生物組織中還原性糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定

1、水浴加熱水浴加熱蘇丹蘇丹染液染液蘇丹蘇丹染液染液鏡檢鏡檢鏡檢鏡檢 橘黃色橘黃色 紅色紅色雙縮脲雙縮脲（NHNH2 2-CO-NH-CO-NH-CO-NH-CO-NH2 2）是兩個(gè)分子是兩個(gè)分子脲脲（即尿（即尿素）經(jīng)素）經(jīng)180180左右加熱，放出一個(gè)分子左右加熱，放出一個(gè)分子氨氨（NH3NH3）后）后得到的產(chǎn)物。得到的產(chǎn)物。雙縮脲反應(yīng)雙縮脲反應(yīng)即在堿性溶液（即在堿性溶液（NaOHNaOH）中，雙縮脲能與銅）中，雙縮脲能與銅離子（離子（Cu2+Cu2+）作用，形成紫紅色絡(luò)合物。）作用，形成紫紅色絡(luò)合物。雙縮脲試劑雙縮脲試劑用于通過用于通過雙縮脲反應(yīng)雙縮脲反應(yīng)檢測雙縮脲，因蛋檢測雙縮脲，因蛋白質(zhì)中

2、也有白質(zhì)中也有-CONH-CONH-基也可用于檢驗(yàn)蛋白質(zhì)，與蛋白基也可用于檢驗(yàn)蛋白質(zhì)，與蛋白質(zhì)接觸后的顏色呈紫色。質(zhì)接觸后的顏色呈紫色。（1 1）還原糖的鑒定）還原糖的鑒定1 11 11 11 11 1辨析比較辨析比較 斐林試劑與雙縮脲試劑的比較分析斐林試劑與雙縮脲試劑的比較分析比較比較項(xiàng)目項(xiàng)目斐林試劑斐林試劑雙縮脲試劑雙縮脲試劑不不同同點(diǎn)點(diǎn)使用使用方法方法甲液和乙液混合均勻后方可甲液和乙液混合均勻后方可使用，且現(xiàn)配現(xiàn)用使用，且現(xiàn)配現(xiàn)用 使用時(shí)先加使用時(shí)先加A A液再加液再加B B液液 呈色呈色反應(yīng)反應(yīng)條件條件需水浴加熱需水浴加熱不需加熱即可反應(yīng)不需加熱即可反應(yīng)反應(yīng)反應(yīng)原理原理還原糖中的醛基被

3、還原糖中的醛基被CuCu( (OHOH) )2 2氧氧化化, ,CuCu( (OHOH) )2 2被還原為被還原為CuCu2 2O O 具有肽鍵的化合物在堿具有肽鍵的化合物在堿性條件下與性條件下與CuCu2+2+反應(yīng)生反應(yīng)生成絡(luò)合物成絡(luò)合物 顏色顏色磚紅色磚紅色紫色紫色濃度濃度乙液乙液CuSOCuSO4 4濃度為濃度為0.05g/0.05g/mLmL B B液液CuSOCuSO4 4濃度為濃度為0.01 0.01 g g/ /mLmL相同點(diǎn)相同點(diǎn) 相同點(diǎn)相同點(diǎn)都含有都含有NaOHNaOH、CuSOCuSO4 4兩種成分，且所用兩種成分，且所用NaOHNaOH濃度都是濃度都是0.10.1g g/

4、 /mLmL (2)鹽酸可改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)鹽酸可改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，同時(shí)使染色質(zhì)中的胞，同時(shí)使染色質(zhì)中的DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于與蛋白質(zhì)分離，有利于DNA 與染色劑結(jié)合與染色劑結(jié)合。實(shí)驗(yàn)：觀察實(shí)驗(yàn)：觀察DNA和和RNA在細(xì)胞中的分布在細(xì)胞中的分布 2實(shí)驗(yàn)流程 沖洗涂片：用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10 s 3實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及相關(guān)結(jié)論 現(xiàn)象現(xiàn)象結(jié)論結(jié)論 綠色明顯集中且接綠色明顯集中且接近細(xì)胞中央近細(xì)胞中央 DNA主要分布于主要分布于細(xì)胞核中細(xì)胞核中 綠色周圍的紅色范綠色周圍的紅色范圍較廣圍較廣 RNA廣泛分布于廣泛分布于細(xì)胞質(zhì)中細(xì)胞質(zhì)中 實(shí)驗(yàn)結(jié)果示例實(shí)驗(yàn)結(jié)果示例

5、材料選擇材料選擇1.生物實(shí)驗(yàn)選材基本要求生物實(shí)驗(yàn)選材基本要求:符合實(shí)驗(yàn)要求符合實(shí)驗(yàn)要求易獲取的原則易獲取的原則不對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾不對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾2.本實(shí)驗(yàn)選材初步分析：本實(shí)驗(yàn)選材初步分析： 真核細(xì)胞真核細(xì)胞（如：洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞，人的口腔上皮細(xì)胞等。（如：洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞，人的口腔上皮細(xì)胞等。該實(shí)驗(yàn)不宜選用綠色植物的葉肉細(xì)胞。該實(shí)驗(yàn)不宜選用綠色植物的葉肉細(xì)胞。）本實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng) (1)幾種液體在實(shí)驗(yàn)中的作用幾種液體在實(shí)驗(yàn)中的作用 0.9%的的NaCl溶液：保持口腔上皮細(xì)胞正常溶液：保持口腔上皮細(xì)胞正常形態(tài)形態(tài) 8%的鹽酸：的鹽酸： a.改變細(xì)胞膜的通透性改變細(xì)胞膜的通透性 b使染色體中使染色體中DNA與蛋白質(zhì)分離與蛋白質(zhì)分離 蒸餾水：蒸餾水：a.配制染色劑；配制染色劑；b.沖洗載玻片沖洗載玻