實驗動物講義

1、實驗實驗1 1 基本技能操作基本技能操作一一 實驗動物的抓取固定方法實驗動物的抓取固定方法1小鼠的抓取固定方法小鼠的抓取固定方法抓?。翰灰と?，可單手、雙手抓?。翰灰と?，可單手、雙手固定：鼠板（蠟板）和固定器兩種固定：鼠板（蠟板）和固定器兩種2 大鼠的抓取固定方法大鼠的抓取固定方法抓取抓?。捍鞣雷o手套：帆布或硬皮質的（否則狂犬：戴防護手套：帆布或硬皮質的（否則狂犬疫苗）疫苗）方法一同小鼠方法一同小鼠方法二方法二:腋下，拇指抵下頜骨，掌心握身體中段腋下，拇指抵下頜骨，掌心握身體中段固定固定同小鼠同小鼠3 豚鼠的抓取固定方法豚鼠的抓取固定方法 豚鼠性情溫和，膽小易驚，一般不易傷人。豚鼠性情溫和，

2、膽小易驚，一般不易傷人。1拇指和食指環(huán)扣其頸部，另一手托臀部；拇指和食指環(huán)扣其頸部，另一手托臀部；2另外可用布袋固定。另外可用布袋固定。4 兔的抓取固定方法兔的抓取固定方法抓取抓?。河沂謴念^前部把兩耳壓于手掌內，將頸部的毛連：右手從頭前部把兩耳壓于手掌內，將頸部的毛連同皮一起提起；左手托住臀部。同皮一起提起；左手托住臀部。注意：不可只抓兩耳，會損傷的。注意：不可只抓兩耳，會損傷的。固定：固定：常用兩種常用兩種盒式固定：常用于兔腦內和耳血管的操作；盒式固定：常用于兔腦內和耳血管的操作；臺式固定：常用于測量血壓、呼吸、靜脈采血；一般麻臺式固定：常用于測量血壓、呼吸、靜脈采血；一般麻醉后用。醉后用。

3、5 狗狗 將其嘴用繩捆綁后繞至頸后固定系好將其嘴用繩捆綁后繞至頸后固定系好二二 實驗動物編號標記方法實驗動物編號標記方法 為了觀察每個動物的不同情況，必須進行編號標記。為了觀察每個動物的不同情況，必須進行編號標記。應保證作到號碼清楚、耐久、簡便、易認和適用。應保證作到號碼清楚、耐久、簡便、易認和適用。1顏料涂染顏料涂染 即用化學劑在動物身體明顯部位如被毛、四肢等處進即用化學劑在動物身體明顯部位如被毛、四肢等處進行涂染或用不同顏色等來區(qū)分各組動物，是實驗室最行涂染或用不同顏色等來區(qū)分各組動物，是實驗室最常用、最容易掌握的方法。常用、最容易掌握的方法。常用的編號標記液有常用的編號標記液有：3%-5

4、%苦味酸溶液苦味酸溶液 涂染黃色涂染黃色2%硝酸銀溶液硝酸銀溶液 咖啡色（涂后需光照咖啡色（涂后需光照10分鐘）分鐘）0.5%中性紅或品紅溶液中性紅或品紅溶液 紅色紅色煤焦油酒精溶液煤焦油酒精溶液 黑色黑色龍膽紫溶液龍膽紫溶液 紫色紫色2烙印法：不常用烙印法：不常用3號牌法：不常用號牌法：不常用如狗可用掛牌或背部剪毛或燙毛的方法；如狗可用掛牌或背部剪毛或燙毛的方法；家兔與豚鼠可用號碼烙印鉗在背部編號；家兔與豚鼠可用號碼烙印鉗在背部編號；大小鼠常用大小鼠常用3%-5%苦味酸編號，不同部位苦味酸編號，不同部位代表不同數字。代表不同數字。三三 實驗動物給藥途徑和方法實驗動物給藥途徑和方法1皮內注射：

5、脫毛后進行小泡不會很快消失。如青霉素皮內注射：脫毛后進行小泡不會很快消失。如青霉素皮試。皮試。 兔、豚鼠和大鼠的注射部位均為背部脊柱兩側的皮兔、豚鼠和大鼠的注射部位均為背部脊柱兩側的皮膚。注射時針頭的孔朝上與皮膚平行刺入皮內（表皮和真皮膚。注射時針頭的孔朝上與皮膚平行刺入皮內（表皮和真皮間），如果小泡不很快消失則證明在皮內。間），如果小泡不很快消失則證明在皮內。 注射量：小鼠最多不超過注射量：小鼠最多不超過0.05ml，豚鼠、大鼠和兔，豚鼠、大鼠和兔一般為一般為0.1ml。 2皮下注射：皮下注射： 注射針頭進入皮下（真皮下），若針注射針頭進入皮下（真皮下），若針頭能自由撥動無牽阻，注入注射液后

6、形成小泡，很快消失。頭能自由撥動無牽阻，注入注射液后形成小泡，很快消失?；蛲ㄟ^后腿肌肉進入皮下注射?；蛲ㄟ^后腿肌肉進入皮下注射。 3肌肉注射：大小鼠直接刺入大腿外側肌肉內，回肌肉注射：大小鼠直接刺入大腿外側肌肉內，回血無則可推液。兔在臀部。血無則可推液。兔在臀部。 4腹腔注射：進針方向與腹股溝垂直，無回血回尿腹腔注射：進針方向與腹股溝垂直，無回血回尿即可推液。小鼠頭低尾高位。小鼠一般為即可推液。小鼠頭低尾高位。小鼠一般為0.51ml, 豚鼠、豚鼠、兔一般為兔一般為5ml。5靜脈注射：靜脈注射：*大鼠小鼠尾靜脈注射大鼠小鼠尾靜脈注射0.5ml為宜；左右為為宜；左右為靜脈，上下為動脈；于下靜脈，上

7、下為動脈；于下1/3處注射，先處注射，先用用45度溫水或酒精處理，使血管充盈。度溫水或酒精處理，使血管充盈。*兔耳緣靜脈注射；兔耳緣靜脈注射；6經口給藥：經口給藥：*大小鼠：大鼠大小鼠：大鼠1-2ml/次，小鼠次，小鼠0.1-0.3ml/10g體重體重/次次 左手持鼠，腹部朝上，頭部向上有一個傾斜度；右手持灌胃左手持鼠，腹部朝上，頭部向上有一個傾斜度；右手持灌胃器，從口角進針，隨其吞咽通過食道進入胃內。如果不掙扎，有落器，從口角進針，隨其吞咽通過食道進入胃內。如果不掙扎，有落空感，說明在胃內；如果掙扎或嘔吐，有阻力，不可硬插，進入氣空感，說明在胃內；如果掙扎或嘔吐，有阻力，不可硬插，進入氣管會

8、造成死亡，應重來。管會造成死亡，應重來。 灌胃器的制作方法：灌胃器的制作方法： 用腰穿的針頭，前部略彎，或用腰穿的針頭，前部略彎，或12號注射針頭，頭部磨鈍或焊號注射針頭，頭部磨鈍或焊成凸沿，針頭部大小鼠約長成凸沿，針頭部大小鼠約長57cm。兔：兔：用木制張口器放入口內，動物即咬住張口器用木制張口器放入口內，動物即咬住張口器。從小孔中插入。從小孔中插入15cm長的導尿管，輕、慢地送入食長的導尿管，輕、慢地送入食管及胃內。用動物毛在導管口試一下，隨呼吸不擺管及胃內。用動物毛在導管口試一下，隨呼吸不擺動，不掙扎，即可連接注射器，灌液。動，不掙扎，即可連接注射器，灌液。7其他給藥途徑其他給藥途徑呼吸

9、道給藥：磨口瓶，插入兩根管，如毒氣、粉呼吸道給藥：磨口瓶，插入兩根管，如毒氣、粉塵、煙霧等塵、煙霧等皮膚給藥：背部脫毛后涂藥，用兔、豚鼠皮膚給藥：背部脫毛后涂藥，用兔、豚鼠脊髓腔內給藥：兔伏臥位，脊髓腔內給藥：兔伏臥位，L7間隙下進針間隙下進針小腦延髓給藥：小腦延髓給藥：C1上進針，可用大動物上進針，可用大動物腦內給藥：微生物室常用腦內給藥：微生物室常用直腸內給藥：導尿管插入兔肛門直腸內給藥：導尿管插入兔肛門關節(jié)腔內給藥：注入關節(jié)腔內給藥：注入實驗動物用藥量的確定及計算方法實驗動物用藥量的確定及計算方法大量實驗證明，生物活性物質或藥物在動物體內細胞外液中大量實驗證明，生物活性物質或藥物在動物體

10、內細胞外液中的濃度和作用與體表面積呈平行關系。因此，人與動物之間的濃度和作用與體表面積呈平行關系。因此，人與動物之間進行劑量換算，應當按體表面積比值進行換算。進行劑量換算，應當按體表面積比值進行換算。（一）動物給藥量的確定（一）動物給藥量的確定1先用少量小鼠探索一下中毒劑量或致死量，然后取中毒劑量先用少量小鼠探索一下中毒劑量或致死量，然后取中毒劑量或致死量的或致死量的1/101/15，通過預實驗再在動物身上探索；若，通過預實驗再在動物身上探索；若用大動物如貓、狗等，需在鼠類用量的用大動物如貓、狗等，需在鼠類用量的1/151/2范圍內探索范圍內探索。2人與動物用藥量的折算：人與動物用藥量的折算：

11、人類用藥量為人類用藥量為1時，貓、狗的用量是人的時，貓、狗的用量是人的5-10倍，兔、豚鼠的倍，兔、豚鼠的用量是人的用量是人的15-20倍，大小鼠是人的倍，大小鼠是人的50100倍。倍。動物體表面積越小，用藥量越大。動物體表面積越小，用藥量越大。3確定劑量后，如果第一次實驗的作用不明顯，動物也無確定劑量后，如果第一次實驗的作用不明顯，動物也無中毒表現（體重下降、精神萎靡、活動減少），可以中毒表現（體重下降、精神萎靡、活動減少），可以加大劑量再次實驗，如果出現中毒現象，作用也明顯加大劑量再次實驗，如果出現中毒現象，作用也明顯，則應降低劑量再次實驗。在一般情況下，在適宜的，則應降低劑量再次實驗。在

12、一般情況下，在適宜的劑量范圍內，藥物的作用隨劑量的增加而增加。有條劑量范圍內，藥物的作用隨劑量的增加而增加。有條件時，最好用幾個劑量作實驗。如果劑量與作用效果件時，最好用幾個劑量作實驗。如果劑量與作用效果不成比例，應慎重分析實驗結果。不成比例，應慎重分析實驗結果。4劑量的多少要考慮年齡與體質：劑量的多少要考慮年齡與體質： 一般我們使用的是成年動物。老年癡呆用老年鼠。同一般我們使用的是成年動物。老年癡呆用老年鼠。同人用藥一樣。人用藥一樣。5還要考慮用藥途徑：還要考慮用藥途徑： 如當口服為如當口服為100時，灌腸應為時，灌腸應為100-200，皮下應，皮下應30-50，靜脈應，靜脈應25。（二）計

13、算方法：（二）計算方法：例例1 計算給體重計算給體重1.8kg的兔靜脈注射的兔靜脈注射20%烏拉坦，按每烏拉坦，按每kg體重體重1g的劑量注射，應注射多少的劑量注射，應注射多少ml？1kg 1g1.8kg 1.8g20g 100ml1.8g x mlx=100*1.8/20=9ml四四 實驗動物的麻醉實驗動物的麻醉（一）常用的麻醉劑（一）常用的麻醉劑1揮發(fā)性麻醉劑：乙醚和氯仿?lián)]發(fā)性麻醉劑：乙醚和氯仿 乙醚：優(yōu)點：適用于各種動物，麻醉量與致死量差別大，安全，麻醉乙醚：優(yōu)點：適用于各種動物，麻醉量與致死量差別大，安全，麻醉深度易掌握，蘇醒快。深度易掌握，蘇醒快。 缺點：局部刺激作用大，易窒息，麻醉

14、時間長了易死，味大。缺點：局部刺激作用大，易窒息，麻醉時間長了易死，味大。2非揮發(fā)性麻醉劑：非揮發(fā)性麻醉劑： 苯巴比妥鈉；戊巴比妥鈉；水合氯醛苯巴比妥鈉；戊巴比妥鈉；水合氯醛優(yōu)點：使用方便，麻醉時間長，麻醉過程平衡。優(yōu)點：使用方便，麻醉時間長，麻醉過程平衡。缺點：蘇醒較慢，麻醉量與致死量差距小，追加一點就可致死缺點：蘇醒較慢，麻醉量與致死量差距小，追加一點就可致死，最好一次給足量。，最好一次給足量。3中藥麻醉劑：中藥麻醉劑：洋金花洋金花 氫溴酸東莨菪堿（提純）氫溴酸東莨菪堿（提純）作用不夠穩(wěn)定，有時需要加佐劑麻醉作用不夠穩(wěn)定，有時需要加佐劑麻醉（二）（二） 動物的麻醉方法動物的麻醉方法1全身麻

15、醉：包括吸入法、非吸入如腹腔和靜脈給藥法全身麻醉：包括吸入法、非吸入如腹腔和靜脈給藥法吸入麻醉：乙醚吸入麻醉：乙醚 揮發(fā)吸入，抑制中樞神經系統(tǒng)，作用快而短，但刺激呼揮發(fā)吸入，抑制中樞神經系統(tǒng)，作用快而短，但刺激呼吸道粘膜使分泌物增加，可使用阿托品來拮抗它。呼吸道吸道粘膜使分泌物增加，可使用阿托品來拮抗它。呼吸道有病者禁用乙醚麻醉。使用密閉透明容器，放入動物即可有病者禁用乙醚麻醉。使用密閉透明容器，放入動物即可。一般用于短期實驗，燃點低，易燃，應遠離火源。一般用于短期實驗，燃點低，易燃，應遠離火源。非吸入麻醉：非吸入麻醉：小型動物大小鼠多為腹腔給藥。小型動物大小鼠多為腹腔給藥。常用于家兔，耳緣靜

16、脈注射。常用于家兔，耳緣靜脈注射。 2局部麻醉：局部麻醉： 鹽酸普魯卡因：用于手術局部浸潤麻醉可用鹽酸普魯卡因：用于手術局部浸潤麻醉可用1%溶液，劑溶液，劑量按麻醉面大小而定，骨髓穿刺、局部皮膚切開等均可采量按麻醉面大小而定，骨髓穿刺、局部皮膚切開等均可采用。用。3本實驗室常用的兩種：本實驗室常用的兩種： 烏拉坦（氨基甲酸乙酯）：使用時配制烏拉坦（氨基甲酸乙酯）：使用時配制為為20%-25%的溶液，用藥量為的溶液，用藥量為g/kg，耳，耳緣靜脈注射。注射快慢，檢查深度。緣靜脈注射。注射快慢，檢查深度。 10%水合氯醛：大小鼠腹腔注射水合氯醛：大小鼠腹腔注射0.35ml/100kg4 麻醉注意事

17、項：麻醉注意事項： 靜脈注射緩慢推藥，同時注意麻醉深度如肌肉的靜脈注射緩慢推藥，同時注意麻醉深度如肌肉的松弛度，角膜反射等；先快后慢，不夠，追加量不能松弛度，角膜反射等；先快后慢，不夠，追加量不能大于大于1/4。麻藥的濃度不可過高或過低，要適中。麻藥的濃度不可過高或過低，要適中。 注意保溫：方法有：裝燈臺燈、電褥、照射等，注意保溫：方法有：裝燈臺燈、電褥、照射等，根據動物肛溫而定。根據動物肛溫而定。 實驗動物的正常體溫：實驗動物的正常體溫： 貓貓38.61度度 兔兔38.41度度 大鼠大鼠39.30.5度度 做慢性實驗時，麻藥應加熱至動物體溫水平。做慢性實驗時，麻藥應加熱至動物體溫水平。五五

18、實驗動物采血方法實驗動物采血方法注意事項：注意事項：1光線充足光線充足室溫應保持：冬室溫應保持：冬 1520度；夏度；夏 2528度度2采血部位消毒采血部位消毒3注射器、試管應清潔干燥：吹風機注射器、試管應清潔干燥：吹風機4抗凝劑：血清（不加抗凝劑）；血漿（加抗凝劑：血清（不加抗凝劑）；血漿（加抗凝劑）離心抗凝劑）離心（）小鼠、大鼠采血法）小鼠、大鼠采血法1割（剪）尾采血：溫水泡，消毒，剪刀剪割（剪）尾采血：溫水泡，消毒，剪刀剪一下尾尖，血滴下，試管接血即可。一下尾尖，血滴下，試管接血即可。2鼠尾刺血法：用鼠尾刺血法：用7號、號、8號針頭刺入尾靜號針頭刺入尾靜脈，流出，脈，流出，1050mm3/次，使用方次，使用方向：從尾尖開始往上用。向：從尾尖開始往上用。3眼眶靜脈叢采血法：兩眼可輪流取，反復眼眶靜脈叢采血法：兩眼可輪流取，反復取，刺入。取，刺入。0.5-1ml/次大鼠次大鼠4斷頭取血：鍘刀，接血，一松一放。不易斷頭取血：鍘刀，接血，一松一放。不易溶血溶血5心臟取血：死亡性的，心臟取血：死亡性的，0.50.6ml/次次6頸動靜脈采血：解剖后才能使用，藥理經頸動靜脈采血：解剖后才能使用，藥理經常用。常用。7腹主動脈采血：解剖后用，從分