因稱為持家基因。4、逆轉(zhuǎn)錄酶以RNA或DNA為模板以tRNA為引物合成DNA ：五、說(shuō)明題(下列徐項(xiàng)在基W工程中的主要作用或功能)h聚丙酰肢凝膠:2、pUC118噬菌料載體:3、T4多核昔激韻:4、Ti質(zhì)粒5. dNTP6、瓊脂糖:7、DNA探針:8、性磷酶:9、IPT610、x-gol木、問(wèn)答題h分子標(biāo)記是怎樣逐步演化的？2、限制性核隈內(nèi)切酶有哪能幾種類型?哪一種類型的限制酶最適合于基W工程，為什么？請(qǐng)簡(jiǎn)嬰說(shuō)明理由、3、生產(chǎn)限制性內(nèi)切酶的細(xì)菌如何保護(hù)自己的DNA不被降解?4、

26、怎樣將一個(gè)平末端DNA片段插入到EcoRI限制位點(diǎn)中去?5、某重組休的插入片段為線狀雙鏈,長(zhǎng)度為lO.Okb,被限制性核隈內(nèi)切酶A和B降解的產(chǎn)物經(jīng)凝膠電泳分級(jí)分離后結(jié)果如下:購(gòu)A祇獨(dú)消化時(shí)，得到h5kb和85kb的2個(gè)片段(2)酶獨(dú)消化時(shí)衢到05kb. 30kb、6.5kb的3個(gè)片段(3)酶A和的B 起消化時(shí)，得到05kb、l-Okb. 20kb和65kb的4個(gè)片段根據(jù)上述信息as出該插入片段的限制性內(nèi)切酶圖譜。6、簡(jiǎn)述重組DNA（基因工程）的主要步驟7、簡(jiǎn)述分子克隆的基木步驟8、說(shuō)明基W克隆的一種方法9、何為基W：程?試述其對(duì)遺傳學(xué)的慰義26、1410、在進(jìn)行基W工程時(shí)載體是攜帶耙DNA片段

27、進(jìn)入宿主細(xì)胞擴(kuò)增和表達(dá)的工具,請(qǐng)問(wèn)一個(gè)載休應(yīng)具有那些基木特性和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)？11、重組0NA技術(shù)的發(fā)展與載休的發(fā)現(xiàn)和研尤密切相關(guān)作為栽休應(yīng)嚴(yán)I具備哪些條件?12、什么是cDNA文庫(kù)？同基W組文庫(kù)有何差別?13、14、簡(jiǎn)述cDNA文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程15、簡(jiǎn)述PCR相關(guān)技術(shù)及應(yīng)用建立一個(gè)基W文庫(kù)后，如何鑒定一個(gè)攜帶目的基W的丸隆？16、17、PCR反應(yīng)包括哪些基木要素？PCR與細(xì)胞內(nèi)0NA復(fù)制兩者有哪些主要的相同點(diǎn)和不同點(diǎn),各舉出5個(gè)18、19、RFLP的中英文名？20、說(shuō)明基W芯片的工作原理及在生物學(xué)研允中的氫義21、什么是管家基因?有何恿義?22、說(shuō)明報(bào)告基W的一種用途23、核酸原位雜交的基木步腺有哪

28、些?24、DNA分子標(biāo)記有哪些種類？25、重組的類型有哪些?基W工程中常用a 一互補(bǔ)來(lái)篩選重組質(zhì)粒，請(qǐng)說(shuō)明其嫌理、說(shuō)明PCR反應(yīng)的基本原理并列舉幾種特殊的PCR方法27、核酸分予探針有哪些種類?試說(shuō)明各類探針的特點(diǎn)2&非放射性標(biāo)記物的優(yōu)點(diǎn)是什么?有哪幾類非放射性標(biāo)記物?合成非放射性核酸探針的方法有哪兒種？29、核酸分子雜交中有哪些常用的濾膜雜交方法、試舉一例說(shuō)明其原理30、如何進(jìn)行啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)與功能分析?31、川從總RNA中分離mRNA的原理是什么？32、什么是限制性內(nèi)切核酸夠的星星活性?受哪些W素影響？33、下ihi是一個(gè)基因工程質(zhì)粒載體形體圖，請(qǐng)拆出這個(gè)載休?部分（虛線箭頭所指）的功能？并

29、說(shuō)明這個(gè)載體的在基W克隆中的用途和工作原理?Hind W34、下ifiiM-個(gè)基因工程質(zhì)粒載休形休圖請(qǐng)指出這個(gè)載體各部分（虛線箭頭所拆的功能？并說(shuō)明這個(gè)載休的在基W克隆中的用途和工作原理? bcOR V伽1盤定帀 G 名.K MCSgiQRBSHI PTrcHis I1 A,B,C I t 4.4 kb 卜盼I入35、已知一個(gè)蛋白質(zhì)的氮基酸序列，如何克隆到編碼此貴白質(zhì)的基W?七、分析題:K在PCR擴(kuò)增時(shí)，（1） PCR擴(kuò)増后岀現(xiàn)的條帶與預(yù)計(jì)的大小不一致或大或小，或者同時(shí)出現(xiàn)特界性擴(kuò)増帶與非特界性擴(kuò)增帯，為什么？有何對(duì)策？（2）PCR擴(kuò)増后有時(shí)出現(xiàn)涂抹帶或片狀帯，其原W是什么？ 應(yīng)該如何改進(jìn)?2

30、s燃料乙醉是目前研允的一個(gè)熱點(diǎn).運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌能發(fā)酵/弋碳糖，但不能發(fā)酵五碳糖：大腸桿菌能發(fā)酵大部分碳源，但產(chǎn)乙醉的含量低。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)在大腸桿菌中生產(chǎn)乙醇的技術(shù)路線.并川圖例說(shuō)明（注: 運(yùn)動(dòng)發(fā)酵貳胞菌含有的丙ftM酸脫按韻和乙醇脫氫酶基W3、打算在細(xì)菌中表達(dá)一種稀有的藥物責(zé)白質(zhì)（來(lái)自人類基因）.以便能夠大fi制備這種責(zé)白。下圖是編碼該貴白質(zhì)的核昔酸序列。N末端5 -CGT GGT ATG ACT GCT CGC CGC GCT GCTTTGCT GTG GGTGGTCGCTAAGCACCT3Met Thr Ala Arg Arg Ala AlaLeu Ala Vai Gly Gly Arg s

31、topC末端分析題圖：欲修飾蛋白質(zhì)的N端和C端的核苛酸序列此圖只標(biāo)H5 fDNA的編碼鏈編碼的a垂酸標(biāo)記在璉的下面 “stop代表終止密碼了（1）請(qǐng)問(wèn)這段cDNA序列要在大腸桿菌中表達(dá)應(yīng)、乍I需考渥一些什么問(wèn)題?（2）請(qǐng)選擇一個(gè)合適的載體試述該段cDNA序列克隆在載體中并尋入大腸桿歯中表達(dá)的全過(guò)程?（3）現(xiàn)為r確保分離純化.決定將一段6個(gè)組抵酸的短肽分別加到該樂(lè)白質(zhì)的N端或C端。這些帶有組氨酸標(biāo)簽的貴白質(zhì)能夠緊緊地同A蛋白柱結(jié)合，但很容易被EDTAiff液洗脫。此法可以一步完成大量$ 白質(zhì)的純化。請(qǐng)你設(shè)計(jì)一對(duì)PCR引物備含有10個(gè)同該基W同源的核昔酸能夠用于擴(kuò)增該基W的編碼 序列.另外.在N端

32、有一個(gè)起始密碼，其后是6個(gè)組抵酸密碼子（CAC） ?另設(shè)計(jì)一對(duì)引物，能夠在C端加上6個(gè)組氮酸和一個(gè)終止密碼？4、我們實(shí)驗(yàn)室研處生做r-個(gè)如下的實(shí)驗(yàn)：將期:基W （丙崩酸脫按醉）克隆到PUC18敘休中.以 便在co力TOP10中表達(dá)，這個(gè)基W兩側(cè)具有及7鈕1的位點(diǎn)，W此il劃將它從Barrel的位點(diǎn)描入 載體中。實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按分子克隆實(shí)驗(yàn)手冊(cè)中進(jìn)行：載休用&7卅1切割后.立即用堿性磷酸酶處理，接著將 處理過(guò)的載體同用EghHI切割的P比基W混合，加入T4連接醉逬行溫仏 連接后，將DNA同處理過(guò)的 可以接受外源DNA的co力TOPIO感受態(tài)細(xì)胞混合。最后將混合物涂布在加有氨茉青霉素、IPTG和x-go

33、l 固體培養(yǎng)基的平板上。實(shí)驗(yàn)中同時(shí)設(shè)宜r 4個(gè)對(duì)照:對(duì)照1=將未同任何載體接觸過(guò)的細(xì)菌細(xì)胞涂布在培養(yǎng)平板上。對(duì)照2：將未切割載體轉(zhuǎn)化過(guò)的細(xì)菌細(xì)胞涂布在培養(yǎng)平板上對(duì)照3：將經(jīng)切割（但未用戚性磷酸酶處理）并用T4連接酶連接（但沒(méi)有P比基W）的載體轉(zhuǎn)化過(guò) 的細(xì)菌細(xì)胞涂布在培養(yǎng)平板上。對(duì)照4：將經(jīng)切割（并用堿性磷酸酶處理過(guò)）并用T4連接陽(yáng)連接（但沒(méi)有P比基W）的栽體轉(zhuǎn)化過(guò) 的細(xì)菌細(xì)胞涂布在培養(yǎng)平板上。在進(jìn)行第一次實(shí)驗(yàn)時(shí)，感受態(tài)細(xì)胞不是自己制備的，結(jié)果，在僑有的平板上都長(zhǎng)出r多到無(wú)法計(jì)數(shù)的 菌落（見(jiàn)下表1）。在第一次實(shí)驗(yàn)中.自己制備感受態(tài)細(xì)胞.但這一次，僑有的平板上都沒(méi)歯落生長(zhǎng)（見(jiàn)下 表1）。接著又進(jìn)行

34、了第三次實(shí)驗(yàn)，這次得到了轉(zhuǎn)化子（見(jiàn)下表1九從實(shí)驗(yàn)平板上挑出12個(gè)菌落，分離質(zhì) 粒DNA,并用Barrel進(jìn)行切割.其中9個(gè)克隆產(chǎn)生大小同載體pUC18 樣的飛一的一條帶.另3個(gè)克 隆中切出一個(gè)基W實(shí)驗(yàn)終于獲得成功表h Q必基W克隆的結(jié)果制備的樣品實(shí)驗(yàn)結(jié)果第1次第2次第3次對(duì)照1只有細(xì)胞TMTC00對(duì)照2未切的載體TMTC0N1000對(duì)照3省去磷酸酶處理.無(wú)Q必基WTMTC0435對(duì)照4無(wú)Q必基WTMTC025實(shí)驗(yàn)樣品TMTC034注：TMTC=too many to count.多到無(wú)法計(jì)數(shù)（1）你如何看待第一次的實(shí)驗(yàn)結(jié)果？對(duì)照1的目的是什么？18（2）影響第一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的原因是什么？對(duì)照2的

35、作用何在?（3）對(duì)腮3和4#有什么作用？（4為什么要用性磷酸鯛處理載體？（5） pUC18表達(dá)的是pdc基W融合賀白還是純pdc基W產(chǎn)物?為什么？（6）第三次實(shí)驗(yàn)如何進(jìn)行轉(zhuǎn)化子的挑選？并說(shuō)明其原理?基因工程原理習(xí)題集參考答案二、選擇題參考答案 1、B 2、B 3. C 4、C 5、B 6、C 7、B8、C 9、B 10. C 11、C 12、C 13、D 14、B 15、C 16、D 17、B 18、C 19、B 20、D2L D三、填空題參考答案1、外顯子，內(nèi)含子,斷裂基W： 2、必須基因必須基W：3、轉(zhuǎn)化，供體菌株，受體蘭株：4、變性、退火.延伸：5.堿性磷酸酶，5磷漲 6.質(zhì)料載體.X噬

36、菌體載體.人工染色體載體。7、200-500kb.10-215kb.平均lOOkb； 8、瓊脂糖凝膠.聚丙烯酰胺凝膠，聚丙烯酰胺凝膠：9.切口平移法.隨機(jī)引物法：10 6IAATTC. 616ATCC. I GATC : 11、RNAi- RNA： 12、小于 lOkb. 9-23kb： 13、嚴(yán)快.最慢.居中C 14、復(fù)制區(qū).16區(qū)。四、判斷題參考答案：1、錯(cuò)謀2、錯(cuò)誤3、錯(cuò)洪4.錯(cuò)誤五、說(shuō)明題（下列補(bǔ)項(xiàng)在基W工程巾的主要作用或功能）參考答案:1、電泳介質(zhì)，用于分離大小郴差I(lǐng)bp的DNA.或用于分離蛋白質(zhì)。2、用于制備敢鏈DNA,因栽休有爪鏈絲狀噬歯休的IG區(qū)，在幫助飛鏈?zhǔn)删莸膸椭略谒拗?/p>

37、細(xì)胞中制備敢鏈DNAo4、用于植物基W丄程的轉(zhuǎn)化載體，內(nèi)含T-DNA區(qū)。5、DNA合成底物。206、電泳介質(zhì)，用于分離大DNA或RNA7、作為分子雜交卅，用于彌選與探針同源的基W8、除去端的磷酸基，防止DNA重組時(shí)栽休的自連269、安慰誘導(dǎo)物，結(jié)構(gòu)與別乳糖相似，川于誘導(dǎo)乳糖操縱元的表達(dá)10、生色劑，P 半乳糖昔酶分解X-gal形成藍(lán)色產(chǎn)物，用于a互補(bǔ)或藍(lán)白斑篩選.參考答案:h分子標(biāo)記是能夠川來(lái)作為指紋鑒定或區(qū)分個(gè)體特點(diǎn)的DNA片段。這種標(biāo)記在遺傳學(xué)研究和生物技術(shù)應(yīng)用方面具有非常重要的作用-分子標(biāo)記的基礎(chǔ)是個(gè)休間存在的自然遺傳變界，進(jìn)而造成許翁遺傳序列 的多態(tài)性即這些序列在不同的個(gè)體表現(xiàn)不同。分

38、子標(biāo)記就是通過(guò)査找和應(yīng)用這種變界對(duì)個(gè)休、性狀和基W在遺傳差界的基礎(chǔ)上進(jìn)行鑒別。(1限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性這是發(fā)展最早的分子標(biāo)記技術(shù)。其原理是檢測(cè)DNA在限制性內(nèi)切酶酶切后形成的特定ONA片段的 大小 W此凡是可以引起酶切位點(diǎn)發(fā)生變界的突變都可導(dǎo)致RFLP的產(chǎn)生此技術(shù)包括以下基木步驟: DNA的提取和純化: DNA的限制性內(nèi)切酶酶切: 用凝膠電泳將DNA片段分開(kāi): 把DNA片段轉(zhuǎn)移到濾膜上; 利用放射性標(biāo)記的探針與濾膜上的DNA片段進(jìn)行雜交以顯示特定的DNA片段.然后分析結(jié)果.(2) 馳機(jī)擴(kuò)増多態(tài)性DNA該技術(shù)用隨機(jī)引物非定點(diǎn)地?cái)U(kuò)増DNA片段.然后用聚丙烯酰胺凝膠電泳分開(kāi)擴(kuò)增片段。其特點(diǎn)包括: 不

39、需DNA探針.設(shè)訃引物也不需要預(yù)先知道序列信息: 用一個(gè)引物就可擴(kuò)增出許鄉(xiāng)片段，總的來(lái)說(shuō)RAPD在檢測(cè)多態(tài)性時(shí)是一種相!快速的方法: 技術(shù)簡(jiǎn)爪，RAPD分析不涉及分子雜交、放射自顯影或其他技術(shù):RAPD分析所需DNA樣品a少:RPO分析中存在的最大問(wèn)題是重復(fù)性不太扁，W為在PCR反應(yīng)中條件的變化會(huì)引起一些擴(kuò)増產(chǎn)物的改變。（3）擴(kuò)増片段長(zhǎng)度多態(tài)性其特點(diǎn)是把RFLP和PCR結(jié)合了起來(lái)。其基木步驟思 把DNA進(jìn)行限制性內(nèi)切酶酶切，然后選鄭 特定的片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增（在所有的限制性片段兩端加上帶有特定序列的“接頭）用接頭互補(bǔ)的但3/ 端有幾個(gè)隨機(jī)選擇的核昔酸的引物進(jìn)行特界PCR擴(kuò)增.只有那些與3,端嚴(yán)

40、格配對(duì)的片段才能得到擴(kuò)増.再在有高分辨率的測(cè)序膠上分開(kāi)這些擴(kuò)增產(chǎn)物.用放射性法、熒光法或銀染色法均可檢測(cè)之同一位點(diǎn)的不同等位基W之間常常只有一個(gè)或幾個(gè)核昔酸的差界 W此在分子水平上對(duì)敢個(gè)核昔酸的差界進(jìn)行檢測(cè)是很有總義的。目前SNP作為一種斯的分子標(biāo)記，已有2000多個(gè)標(biāo)記定位于人類染色 休上.在植物上也在進(jìn)行開(kāi)發(fā)研尤。2、1類限制性核酸內(nèi)切酶、II類限制性核酸內(nèi)切酶和川類限制性核酸內(nèi)切酶三類.H類限制性核酶報(bào)適合基W工程 W為H類限制性核酶內(nèi)切酶只由一條肽鏈構(gòu)成僅需M62*.切割DNA特界性最強(qiáng)且就在識(shí)別位點(diǎn)范ffl內(nèi)切斷DNA。i類和川類限制性核內(nèi)切酶由于切割序列是馳機(jī)的.與識(shí)別序列不統(tǒng)一.

41、W此在基W工程中沒(méi)有什么價(jià)值3、細(xì)菌通過(guò)對(duì)自身DNA上的識(shí)別序列進(jìn)行甲基化來(lái)保護(hù)自己的ONA不被限制性內(nèi)切酶破壞。4、對(duì)于平末端DNA.右先連上工設(shè)計(jì)合成的EcoRI切割產(chǎn)生的脫氧寡核昔戰(zhàn)雙鏈接頭，撚后再插入到EcoRI限制位點(diǎn)中去：也可以將EcoRI的限制位點(diǎn)進(jìn)行改造將粘性末端變成平末端后.用T4DNA連接酶進(jìn)行連接。0.51. 02.06. 55、6、重組DNA的主要步驟主要包拈以下四個(gè)基木步驟:（1）目的基W的獲徇:2）目的基W與栽休分子在休外進(jìn)行連接反應(yīng)形成重組體:3）將人工重組的DNA分子尋入能進(jìn)行正常復(fù)制的崙主細(xì)胞從而御到復(fù)制: 4）巫組休分子的轉(zhuǎn)化子克隆的選擇和篩選。7、重組DN

42、A的主要步驟主要包括以下四個(gè)基木步驟:（1）目的基W的獲毎:2)(3)目的基W與載休分子在休外進(jìn)行連接反應(yīng).形成重組體:將人工重組的DNA分子導(dǎo)入能進(jìn)行正常復(fù)制的寄主細(xì)胞從而御到復(fù)制:4)重組休分予的轉(zhuǎn)化子克隆的選擇和篩選。8、差異克?。豪脕?lái)源不同DNA之間的表現(xiàn)度差界來(lái)分離差異表達(dá)基W的功能克隆方法。在任何組織中都表達(dá)的基W是管家基因在大多數(shù)cDNA文庫(kù)中都出現(xiàn)。用一個(gè)來(lái)源的cDNA去除第一個(gè)來(lái)源中共同的RNA.留下獨(dú)特的RNA用于文庫(kù)構(gòu)建。9、基W工程是拆在體外將核酸分子插入摘毒.質(zhì)?；蚱渌d休分予中構(gòu)成遺傳物質(zhì)的重新組合.使之進(jìn)入原先沒(méi)有這類分子的寄主細(xì)胞內(nèi)并進(jìn)行持續(xù)穩(wěn)定的繁殖和表達(dá)的

43、過(guò)程。基W工程是基W分子水平上的遺傳工程.是一門能定向改造生物遺傳性狀的育種新技術(shù)?；鵚工程能使帶有各種遺傳信息的DNA片段越過(guò)不同生物間特異的細(xì)胞界限而組入到完全不同的生物體內(nèi)。定向地控制、修飾和改變生物體的遺傳和變界從而創(chuàng)造出自然界沒(méi)有或具有新的遺傳性狀的生物新品種。10、（1）具有多克隆位點(diǎn) （2）能自我復(fù)制：（3）具有篩選標(biāo)記：（4）在細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)定性。11、（1）具有多克隆位點(diǎn) （2）能自我復(fù)制：3）具有篩選標(biāo)記：用于繪制基因缺失圖譜和進(jìn)行基W表達(dá)分析:（2用于基W突變研處:C3）用于病1術(shù)原體的檢測(cè)和基W分型:（4）用于細(xì)菌檢測(cè):（5）用于同細(xì)胞周期發(fā)育階段的cDNA作探針系統(tǒng)性地研

44、處細(xì)胞中任總:時(shí)期特界表達(dá)的基W；（6能了解某些基因?qū)μ囟ㄉL(zhǎng)發(fā)廳階段的重要性（7）基因芯片還可用于進(jìn)行基因診斷，可建立正常人特定組織、器官的基W芯片.給出標(biāo)準(zhǔn)雜交信號(hào)圖:（8）用嘉人的可疑cDNA做探針與之雜交，檢査哪些基W的表達(dá)受抑制或激活421、管家基因是抬所有類型組織細(xì)胞在任何時(shí)候都需要表達(dá)的基因。由于管家基W是生命活動(dòng)必需的基1*1.表達(dá)相對(duì)穩(wěn)定，差界小，所以在基因芯片技術(shù)中根據(jù)各芯片的管家基W可以得出標(biāo)準(zhǔn)化系數(shù)進(jìn)行標(biāo) 準(zhǔn)化校正：管家基因在所有的細(xì)胞中都有表達(dá) W此有關(guān)管家基W的概念有助于分析差界表達(dá)基W的表達(dá)情況進(jìn)而進(jìn)行差界表達(dá)基W的克隆。通過(guò)管家基W，能比較不同樣木中某種mRNA

45、的水平。在進(jìn)行基W 分離時(shí)，可通過(guò)不同組織間基因的比較扌II除相同部分（管家基因）后御到差界表達(dá)基因，從而得到不同 組織間基W表達(dá)。22、（1用于鑒定啟動(dòng)子:2）可以用以了解細(xì)胞中基因的表達(dá)情況.便于分析基W的調(diào)節(jié): RFLP 標(biāo)記DNA某一位點(diǎn)上的變界有可能引起該位點(diǎn)特界性的限制性內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)的改變.包括原有位點(diǎn)的消失或出現(xiàn)新的酶切位點(diǎn).致使酶切片段長(zhǎng)度隨之發(fā)生變化。這種變化引起的多態(tài)現(xiàn)象即為限制性片段 長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLPk對(duì)RFLP的檢測(cè)主耍是用southern雜交的方法進(jìn)行.即利用限制酶酶解及凝膠電泳 分離不同生物休的DNA分子.然后用經(jīng)標(biāo)記的特異DNA探針與之雜交，通過(guò)發(fā)射自影或非同位素顯色技 術(shù)來(lái)揭示DNA的多態(tài)性。(2) RAPD標(biāo)記隨機(jī)擴(kuò)增賽態(tài)性DNA,用馳機(jī)短引物（人工合成的,7核昔酸）進(jìn)行DNA的PCR擴(kuò)增。所擴(kuò)增的DNA區(qū)